蜂王浆中活性小分子物质的研究
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摘要
本论文应用动物药理学试验和气质联用仪分析，对蜂王浆中活性小分子物质的研究取得了以下两方面的结果。
蜂王浆经水溶过滤制备的上清液然后再经葡聚糖凝胶Sephadex G-50柱分离的第一个峰组分、沸水浴加热7h后的蜂王浆上清液、蜂王浆上清液经过透析后的渗出液及加热7h后的渗出液对大鼠的血压均有降低效果而且对蛙腹直肌也有收缩效果，而蜂王浆上清液柱分离的其他三个峰组分和蜂王浆上清液经过透析后的透析液(透析袋里的溶液)对大鼠血压和蛙腹直肌没有明显效果，从而可以判断蜂王浆的降血压作用和对蛙腹直肌起收缩效果的有效物质是蜂王浆中的小分子物质。用气质联用仪分别对具有活性的各个组分进行了成分分析，从中发现各个活性组分中有几种相同的成分，而且可以判断这几种相同成分对热很稳定。它们是2-丁基-1-辛醇、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚、3，5-二叔丁基苯酚、雪松醇(雪松脑、柏木脑)、1，2-苯二酸二异丁酯、1，2-苯二酸二丁酯。
首次报道了浆蜂的蜂王浆中氨基酸的含量，并对其中几种稀有氨基酸进行了进一步的定量分析，结果发现：采用磺基水杨酸提取法对蜂王浆中鸟氨酸的提取率相对最高；采用酒精提取法对蜂王浆中γ-氨基丁酸和牛黄酸的提取率相对最高；采用盐酸提取法对蜂王浆中γ-氨基丁酸、鸟氨酸和牛黄酸的提取率相对都最低。
This paper studied partial small active molecule substances of the Royal Jelly (RJ), by means of pharmacological experiments and GC/MS and had two results as follows:
The supernatant fluid, which was made by filtrating water-soluble substances of the RJ, was loaded on a preequilibrated column of Sephadex G-50, was eluted with a pH7.0 phosphate buffer, and four peaks were showed, that is, four chromatographic fractions RJ1, RJ2, RJ3, RJ4.
The supernatant fluid was heated by boiling water of 100 C lasting respectively for Ih, 2h, 3h, 4h, 5h, 6h, 7h, and then the supernatant fluid was dialyzed against deionized water for 4d~5d, and obtained effusive fluid and dialytic fluid.
Pharmacological experiments on the above fractions were done by means of observing the effect of RJ on blood pressure of big mouse and abdominal muscle of bullfrog. Proved active components were analyzed by GC/MS and obtained every active component's chemical compositions, and find out common chemical compositions of every active component, this compositions were very heat-stable, they were l-Octanol,2-butyl-, Butylated Hydroxytoluene, Phenol,3,5-bis(l,l-dimethylethyl)-, Cedrol, 1,2-Benzenedicarboxylic acid,bis(2-methylpropyl)ester, Dibutylphthalate.
Moreover, this paper reported firstly the qualitative and quantitive analysis of amino acid of the RJ and reported firstly the three rare amino acids: Y -Aminobutanoic acid (G-ABA), Ornithine (Orn), Taurine (Tau) existing in the RJ. Result shows that extraction rates of Orn is relatively higher by sulphosalicylic acid, extraction rates of G-ABA and Tau is relatively higher by alcohol, extraction rates of G-ABA, Orn and Tau is relatively lower by HC1.
蜂王浆经水溶过滤制备的上清液然后再经葡聚糖凝胶Sephadex G-50柱分离的第一个峰组分、沸水浴加热7h后的蜂王浆上清液、蜂王浆上清液经过透析后的渗出液及加热7h后的渗出液对大鼠的血压均有降低效果而且对蛙腹直肌也有收缩效果，而蜂王浆上清液柱分离的其他三个峰组分和蜂王浆上清液经过透析后的透析液(透析袋里的溶液)对大鼠血压和蛙腹直肌没有明显效果，从而可以判断蜂王浆的降血压作用和对蛙腹直肌起收缩效果的有效物质是蜂王浆中的小分子物质。用气质联用仪分别对具有活性的各个组分进行了成分分析，从中发现各个活性组分中有几种相同的成分，而且可以判断这几种相同成分对热很稳定。它们是2-丁基-1-辛醇、2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚、3，5-二叔丁基苯酚、雪松醇(雪松脑、柏木脑)、1，2-苯二酸二异丁酯、1，2-苯二酸二丁酯。
首次报道了浆蜂的蜂王浆中氨基酸的含量，并对其中几种稀有氨基酸进行了进一步的定量分析，结果发现：采用磺基水杨酸提取法对蜂王浆中鸟氨酸的提取率相对最高；采用酒精提取法对蜂王浆中γ-氨基丁酸和牛黄酸的提取率相对最高；采用盐酸提取法对蜂王浆中γ-氨基丁酸、鸟氨酸和牛黄酸的提取率相对都最低。
This paper studied partial small active molecule substances of the Royal Jelly (RJ), by means of pharmacological experiments and GC/MS and had two results as follows:
The supernatant fluid, which was made by filtrating water-soluble substances of the RJ, was loaded on a preequilibrated column of Sephadex G-50, was eluted with a pH7.0 phosphate buffer, and four peaks were showed, that is, four chromatographic fractions RJ1, RJ2, RJ3, RJ4.
The supernatant fluid was heated by boiling water of 100 C lasting respectively for Ih, 2h, 3h, 4h, 5h, 6h, 7h, and then the supernatant fluid was dialyzed against deionized water for 4d~5d, and obtained effusive fluid and dialytic fluid.
Pharmacological experiments on the above fractions were done by means of observing the effect of RJ on blood pressure of big mouse and abdominal muscle of bullfrog. Proved active components were analyzed by GC/MS and obtained every active component's chemical compositions, and find out common chemical compositions of every active component, this compositions were very heat-stable, they were l-Octanol,2-butyl-, Butylated Hydroxytoluene, Phenol,3,5-bis(l,l-dimethylethyl)-, Cedrol, 1,2-Benzenedicarboxylic acid,bis(2-methylpropyl)ester, Dibutylphthalate.
Moreover, this paper reported firstly the qualitative and quantitive analysis of amino acid of the RJ and reported firstly the three rare amino acids: Y -Aminobutanoic acid (G-ABA), Ornithine (Orn), Taurine (Tau) existing in the RJ. Result shows that extraction rates of Orn is relatively higher by sulphosalicylic acid, extraction rates of G-ABA and Tau is relatively higher by alcohol, extraction rates of G-ABA, Orn and Tau is relatively lower by HC1.
引文
[1] 陈盛禄主编．中国蜜蜂学[M]．北京：中国农业出版社，2001．728～729．
[2] 陈崇羔编著．蜂产品加工学[M]．福建：科学技术出版社，1999．6～7．
[3] 王贻节主编．蜜蜂产品学[M]．北京：农业出版社，1991．96～101．
[4] 张复兴主编．现代养蜂生产[M]．北京：中国农业大学出版社，1998．446～455．
[5] Nove, H. Honeybee Science[J]. 1982, 2(3): 123～124.
[6] 范志红，南庆贤．蜂乳中蛋白质和肽对人体的保护作用[J]．中国乳品工业，2000，28(5)：29～33．
[7] 方国桢，方建生，田树革．蜂王浆成份及其分析方法研究进展[J]．中国乳品工业，1994，12(6)：280～286．
[8] 郭源梅，董华兴．小肽的吸收机制及其应用前景[J]．饲料博览，2000，(11)：9～11．
[9] Masaki Kamakura. Signal Transduction Mechanism Leading to Enhanced Treated with Royal Jelly 57-Kda Protein[J]. Biochem, 2002, (132): 911～919.
[10] 郭芳彬．蜂王浆中氨基酸的保健作用[J]．蜜蜂杂志，2000，(3)：17～18．
[11] 吴长青，吴文胜，董爱茶．蜂王浆功能因子的研究现状[J]．蜜蜂杂志，2001，(11)：32～33．
[12] 彭展芬，潘建国．试论蜂王浆中的功能因子[J]．养蜂科技，1998，(4)：7～8．
[13] 李万瑶．蜂王浆的医疗保健作用研究[J]．蜜蜂杂志，2001，(5)：23～25．
[14] 茹清静．蜂王浆活性成分与护肝机理研究[J]．知识新天地，2002，(1)：15～16．
[15] 何薇莉，周婷．蜂王浆生物活性质量测定探讨[J]．蜜蜂杂志，2001，(4)：5～6．
[16] 黄自强，倪秀雄，戴秀中，等．机能学实验指导[M]．福建：福建科学技术出版社，2000．57～60．
[17] 曹军，杨秀珍．人参蜂王浆口服液抗辐射损伤的实验研究[J]．中医药信息，1995，(6)：44～45．
[18] 金国梁，王一心．王浆合剂治疗血吸虫病肝硬化临床和动物实验的治疗观察[J]．中国养蜂，1985，(5)：26～27．
[19] 刘务生，肖显华．蜂王浆对小鼠辐射损伤治疗作用的实验研究[J]．中华放射医学与防护杂志，1984，4(3)：25～26．
[20] 沈新南，陆瑞芳．蜂王浆冻干粉对实验性高脂血症及血栓形成的影响[J]．中华预防医学杂志，1995，29(1)：27～29．
[21] 林志彬，张页．沙苑子蜂王浆的免疫增强作用[J]．中国养蜂，1987，(1)：16．
[22] 林志彬，张一彬．蜂王浆对小鼠免疫功能的增强作用[J]．中国药理学通报，1987，3(1)：6～8．
[23] 沈自尹，胡国让．上海人参蜂王浆对老年人体内免疫功能与内分泌功能的影响[J]．中草药研究，1987，(7)：20～23．
[24] 张敬，戴秋萍，刘艺敏，等．蜂王浆冻干粉对小鼠免疫功能的影响[J]．上海铁道大学学报，2000，(9)：16～17．
[25] Lidija Sver, Nada Orsolic, et. A Royal Jelly as a New Potential Immunomodulator in Rats and Mice[J]. Comp Immunol Microbiol Infect Dis, 1996, 19(1): 31～38.
[26] 郭芳彬．蜂王浆中的记忆物质—乙酰胆碱[J]．蜜蜂杂志，2000，(8)：21．
[27] 乔廷昆．蜂王浆与大脑营养和思维[J]．中国养蜂，1987，(3)：22．
[28] 孙丽萍，董捷，王芳．蜂王浆改善心脑血管系统功能的研究进展[J]．蜜蜂杂志，2002，(1)：7～8．
[29] 孙丽萍，董捷．蜂王浆抗老年性痴呆的机理浅析[J]．中国养蜂，2001，52(6)：30．
[30] 刘晓雯，刘克武，喻东．蜂王浆的有效成分与人类健康[J]．蜜蜂杂志，1999，(9)：6～9．
[31] 倪辉，张其标．激素及激素样物质是蜂王浆的主要保健成分[J]．蜜蜂杂志，2001，(4)：19～21．
[32] Tamura, T. Fujii,A., Kuboyarna,N., Antitumor Effect of Royal Jelly[J]. Nippon Yakurigaku Zasshi, 1987, 89(2): 73～80.
[33] 戴静芝，严惠芳．蜂皇浆与10-羟基-2-癸烯酸的药理活性试验[J]．医药工业．1985，16(5)：219～221．
[34] 刘克武，杨守忠．蜂王浆的抗菌活性的研究[J]．蜜蜂杂志，2001，(2)：5～6．
[35] 苏晔，敬璞，丁晓雯，等．蜂王浆的化学成分生理活性及应用[J]．农牧产品开发，2000，(7)：11～12．
[36] 耿纯．蜂王浆的降血脂作用[J]．中国养蜂，2000，52(1)：36．
[37] 郭芳彬．蜂王浆对高血压降压机理浅析[J]．蜜蜂杂志，2000，(5)：21．
[38] 郭芳彬．蜂王浆与低血压[J]．蜜蜂杂志，2000，(7)：32～33．
[39] 郭芳彬．蜂王浆与高血脂症[J]．蜜蜂杂志，2001，(5)：31～33．
[40] 林志彬．七十年代以来蜂王浆研究的进展[J]．蜜蜂杂志，1982，(2)：5～6．
[41] Kramer, K.J., Childs,C.N., Spiers,R.D., Jacobs,R.M. Purification of Insulin-like
Peptide from Insect Haemdymph and Royal Jelly[J]. Insect Biochem, 1982, (12): 91～98.
[42] Takenaka, T. Honeybee Science[J], 1982,3(2): 69～74.
[43] Takenaka,T. Bulletin of the Faculty of Agriculture[J]. Tamagawa University, 1984, (24): 101～149.
[44] Fujiwara, S., Imai,J., Fujiwara,M., et. A Potent Antibacterial Protein in Royal Jelly. Purification and Determination of the Primary Structure of Royalisin[J]. Biochem. 1990, (265): 11333～11337.
[45] Osman,S.A., Ismail,S.A. Bulletin of the Faculty of Agriculture[J]. Cairo. University, 1977, 28(1): 321～325.
[46] Osmn,S.A., Fasag,R.S. Bulletin of the Faculty of Agriculture Cairo University[J]. 1977, 28(1): 285～303.
[47] 肖静伟，李举怀，李绍文，等．蜂王浆中一种有抗菌活性的小肽[J]．昆虫学报，1996，39(2)：133～140．
[48] 徐友弟．蜂王浆与蜂王浆胶囊[J]．中国养蜂，1989，(6)：28～29．
[49] Otani H., Oyama M. and Tokita F. Polyacrylamide Gel Electrophoresis and Immunochemical Propertied of Proteins in Royal Jelly[J]. Journal of Dairy Food Science. 1985, (34):21～25.
[50] S. R. Howe, P. S. Dimick, A.W. Benton. Composition of freshly harvested and commercial royal jelly[J]. Journal of Apicultural Research, 1995, 24(1): 52～61.
[51] Yatsunami K. Miwa S. and Echigo T. Studied on Proteins in Royal Jelly by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis[J]. Bull. Fac. Agricul., 1987, (27): 31～33.
[52] 史景江主编．色谱分析法实验与习题[M]．重庆：重庆大学出版社，1993．88～98．
[53] 汪家政，范明主编．蛋白质技术手册[M]．北京：科学出版社，2002．72～74．
[54] 吴冠芸，潘华珍，吴晕，等．生物化学与分子生物学实验常用数据手册[M]．北京：科学出版社，2002．51～52．
[55] 严衍禄主编．现代仪器分析[M]．北京：北京农业大学出版社，2001．190～193．
[56] 赵永芳主编．生物化学技术原理及应用[M]．北京：科学出版社，2002．64～69．
[57] 张均田主编．现代药理实验方法(上册)[M]．北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1998．546～553．
[58] Hashimoto,T., Takeuchi,K., ect. Bulletin of the Naji College of Pharmacy[J]. 1977, (7): 1～13.
[59] W.L.M.PERRY O.B.E., D.Sc., M.D., F.R.C.P.E. Pharmacological experiments on isolated preparations[M] Second edition. By the staff of the Department of Pharmacology University Edinburgh. Preface by Churchill Livingstone Edinburgh London and New York printed in Hong Kong by Commonwealth printing Press Ltd, 1970. 38～40.
[60] 村田武，陈致杭，邹连生．蜂王浆中部分组分的GC／MS的研究[J]．化学通报，1987，(5)：31～32．
[61] 周瑾，李雪梅，杨伟祖，等．利用地霉属真菌和棒状杆菌属菌株协同发酵生产γ-癸内酯[J]．生物技术通报，2003，14(1)：39～41．
[62] 龚蜜，徐洁，段爱萍．蜂王浆中牛黄酸含量分析初报[J]．蜜蜂杂志，1993，(6)：3～4
[63] 龚蜜，张永贵，吴珍红．蜂花粉中牛磺酸含量分析初报[J]．蜜蜂杂志，1999，(1)：3～4．
[64] 刘冬生，汪青青．牛磺酸，羟脯氨酸、γ—氨基丁酸、鸟氨酸和色氨酸的测定[J]．氨基酸和生物资源，1996，18(3)：15～18．
[65] 陆淳，田富春，苏海龙，等．食品中牛磺酸的测定[J]．中国乳品工业，2001，29(5)：29～31．
[66] 罗岳雄，刘炽松，赖友胜．蜂蜜中牛磺酸含量分析初报[J]．养蜂科技，1992，(3)：3．
[67] 陈华生，罗岳雄，张学峰．中、意蜂蜂王浆氨基酸含量比较测定[J]．蜜蜂杂志，1998，(7)：7～8．
[68] 董学军，郝恩坤．蜂蛹中氨基酸含量的研究[J]．氨基酸和生物资源，2000，22(1)：14～15．
[69] 王明安，童大伟，黄国响．蜂王浆中的氨基酸和微量元素分析[J]．北京农业大学学报，1991，17(4)：60，65．
[70] 包华琼，王新庄．γ-氨基丁酸(GABA)的生殖生理作用[J]．动物医学进展，2002，23(3)：39～41．
[71] 汪春运．γ-氨基丁酸和精神药理[J]．国外医学精神病学分册，2002，29(4)：233～235．
[72] 郭芳彬．蜂王浆中牛黄酸的营养保健作用[J]．蜜蜂杂志，1996，(11)：5～6．
[73] 刘惠芳．牛磺酸的营养研究进展[J]．饲料博览，2001，(10)：11～13．
[74] 王蕾，刘占涛，臧东莲，等．牛磺酸对GABA的替代作用研究[J]．脑与神经疾
病杂志，1999，7(6)：338～340．
[75] 北京农业大学主编．动物生物化学[M]．北京：农业出版社，1983．279～304．
[2] 陈崇羔编著．蜂产品加工学[M]．福建：科学技术出版社，1999．6～7．
[3] 王贻节主编．蜜蜂产品学[M]．北京：农业出版社，1991．96～101．
[4] 张复兴主编．现代养蜂生产[M]．北京：中国农业大学出版社，1998．446～455．
[5] Nove, H. Honeybee Science[J]. 1982, 2(3): 123～124.
[6] 范志红，南庆贤．蜂乳中蛋白质和肽对人体的保护作用[J]．中国乳品工业，2000，28(5)：29～33．
[7] 方国桢，方建生，田树革．蜂王浆成份及其分析方法研究进展[J]．中国乳品工业，1994，12(6)：280～286．
[8] 郭源梅，董华兴．小肽的吸收机制及其应用前景[J]．饲料博览，2000，(11)：9～11．
[9] Masaki Kamakura. Signal Transduction Mechanism Leading to Enhanced Treated with Royal Jelly 57-Kda Protein[J]. Biochem, 2002, (132): 911～919.
[10] 郭芳彬．蜂王浆中氨基酸的保健作用[J]．蜜蜂杂志，2000，(3)：17～18．
[11] 吴长青，吴文胜，董爱茶．蜂王浆功能因子的研究现状[J]．蜜蜂杂志，2001，(11)：32～33．
[12] 彭展芬，潘建国．试论蜂王浆中的功能因子[J]．养蜂科技，1998，(4)：7～8．
[13] 李万瑶．蜂王浆的医疗保健作用研究[J]．蜜蜂杂志，2001，(5)：23～25．
[14] 茹清静．蜂王浆活性成分与护肝机理研究[J]．知识新天地，2002，(1)：15～16．
[15] 何薇莉，周婷．蜂王浆生物活性质量测定探讨[J]．蜜蜂杂志，2001，(4)：5～6．
[16] 黄自强，倪秀雄，戴秀中，等．机能学实验指导[M]．福建：福建科学技术出版社，2000．57～60．
[17] 曹军，杨秀珍．人参蜂王浆口服液抗辐射损伤的实验研究[J]．中医药信息，1995，(6)：44～45．
[18] 金国梁，王一心．王浆合剂治疗血吸虫病肝硬化临床和动物实验的治疗观察[J]．中国养蜂，1985，(5)：26～27．
[19] 刘务生，肖显华．蜂王浆对小鼠辐射损伤治疗作用的实验研究[J]．中华放射医学与防护杂志，1984，4(3)：25～26．
[20] 沈新南，陆瑞芳．蜂王浆冻干粉对实验性高脂血症及血栓形成的影响[J]．中华预防医学杂志，1995，29(1)：27～29．
[21] 林志彬，张页．沙苑子蜂王浆的免疫增强作用[J]．中国养蜂，1987，(1)：16．
[22] 林志彬，张一彬．蜂王浆对小鼠免疫功能的增强作用[J]．中国药理学通报，1987，3(1)：6～8．
[23] 沈自尹，胡国让．上海人参蜂王浆对老年人体内免疫功能与内分泌功能的影响[J]．中草药研究，1987，(7)：20～23．
[24] 张敬，戴秋萍，刘艺敏，等．蜂王浆冻干粉对小鼠免疫功能的影响[J]．上海铁道大学学报，2000，(9)：16～17．
[25] Lidija Sver, Nada Orsolic, et. A Royal Jelly as a New Potential Immunomodulator in Rats and Mice[J]. Comp Immunol Microbiol Infect Dis, 1996, 19(1): 31～38.
[26] 郭芳彬．蜂王浆中的记忆物质—乙酰胆碱[J]．蜜蜂杂志，2000，(8)：21．
[27] 乔廷昆．蜂王浆与大脑营养和思维[J]．中国养蜂，1987，(3)：22．
[28] 孙丽萍，董捷，王芳．蜂王浆改善心脑血管系统功能的研究进展[J]．蜜蜂杂志，2002，(1)：7～8．
[29] 孙丽萍，董捷．蜂王浆抗老年性痴呆的机理浅析[J]．中国养蜂，2001，52(6)：30．
[30] 刘晓雯，刘克武，喻东．蜂王浆的有效成分与人类健康[J]．蜜蜂杂志，1999，(9)：6～9．
[31] 倪辉，张其标．激素及激素样物质是蜂王浆的主要保健成分[J]．蜜蜂杂志，2001，(4)：19～21．
[32] Tamura, T. Fujii,A., Kuboyarna,N., Antitumor Effect of Royal Jelly[J]. Nippon Yakurigaku Zasshi, 1987, 89(2): 73～80.
[33] 戴静芝，严惠芳．蜂皇浆与10-羟基-2-癸烯酸的药理活性试验[J]．医药工业．1985，16(5)：219～221．
[34] 刘克武，杨守忠．蜂王浆的抗菌活性的研究[J]．蜜蜂杂志，2001，(2)：5～6．
[35] 苏晔，敬璞，丁晓雯，等．蜂王浆的化学成分生理活性及应用[J]．农牧产品开发，2000，(7)：11～12．
[36] 耿纯．蜂王浆的降血脂作用[J]．中国养蜂，2000，52(1)：36．
[37] 郭芳彬．蜂王浆对高血压降压机理浅析[J]．蜜蜂杂志，2000，(5)：21．
[38] 郭芳彬．蜂王浆与低血压[J]．蜜蜂杂志，2000，(7)：32～33．
[39] 郭芳彬．蜂王浆与高血脂症[J]．蜜蜂杂志，2001，(5)：31～33．
[40] 林志彬．七十年代以来蜂王浆研究的进展[J]．蜜蜂杂志，1982，(2)：5～6．
[41] Kramer, K.J., Childs,C.N., Spiers,R.D., Jacobs,R.M. Purification of Insulin-like
Peptide from Insect Haemdymph and Royal Jelly[J]. Insect Biochem, 1982, (12): 91～98.
[42] Takenaka, T. Honeybee Science[J], 1982,3(2): 69～74.
[43] Takenaka,T. Bulletin of the Faculty of Agriculture[J]. Tamagawa University, 1984, (24): 101～149.
[44] Fujiwara, S., Imai,J., Fujiwara,M., et. A Potent Antibacterial Protein in Royal Jelly. Purification and Determination of the Primary Structure of Royalisin[J]. Biochem. 1990, (265): 11333～11337.
[45] Osman,S.A., Ismail,S.A. Bulletin of the Faculty of Agriculture[J]. Cairo. University, 1977, 28(1): 321～325.
[46] Osmn,S.A., Fasag,R.S. Bulletin of the Faculty of Agriculture Cairo University[J]. 1977, 28(1): 285～303.
[47] 肖静伟，李举怀，李绍文，等．蜂王浆中一种有抗菌活性的小肽[J]．昆虫学报，1996，39(2)：133～140．
[48] 徐友弟．蜂王浆与蜂王浆胶囊[J]．中国养蜂，1989，(6)：28～29．
[49] Otani H., Oyama M. and Tokita F. Polyacrylamide Gel Electrophoresis and Immunochemical Propertied of Proteins in Royal Jelly[J]. Journal of Dairy Food Science. 1985, (34):21～25.
[50] S. R. Howe, P. S. Dimick, A.W. Benton. Composition of freshly harvested and commercial royal jelly[J]. Journal of Apicultural Research, 1995, 24(1): 52～61.
[51] Yatsunami K. Miwa S. and Echigo T. Studied on Proteins in Royal Jelly by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis[J]. Bull. Fac. Agricul., 1987, (27): 31～33.
[52] 史景江主编．色谱分析法实验与习题[M]．重庆：重庆大学出版社，1993．88～98．
[53] 汪家政，范明主编．蛋白质技术手册[M]．北京：科学出版社，2002．72～74．
[54] 吴冠芸，潘华珍，吴晕，等．生物化学与分子生物学实验常用数据手册[M]．北京：科学出版社，2002．51～52．
[55] 严衍禄主编．现代仪器分析[M]．北京：北京农业大学出版社，2001．190～193．
[56] 赵永芳主编．生物化学技术原理及应用[M]．北京：科学出版社，2002．64～69．
[57] 张均田主编．现代药理实验方法(上册)[M]．北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1998．546～553．
[58] Hashimoto,T., Takeuchi,K., ect. Bulletin of the Naji College of Pharmacy[J]. 1977, (7): 1～13.
[59] W.L.M.PERRY O.B.E., D.Sc., M.D., F.R.C.P.E. Pharmacological experiments on isolated preparations[M] Second edition. By the staff of the Department of Pharmacology University Edinburgh. Preface by Churchill Livingstone Edinburgh London and New York printed in Hong Kong by Commonwealth printing Press Ltd, 1970. 38～40.
[60] 村田武，陈致杭，邹连生．蜂王浆中部分组分的GC／MS的研究[J]．化学通报，1987，(5)：31～32．
[61] 周瑾，李雪梅，杨伟祖，等．利用地霉属真菌和棒状杆菌属菌株协同发酵生产γ-癸内酯[J]．生物技术通报，2003，14(1)：39～41．
[62] 龚蜜，徐洁，段爱萍．蜂王浆中牛黄酸含量分析初报[J]．蜜蜂杂志，1993，(6)：3～4
[63] 龚蜜，张永贵，吴珍红．蜂花粉中牛磺酸含量分析初报[J]．蜜蜂杂志，1999，(1)：3～4．
[64] 刘冬生，汪青青．牛磺酸，羟脯氨酸、γ—氨基丁酸、鸟氨酸和色氨酸的测定[J]．氨基酸和生物资源，1996，18(3)：15～18．
[65] 陆淳，田富春，苏海龙，等．食品中牛磺酸的测定[J]．中国乳品工业，2001，29(5)：29～31．
[66] 罗岳雄，刘炽松，赖友胜．蜂蜜中牛磺酸含量分析初报[J]．养蜂科技，1992，(3)：3．
[67] 陈华生，罗岳雄，张学峰．中、意蜂蜂王浆氨基酸含量比较测定[J]．蜜蜂杂志，1998，(7)：7～8．
[68] 董学军，郝恩坤．蜂蛹中氨基酸含量的研究[J]．氨基酸和生物资源，2000，22(1)：14～15．
[69] 王明安，童大伟，黄国响．蜂王浆中的氨基酸和微量元素分析[J]．北京农业大学学报，1991，17(4)：60，65．
[70] 包华琼，王新庄．γ-氨基丁酸(GABA)的生殖生理作用[J]．动物医学进展，2002，23(3)：39～41．
[71] 汪春运．γ-氨基丁酸和精神药理[J]．国外医学精神病学分册，2002，29(4)：233～235．
[72] 郭芳彬．蜂王浆中牛黄酸的营养保健作用[J]．蜜蜂杂志，1996，(11)：5～6．
[73] 刘惠芳．牛磺酸的营养研究进展[J]．饲料博览，2001，(10)：11～13．
[74] 王蕾，刘占涛，臧东莲，等．牛磺酸对GABA的替代作用研究[J]．脑与神经疾
病杂志，1999，7(6)：338～340．
[75] 北京农业大学主编．动物生物化学[M]．北京：农业出版社，1983．279～304．