高产杂交稻“两优培九”剑叶衰退过程中叶绿体超微结构、光合功能特性变化的研究
|
摘要
本实验以全展后的两优培九剑叶为主要研究材料，以全展后的汕优63剑叶为对照，主要研究了在不同衰老期的功能叶片的光合功能特性、抗氧化特性及叶绿体超微结构的变化。结果表明：
1 在剑叶的全展早期，叶绿素含量、可溶性蛋白含量、光合速率、PSⅠ和PSⅡ的活性、叶绿体放氧活性皆呈上升趋势，但叶绿体中ATP的含量下降；膜透性、MDA含量、超氧阴离子含量变化不明显或变化不大、保护酶系统中SOD、POD的活性不断提高、CAT活性稍下降；抗性物质中GSH含量上升，但ASA和脯氨酸的含量下降；叶绿体的体积较小、呈梭形，叶绿体的基粒片层排列紧密。表明在这一时期杂交水稻剑叶的功能不断完善。两优培九和汕优63差异不显著。
2 在水稻剑叶衰老过程中，保护酶系统与抗氧化物质两大系统共同作用，清除体内活性氧自由基，阻止了膜脂过氧化物MDA的大量产生，维护细胞膜系统完整性。其中SOD、POD、谷肮甘肽-抗坏血酸氧化还原系统发挥主要的保护作用，CAT在杂交水稻的衰老过程中，发挥的作用有限。
3 杂交剑叶全展中后期间，与汕优63相比较，两优培九在剑叶的功能持续期，可溶性蛋白含量，PS还原能力，PSⅡ放氧活性，光合速率，光合高值期，叶绿体基粒片层结构排列方式等方面占优势，是其高产的部分原因；两优培九在保护酶活性、抗氧化物质含量上占优势，是抗衰老能力强的主要原因；另外，两优培九的保护酶活性和抗氧化剂含量上占有一定优势，在衰老过程中活性氧自由基的产生和积累较少，细胞和叶绿体的膜结构较完整，又能提高杂交稻的光合作用，籽粒发育获得较多养分，最终在产量上占优势。
4 水稻剑叶全展后期，叶绿体被膜破坏，片层分离，叶绿体的基粒排列疏松，垛叠解体；保护酶系统与抗氧化物质清除氧自由基作用不明显，活性氧自由基大量积累，膜系统受到严重破坏，电子传递与光合磷酸化解偶联，光合作用、呼吸代谢等一系列生理生化反应发生紊乱，叶片完全衰老。
Study on Chloroplast Ultrastructure and Photosynthetic Characters of Flag Leaves from High Yield Hybrid Rice During Their Senescence
The chloroplast ultrastructure, the activities of antioxidases, the photosynthetic characters of the hybide rice flag leaves were studied during senescence. The results showed as follews:
During early stage of the full-expanded flag leaves, the photosynthetic rates of flag leaves were high and steady; the electron transport activities of thylakoid membranes were increasing; the activity of antioxidase were also increasing, except CAT,; but the contents of ATP, MDA, O2- , the membrane permeabity all showed a declining trend. The like-shuttle chloroplast was small, with tightly stacking lamellae of grana. These results indicated that photosynthetic funfion was under a gradually maturing period, withouth symptoms of senescence. Meanwhile, there was no difference in these parameters between high yeild hybrid rice "Liangyouopeijiu" and "Shanyou63".
During the middle stage of the full-expanded flag leaves, the net photosynthetic rate was decreasing; The Active Photosynthetic Duration (APD) of was about 35 days for "Liangyouopeijiu", 28 days for "Liangyou63", respectively. The protein, GSH, ASA and protrine content of full-expanded flag leaves, ATP content of chloroplast were decreasing, too; The activities of POD, SOD dropped after reached maximum, the activity of CAT went on dropping; The chloroplast expanded, the chloroplast grana was contorting, loosing, some of chloroplast grana decomposited. The antioxidases of "Liangyoupeijiu" were more active than those of"Shanyou63" in this period , the net photosynthetic rate of "Liangyoupeijiu" was higher than that of "Shanyou63".
During late stage of the full-expanded flag leaves, the membrane of chloroplast was destroyed, a lot of chloroplast grana decomposited, the connection of chloroplast grana wasn't tight. The resistences of leaves were getting weaker, the photosynthe-sitic rate was getting lower, almost all the chloroplast showed marked symptoms of in senescence.
1 在剑叶的全展早期，叶绿素含量、可溶性蛋白含量、光合速率、PSⅠ和PSⅡ的活性、叶绿体放氧活性皆呈上升趋势，但叶绿体中ATP的含量下降；膜透性、MDA含量、超氧阴离子含量变化不明显或变化不大、保护酶系统中SOD、POD的活性不断提高、CAT活性稍下降；抗性物质中GSH含量上升，但ASA和脯氨酸的含量下降；叶绿体的体积较小、呈梭形，叶绿体的基粒片层排列紧密。表明在这一时期杂交水稻剑叶的功能不断完善。两优培九和汕优63差异不显著。
2 在水稻剑叶衰老过程中，保护酶系统与抗氧化物质两大系统共同作用，清除体内活性氧自由基，阻止了膜脂过氧化物MDA的大量产生，维护细胞膜系统完整性。其中SOD、POD、谷肮甘肽-抗坏血酸氧化还原系统发挥主要的保护作用，CAT在杂交水稻的衰老过程中，发挥的作用有限。
3 杂交剑叶全展中后期间，与汕优63相比较，两优培九在剑叶的功能持续期，可溶性蛋白含量，PS还原能力，PSⅡ放氧活性，光合速率，光合高值期，叶绿体基粒片层结构排列方式等方面占优势，是其高产的部分原因；两优培九在保护酶活性、抗氧化物质含量上占优势，是抗衰老能力强的主要原因；另外，两优培九的保护酶活性和抗氧化剂含量上占有一定优势，在衰老过程中活性氧自由基的产生和积累较少，细胞和叶绿体的膜结构较完整，又能提高杂交稻的光合作用，籽粒发育获得较多养分，最终在产量上占优势。
4 水稻剑叶全展后期，叶绿体被膜破坏，片层分离，叶绿体的基粒排列疏松，垛叠解体；保护酶系统与抗氧化物质清除氧自由基作用不明显，活性氧自由基大量积累，膜系统受到严重破坏，电子传递与光合磷酸化解偶联，光合作用、呼吸代谢等一系列生理生化反应发生紊乱，叶片完全衰老。
Study on Chloroplast Ultrastructure and Photosynthetic Characters of Flag Leaves from High Yield Hybrid Rice During Their Senescence
The chloroplast ultrastructure, the activities of antioxidases, the photosynthetic characters of the hybide rice flag leaves were studied during senescence. The results showed as follews:
During early stage of the full-expanded flag leaves, the photosynthetic rates of flag leaves were high and steady; the electron transport activities of thylakoid membranes were increasing; the activity of antioxidase were also increasing, except CAT,; but the contents of ATP, MDA, O2- , the membrane permeabity all showed a declining trend. The like-shuttle chloroplast was small, with tightly stacking lamellae of grana. These results indicated that photosynthetic funfion was under a gradually maturing period, withouth symptoms of senescence. Meanwhile, there was no difference in these parameters between high yeild hybrid rice "Liangyouopeijiu" and "Shanyou63".
During the middle stage of the full-expanded flag leaves, the net photosynthetic rate was decreasing; The Active Photosynthetic Duration (APD) of was about 35 days for "Liangyouopeijiu", 28 days for "Liangyou63", respectively. The protein, GSH, ASA and protrine content of full-expanded flag leaves, ATP content of chloroplast were decreasing, too; The activities of POD, SOD dropped after reached maximum, the activity of CAT went on dropping; The chloroplast expanded, the chloroplast grana was contorting, loosing, some of chloroplast grana decomposited. The antioxidases of "Liangyoupeijiu" were more active than those of"Shanyou63" in this period , the net photosynthetic rate of "Liangyoupeijiu" was higher than that of "Shanyou63".
During late stage of the full-expanded flag leaves, the membrane of chloroplast was destroyed, a lot of chloroplast grana decomposited, the connection of chloroplast grana wasn't tight. The resistences of leaves were getting weaker, the photosynthe-sitic rate was getting lower, almost all the chloroplast showed marked symptoms of in senescence.
引文
[1] 杨振玉 北方杂交粳稻发展的思考与展望．作物学报，1998．24(6)840～846．
[2] 汪向明 从中国水稻育种经验看遗传资源的意义．[J]。氨基酸和生物资源，1999，21(4)：9-11
[3] 李任，扬振玉，罗孝和，等 论水稻优良常规稻品系参与杂交优势育种的遗传基础[J]。中国水稻科学，1999，13(4)：239-241
[4] 吕川根，邹江石 两系法亚种间杂交稻两优培九的选育与应用[J]．杂交水稻，2000，15(2)：4-5
[5] HUFFAKER E C, PETERSON L W Protein turnover in plants and possible means of its regulation [J]. Ann. Rev. Plant Physiol. 1974, 25:363
[6] 吴光南，刘宝仁，张金渝 水稻叶片蛋白水解酶的某些理化特性及其与衰老的关系[J]．江苏农业学报，1985，1(1)：1-8
[7] 宋松泉，苏卫珍，袁晓南 杂交水稻离体叶片衰老与蛋白代谢的关系[J]．中山大学学报论丛，1995，1：20-23．
[8] RAY S, CHOUDHURI M A Flag leaf senescence in intact rice plant: effect of hormones on the activities 'senescense-eniymes' during leaf age at the reproductive development [J]. Biochem. Physiol. Pflanzen, 1980, 15:346-353.
[9] BISWAS A K, CHOUDHURI MA. Mechanism of monocarpic senescence in rice[J]. Plant Phvsiol, 1980, 65:340-345
[10] 陈靠山，张承烈，梁厚果．菜豆叶片衰老期间叶绿体被膜膜脂与脂肪酸组分的变化[J]．植物生理学报，1991，17(2)：139-144
[11] MARTIN C, THIMANN K V. The role of protein synthesis in the senescence of leaves [J]. Plant Physiol, 1972,49:64-71.
[12] LESHEM Y Y. Oxygen free radicals and plant senescence [J]. Wheats New in PlantPhysio], 1981, 12:1-4.
[13] 聂先舟，刘道宏，徐竹生 水稻旗叶脂质过氧化作用与叶龄Ni~(2+)，Ag~+的关系[J]．植物生理学通讯，1989，2：32-34．
[14] 陈贵，胡文王，谢甫绨，等 提取植物体内MDA的溶剂及MDA作为衰老指标的探讨[J]．植物生理通讯，1991，27(1)：44-46
[15] 王海涛，杨祥良，徐辉碧活性氧的信号分子作用[J]．生命的化学，2001，21(1)：39-41．
[16] KAISER W M. The effect of hydrogen peroxidide on CO2 fixation of isolated intact chloroplasts [J]. Biochem. Biphys. Acta., 1976,400:476-482
[17] 刘宁，高玉葆，贾彩霞，等 渗透胁迫下多花黑麦草叶内过氧化物酶活性和脯氨酸含量以及质膜相对透性的变化[J]．植物生理学通讯，2000，36(1)：11-14．
[18] 李振国，吴有梅，刘愚，等 植物对二氧化硫的反应和抗性研究[J]．植物生理学报，1981，7(4)：363-371．
[19] PATKA H K, MISKRA D. Pyrophosphatase, peroxidase and polyphenbol oxidase activities during leaf develop-ment and senescence[J]. Plant Physiol. 1979, 63:318-323.
[20] 张丽欣，淙汝静 乙烯对叶菜衰老的影响及光对乙烯作用的增效作用[J]．华北农学报，1987，2(4)：121-125．
[21] 许长成，邹琦，程炳嵩．杂交水稻开花结实期间叶片衰老[J]．植物生理学报，1991，19(3)：216-220．
[22] 林植芳，林桂珠，李双顺．衰老叶片和叶绿体中超氧阴离子和有机自由基浓度的变化[J]．植物生理学报，1988，14(3)：238-243．
[23] DHINDSA R S, PL UMB-DHINDSA P L, THORPE T A. Leaf senescence: correlated with increared levels ofmembrane permeability and lipid peroxidation, and decreased levels of superoxide desmutase and catalase [J]. J. Exp. Bot. 1981, 32:93-101.
[24] 林植芳，李双顺，林桂珠，等 水稻叶片的衰老与超氧物歧化酶活性及脂质过氧化作用的关系[J]．植物学报，1984，26：605-615．
[25] 林植芳，李双顺，林桂株 花生离体叶片衰老的调节[J]．中国科学院华南植物研究所集刊，1986，3：97-102．
[26] 陈光仪，傅家瑞 花生种子劣变过程中一些酶活性变化[J]．植物学报，1987，29(2)：164-170．
[27] 李柏林，梅慧生 燕麦叶片衰老与活性氧代谢的关系[J]．植物生理学报，1989，15(1)：6-12．
[28] 晏斌，戴秋杰，刘晓忠，等 玉米叶片涝渍伤害过程超氧自由基的积累[J]．植物学报，1995，37(9)：738-744．
[29] PAUL S K P, THOMPSON JE. Evidence for the accumulation of peroxidized lipids in membranes of senescing cotyledons [J]. Plant Physiol. 1984, 75:1152-1157
[30] 聂先舟，刘道宏，徐竹生 水稻旗叶脂质过氧化作用与叶龄Ni~(2+)，Ag~+的关系[J]．植物生理学通讯，1989，2：32-34
[31] Lawlor D W Photosynthesis, productivity and envuronment [J] J. Exp Bot. 1995.46 (special issue):1449-1461
[32] Evans, L T Dunstone, R, L Some physiological aspects of evolution in wheat [J]Aust J Biol Sci. 1970.23:725-741
[33] 张荣铣，程在全，方志伟等 关于光合速率高值持续期的初步研究(J)南京师范大学学报(自然科学版)1992，15：76-86
[34] 黄升谋 库源比对杂交水稻叶片衰老的影响．杂交水稻 2001．16(3)56-57
[35] 严建民，翟虎渠，万建民，焦德茂，张荣铣 亚种间重穗型杂交稻光合产物的转运特征及生理机制 中国农业科学2003．36(5)502-507
[36] 朱庆森，张祖建，杨建昌，曹显祖，郎有忠，王增春 亚种间杂交水稻产量库源特征 中国农业科学，1997，30(3)：52-59
[37] Thimann K V, Tcicy RM, Krivak B M. Metablism of oat leaves during senescence. V Senescence in light. Plant in phsiol 1977, 59:448
[38] 姬生栋，夏民，徐存拴，李庚午 小麦叶片衰老过程中叶绿体超微形态观察电子显微学报 电子显微学报电子显微学报[J]．2001，20(4)：513～514
[39] 左宝玉 Warigal小麦叶绿体类囊体膜的超微结构[J]植物学报，1996，28(1)：11-19
[40] 苏行 林植芳 孙谷畴 脂氧合酶对黄瓜叶片光合电子传递活性的影响[J]
植物学报 1996，38(4)：287～294
[41] NOODENLD, LEOPOLDAC. Phytohormones and the endogenous regulation of senescence and the abscission [A]. Letham D, Goodwinp, Higgins T. Phytohormones and Regulated compounds: A Comprehensive treatise [C]. New York: Elsevier, 1978. 329-369
[42] BATEN J, ROTHSTEINS J, THOMGSONJE. Expression of nuclear and chlorplast photosynthesis-specific genes during leave senescence [J]. J Exp Bot, 1991, 42:801-811
[43] CLOUSESD. Molecular genetic studies confirm the role of brass in osteriods in plant growth and development [J]Plant J, 1996, 10:1-8
[44] Yuan L p(袁隆平). Progress of two-line system hybrid rice breeding. Acta Agric Sci (中国农业科学),1990,23:1-3 (in Chinese with English abstract)
[45] Yuan LP(袁隆平). Hybrid rice breeding for super highyield. Hybrid Rice (杂交水稻), 1997, 12(6):1-6. (in Chinese withEnglish abstract)
[46] Arnon D L. Copper enzymes in isolated chloroplasts. Polyphenol oxidase in Bete bulgafis [J]. Plant physical, 1949(24): 1～15.
[47] Dunahay T G, Staehelin L A, Seibert Metal. Structural, biochemical and biophysical characterization of four oxyen evolving photosystem preparation from spinach [J]. BBA, 1984, 764:179～193.
[48] Gao S-J, Chen S-S、Li M-Q. Rapid post-illumination oxygen consumption and the relation to photorespiration [J]. Acta Phytophysiol Sin, 1988, 14(4): 313～317
[49] Cooms J, Hall D O, Long S P et al. Techniques in bioproductivity and photosynthesis [M]. Oxford: Pergamon Press. 1985, 136～137.
[50] Leammli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of facteriophage T4 [J]. Nature, 1970, 227:680～685.
[51] 叶济宇、赵海英 完整叶绿体的快速制备及其完整率的测定[J]．植物生理学通讯，1982，(1)：59～61．
[52] 马囚英、方志伟、张荣铣 小麦原生质体和叶绿体分离及其光合速率的测定
[J]．植物生理学通讯，1991，27(1)：53～55．
[53] 王维光 生物发光法测定三磷酸腺苷(A7P)．植物生理学实验手册[M]．上海科学技术出版社，1985：115～117
[54] Lu S-Y(卢少云), Guo Z-F(郭振飞), Peng X-X(彭新湘)et al, Responses of protection system in chloroplast of rice seedlings to the drought[J]. Journal of Tropical and Subtropical Botany(热带亚热带植物学报), 1999, 7(1): 47-52
[55] Tanaka K, Suda Y, Kondo N, et al, Ozone tolerance and the ascorbate-dependent hydrogen peroxide decompos- ing system in chloroplasts[J]. Plant Cell physiol., 1985,26:1425-1431
[56] Zhang D-Z(张殿忠), Wang P-H(汪沛洪), Zhao H-X(赵会贤) Determination of the content of free proline in wheat leaves[J]. Plant Physiol Comm (植物生理学通讯), 1990, (4): 62-65
[57] Li L(李琳), Jiao X-Z(焦新之) Determination of the content of protein with G-250[J]. Plant Physiol Comm(植物生理学通讯), 1980, (3): 52-55 Maely A C, Plant peroxidase[M].
[57] Methods in Enzymology, Vol. Ⅱ, Academic Press,1955:801-813
[58] Zhang Z-L(张志良), Laboratory Direction of Plant Physiology(植物生理学实验指导) [M]. Hight Education Press, 1995: 155-157[4]
[59] 谢田、徐中际 测定细胞膜透性的紫外吸收法[J]．植物生理学通讯，1986(1)：45～46．
[60] 蒋明义 植物内源维生素E的抗氧化作用．生物学通报，1993，28(9)：9
[61] Larson R A, The antioxidants of higher plants. Phytochem., 1988,27:969
[62] 宋纯鹏，梅慧生，储钟稀等Ca~(2+)对叶绿体中超氧化物自由基产生以及由ACC形成乙烯的影响。植物生理学报，1992，18(1)：55-62
[63] 冯文新，韩占芳，王玉国等 钙浸种对小麦幼苗保护酶活性及膜功能的影响。麦类作物，1997，17(3)：31-33
[64] 王国强，肖建平，蔡剑萍等 叶绿体结构和功能的研究Ⅴ：完整叶绿体的光合作用的放氧。植物生理学通讯，1980，5：31-36
[65] JIANG De-an, ZHU Cheng(蒋德安，朱诚)Laboratory manual of plant
physiology(植物生理学实验指导) [M]. Chengdu: Chengdu Sci. and Tech. Press, 1999,83-84. (in Chinese)
[66] 陆定志 杂交水稻根系生理优势及其与地上部性状的关联研究。中国水稻科学，1987，1(2)：81-94
[67] 王涌锐 杂交水稻产量生理。中山大学出版社，1988
[68] 曾宋君，梁承邺，梁敬琨等 两系杂交水稻杂种优势研究Ⅱ：生理与生物学基础分析。热带亚热带植物学报，1998，6(1)：19-24
[69] 张其德，卢从明，张启峰等 几组杂交组合德杂交稻及其亲本光合特性德比较研究。生物物理学报，1996，12(3)：511-516
[70] 卢从明，高煜珠，张其德等水分胁迫对叶绿体能量转换的影响。植物学报，1993，35(9)：693-697
[71] Salisbury F B, Ross C. Plant Physiol, Wadsworth Publishing Company, New Youk, 1969, 214
[72] PRASAD T K, ANDERSON M D, MARTIN B A, STEWART C R. Evidence for chilling-induced oxidative stress in maize seedlings and regulatory role for hydrogenperoide [J]. The Plant Cell, 1994,6:65～74.
[73] 张荣铣，程在全，马万山等，不同染色体组小麦种叶片全展后光合速率及叶绿京含量变化，江苏农业学报，1990，6(1)：1-9
[74] 岳寿松．余松烈．于振文 小麦旗叶衰老期间光合作用与叶肉细胞超微结构变化，沈阳农业大学学报，1998-01．29(1)：1-5
[75] 娄义龙 刘振业 刘贞琦 马达鹏 曾淑芬 烟草光合作用的遗传研究——Ⅳ．叶绿素含量的遗传及其与产量的关系1994：13(2)1-7
[76] 李明启，吕章荣，邓向前 野生稻和栽培稻的光合作用和叶绿素含量的比较研究[J]．植物生理学报，1984，10(4)：333-338．
[77] 魏锦城．王仁雷．程光宇 杂交稻核酮糖二磷酸羧化酶的动力学性质，植物生理学报，1994，20(1)：55-60
[78] 罗广华，王爱国 植物体内氧自由基的测定与清除。现代植物生理学实验指南，科学出版社。1999：308-309
[79] 李琳，焦新之 应用蛋白染色剂考马斯蓝G-250测定蛋白质的方法。植物生
理学通讯，1980，(3)：52-55
[80] 张殿忠，汪沛洪，赵会贤 测定小麦叶片游离脯氨酸含量的方法。植物生理学通讯[J]，1990，(4)：62-65
[81] Evans JR. Seemann JR. Defferences beween wheat genotypes in spefic achivity Of ribulose-1.5 bisphosphate carboxylase and the relationship tophotosynthesis. Plant physiol 1984,74: 759
[82] 王仁雷，魏锦城杂交稻及其三系生育过程中RuBP羧化酶及有关光合酶的变化[J]．作物学报，1996，22(1)：6-12．
[83] 魏道智，戴新宾，许晓明，等 植物叶片衰老机理的几种假说[J]．广西植物，1998，1：89-96．
[84] 曾韶西，王以柔刘鸿先 低温光照下与叶绿素降能有关酶促反应[J]，1991，17(2)：177-182．
[85] VAN HASSELT P H R. Photo-oxidation of leaf pigment in cucumber leaf discs during chilling [J]. ActaBot. Neerl., 1972,21: 539.
[86] KAR R K, CHOUDHURI M A. Possible mechanisms of light-induced chlorophyll degradation in senescing leaves of Hydrilla verticillata [J]. Physiol Plant, 1987,70:729-734.
[87] FOYE R C, ROW ELL J, WALER D. Measurement of the ascorbate content of spinach leaf protoplasts and chloroplasts during illum in stion [J]. Planta, 1983,157:239-244.
[88] 张丽欣，淙汝静 乙烯对叶菜衰老的影响及光对乙烯作用的增效作用[J]．华北农学报，1987，2(4)：121-125．
[89] 许长成，邹琦，程炳嵩 杂交水稻开花结实期间叶片衰老[J]．植物生理学报，1991，19(3)：216-220．
[90] 林植芳，林桂珠，李双顺 衰老叶片和叶绿体中超氧阴离子和有机自由基浓度的变化[J]．植物生理学报，19814(3)：238-243．
[91] 陈光仪，傅家瑞花生种子劣变过程中一些酶活性变化[J]．植物学报，1987，29(2)：164-170．
[92] 丁文明，赵毓橘 表油菜素内酯对黄瓜子叶过氧化物酶活性和可溶性蛋白含
量的影响[J]．植物生理学学报，1995，21(3)：259-264．
[93] DHINDSA R S, PLUM B-DH INDSA P LTHORPET A. Leaf senescence: correlated within creared levels of membrane permeability and lipid peroxidation, and decreased levels of superoxidedesmutase and catalase [J]. J. Exp. Bot.,1981, 32:93-101.
[94] 林植芳，李双顺，林桂珠，等 衰老叶片和叶绿体中H_2O_2的累积与膜脂过氧化的关系[J]．植物生理学报，198814(1)：16-22．
[94] LOWRY O H, ROSEBROUGH N J, FARR A LJ et al Protein measurement with the folin phenol reagent[J]. J. Biol. L, them, 1951, 193: 265-275.
[96] KELLOGG E W, Ⅲ, FRIDOVICHI. Speroxide, hydrogen peroxide, and singlet oxygen in lipid peroxidation by a xanthine oxidase system[J]. J. Biol. Chem, 1975, 250: 8812-8817.
[97] FRIDOVICHI. The biology of oxygen radicals[J]. Scince, 1978, 201:875-880.
[98] 赵世杰，李德全 丙二醛的测定。现代植物生理学实验指南，科学出版社。1999：305-306
[99] 王邦锡，何军贤，黄久常．水分胁迫导致小麦叶片光合作用下降的非气孔因素[J]．植物生理学报，1992，18(1)：77-84．
[100] 史兰波，李云荫．水分胁迫对冬小麦幼苗几种生理指标和叶绿体超微结构的影响[J]．植物生理学通讯，1990，2：28-31．
[101] 龚明，丁念诚，贺子义，等盐胁迫下大麦和小麦叶片脂质过氧化伤害与超微结构变化的关系[J]．植物学报，1989，31(11)：841-846．
[102] 汪宗立，刘晓忠，李建坤 玉米的涝渍伤害与膜脂过氧化作用和保护酶活性的关系[J]．江苏农业学报，1988，4(3)：1-8．
[103] HEATH R L, PACKER L. Photope rox idation in isolated chloroplasts.. Kinetics and stoichiometry of fatty acid peroxidation [J]. Arch Biochem. Biophys. 1968,125:189-198.
[104] 凌启鸿，张洪程，苏祖芳，等 稻作新理论[M]．北京：科学出版社，1994：171．
[105] 于振文，张炜，岳寿松 钾营养对冬小麦光合作用和衰老的影响[J]．作物学报，1996，22(3)：305-312
[106] 林植芳，李双顺，林植珠 丙二醛对菠菜叶片中光合羧化酶和细胞保护酶活性的影响[J]．植物学报，1989，31(11)：860-866．
[107] 姬全栋 夏民，徐存拴，李庚午 小麦叶片衰老过程中叶绿体超微形态观察 电子显微学报[J]2001 20(4)：513-514
[108] 方志伟，张荣铣，方敏 水稻叶片叶绿素含量与光合作用的关系[J]。南京农业大学学报，1987，4：17-22
[109] 沈允钢 提高作物光合效率、光合作用与物质生产译丛[M]．中国农业出版社，1980，(1)：1-32。
[110] 王永锐 杂交稻产量生理[M]中山大学出版社，1988。
[111] 郭培国，李明启 杂交稻及其亲本光合特征的研究Ⅰ、功能叶片叶绿素含量、叶绿素-蛋白质复合体及诱导荧光动力学[J]．热带亚热带植物学报，1996，4(4)：60-65。
[112] 曾宋君，梁敬琨，等 两系杂交稻杂交优势研究Ⅱ、植物与生物学基础分析[J]。热带亚热带植物学报，1998，6(1)：19-24。
[113] 郭培国，李明启 杂交稻及其亲本光合特征的研究Ⅲ、功能叶片碳代谢中一些酶活性[J] 热带亚热带植物学报，1997，5(2)：68-72。
[114] 郑国华 炭疽病侵染对枇杷叶片H2O2含量和叶绿素荧光参数的影响 福建农业大学学报2001，30(3)：353-356，
[115] Ellman G L, Tissue sulfhydryl groups[J]. Arch. Biochem. Biophys., 1959,82:70-77
[2] 汪向明 从中国水稻育种经验看遗传资源的意义．[J]。氨基酸和生物资源，1999，21(4)：9-11
[3] 李任，扬振玉，罗孝和，等 论水稻优良常规稻品系参与杂交优势育种的遗传基础[J]。中国水稻科学，1999，13(4)：239-241
[4] 吕川根，邹江石 两系法亚种间杂交稻两优培九的选育与应用[J]．杂交水稻，2000，15(2)：4-5
[5] HUFFAKER E C, PETERSON L W Protein turnover in plants and possible means of its regulation [J]. Ann. Rev. Plant Physiol. 1974, 25:363
[6] 吴光南，刘宝仁，张金渝 水稻叶片蛋白水解酶的某些理化特性及其与衰老的关系[J]．江苏农业学报，1985，1(1)：1-8
[7] 宋松泉，苏卫珍，袁晓南 杂交水稻离体叶片衰老与蛋白代谢的关系[J]．中山大学学报论丛，1995，1：20-23．
[8] RAY S, CHOUDHURI M A Flag leaf senescence in intact rice plant: effect of hormones on the activities 'senescense-eniymes' during leaf age at the reproductive development [J]. Biochem. Physiol. Pflanzen, 1980, 15:346-353.
[9] BISWAS A K, CHOUDHURI MA. Mechanism of monocarpic senescence in rice[J]. Plant Phvsiol, 1980, 65:340-345
[10] 陈靠山，张承烈，梁厚果．菜豆叶片衰老期间叶绿体被膜膜脂与脂肪酸组分的变化[J]．植物生理学报，1991，17(2)：139-144
[11] MARTIN C, THIMANN K V. The role of protein synthesis in the senescence of leaves [J]. Plant Physiol, 1972,49:64-71.
[12] LESHEM Y Y. Oxygen free radicals and plant senescence [J]. Wheats New in PlantPhysio], 1981, 12:1-4.
[13] 聂先舟，刘道宏，徐竹生 水稻旗叶脂质过氧化作用与叶龄Ni~(2+)，Ag~+的关系[J]．植物生理学通讯，1989，2：32-34．
[14] 陈贵，胡文王，谢甫绨，等 提取植物体内MDA的溶剂及MDA作为衰老指标的探讨[J]．植物生理通讯，1991，27(1)：44-46
[15] 王海涛，杨祥良，徐辉碧活性氧的信号分子作用[J]．生命的化学，2001，21(1)：39-41．
[16] KAISER W M. The effect of hydrogen peroxidide on CO2 fixation of isolated intact chloroplasts [J]. Biochem. Biphys. Acta., 1976,400:476-482
[17] 刘宁，高玉葆，贾彩霞，等 渗透胁迫下多花黑麦草叶内过氧化物酶活性和脯氨酸含量以及质膜相对透性的变化[J]．植物生理学通讯，2000，36(1)：11-14．
[18] 李振国，吴有梅，刘愚，等 植物对二氧化硫的反应和抗性研究[J]．植物生理学报，1981，7(4)：363-371．
[19] PATKA H K, MISKRA D. Pyrophosphatase, peroxidase and polyphenbol oxidase activities during leaf develop-ment and senescence[J]. Plant Physiol. 1979, 63:318-323.
[20] 张丽欣，淙汝静 乙烯对叶菜衰老的影响及光对乙烯作用的增效作用[J]．华北农学报，1987，2(4)：121-125．
[21] 许长成，邹琦，程炳嵩．杂交水稻开花结实期间叶片衰老[J]．植物生理学报，1991，19(3)：216-220．
[22] 林植芳，林桂珠，李双顺．衰老叶片和叶绿体中超氧阴离子和有机自由基浓度的变化[J]．植物生理学报，1988，14(3)：238-243．
[23] DHINDSA R S, PL UMB-DHINDSA P L, THORPE T A. Leaf senescence: correlated with increared levels ofmembrane permeability and lipid peroxidation, and decreased levels of superoxide desmutase and catalase [J]. J. Exp. Bot. 1981, 32:93-101.
[24] 林植芳，李双顺，林桂珠，等 水稻叶片的衰老与超氧物歧化酶活性及脂质过氧化作用的关系[J]．植物学报，1984，26：605-615．
[25] 林植芳，李双顺，林桂株 花生离体叶片衰老的调节[J]．中国科学院华南植物研究所集刊，1986，3：97-102．
[26] 陈光仪，傅家瑞 花生种子劣变过程中一些酶活性变化[J]．植物学报，1987，29(2)：164-170．
[27] 李柏林，梅慧生 燕麦叶片衰老与活性氧代谢的关系[J]．植物生理学报，1989，15(1)：6-12．
[28] 晏斌，戴秋杰，刘晓忠，等 玉米叶片涝渍伤害过程超氧自由基的积累[J]．植物学报，1995，37(9)：738-744．
[29] PAUL S K P, THOMPSON JE. Evidence for the accumulation of peroxidized lipids in membranes of senescing cotyledons [J]. Plant Physiol. 1984, 75:1152-1157
[30] 聂先舟，刘道宏，徐竹生 水稻旗叶脂质过氧化作用与叶龄Ni~(2+)，Ag~+的关系[J]．植物生理学通讯，1989，2：32-34
[31] Lawlor D W Photosynthesis, productivity and envuronment [J] J. Exp Bot. 1995.46 (special issue):1449-1461
[32] Evans, L T Dunstone, R, L Some physiological aspects of evolution in wheat [J]Aust J Biol Sci. 1970.23:725-741
[33] 张荣铣，程在全，方志伟等 关于光合速率高值持续期的初步研究(J)南京师范大学学报(自然科学版)1992，15：76-86
[34] 黄升谋 库源比对杂交水稻叶片衰老的影响．杂交水稻 2001．16(3)56-57
[35] 严建民，翟虎渠，万建民，焦德茂，张荣铣 亚种间重穗型杂交稻光合产物的转运特征及生理机制 中国农业科学2003．36(5)502-507
[36] 朱庆森，张祖建，杨建昌，曹显祖，郎有忠，王增春 亚种间杂交水稻产量库源特征 中国农业科学，1997，30(3)：52-59
[37] Thimann K V, Tcicy RM, Krivak B M. Metablism of oat leaves during senescence. V Senescence in light. Plant in phsiol 1977, 59:448
[38] 姬生栋，夏民，徐存拴，李庚午 小麦叶片衰老过程中叶绿体超微形态观察电子显微学报 电子显微学报电子显微学报[J]．2001，20(4)：513～514
[39] 左宝玉 Warigal小麦叶绿体类囊体膜的超微结构[J]植物学报，1996，28(1)：11-19
[40] 苏行 林植芳 孙谷畴 脂氧合酶对黄瓜叶片光合电子传递活性的影响[J]
植物学报 1996，38(4)：287～294
[41] NOODENLD, LEOPOLDAC. Phytohormones and the endogenous regulation of senescence and the abscission [A]. Letham D, Goodwinp, Higgins T. Phytohormones and Regulated compounds: A Comprehensive treatise [C]. New York: Elsevier, 1978. 329-369
[42] BATEN J, ROTHSTEINS J, THOMGSONJE. Expression of nuclear and chlorplast photosynthesis-specific genes during leave senescence [J]. J Exp Bot, 1991, 42:801-811
[43] CLOUSESD. Molecular genetic studies confirm the role of brass in osteriods in plant growth and development [J]Plant J, 1996, 10:1-8
[44] Yuan L p(袁隆平). Progress of two-line system hybrid rice breeding. Acta Agric Sci (中国农业科学),1990,23:1-3 (in Chinese with English abstract)
[45] Yuan LP(袁隆平). Hybrid rice breeding for super highyield. Hybrid Rice (杂交水稻), 1997, 12(6):1-6. (in Chinese withEnglish abstract)
[46] Arnon D L. Copper enzymes in isolated chloroplasts. Polyphenol oxidase in Bete bulgafis [J]. Plant physical, 1949(24): 1～15.
[47] Dunahay T G, Staehelin L A, Seibert Metal. Structural, biochemical and biophysical characterization of four oxyen evolving photosystem preparation from spinach [J]. BBA, 1984, 764:179～193.
[48] Gao S-J, Chen S-S、Li M-Q. Rapid post-illumination oxygen consumption and the relation to photorespiration [J]. Acta Phytophysiol Sin, 1988, 14(4): 313～317
[49] Cooms J, Hall D O, Long S P et al. Techniques in bioproductivity and photosynthesis [M]. Oxford: Pergamon Press. 1985, 136～137.
[50] Leammli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of facteriophage T4 [J]. Nature, 1970, 227:680～685.
[51] 叶济宇、赵海英 完整叶绿体的快速制备及其完整率的测定[J]．植物生理学通讯，1982，(1)：59～61．
[52] 马囚英、方志伟、张荣铣 小麦原生质体和叶绿体分离及其光合速率的测定
[J]．植物生理学通讯，1991，27(1)：53～55．
[53] 王维光 生物发光法测定三磷酸腺苷(A7P)．植物生理学实验手册[M]．上海科学技术出版社，1985：115～117
[54] Lu S-Y(卢少云), Guo Z-F(郭振飞), Peng X-X(彭新湘)et al, Responses of protection system in chloroplast of rice seedlings to the drought[J]. Journal of Tropical and Subtropical Botany(热带亚热带植物学报), 1999, 7(1): 47-52
[55] Tanaka K, Suda Y, Kondo N, et al, Ozone tolerance and the ascorbate-dependent hydrogen peroxide decompos- ing system in chloroplasts[J]. Plant Cell physiol., 1985,26:1425-1431
[56] Zhang D-Z(张殿忠), Wang P-H(汪沛洪), Zhao H-X(赵会贤) Determination of the content of free proline in wheat leaves[J]. Plant Physiol Comm (植物生理学通讯), 1990, (4): 62-65
[57] Li L(李琳), Jiao X-Z(焦新之) Determination of the content of protein with G-250[J]. Plant Physiol Comm(植物生理学通讯), 1980, (3): 52-55 Maely A C, Plant peroxidase[M].
[57] Methods in Enzymology, Vol. Ⅱ, Academic Press,1955:801-813
[58] Zhang Z-L(张志良), Laboratory Direction of Plant Physiology(植物生理学实验指导) [M]. Hight Education Press, 1995: 155-157[4]
[59] 谢田、徐中际 测定细胞膜透性的紫外吸收法[J]．植物生理学通讯，1986(1)：45～46．
[60] 蒋明义 植物内源维生素E的抗氧化作用．生物学通报，1993，28(9)：9
[61] Larson R A, The antioxidants of higher plants. Phytochem., 1988,27:969
[62] 宋纯鹏，梅慧生，储钟稀等Ca~(2+)对叶绿体中超氧化物自由基产生以及由ACC形成乙烯的影响。植物生理学报，1992，18(1)：55-62
[63] 冯文新，韩占芳，王玉国等 钙浸种对小麦幼苗保护酶活性及膜功能的影响。麦类作物，1997，17(3)：31-33
[64] 王国强，肖建平，蔡剑萍等 叶绿体结构和功能的研究Ⅴ：完整叶绿体的光合作用的放氧。植物生理学通讯，1980，5：31-36
[65] JIANG De-an, ZHU Cheng(蒋德安，朱诚)Laboratory manual of plant
physiology(植物生理学实验指导) [M]. Chengdu: Chengdu Sci. and Tech. Press, 1999,83-84. (in Chinese)
[66] 陆定志 杂交水稻根系生理优势及其与地上部性状的关联研究。中国水稻科学，1987，1(2)：81-94
[67] 王涌锐 杂交水稻产量生理。中山大学出版社，1988
[68] 曾宋君，梁承邺，梁敬琨等 两系杂交水稻杂种优势研究Ⅱ：生理与生物学基础分析。热带亚热带植物学报，1998，6(1)：19-24
[69] 张其德，卢从明，张启峰等 几组杂交组合德杂交稻及其亲本光合特性德比较研究。生物物理学报，1996，12(3)：511-516
[70] 卢从明，高煜珠，张其德等水分胁迫对叶绿体能量转换的影响。植物学报，1993，35(9)：693-697
[71] Salisbury F B, Ross C. Plant Physiol, Wadsworth Publishing Company, New Youk, 1969, 214
[72] PRASAD T K, ANDERSON M D, MARTIN B A, STEWART C R. Evidence for chilling-induced oxidative stress in maize seedlings and regulatory role for hydrogenperoide [J]. The Plant Cell, 1994,6:65～74.
[73] 张荣铣，程在全，马万山等，不同染色体组小麦种叶片全展后光合速率及叶绿京含量变化，江苏农业学报，1990，6(1)：1-9
[74] 岳寿松．余松烈．于振文 小麦旗叶衰老期间光合作用与叶肉细胞超微结构变化，沈阳农业大学学报，1998-01．29(1)：1-5
[75] 娄义龙 刘振业 刘贞琦 马达鹏 曾淑芬 烟草光合作用的遗传研究——Ⅳ．叶绿素含量的遗传及其与产量的关系1994：13(2)1-7
[76] 李明启，吕章荣，邓向前 野生稻和栽培稻的光合作用和叶绿素含量的比较研究[J]．植物生理学报，1984，10(4)：333-338．
[77] 魏锦城．王仁雷．程光宇 杂交稻核酮糖二磷酸羧化酶的动力学性质，植物生理学报，1994，20(1)：55-60
[78] 罗广华，王爱国 植物体内氧自由基的测定与清除。现代植物生理学实验指南，科学出版社。1999：308-309
[79] 李琳，焦新之 应用蛋白染色剂考马斯蓝G-250测定蛋白质的方法。植物生
理学通讯，1980，(3)：52-55
[80] 张殿忠，汪沛洪，赵会贤 测定小麦叶片游离脯氨酸含量的方法。植物生理学通讯[J]，1990，(4)：62-65
[81] Evans JR. Seemann JR. Defferences beween wheat genotypes in spefic achivity Of ribulose-1.5 bisphosphate carboxylase and the relationship tophotosynthesis. Plant physiol 1984,74: 759
[82] 王仁雷，魏锦城杂交稻及其三系生育过程中RuBP羧化酶及有关光合酶的变化[J]．作物学报，1996，22(1)：6-12．
[83] 魏道智，戴新宾，许晓明，等 植物叶片衰老机理的几种假说[J]．广西植物，1998，1：89-96．
[84] 曾韶西，王以柔刘鸿先 低温光照下与叶绿素降能有关酶促反应[J]，1991，17(2)：177-182．
[85] VAN HASSELT P H R. Photo-oxidation of leaf pigment in cucumber leaf discs during chilling [J]. ActaBot. Neerl., 1972,21: 539.
[86] KAR R K, CHOUDHURI M A. Possible mechanisms of light-induced chlorophyll degradation in senescing leaves of Hydrilla verticillata [J]. Physiol Plant, 1987,70:729-734.
[87] FOYE R C, ROW ELL J, WALER D. Measurement of the ascorbate content of spinach leaf protoplasts and chloroplasts during illum in stion [J]. Planta, 1983,157:239-244.
[88] 张丽欣，淙汝静 乙烯对叶菜衰老的影响及光对乙烯作用的增效作用[J]．华北农学报，1987，2(4)：121-125．
[89] 许长成，邹琦，程炳嵩 杂交水稻开花结实期间叶片衰老[J]．植物生理学报，1991，19(3)：216-220．
[90] 林植芳，林桂珠，李双顺 衰老叶片和叶绿体中超氧阴离子和有机自由基浓度的变化[J]．植物生理学报，19814(3)：238-243．
[91] 陈光仪，傅家瑞花生种子劣变过程中一些酶活性变化[J]．植物学报，1987，29(2)：164-170．
[92] 丁文明，赵毓橘 表油菜素内酯对黄瓜子叶过氧化物酶活性和可溶性蛋白含
量的影响[J]．植物生理学学报，1995，21(3)：259-264．
[93] DHINDSA R S, PLUM B-DH INDSA P LTHORPET A. Leaf senescence: correlated within creared levels of membrane permeability and lipid peroxidation, and decreased levels of superoxidedesmutase and catalase [J]. J. Exp. Bot.,1981, 32:93-101.
[94] 林植芳，李双顺，林桂珠，等 衰老叶片和叶绿体中H_2O_2的累积与膜脂过氧化的关系[J]．植物生理学报，198814(1)：16-22．
[94] LOWRY O H, ROSEBROUGH N J, FARR A LJ et al Protein measurement with the folin phenol reagent[J]. J. Biol. L, them, 1951, 193: 265-275.
[96] KELLOGG E W, Ⅲ, FRIDOVICHI. Speroxide, hydrogen peroxide, and singlet oxygen in lipid peroxidation by a xanthine oxidase system[J]. J. Biol. Chem, 1975, 250: 8812-8817.
[97] FRIDOVICHI. The biology of oxygen radicals[J]. Scince, 1978, 201:875-880.
[98] 赵世杰，李德全 丙二醛的测定。现代植物生理学实验指南，科学出版社。1999：305-306
[99] 王邦锡，何军贤，黄久常．水分胁迫导致小麦叶片光合作用下降的非气孔因素[J]．植物生理学报，1992，18(1)：77-84．
[100] 史兰波，李云荫．水分胁迫对冬小麦幼苗几种生理指标和叶绿体超微结构的影响[J]．植物生理学通讯，1990，2：28-31．
[101] 龚明，丁念诚，贺子义，等盐胁迫下大麦和小麦叶片脂质过氧化伤害与超微结构变化的关系[J]．植物学报，1989，31(11)：841-846．
[102] 汪宗立，刘晓忠，李建坤 玉米的涝渍伤害与膜脂过氧化作用和保护酶活性的关系[J]．江苏农业学报，1988，4(3)：1-8．
[103] HEATH R L, PACKER L. Photope rox idation in isolated chloroplasts.. Kinetics and stoichiometry of fatty acid peroxidation [J]. Arch Biochem. Biophys. 1968,125:189-198.
[104] 凌启鸿，张洪程，苏祖芳，等 稻作新理论[M]．北京：科学出版社，1994：171．
[105] 于振文，张炜，岳寿松 钾营养对冬小麦光合作用和衰老的影响[J]．作物学报，1996，22(3)：305-312
[106] 林植芳，李双顺，林植珠 丙二醛对菠菜叶片中光合羧化酶和细胞保护酶活性的影响[J]．植物学报，1989，31(11)：860-866．
[107] 姬全栋 夏民，徐存拴，李庚午 小麦叶片衰老过程中叶绿体超微形态观察 电子显微学报[J]2001 20(4)：513-514
[108] 方志伟，张荣铣，方敏 水稻叶片叶绿素含量与光合作用的关系[J]。南京农业大学学报，1987，4：17-22
[109] 沈允钢 提高作物光合效率、光合作用与物质生产译丛[M]．中国农业出版社，1980，(1)：1-32。
[110] 王永锐 杂交稻产量生理[M]中山大学出版社，1988。
[111] 郭培国，李明启 杂交稻及其亲本光合特征的研究Ⅰ、功能叶片叶绿素含量、叶绿素-蛋白质复合体及诱导荧光动力学[J]．热带亚热带植物学报，1996，4(4)：60-65。
[112] 曾宋君，梁敬琨，等 两系杂交稻杂交优势研究Ⅱ、植物与生物学基础分析[J]。热带亚热带植物学报，1998，6(1)：19-24。
[113] 郭培国，李明启 杂交稻及其亲本光合特征的研究Ⅲ、功能叶片碳代谢中一些酶活性[J] 热带亚热带植物学报，1997，5(2)：68-72。
[114] 郑国华 炭疽病侵染对枇杷叶片H2O2含量和叶绿素荧光参数的影响 福建农业大学学报2001，30(3)：353-356，
[115] Ellman G L, Tissue sulfhydryl groups[J]. Arch. Biochem. Biophys., 1959,82:70-77