几种收涩中药对血管生成及S_（180）肉瘤MMP9表达的影响
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摘要
目的 研究收涩中药乌梅、椿皮、金樱子、五昧子、五倍子、赤石脂、禹余粮
抑制血管生成及抗肿瘤生长的作用及其机制。方法 建立鸡胚绒毛尿囊膜血管模型，
观察药物对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。采用小鼠移植肿瘤模型，研究药物对
肿瘤生长的影响；应用免疫组织化学方法，检测肿瘤组织相关第八因子抗原(Ⅷ
-RAg)和基质金属蛋白酶9(MMP-9) 的表达，通过医用图像处理软件测定肿瘤组织
的微血管密度(MVD)。结果 收涩药物金樱子、五味子、五倍子、乌梅、赤石脂、
椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管数目有一定抑制作用；乌梅、椿皮对小鼠皮下移植
肉瘤有明显抑制作用(P<0． 05) ；血管密度椿皮组明显低于空白和阳性对照组
(P<0． 05) ；乌梅、椿皮组相对于空白对照组MMP-9呈低表达(P<0． 05) 。结论 收
涩中药椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜血管及肿瘤血管生成有一定的抑制作用，可以抑制移
植S180肉瘤的生长及MMP-9的表达。
Objective To investigate the effect on angiogensis as well as tumor growth of the traditional Chinese medical astringent, such as, Fructus Mume, Cortex Ailanthi, Cherokee Rose Fruit, Chinese Magnoliavine, Chinese Gall, Red Halloysite, Limonitum, and the mechanism of it.Method The chicken chorioallantoic membrane (CAM) angiogensis model was used to study the effect of these medical herbs on angiogensis. a model of transplanting tumor in mice was used to study the effect of these medical herbs on tumor growth. The expression of VⅢ-RAg and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in tumor tissue were examined with immunohistochemical method. The microvessel density (MVD) of the tumour tissue was also measured with the Image Pro Plus medical image system. Result Cherokee Rose Fruit, Chinese Magnoliavine, Fructus Mume, Red Halloysite, Cortex Ailanthi can inhibit the angiogensis of CAM. Fructus Mume and Cortex Ailanthi can obviously inhibit the growth of sarcoma (S180) transplanted subcutaneously in mice (P<0. 05). Ther
e were fewer vessels in sarcoma tissue in Cortex Ailanthi group than in control group and CTX group(P<0.05). The expression of MMP-9 was lower in Cortex Ailanthi group and Fructus Mume group than in control group(P<0. 05). Conclusion Cortex Ailanthi can inhibit angiogensis in CAM and tumor tissue, and can also suppress the growth of sarcoma (S180) transplanted in mice and the expression of MMP-9 in the sarcoma tissue.
抑制血管生成及抗肿瘤生长的作用及其机制。方法 建立鸡胚绒毛尿囊膜血管模型，
观察药物对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。采用小鼠移植肿瘤模型，研究药物对
肿瘤生长的影响；应用免疫组织化学方法，检测肿瘤组织相关第八因子抗原(Ⅷ
-RAg)和基质金属蛋白酶9(MMP-9) 的表达，通过医用图像处理软件测定肿瘤组织
的微血管密度(MVD)。结果 收涩药物金樱子、五味子、五倍子、乌梅、赤石脂、
椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管数目有一定抑制作用；乌梅、椿皮对小鼠皮下移植
肉瘤有明显抑制作用(P<0． 05) ；血管密度椿皮组明显低于空白和阳性对照组
(P<0． 05) ；乌梅、椿皮组相对于空白对照组MMP-9呈低表达(P<0． 05) 。结论 收
涩中药椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜血管及肿瘤血管生成有一定的抑制作用，可以抑制移
植S180肉瘤的生长及MMP-9的表达。
Objective To investigate the effect on angiogensis as well as tumor growth of the traditional Chinese medical astringent, such as, Fructus Mume, Cortex Ailanthi, Cherokee Rose Fruit, Chinese Magnoliavine, Chinese Gall, Red Halloysite, Limonitum, and the mechanism of it.Method The chicken chorioallantoic membrane (CAM) angiogensis model was used to study the effect of these medical herbs on angiogensis. a model of transplanting tumor in mice was used to study the effect of these medical herbs on tumor growth. The expression of VⅢ-RAg and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in tumor tissue were examined with immunohistochemical method. The microvessel density (MVD) of the tumour tissue was also measured with the Image Pro Plus medical image system. Result Cherokee Rose Fruit, Chinese Magnoliavine, Fructus Mume, Red Halloysite, Cortex Ailanthi can inhibit the angiogensis of CAM. Fructus Mume and Cortex Ailanthi can obviously inhibit the growth of sarcoma (S180) transplanted subcutaneously in mice (P<0. 05). Ther
e were fewer vessels in sarcoma tissue in Cortex Ailanthi group than in control group and CTX group(P<0.05). The expression of MMP-9 was lower in Cortex Ailanthi group and Fructus Mume group than in control group(P<0. 05). Conclusion Cortex Ailanthi can inhibit angiogensis in CAM and tumor tissue, and can also suppress the growth of sarcoma (S180) transplanted in mice and the expression of MMP-9 in the sarcoma tissue.
引文
[1] 刘成海．抗肝纤维化有效中药复方血清药理学方法探讨．中国实验方剂学杂 志，1998；4(2) ：16．
[2] 夏誉薇，蔡连香，张树成．女贞孕育汤对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型血清药理学 研究．中医药学刊，2003；21(4) ：531-534．
[3] 田牛．微循环．科学出版社，1980年，第一版，第一次印刷：342页．
[4] 吴细丕，钱林法．实验动物与肿瘤研究．中国医药科技出版社，2000年4月第一 版，2000年4月第一次印刷：432页．
[5] 刘育艳．Fetulgen染色改良法．山西医科大学学报，2000；31(4) ：397．
[6] Masaharu T, Hiroyasu I,Miyako B et al. Attenuation by genistein of sodium-chloride-enhanced gastric carcinogenesis induced by N-Methyl-n Nitro-N-nitrosoguanidine in Wistar-rats. Int cancer,1999;80:396-9．
[7] 何振辉综述，梁念慈审校．肿瘤血管生成机制与抗肿瘤血管生成．国外医学临床生 物化学与检验学分册，2004；25(1) ：20-23．
[8] 陈雷，林建华，张声．MMP-9在骨肉瘤中的表达及其临床意义．中国肿瘤临 床，2001；28(6) ：431-433．
[9] 王蘅文主编.验肿瘤学基础，人民卫生出版社出版，1992年1月第1版：314 页．
[10] 萧东，丁健．肿瘤血管生成抑制剂的研究现状及我国的发展战略探讨．科技前沿 与学术评论，1999；21(5) ：31-33．
[11] 陈大富，赵扬冰，白绍槐等．人参皂甙Rg3对裸鼠原位种植人乳腺浸润性导管癌 的抗癌作用及其机制的研究．华西医学，2002；17(3) ：296-298．
[12] 姜晓玲，张良．薏苡仁注射液对血管生成的影响．肿瘤，2000；20(4) ：313-314．
[13] 蔡峥嵘，张国平．鲨鱼软骨粉对小鼠移植性淋巴瘤VEGF含量的影响及其与微血 管的关系．中国微循环，2002；6(3) ：136-138．
[14] 凌一揆，颜正华．中药学．高等医药院校教材，上海科技技术出版社，1984年6月 第一版：314页．
[15] 徐刚．正确认识和使用收涩药．浙江中医学院学报，1995；19(4) ：49-50．
[16] 沈红梅，程涛，乔传卓．乌梅的体外抗肿瘤活性及免疫调节作用初探．中国中药杂
志，1995：20(6) ：365-369．
[17] 李雪萍．臭椿皮提取物体内抗肿瘤作用的实验研究．甘肃科学学报， 2003；15(4) ：124-125．
[18] 黄玲，张捷平，陈华．五味子多糖对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的研究．福建中医学 院学报，2003；13(3) ：22-24．
[19] 侯琦，陈维宁，张薇等．禹余粮抗肿瘤作用的实验研究．肿瘤，1997；17(5) ： 285-288．
[20] 张平．肿瘤新生血管的形态学应用研究．菏泽医专学报，2000；12(3) ：171-175．
[21] Folkman.Clinical applications of research on angiogenesis. Neng J Med, 1995,333:1757-1763．
[22] Jinrk, Schlenger K, Hockel M, et al .Quantitative angiogenesis assays. Progress and Problem J. Nature Medicine,1997,3:1203-1208．
[23] 王蕾，张树成，吴志奎等．鸡胚绒毛尿囊膜血管主成模型在中药研究中应用方法 探讨．中药药理与临床，2000；16(6) ：46-47．
[24] 呼群，宁涛，苏秀兰等．鸡胚绒毛尿囊膜技术的改进．北京大学学报[医学 版]，2001：33(4) ：383-385．
[25] 张树成，吴志奎，王蕾等．研究中药血管生成活性和作用的鸡胚绒毛尿囊膜试验 模型的应用．中国中医基础医学杂志，1999：5(5) ：16-19．
[26] 赵万红，曹永孝，袁泽飞．中药血清药理学的方法学探讨．中药新药与临床药 理，2002；13(2) ：122-124．
[27] 宁中华，王庆民，袁建敏等．图说养鸡新技术，科学出版社，1999年8月年第二次 印刷：340页．
[28] 吕家本，魏红军，蒋定文等．用CAM技术评价鲨鱼软骨提取物抑制新生血管生成 活性．中国生化药物杂志，1998；19(4) ：173-175．
[29] 张平．肿瘤血管生成评估．肿瘤防治研究，2001：28(1) ：70-73．
[30] 候惠莲，张学斌，张冠军等．FⅧ-RAg、CD34在前列腺癌组织中的表达及MVD检测 的意义．实用癌症杂志，2002：17(5) ：493-496．
[31] 明学志，尹浩然，朱正纲等．胃癌组织微血管密度与病变进展及预后的关系．江苏 医药杂志，2003；29(1) ：26-28．
[32] 刘小平，宋少柏．结直肠肿瘤微血管计数及血管内皮细胞生成因子表达．中华肿 瘤杂志，1999：21(6) ：430-432．
[33] 王杰松综述，芮耀诚审校．血管内皮细胞产生基质金属蛋白酶的作用与机制． 国外医学·生理、病理科学与临床分册，2002；22(2) ：125-127．
[34] 韩螟，许而艳，综述，李恩民审阅．恶性肿瘤中MMP-9表达调控机制研究进展．国 外医学分子生物学分册，2003：25(1) ：24-26．
[35] Folkman J, Klagsbrun M. Angiogenic factors. Science, 1987;23(5) :442-447．
[36] Ausprunk DH, Folkman J. Migration and proliferationofen-do theliums in performed and newly formed bloodvessels during tumor angiogenesis. MicrovascRes,1977;14:53-6．
[37] 江希明等主编．肿瘤生物学．出版社：浙江科学技术出版社，出版日期，1990年12 月第1版：348页．
[38] Folkman J．Am J Clin．Patho．1989；92：241．
[39] 李龙江，温玉明，王昌美等．鱼精蛋白抑制肿瘤生长的实验研究．口腔医 学，2001；21(4) ：169-171．
[40] Folkman J. Growt Hand metastasis Of Tumor In Organcuiture J. Cancer, 1963, 16:453-467．
[41] Holren L , O'Reilly MS ,Folkman J. Domancy of micrometastases. Balanced prolixferation and apoptosis in the presence of angiogenesis supperession Nat Med 1995;1:149．
[42] 江忠清，朱凤川，曲军英等．宫颈癌MMP-9表达与肿瘤血管生成、癌细胞增殖及 侵袭转移的关系．癌症，2003，22(2) ：178-184．
[43] Zeng Zs, Guillem J G. Distinctpattern Of Matrix Metalloproteinase 9 And Tissue Inhibtor Of Metalloproteinasel Mrna Expression In Human Colorectal Cancer And Liver Metastases . Br J cancer , 1995;72:575-82．
[44] 张建民，牛焕江，彭淑傭．侵袭性垂体腺瘤基质金属蛋白酶的表达及其与微血管 密度的相关性．Journal of Practical Oncology，2003；18(3) ：214-216．
[45] 王爱东，吕光成．胃癌组织中MMP-9表达、微血管生成与胃癌侵袭与转移．肿瘤 杂志，2002；25(22) ：57-59．
[2] 夏誉薇，蔡连香，张树成．女贞孕育汤对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型血清药理学 研究．中医药学刊，2003；21(4) ：531-534．
[3] 田牛．微循环．科学出版社，1980年，第一版，第一次印刷：342页．
[4] 吴细丕，钱林法．实验动物与肿瘤研究．中国医药科技出版社，2000年4月第一 版，2000年4月第一次印刷：432页．
[5] 刘育艳．Fetulgen染色改良法．山西医科大学学报，2000；31(4) ：397．
[6] Masaharu T, Hiroyasu I,Miyako B et al. Attenuation by genistein of sodium-chloride-enhanced gastric carcinogenesis induced by N-Methyl-n Nitro-N-nitrosoguanidine in Wistar-rats. Int cancer,1999;80:396-9．
[7] 何振辉综述，梁念慈审校．肿瘤血管生成机制与抗肿瘤血管生成．国外医学临床生 物化学与检验学分册，2004；25(1) ：20-23．
[8] 陈雷，林建华，张声．MMP-9在骨肉瘤中的表达及其临床意义．中国肿瘤临 床，2001；28(6) ：431-433．
[9] 王蘅文主编.验肿瘤学基础，人民卫生出版社出版，1992年1月第1版：314 页．
[10] 萧东，丁健．肿瘤血管生成抑制剂的研究现状及我国的发展战略探讨．科技前沿 与学术评论，1999；21(5) ：31-33．
[11] 陈大富，赵扬冰，白绍槐等．人参皂甙Rg3对裸鼠原位种植人乳腺浸润性导管癌 的抗癌作用及其机制的研究．华西医学，2002；17(3) ：296-298．
[12] 姜晓玲，张良．薏苡仁注射液对血管生成的影响．肿瘤，2000；20(4) ：313-314．
[13] 蔡峥嵘，张国平．鲨鱼软骨粉对小鼠移植性淋巴瘤VEGF含量的影响及其与微血 管的关系．中国微循环，2002；6(3) ：136-138．
[14] 凌一揆，颜正华．中药学．高等医药院校教材，上海科技技术出版社，1984年6月 第一版：314页．
[15] 徐刚．正确认识和使用收涩药．浙江中医学院学报，1995；19(4) ：49-50．
[16] 沈红梅，程涛，乔传卓．乌梅的体外抗肿瘤活性及免疫调节作用初探．中国中药杂
志，1995：20(6) ：365-369．
[17] 李雪萍．臭椿皮提取物体内抗肿瘤作用的实验研究．甘肃科学学报， 2003；15(4) ：124-125．
[18] 黄玲，张捷平，陈华．五味子多糖对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的研究．福建中医学 院学报，2003；13(3) ：22-24．
[19] 侯琦，陈维宁，张薇等．禹余粮抗肿瘤作用的实验研究．肿瘤，1997；17(5) ： 285-288．
[20] 张平．肿瘤新生血管的形态学应用研究．菏泽医专学报，2000；12(3) ：171-175．
[21] Folkman.Clinical applications of research on angiogenesis. Neng J Med, 1995,333:1757-1763．
[22] Jinrk, Schlenger K, Hockel M, et al .Quantitative angiogenesis assays. Progress and Problem J. Nature Medicine,1997,3:1203-1208．
[23] 王蕾，张树成，吴志奎等．鸡胚绒毛尿囊膜血管主成模型在中药研究中应用方法 探讨．中药药理与临床，2000；16(6) ：46-47．
[24] 呼群，宁涛，苏秀兰等．鸡胚绒毛尿囊膜技术的改进．北京大学学报[医学 版]，2001：33(4) ：383-385．
[25] 张树成，吴志奎，王蕾等．研究中药血管生成活性和作用的鸡胚绒毛尿囊膜试验 模型的应用．中国中医基础医学杂志，1999：5(5) ：16-19．
[26] 赵万红，曹永孝，袁泽飞．中药血清药理学的方法学探讨．中药新药与临床药 理，2002；13(2) ：122-124．
[27] 宁中华，王庆民，袁建敏等．图说养鸡新技术，科学出版社，1999年8月年第二次 印刷：340页．
[28] 吕家本，魏红军，蒋定文等．用CAM技术评价鲨鱼软骨提取物抑制新生血管生成 活性．中国生化药物杂志，1998；19(4) ：173-175．
[29] 张平．肿瘤血管生成评估．肿瘤防治研究，2001：28(1) ：70-73．
[30] 候惠莲，张学斌，张冠军等．FⅧ-RAg、CD34在前列腺癌组织中的表达及MVD检测 的意义．实用癌症杂志，2002：17(5) ：493-496．
[31] 明学志，尹浩然，朱正纲等．胃癌组织微血管密度与病变进展及预后的关系．江苏 医药杂志，2003；29(1) ：26-28．
[32] 刘小平，宋少柏．结直肠肿瘤微血管计数及血管内皮细胞生成因子表达．中华肿 瘤杂志，1999：21(6) ：430-432．
[33] 王杰松综述，芮耀诚审校．血管内皮细胞产生基质金属蛋白酶的作用与机制． 国外医学·生理、病理科学与临床分册，2002；22(2) ：125-127．
[34] 韩螟，许而艳，综述，李恩民审阅．恶性肿瘤中MMP-9表达调控机制研究进展．国 外医学分子生物学分册，2003：25(1) ：24-26．
[35] Folkman J, Klagsbrun M. Angiogenic factors. Science, 1987;23(5) :442-447．
[36] Ausprunk DH, Folkman J. Migration and proliferationofen-do theliums in performed and newly formed bloodvessels during tumor angiogenesis. MicrovascRes,1977;14:53-6．
[37] 江希明等主编．肿瘤生物学．出版社：浙江科学技术出版社，出版日期，1990年12 月第1版：348页．
[38] Folkman J．Am J Clin．Patho．1989；92：241．
[39] 李龙江，温玉明，王昌美等．鱼精蛋白抑制肿瘤生长的实验研究．口腔医 学，2001；21(4) ：169-171．
[40] Folkman J. Growt Hand metastasis Of Tumor In Organcuiture J. Cancer, 1963, 16:453-467．
[41] Holren L , O'Reilly MS ,Folkman J. Domancy of micrometastases. Balanced prolixferation and apoptosis in the presence of angiogenesis supperession Nat Med 1995;1:149．
[42] 江忠清，朱凤川，曲军英等．宫颈癌MMP-9表达与肿瘤血管生成、癌细胞增殖及 侵袭转移的关系．癌症，2003，22(2) ：178-184．
[43] Zeng Zs, Guillem J G. Distinctpattern Of Matrix Metalloproteinase 9 And Tissue Inhibtor Of Metalloproteinasel Mrna Expression In Human Colorectal Cancer And Liver Metastases . Br J cancer , 1995;72:575-82．
[44] 张建民，牛焕江，彭淑傭．侵袭性垂体腺瘤基质金属蛋白酶的表达及其与微血管 密度的相关性．Journal of Practical Oncology，2003；18(3) ：214-216．
[45] 王爱东，吕光成．胃癌组织中MMP-9表达、微血管生成与胃癌侵袭与转移．肿瘤 杂志，2002；25(22) ：57-59．