强肌健力饮对脾虚、肾虚证大鼠防治作用的实验研究
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摘要
目的
本研究根据邓铁涛教授临床治疗重症肌无力的中医辩证病机——脾胃虚损,久虚及肾,分别从脾虚证、肾虚证两个证型着手,探求治疗该病的经验方——强肌健力饮的药理作用机制,并于这一研究结果的基础上进一步探讨中医脾、肾相交叉的物质基础,从微观角度阐释邓老指导临床辩证又可以实际应用的理论体系——“脾肾相关”的客观性。
方法
1.理论研究
在综述近年来有关脾虚、肾虚证研究文献的基础上,以神经内分泌免疫学说为切入点,结合中医脾、肾各自的生理特性,分别寻求两证型中相对特异、重复性好、能够客观评价的指标。脾虚证的指标包括AMS、D-木糖,甲状腺激素、性腺激素、环核苷酸及胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸的病理形态学。肾虚证的指标包括肾上腺轴、甲状腺轴、性腺轴、环核苷酸及胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸的病理形态学。
2.实验研究
实验一:强肌健力饮对脾虚证大鼠防治作用的实验观察
采用大黄复制动物模型,将大鼠随机分为6组,即正常对照组;脾虚模型组;强肌健力低剂量组、中剂量组、高剂量组;四君子汤组。分别于上午造模,下午灌药,造模与给药同时进行,共20天。分两段时间——前期(10d)、后期(20d)时取血,用比色法、放射免疫分析法检测相关指标。并摘取胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸做形态学观察。
实验二:强肌健力饮对肾阳虚证大鼠防治作用的实验观察
采用氢化可的松复制肾阳虚模型,将大鼠随机分为6组:即正常对照组;肾阳虚模型组;强肌健力低剂量组、中剂量组、高剂量组;右归丸组。造模与用药同时进行,肌肉注射氢化可的松造模,同时各用药组分别灌服相应剂量的药物,共14天。取血及下丘脑匀浆液用放射免疫分析法分别检测相关指标。并摘取胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸做形态学观察。
结果
实验一:大黄复制的脾虚证动物,出现类脾虚的症状体征、体重增长缓慢、淀粉酶活性降低;T_3、T_4的合成和分泌减少,TSH无反馈性升高;cAMP、cGMP出现紊乱;胸腺、脾脏、肾上腺和睾丸的组织结构明显遭受损伤,胸腺和脾脏出现明显的萎缩。
强肌健力饮能促进甲状腺激素的分泌,使cAMP、cGMP含量恢复平衡,改善机体内分泌紊乱的状态;使已遭破坏的相应组织结构得以修复,恢复正常或接近正常。尤以对萎缩的胸腺修复作用最为明显。以上结果表明,强肌健力饮防治脾虚证的潜在作用机制在于:能够调节机体的内分泌免疫功能。主要涉及的指标有:甲状腺激素、环核苷酸及免疫器官胸腺和内分泌腺体。
实验二:氢化可的松所致的肾阳虚证大鼠主要的表现为:类肾阳虚证的症状体征、体重增长缓慢;肾上腺轴、甲状腺轴、性腺轴激素分泌呈现抑制或紊乱状态;胸腺、脾脏、肾上腺和睾丸的组织结构明显遭受损伤,胸腺、肾上腺出现明显的萎缩,睾丸则代偿性增大。
强肌健力饮能够调整垂体—靶腺轴的功能紊乱状态,使已遭破坏的肾上腺、脾脏、睾丸的组织结构得以修复,恢复正常或接近正常。对胸腺组织的修复作用尚不显著。以上结果表明:强肌健力饮对肾阳虚证的防治作用是通过调整神经内分泌免疫网络中各个系统的功能,修复相应的组织结构而发挥作用,主要涉及的指标有:下丘脑—垂体—肾上腺轴、甲状腺轴、性腺轴及环核苷酸,免疫器官脾脏和内分泌腺体。
结论
实验研究表明:强肌健力饮对脾虚、肾虚证具有明显的防治作用,其主要作用机理在于通过整体调节机体神经内分泌免疫网络改善内在的病理改变,主要涉及到的客观指标包括:肾上腺、甲状腺、性腺激素,传递信使环核苷酸以及相应的腺体及免疫器官。
本研究中延长脾虚造模时间这个条件,观察到前后两期性激素E_2、T的变化不同,这一结果凸显了中医脾肾二脏的关系,E_2、T构成了脾虚向肾虚转化的物质基础,换言之,这类物质可能是脾肾相关的重要物质基础之一。提示:从单一动物模型来阐明脾肾互相关系更符合中医脾虚及肾这一理论。
通过对比两模型的指标变化,我们发现:T_3、T_4,cAMP、cGMP这类物质在脾虚肾虚证中均有改变,推测这类物质可能是脾肾相关的物质基础之一。胸腺在脾虚、肾虚证中均有不同程度的萎缩及组织结构损伤,提示,胸腺可能是脾肾相关的病理学依据之一。
Objective
According to the theory of traditional Chinese medicine that Professor Oeng Tietao treats myasthenia gravis,the deficiency of spleen and stomach and prolonged deficiency affected kidney,based on the two patterns of kidney and spleen deficiency,this study explores pharmacological mechanisms of Qiangji Jianli Yin-the empirical prescription of clinical treatment of myasthenia gravis of Professor Deng tietao,then explores the material basis of the cross of spleen and kidney in TCM,and explains the theoretical system of guidance and practical application of Mr.Deng from the micro perspective, the theory of "spleen and kidney-related".
Methods
1 Theoretical Study
On Review of the research literature on the spleen deficiency and kidney deficiency in recent years,the study makes the neuroendocrine and immunity theory as the breakthrough point,combines their physical characteristics of spleen and kidney in TCM,and seeks the relatively specific,reproducible and objective indicators in the two patterns.Indicators of Spleen deficiency include AMS,D-xylose,thyroid hormone,gonadal hormones,cyclic nucleotides, and the Pathomorphology of thymus,spleen,adrenal gland and testosterone. Indicators of Kidney deficiency include adrenal axis,thyroid axis,gonadal axis,cyclic nucleotide and the Pathomorphology of thymus,spleen,adrenal gland and testosterone.
2 Experimental Study
Experiment 1:observation of the prevention and treatment effects of Qiangji Jianli Yin on rats of spleen deficiency.
Using rhubarb to copy the model,and rats are randomly divided into six groups,namely the control group;spleen deficiency model group,Qiangji Jianli Yin of the low-dose group,the middle-dose and high-dose group;Sijunzi Tang group.Making Models in the morning,giving medicine in oral gavage in the afternoon,and the above actions are made at the same time,a total of 20 days.The blood is drawn separately on the tenth day and the twentieth day, the related indicators are detected by the methods Colorimetry and RIA.And thymus,spleen,adrenal gland and testosterone are removed for morphologic observation.
Experiment 2:observation of the prevention and treatment effects of Qiangji Jianli Yin on kidney yang deficiency.
Using hydrocortisone to make kidney yang deficiency model,and the rats are divided into six groups:the control group;deficiency model group,Qiangji Jianli Yin of the low-dose group,the middle-dose and high-dose group;Yougui wan group.Making model and treating are at the same time,intramuscular injection of hydrocortisone makes model,while the medicine group are fed with the corresponding doses of medicine,a total of 14 days.Draw blood and hypothalamus homogenized liquid,the related indicators are detected by the methods Colorimetry and RIA,and thymus,spleen,adrenal gland and testosterone are removed for morphologic observation.
Results:
Experiment 1:the rats of spleen deficiency by Rhubarb shows symptoms and signs similar to spleen deficiency,the slow growth of body weight,the decrease of amylase activity,the reduce of the synthesis and secretion of thyroid hormone T_3,T_4,the no-feedback increase of TSH,a disorder of cAMP,cGMP, the obvious injury of the organizational structure of Thymus,spleen,adrenal gland and testosterone,and the noticeable shrinkage of thymus and spleen.
Qiangji Jianli Yin can make thyroid hormone secrete,restore cAMP,cGMP to balance,improve the body's endocrine disorder state,repair the destroyed corresponding organizational structure,to be normal or near normal.In particular,repairing the shrunk thymus is the most obvious.It's indicated that the potential mechanisms of Qiangji Jianli Yin preventing and treating spleen deficiency is to be able to adjust the body's endocrine and immune functions,and that the main involved aspects are thyroid hormone,cyclic nucleotide,thymus and endocrine glands.
Experiment 2:the main performances of kidney yang deficiency rats caused by Hydrocortisone:the symptoms and signs similar to kidney yang deficiency, the slow growth of body weight;the inhibit or chaos state of hormone secretion of adrenal axis,thyroid axis,gonadal axis;the obvious injury of the organizational structure of thymus,Spleen,adrenal gland and testosterone, the noticeable shrinkage of thymus and adrenal atrophy,the compensatory increase of testosterone.
Qiangji Jianli Yin can adjust the dysfunction of pituitary-target gland axis,and repair the damaged organizational structure of the adrenal gland, spleen,testicular,to be normal or near normal.The repair of the thymus is not still significant.These results show,that Qiangji Jianli Yin preventing and treating kidney-yang deficiency achieves the effect by adjusting the function of the each system in the neuroendocrine immune network and restoring the corresponding organizational structure,and that the indicators mainly involved are the hypothalamus——Pituitary——adrenal axis,thyroid axis, gonadal axis and the second messenger cyclic nucleotides,endocrine glands and the immune organs spleen.
Conclusion:
The experimental study shows that Qiangji Jianli Yin plays an obvious role in preventing and treating the spleen deficiency and kidney deficiency,whose main mechanisms is to promote the internal pathological changes through the overall regulation of neuroendocrine immune network.
This study extends the time of making model of Spleen deficiency,observes the different changes of the sex hormones E_2,T between the earlier and later periods,which highlights the relationship between spleen and kidney in TCM.E_2,T constitute material foundations for the transformation from spleen deficiency to kidney deficiency.In other words,such substances may be one of the important material foundations spleen related to kidney.
By comparing the changes of indicators of the two models,we find that T_3,T_4,cAMP and cGMP changes in both spleen deficiency and kidney deficiency, and speculate that such substances may be one of the material basis of spleen related to kidney.In the two patterns thymus shrinks and is damaged to different degree,and it shows that thymus may be one of pathology basis of spleen related to kidney.
本研究根据邓铁涛教授临床治疗重症肌无力的中医辩证病机——脾胃虚损,久虚及肾,分别从脾虚证、肾虚证两个证型着手,探求治疗该病的经验方——强肌健力饮的药理作用机制,并于这一研究结果的基础上进一步探讨中医脾、肾相交叉的物质基础,从微观角度阐释邓老指导临床辩证又可以实际应用的理论体系——“脾肾相关”的客观性。
方法
1.理论研究
在综述近年来有关脾虚、肾虚证研究文献的基础上,以神经内分泌免疫学说为切入点,结合中医脾、肾各自的生理特性,分别寻求两证型中相对特异、重复性好、能够客观评价的指标。脾虚证的指标包括AMS、D-木糖,甲状腺激素、性腺激素、环核苷酸及胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸的病理形态学。肾虚证的指标包括肾上腺轴、甲状腺轴、性腺轴、环核苷酸及胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸的病理形态学。
2.实验研究
实验一:强肌健力饮对脾虚证大鼠防治作用的实验观察
采用大黄复制动物模型,将大鼠随机分为6组,即正常对照组;脾虚模型组;强肌健力低剂量组、中剂量组、高剂量组;四君子汤组。分别于上午造模,下午灌药,造模与给药同时进行,共20天。分两段时间——前期(10d)、后期(20d)时取血,用比色法、放射免疫分析法检测相关指标。并摘取胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸做形态学观察。
实验二:强肌健力饮对肾阳虚证大鼠防治作用的实验观察
采用氢化可的松复制肾阳虚模型,将大鼠随机分为6组:即正常对照组;肾阳虚模型组;强肌健力低剂量组、中剂量组、高剂量组;右归丸组。造模与用药同时进行,肌肉注射氢化可的松造模,同时各用药组分别灌服相应剂量的药物,共14天。取血及下丘脑匀浆液用放射免疫分析法分别检测相关指标。并摘取胸腺、脾脏、肾上腺、睾丸做形态学观察。
结果
实验一:大黄复制的脾虚证动物,出现类脾虚的症状体征、体重增长缓慢、淀粉酶活性降低;T_3、T_4的合成和分泌减少,TSH无反馈性升高;cAMP、cGMP出现紊乱;胸腺、脾脏、肾上腺和睾丸的组织结构明显遭受损伤,胸腺和脾脏出现明显的萎缩。
强肌健力饮能促进甲状腺激素的分泌,使cAMP、cGMP含量恢复平衡,改善机体内分泌紊乱的状态;使已遭破坏的相应组织结构得以修复,恢复正常或接近正常。尤以对萎缩的胸腺修复作用最为明显。以上结果表明,强肌健力饮防治脾虚证的潜在作用机制在于:能够调节机体的内分泌免疫功能。主要涉及的指标有:甲状腺激素、环核苷酸及免疫器官胸腺和内分泌腺体。
实验二:氢化可的松所致的肾阳虚证大鼠主要的表现为:类肾阳虚证的症状体征、体重增长缓慢;肾上腺轴、甲状腺轴、性腺轴激素分泌呈现抑制或紊乱状态;胸腺、脾脏、肾上腺和睾丸的组织结构明显遭受损伤,胸腺、肾上腺出现明显的萎缩,睾丸则代偿性增大。
强肌健力饮能够调整垂体—靶腺轴的功能紊乱状态,使已遭破坏的肾上腺、脾脏、睾丸的组织结构得以修复,恢复正常或接近正常。对胸腺组织的修复作用尚不显著。以上结果表明:强肌健力饮对肾阳虚证的防治作用是通过调整神经内分泌免疫网络中各个系统的功能,修复相应的组织结构而发挥作用,主要涉及的指标有:下丘脑—垂体—肾上腺轴、甲状腺轴、性腺轴及环核苷酸,免疫器官脾脏和内分泌腺体。
结论
实验研究表明:强肌健力饮对脾虚、肾虚证具有明显的防治作用,其主要作用机理在于通过整体调节机体神经内分泌免疫网络改善内在的病理改变,主要涉及到的客观指标包括:肾上腺、甲状腺、性腺激素,传递信使环核苷酸以及相应的腺体及免疫器官。
本研究中延长脾虚造模时间这个条件,观察到前后两期性激素E_2、T的变化不同,这一结果凸显了中医脾肾二脏的关系,E_2、T构成了脾虚向肾虚转化的物质基础,换言之,这类物质可能是脾肾相关的重要物质基础之一。提示:从单一动物模型来阐明脾肾互相关系更符合中医脾虚及肾这一理论。
通过对比两模型的指标变化,我们发现:T_3、T_4,cAMP、cGMP这类物质在脾虚肾虚证中均有改变,推测这类物质可能是脾肾相关的物质基础之一。胸腺在脾虚、肾虚证中均有不同程度的萎缩及组织结构损伤,提示,胸腺可能是脾肾相关的病理学依据之一。
Objective
According to the theory of traditional Chinese medicine that Professor Oeng Tietao treats myasthenia gravis,the deficiency of spleen and stomach and prolonged deficiency affected kidney,based on the two patterns of kidney and spleen deficiency,this study explores pharmacological mechanisms of Qiangji Jianli Yin-the empirical prescription of clinical treatment of myasthenia gravis of Professor Deng tietao,then explores the material basis of the cross of spleen and kidney in TCM,and explains the theoretical system of guidance and practical application of Mr.Deng from the micro perspective, the theory of "spleen and kidney-related".
Methods
1 Theoretical Study
On Review of the research literature on the spleen deficiency and kidney deficiency in recent years,the study makes the neuroendocrine and immunity theory as the breakthrough point,combines their physical characteristics of spleen and kidney in TCM,and seeks the relatively specific,reproducible and objective indicators in the two patterns.Indicators of Spleen deficiency include AMS,D-xylose,thyroid hormone,gonadal hormones,cyclic nucleotides, and the Pathomorphology of thymus,spleen,adrenal gland and testosterone. Indicators of Kidney deficiency include adrenal axis,thyroid axis,gonadal axis,cyclic nucleotide and the Pathomorphology of thymus,spleen,adrenal gland and testosterone.
2 Experimental Study
Experiment 1:observation of the prevention and treatment effects of Qiangji Jianli Yin on rats of spleen deficiency.
Using rhubarb to copy the model,and rats are randomly divided into six groups,namely the control group;spleen deficiency model group,Qiangji Jianli Yin of the low-dose group,the middle-dose and high-dose group;Sijunzi Tang group.Making Models in the morning,giving medicine in oral gavage in the afternoon,and the above actions are made at the same time,a total of 20 days.The blood is drawn separately on the tenth day and the twentieth day, the related indicators are detected by the methods Colorimetry and RIA.And thymus,spleen,adrenal gland and testosterone are removed for morphologic observation.
Experiment 2:observation of the prevention and treatment effects of Qiangji Jianli Yin on kidney yang deficiency.
Using hydrocortisone to make kidney yang deficiency model,and the rats are divided into six groups:the control group;deficiency model group,Qiangji Jianli Yin of the low-dose group,the middle-dose and high-dose group;Yougui wan group.Making model and treating are at the same time,intramuscular injection of hydrocortisone makes model,while the medicine group are fed with the corresponding doses of medicine,a total of 14 days.Draw blood and hypothalamus homogenized liquid,the related indicators are detected by the methods Colorimetry and RIA,and thymus,spleen,adrenal gland and testosterone are removed for morphologic observation.
Results:
Experiment 1:the rats of spleen deficiency by Rhubarb shows symptoms and signs similar to spleen deficiency,the slow growth of body weight,the decrease of amylase activity,the reduce of the synthesis and secretion of thyroid hormone T_3,T_4,the no-feedback increase of TSH,a disorder of cAMP,cGMP, the obvious injury of the organizational structure of Thymus,spleen,adrenal gland and testosterone,and the noticeable shrinkage of thymus and spleen.
Qiangji Jianli Yin can make thyroid hormone secrete,restore cAMP,cGMP to balance,improve the body's endocrine disorder state,repair the destroyed corresponding organizational structure,to be normal or near normal.In particular,repairing the shrunk thymus is the most obvious.It's indicated that the potential mechanisms of Qiangji Jianli Yin preventing and treating spleen deficiency is to be able to adjust the body's endocrine and immune functions,and that the main involved aspects are thyroid hormone,cyclic nucleotide,thymus and endocrine glands.
Experiment 2:the main performances of kidney yang deficiency rats caused by Hydrocortisone:the symptoms and signs similar to kidney yang deficiency, the slow growth of body weight;the inhibit or chaos state of hormone secretion of adrenal axis,thyroid axis,gonadal axis;the obvious injury of the organizational structure of thymus,Spleen,adrenal gland and testosterone, the noticeable shrinkage of thymus and adrenal atrophy,the compensatory increase of testosterone.
Qiangji Jianli Yin can adjust the dysfunction of pituitary-target gland axis,and repair the damaged organizational structure of the adrenal gland, spleen,testicular,to be normal or near normal.The repair of the thymus is not still significant.These results show,that Qiangji Jianli Yin preventing and treating kidney-yang deficiency achieves the effect by adjusting the function of the each system in the neuroendocrine immune network and restoring the corresponding organizational structure,and that the indicators mainly involved are the hypothalamus——Pituitary——adrenal axis,thyroid axis, gonadal axis and the second messenger cyclic nucleotides,endocrine glands and the immune organs spleen.
Conclusion:
The experimental study shows that Qiangji Jianli Yin plays an obvious role in preventing and treating the spleen deficiency and kidney deficiency,whose main mechanisms is to promote the internal pathological changes through the overall regulation of neuroendocrine immune network.
This study extends the time of making model of Spleen deficiency,observes the different changes of the sex hormones E_2,T between the earlier and later periods,which highlights the relationship between spleen and kidney in TCM.E_2,T constitute material foundations for the transformation from spleen deficiency to kidney deficiency.In other words,such substances may be one of the important material foundations spleen related to kidney.
By comparing the changes of indicators of the two models,we find that T_3,T_4,cAMP and cGMP changes in both spleen deficiency and kidney deficiency, and speculate that such substances may be one of the material basis of spleen related to kidney.In the two patterns thymus shrinks and is damaged to different degree,and it shows that thymus may be one of pathology basis of spleen related to kidney.
引文
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