氟致大鼠肾脏毒性及其机理研究
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摘要
为了探讨氟中毒对肾脏的毒性作用及其可能机制,为氟病的研究提供理论依据。本研究选择健康Wistar大鼠32只,雌雄各半,体重150-180g,随机分为4组,每组8只,即：生理盐水组(对照组)、低氟组(100mg·kg-1·d-1 NaF)中氟组(200mg·kg-1·d-1 NaF)、高氟组(300mg·kg-1·d-1 NaF),连续灌胃染毒90天,每三天称体重一次。染毒结束次日,摘眼球采血；颈椎脱臼处死大鼠,迅速分离肾脏,分别称质量并计算肾脏脏器系数；制作肾脏组织HE染色切片,观察大鼠肾组织病理形态学的改变；用生化分析仪检测肾功能生化指标：血清尿素、肌酐；运用原子吸收光谱仪检测大鼠血清铜、锌、钙、镁、铁5种微量元素的含量；取单侧肾脏组织用HNO3-KCIO4低温湿法消化,利用空气-乙炔火焰原子吸收光谱法测定大鼠肾脏组织中铜、锌、钙、镁、铁5种微量元素的含量；制备肾脏组织匀浆,分光光度法检测肾脏组织过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)的含量。研究结果如下：
1、染毒第30天各组大鼠体重,组间差异有统计学意义(P<0.05),其中低氟组、中氟组、高氟组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。低氟组、中氟组与高氟组比较差异有统计学意义(P<0.05)；第0、60、90天各组间比较差异无统计学意义,其中低氟组、中氟组、高氟组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
2、灌胃90天后,肾脏脏器系数,各染氟组与对照组比较组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。
3、光镜观察,高氟组肾脏近端小管轻度水肿,近曲小管上皮细胞水肿,伴有不同程度颗粒变性,部分呈空泡变性,间质小血管轻度扩张。
4、与对照组比较,高氟组血清Urea含量有显著性升高(P<0.01)。同时与低氟组比较,中、高氟组血清Urea含量亦有显著性升高(P<0.05)。血清肌肝(Cr)含量随染毒剂量的增加有升高趋势,但与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。
5、与对照组比较,低氟组、高氟组Cu含量和中氟组、高氟组Fe含量降低(P<0.05)。与低氟组比较,中氟组Fe含量降低(P<0.05)。与中氟组比较,高氟组Cu含量降低(P<0.05)。
6、与对照组比较,中氟组的锌含量、高氟组的铁含量和低氟组的钙含量的有显著性降低(P<0.05)。与低氟组比较,中、高氟组Fe含量有显著性较低(P<0.01)；中、高氟组Ca含量有显著性升高(P<0.05)。与中氟组比较,高氟组Zn含量有显著性升高(P<0.05)。
7、与对照组比较,高氟组的CAT活性有显著性降低,但MDA有显著性升高(P<0.05)。与低氟组比较,高氟组的CAT活性有显著性降低(P<0.05)；与中氟组比较,高氟组的MDA有显著性升高(P<0.05)。
本研究结果显示,氟对肾脏组织具有一定的损害作用。其机制可能与氟降低肾脏组织中金属元素的含量和改变肾脏的组织结构及引起肾脏组织氧化应激损伤有关,其具体机制有待进一步的研究。
To probe into the fluoride-induced renal toxicity and its possible mechanisms in rats so as to provide theoretical basis for the prevention and treatment of fluorosis. A total of 32 with male and female evenly weighting 150～180g were randomly divided into 4 groups, control group with normal saline, the low fluoride group of 100 mg·kg-1·d-1 NaF, the medium fluoride group of 200 mg·kg-1·d-1 NaF and the high fluoride group of 300 mg·kg-1·d-1 NaF, with 8 rats in each group. The rats were exposed to fluoride by intragastric administration for 90 days. The weight of the rats was measured one time every 3 days. The day after the last intragastric administration, the blood samples were collected on eyes of rats and all rats were killed. The Rat kidneys were promptly plucked off and the organ coefficient of kidney was calculated. The tissues of kidney were made into pathological sections and the pathological changes of rat kidney were observed by light microscopy. Some indexes of renal function such as serum urea, serum creatinine were measured with biochemical analyzers. The levels of the five trace elements in serum of rats were measured with Atomic Absorption Spectrophotometer. One of two kidneys from each Rat was digested with HNO3-KClO4 at low temperature. Five trace elements in kidney tissue were determined by air-acetylene flame atomic absorption spectrometry, and another one kidney were prepared as homogenate to detect the content of malondialdehyde (MDA), Hydrogen peroxide (H2O2) and the activity of catalase (CAT).
The results indicated that:
1.There were statistic differences among groups in the weight of rats on exposure 30 days. Compared with control group, the weight of rats among three groups showed no significant difference (P>0.05). However, the weight of rats in low and medium fluoride groups after 30 days exposure was significant increased compared with high fluoride group (P<0.05), but significant differences were not observed between after 60 days and 90 days exposure.
2.The organ coefficient of kidney among four groups showed no significant difference (P>0.05).
3.Under the light microscopy, granular degeneration to some extent was observed in the epithelial cells of kidney proximal tubule, some cells showed vacuolar degeneration, and also mildly congestion and swelling in mesenchymal blood vessels were observed.
4.The serum urea of the high fluoride group showed significant increase compared with control group (P<0.01). Meanwhile, the serum urea of the medium group and high fluoride group showed significant increase compared with the low fluoride group (P<0.05). The serum creatinine showed no difference between any each of fluoride exposure groups compared with the control group (P>0.05).
5.The Cu2+ contents in rat serum of the low group and high fluoride groups showed significant decrease compared with control group (P<0.05). The Fe3+ contents in rat serum of the medium and high fluoride group showed significant decrease compared with control group (P<0.01). Meanwhile, The Fe3+ contents in rat serum of the medium fluoride group showed significant decrease compared with control group (P<0.05). Compared with the medium fluoride group, the Cu2+ contents in rat serum of high fluoride groups showed significant decrease(P<0.05). The contents of Ca2+, Mg2+ and Zn2+ in rat serum were not different in each group compared with the control group (all P>0.05).
6.The Zn2+ contents in kidney tissue from the medium fluoride group showed significant decrease compared with control group (P<0.05). The Fe3+ contents in kidney of the high fluoride groups showed significant decrease compared with control group (P<0.05). The Ca2+ contents in kidney tissue of the low fluoride groups showed significant decrease compared with control group (P<0.05). Meanwhile, the Fe3+ contents in kidney of the medium and high fluoride groups showed significant decrease compared with low fluoride group (P<0.01). The Ca2+ contents in kidney tissue of the medium and high fluoride groups showed significant increase compared with low fluoride group (P<0.05). Compared with the medium fluoride group, The Zn2+ contents in kidney tissue from the medium fluoride group showed significant increase compared with medium group (P<0.05). The contents of Mg2+ and Cu2+ in kidney were not different in each group compared with the control group (all P>0.05).
7.Compared with the control group, the activity of CAT in kidney tissue from the high fluoride group showed significant decrease (P<0.05). The content of MDA showed significant increase compared with the control group (P<0.05). Compared with the low group, the activity of CAT in kidney tissue from the high fluoride group showed significant decrease (P<0.05). The content of MDA showed significant increase compared with the medium group (P<0.05). The contents of H2O2 in kidney were not different in each group compared with the control group (all P>0.05).
The results indicated that fluoride could cause damage to the kidney of rat. Fluoride could reduce the content of metallic elements, and cause significant change in renal tissue and lead to some disorder in redox equilibrium of kidney tissue, which might be related to its damage mechanism. However, its specific mechanism needed to further study.
1、染毒第30天各组大鼠体重,组间差异有统计学意义(P<0.05),其中低氟组、中氟组、高氟组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。低氟组、中氟组与高氟组比较差异有统计学意义(P<0.05)；第0、60、90天各组间比较差异无统计学意义,其中低氟组、中氟组、高氟组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
2、灌胃90天后,肾脏脏器系数,各染氟组与对照组比较组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。
3、光镜观察,高氟组肾脏近端小管轻度水肿,近曲小管上皮细胞水肿,伴有不同程度颗粒变性,部分呈空泡变性,间质小血管轻度扩张。
4、与对照组比较,高氟组血清Urea含量有显著性升高(P<0.01)。同时与低氟组比较,中、高氟组血清Urea含量亦有显著性升高(P<0.05)。血清肌肝(Cr)含量随染毒剂量的增加有升高趋势,但与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。
5、与对照组比较,低氟组、高氟组Cu含量和中氟组、高氟组Fe含量降低(P<0.05)。与低氟组比较,中氟组Fe含量降低(P<0.05)。与中氟组比较,高氟组Cu含量降低(P<0.05)。
6、与对照组比较,中氟组的锌含量、高氟组的铁含量和低氟组的钙含量的有显著性降低(P<0.05)。与低氟组比较,中、高氟组Fe含量有显著性较低(P<0.01)；中、高氟组Ca含量有显著性升高(P<0.05)。与中氟组比较,高氟组Zn含量有显著性升高(P<0.05)。
7、与对照组比较,高氟组的CAT活性有显著性降低,但MDA有显著性升高(P<0.05)。与低氟组比较,高氟组的CAT活性有显著性降低(P<0.05)；与中氟组比较,高氟组的MDA有显著性升高(P<0.05)。
本研究结果显示,氟对肾脏组织具有一定的损害作用。其机制可能与氟降低肾脏组织中金属元素的含量和改变肾脏的组织结构及引起肾脏组织氧化应激损伤有关,其具体机制有待进一步的研究。
To probe into the fluoride-induced renal toxicity and its possible mechanisms in rats so as to provide theoretical basis for the prevention and treatment of fluorosis. A total of 32 with male and female evenly weighting 150～180g were randomly divided into 4 groups, control group with normal saline, the low fluoride group of 100 mg·kg-1·d-1 NaF, the medium fluoride group of 200 mg·kg-1·d-1 NaF and the high fluoride group of 300 mg·kg-1·d-1 NaF, with 8 rats in each group. The rats were exposed to fluoride by intragastric administration for 90 days. The weight of the rats was measured one time every 3 days. The day after the last intragastric administration, the blood samples were collected on eyes of rats and all rats were killed. The Rat kidneys were promptly plucked off and the organ coefficient of kidney was calculated. The tissues of kidney were made into pathological sections and the pathological changes of rat kidney were observed by light microscopy. Some indexes of renal function such as serum urea, serum creatinine were measured with biochemical analyzers. The levels of the five trace elements in serum of rats were measured with Atomic Absorption Spectrophotometer. One of two kidneys from each Rat was digested with HNO3-KClO4 at low temperature. Five trace elements in kidney tissue were determined by air-acetylene flame atomic absorption spectrometry, and another one kidney were prepared as homogenate to detect the content of malondialdehyde (MDA), Hydrogen peroxide (H2O2) and the activity of catalase (CAT).
The results indicated that:
1.There were statistic differences among groups in the weight of rats on exposure 30 days. Compared with control group, the weight of rats among three groups showed no significant difference (P>0.05). However, the weight of rats in low and medium fluoride groups after 30 days exposure was significant increased compared with high fluoride group (P<0.05), but significant differences were not observed between after 60 days and 90 days exposure.
2.The organ coefficient of kidney among four groups showed no significant difference (P>0.05).
3.Under the light microscopy, granular degeneration to some extent was observed in the epithelial cells of kidney proximal tubule, some cells showed vacuolar degeneration, and also mildly congestion and swelling in mesenchymal blood vessels were observed.
4.The serum urea of the high fluoride group showed significant increase compared with control group (P<0.01). Meanwhile, the serum urea of the medium group and high fluoride group showed significant increase compared with the low fluoride group (P<0.05). The serum creatinine showed no difference between any each of fluoride exposure groups compared with the control group (P>0.05).
5.The Cu2+ contents in rat serum of the low group and high fluoride groups showed significant decrease compared with control group (P<0.05). The Fe3+ contents in rat serum of the medium and high fluoride group showed significant decrease compared with control group (P<0.01). Meanwhile, The Fe3+ contents in rat serum of the medium fluoride group showed significant decrease compared with control group (P<0.05). Compared with the medium fluoride group, the Cu2+ contents in rat serum of high fluoride groups showed significant decrease(P<0.05). The contents of Ca2+, Mg2+ and Zn2+ in rat serum were not different in each group compared with the control group (all P>0.05).
6.The Zn2+ contents in kidney tissue from the medium fluoride group showed significant decrease compared with control group (P<0.05). The Fe3+ contents in kidney of the high fluoride groups showed significant decrease compared with control group (P<0.05). The Ca2+ contents in kidney tissue of the low fluoride groups showed significant decrease compared with control group (P<0.05). Meanwhile, the Fe3+ contents in kidney of the medium and high fluoride groups showed significant decrease compared with low fluoride group (P<0.01). The Ca2+ contents in kidney tissue of the medium and high fluoride groups showed significant increase compared with low fluoride group (P<0.05). Compared with the medium fluoride group, The Zn2+ contents in kidney tissue from the medium fluoride group showed significant increase compared with medium group (P<0.05). The contents of Mg2+ and Cu2+ in kidney were not different in each group compared with the control group (all P>0.05).
7.Compared with the control group, the activity of CAT in kidney tissue from the high fluoride group showed significant decrease (P<0.05). The content of MDA showed significant increase compared with the control group (P<0.05). Compared with the low group, the activity of CAT in kidney tissue from the high fluoride group showed significant decrease (P<0.05). The content of MDA showed significant increase compared with the medium group (P<0.05). The contents of H2O2 in kidney were not different in each group compared with the control group (all P>0.05).
The results indicated that fluoride could cause damage to the kidney of rat. Fluoride could reduce the content of metallic elements, and cause significant change in renal tissue and lead to some disorder in redox equilibrium of kidney tissue, which might be related to its damage mechanism. However, its specific mechanism needed to further study.
引文
[1]张小磊,何宽,马建华.氟元素对人体健康的影响[J].微量元素与健康研究,2006,23(6)：66-67.
[2]李勇,孙棉铃,吴德生,等.应用全胚胎培养技术研究氟的发育毒性[J].环境与健康杂志,1995,12(6)：250-252.
[3]陈杨,于燕妮.氧自由基与氟中毒[J].中国地方病学杂志,2009,28(2)：234-236.
[4]何爱娥.氟的生理作用及安全用氟[J].临床口腔医学杂志,2007,8(23)：497-498.
[5]姚明勤.微量元素氟的营养价值和危害[J].中国食物与营养,1997,4：26-27.
[6]官志忠,于燕妮,张华,等.地方性氟中毒流行因素、病理损害及防治措施研究[J].医学研究杂志,2007,36(4)：62-63.
[7]郄文娟,黄鸿雁,李素娟,等.两种必需微量元素的生物功能[J].微量元素与健康研究,2001,18(3)：77.
[8]何凤生.中华职业医学[M].北京：人民卫生出版社,1979.382-388.
[9]张继剀,毛淑贤.人体必需微量元素与人类健康[J].甘肃科技,2005,21(3)：183-184.
[10]Bartlett JD, Dwyer SE, Beniash E, et al. Fluorosis:a new model and new insights[J]. J DentRes,2005,84(9):832.
[11]曾昭华,曾雪萍.氟、氯、溴、碘等卤族元素与人体健康的关系[J].湖南地质,2002,21(3)：221-224.
[12]徐辉,井玲,李广生.过量氟对肾细胞内游离钙及钙泵的影响[J].中国地方病学杂志,2006,25(4)：379-381.
[13]陶新,许梓荣,汪以真.氟中毒对动物健康影响的研究进展[J].中国畜牧杂志,2006,42(3)：61-63.
[14]谭郁彬.氟对机体代谢及各系统的影响[J].中国地方病防治杂志,1994,9(3)：163-165.
[15]张维东,张勇,刘国艳,等.氟对大鼠甲状腺超微结构的影响[J].中国地方病学杂志,2008,27(6)：622-624.
[16]王成学,马洪顺,陈塑寰.氟中毒对骨密度影响实验研究[J]. 中国地方病防治杂志,2005,20(6)：339-340.
[17]马晓英,朱静媛,等.高氟区儿童血清骨钙素与降钙素含量测定[J].中国学校卫生,2007,28(3)：244-245.
[18]于燕妮,刘家骝,王守立. 慢性氟中毒大鼠骨骼自由基含量及病理形态学研究[J].中国地方病学杂志,2000,19(5)：337-339.
[19]刘晓秋,张秀云,李广生.自由基与氧化应激在氟中毒骨病变发生中的作用[J].中国地方病防治杂志,2001,16(1)：4-6.
[20]高晨光,张爱君.氟对运动系统的毒性作用[J].中国地方病防治杂志,2007,22(3)：195-196.
[21]何瑞波,杜华杰,杨亚奇.氟中毒大鼠睾丸细胞DNA和RNA变化的荧光组织化学研究[J].武警医学院学报,2001,10(3)：186-187.
[22]甄炯,陈荣安,王慧娟.慢性氟中毒大鼠睾丸超微结构观察[J].职业医学,1994,21(4)：11-12.
[23]江琴,朱静媛,姜春霞.氟对大鼠睾丸生殖细胞增殖细胞核抗原表达的影响[J].中国地方病学杂志,2005,24(5)：520-522.
[24]张本忠,高小玲,吴德生.氟致大鼠胚胎发育毒性及其机理的体外实验研究[J].卫生研究,2002,31(6)：420-422.
[25]程晓天,王三祥,高建国.氟中毒大鼠脑组织MBP、NSE、氟含量及CHE活性分析[J].中国地方病学杂志,2002,21(5)：357-358.
[26]高建国,王三祥,程晓天.氟对大鼠脑髓鞘碱性蛋白及髓鞘磷脂质损伤的研究[J].中国地方病学杂志,2003,22(1)：28-30.
[27]邵千里,王亚南,李良文.慢性氟中毒患者认知功能缺损的初步研究[J].中国地方病学杂志,2003,22(4)：336-338.
[28]袁淑德,宋可钦,吕优英.实验性慢性氟中毒鼠脑5-羟色胺含量和更新率变化的分区性研究[J].中国地方病防治杂志,1993,8(2)：145.
[29]陈学军,薛占瑞,王玉清.慢性氟中毒大鼠中缝大核5-羟色胺神经元免疫细胞化学研究[J].锦州医学院学报,2003,24(1)：13-15.
[30]张海谋.氟对免疫分子影响的研究进展[J].工业卫生与职业病,1998,24(1)：43-46.
[31]韩博,史言,卢广忠.氟对动物免疫功能的影响[J].饲料博览,1999,11(1)：19-20.
[32]陈骏汇,宋世震,徐增光.氟致大鼠免疫系统的损伤及其机制探讨[J].职业医学,1997,24(2)：16-17.
[33]叶榕,管继如,张国军.有机氟作业工人免疫功能及脂质过氧化水平的观察[J].中国工业医学杂志2000,13(1)：11-12.
[34]李克俊,黄志军,杨岩.职业性氟接触者的血清免疫球蛋白和几种酶活性改变及抗氟灵干预效果分析[J].中国职业医学,2000,27(2)：28-30.
[35]Chlubek D. Fluoride and oxidative stress[J]. Fluoride,2003,36(4):217-228.
[36]徐辉,常明,李广生,等.氟中毒大鼠骨、肾组织自由基水平的变化[J].中国地方病防治杂志,2004,19(4)：193-195.
[37]Hanen B, Francoise C, Tahia B, et al. Oxidative stress induced by fluoride in adult mice and their suckling pups[J]. Exp Toxicol Pathol,2007,58(5):339-349.
[38]张静敏,王春艳,李新,等.氟中毒大鼠肾组织抗氧化酶基因水平的变化[J].中国地方病防治杂志,2009,24(2)：88-90.
[39]李健学,全笑江,吴云鹏.氟对大鼠肝、肾、脑细胞活性氧代谢的影响[J].地方病通报,1995,10(2)：10-12.
[40]宋沈超,魏赞道.铝在氟中毒病因中的地位实验研究[J].贵阳医学院学报,1991,163：217-225.
[41]Saralakumari D, Rao PR. Erythrocyte glutathione metabolism in human chronic fluoride toxicity[J]. Biochem Int,1991,232:349-57.
[42]买买提艾力·斯迪克,沙娜瓦尔·塔希.微量元素铜的分布与营养生理作用[J].新疆畜牧业,2009,(3)：45.
[43]袁施彬,何平,陈代明.微量元素铜的营养生理功能和促进生长机制[J].饲料工业,2004,25(7)：23-25.
[44]傅可为,刘晓雁,汤瑞琦,等.氟对鸡胚肢软骨细胞毒作用及铜对其拮抗效应的研究[J].中国地方病防治杂志,1995,10(2)：84-85.
[45]刘青松.锌的生理功能与临床疾病的关系[J].职业与健康,2006,22(21)：1836-1837.
[46]孟晋宏,梁哲,鞠躬.锌对人体生理功能的影响及作用机制[J].微量元素与 健康研究,1997,14(3)：54-56.
[47]曹谨玲,陈剑杰.微量元素锌的生理功能及其应用研究[J].家畜生态,2003,24(4)：62-65.
[48]张爱君,朱岱,都春华.微量元素与地方性氟中毒[J].中国地方病防治杂志,1999,14(5)：281-284.
[49]白雪涛,包克光.锌锰钼对大鼠小肠吸收的影响[J].中国地方病学杂志,1996,15(4)：205.
[50]陈国广,陈振华,李学明,等.钙锌的生理作用及其体内吸收的相互影响[J].中国食物与营养.2006,(3)：61-61.
[51]顾清.钙的生理功能及代谢的研究进展[J].中国食品卫生杂志,2002,14(6)：29-33.
[52]王雄清,陈封政.人体钙的生理作用与合理补钙[J].锦阳师范学院学报,2004,23(5)：62-65.
[53]葛相金,姜玉亭,唐国华,等.高密市饮水型氟中毒地区中老年人骨关节炎患病情况调查[J].预防医学论坛2006,12(1)：57-58.
[54]李万里,王萍,王守英.钙与鸡冠花提取物对氟中毒大鼠骨代谢的影响[J].新乡医学院学报,1999,16(4)：289-291.
[55]吴坤.营养与食品卫生[M].北京：人民卫生出版社2004.41-45.
[56]倪凤伟,谢立群,黄长青.饮水型地方性氟中毒病区儿童发中微量元素测定[J].中华医学研究杂志,2005,5(12)：1312-1313.
[57]朱绯,李术,周良生,等.氟中毒致贫血的研究进展[J].东北农业大学学报,2009,40(1)：134-137.
[58]李淑华.镁缺乏对人体健康的危害[J].中国校医,2000,6(14)：232.
[59]许丽萍,周金苟.老年人血清镁缺乏现象的观察[J].苏州大学学报(医学版),2002,22(3)：248.
[60]陈继英.硒、镁、铜-人体不可缺少的微量元素[J].药膳食疗研究,1999,2：21.
[61]白云,刘风贞.镁与氟相互作用的研究近况[J].环境与健康杂志,2001,18(1)：56-58.
[62]方冬虹,李延兵.氧化应激与糖尿病肾病[J].药品评价,2010,1：12-15.
[63]梁刚,于露洋,李富君,等.砷对小鼠脂质过氧化和抗氧化能力的影响[J]. 中国公共卫生杂志,1999,15(1)：26-27.
[64]冯国基,王福忠.血液过氧化氢酶测定及临床应用[J].国外医学临床生物化学与检验分册,1994,17(4)：167-168.
[65]李省,陈悦,许启泰,等.自由基与氟中毒对RNA代谢影响[J].中国公共卫生,2007,23(1)：113.
[66]刘红,冯桂英,刘立志.饮水氟浓度不同地区中小学生血清LPO的检测[J].哈尔滨医科大学学报,1999,(2)：119.
[67]张秀云,徐辉,李广生.氟化钠对血管平滑肌细胞氧化应激水平的影响[J].中国地方病防治杂志,2003,18(4)：199-201.
[68]刘连,徐园园,许洁.氟对大鼠自由基、氧化应激及超微结构影响[J].中国公共卫生,2009,25(9)：1114-1116.
[69]李健学,全笑江,宋世震,等.氟与硒对离体大鼠肝酶和氧自由基代谢的影响[J].卫生研究,1995,24(3)：148-151.
[70]郭晓英,陈爱莉.氟对大鼠肝脏氧化应激及超微结构的影响[J].中国医科大学学报,2005,(4)：321-322.
[71]李卫华,范奇元,申立军,等.环境内分泌干扰物2-溴丙烷对大鼠睾丸毒性的研究[J].生殖与避孕,2001,21(3)：157-161.
[72]杨建明,蒋学之,刘洪,等.铅的肾脏毒性与细胞凋亡的关系[J].广东微量元素科学,1998,5(4)：39-42.
[73]吴起清,钟近洁,白生宾.饮水型大鼠氟中毒动物模型的建立[J].中国高等医学教育,2009,(3)：120-121.
[74]曹进,赵燕,刘箭卫.砖茶型氟中毒的动物模型[J].中国地方病学杂志,1998,17(5)：287-290.
[75]陈树君,孙玉敏,孟羽俊.慢性氟中毒对雄性大鼠肝脏的损伤及其抗氧化能力的影响[J].环境与健康杂志,2008,25(8)：714-715.
[76]陈贤,赵红刚.盐制杜仲对小鼠生长发育与脏器系数的影响[J].四川中医,2005,23(11)：29-31.
[77]薛诚,陈学,杨克敌.硒锌对氟致肾脏损伤的拮抗作用研究[J].卫生研究,2000,29(1)：21-23.
[78]邹万忠.肾脏疾病的病理变化及肾脏的基本结构和功能[J].继续医学教育, 2006,20(27)：32-35.
[79]王丽华,孙殿军,石玉霞,等.饮茶型氟中毒动物模型建立及组织病理学观察[J].中国地方病学杂志,2003,22(1)：22-24.
[80]杨克敌,王爱国,王桂珍.硒对氟所致肾脏病理和超微结构改变的影响[J].中国公共卫生学报,1996,15(3)：156-157.
[81]张福军,康龙丽,于琳华.摄入过量氟实验大鼠肾脏形态损害与体内氟含量及血清MDA的关系[J].西安医科大学学报,2000,21(6)：515-517.
[82]丁振若,于文彬,苏明权,郝晓柯.现代检验医学[M].北京：人民军医出版社,2007.487-490.
[83]阳世光,袁爱武,郭锡素.不同浓度的安氟醚对肝肾功能的影响[J].实用临床医学,2005,6(4)：47-49.
[84]鲁家才,库宝庆,莫扬.四项生化指标在肾功能损伤中的意义和临床评价[J].国际检验医学杂志,2006,27(9)：841—842.
[85]农嵩,张树球,李朝敢.接氟工人血和尿液指标的检测分析[J].中国工业职业医学杂志,2003,16(1)：43-44.
[86]李光晨,张文博,中曜明.氟中毒家兔肾脏功能与细胞周期的变化[J].中国实验诊断学,2007,11(12)：1591-1592.
[87]颜世铭.微量元素的吸收[J].广东微量元素科学,2008,15(10)：70.
[88]徐增光,陈荣安,章孟本.“拮氟锐”抗氟毒性的研究.中国地方病防治杂志,1994,9(3)：136.
[89]陈荣安,李健学,张裕曾.电解铝作业对工人健康的影响及硼砂饮料保健作用的研究.职业医学,1993,20(2)：66.
[90]何生虎,等.高氟对绵羊铜吸收影响的研究[J].宁夏农学院学报,1998,19(2)：15-17.
[91]陈培忠,云中杰,李涛,等.地方性氟中毒与病区内外环境中化学元素关系分析[J]. 中国公共卫生,2002,18(4)：433-434.
[92]刘珊,吴天秀,廖进民.氟化钠对大鼠血清微量元素的影响[J].广东微量元素科学,2009,16(3)：22-25.
[93]莫志亚,郭英杰,李晓惠.氟中毒人群及大鼠体内微量元素测定分析[J].中国地方病防治杂志,2006,21(1)：44-45.
[94]陈应康,田培燕,叶劲松.燃煤型氟骨症患者血清钙、磷及碱性磷酸酶的变化[J].河北北方学院学报,2008,25(4)：27-28.
[95]韩培,刘洪武,张志兴.氟中毒大鼠血清碱性磷酸酶活性及钙、磷水平的动态变化[J].中国地方病防治杂志,1995,10(3)：130-132.
[96]宋世震,龚太平.氟对大鼠血清微量元素含量的影响及“抗氟灵”干预作用的研究[J].微量元素与健康研究,1998,15(1)：13-14.
[97]黄志军,罗晓芳,王翠,等.过量氟对电解铝工人血清微量元素及钙调节激素的关系[J].河南医学研究,2000,9(3)：278-279.
[98]王守英,席景砖,李福成.血清化学元素与地方性氟中毒的关系[J].新乡医学院学报.22(3)：198-199.
[99]李建国,王平.氟病区老年性白内障患者血清及晶体中微量元素分析[J].中国地方病防治杂志.1996,11(3)：158-159.
[100]杨克敌,王桂珍,王爱国,等.氟硒联合作用对大鼠体内铜、锌、铁影响的研究[J].环境与健康杂志,1996,13(2)：52-55.
[101]高嵩,郝兵,黄长青.过量氟化物所致机体血液生物化学变化[J].中国地方病杂志,2005,20(6)：346-348.
[102]阿斯木古丽·克力木,刘开泰,连军,等.维生素C、E对氟中毒大鼠尿氟排泄的影响[J].新疆医科大学学报,2007,30(4)：352-353.
[103]曹晖,郭雄,许鹏,等.过量氟对大鼠不同组织铜、锌、铁、锰、硒水平的影响[J],中国地方病学杂志,2003,22(4)：315-317.
[104]张文岚,赵虹,薛立娟,等.过量摄氟后大鼠肾细胞内钙水平与氧化应激损伤研究[J].中国地方病学杂志,2004,23(1)：25-27.
[105]马丽英,刘开泰,肖碧玉.氟化钠对大鼠肝、肾无机元素影响的动态观察[J].现代预防医学,1996,23(4)：208-209.
[106]刘开泰,肖碧玉,姜平.氟砷联合作用对大鼠肾脏9种无机元素含量的影响[J].中国地方病防治杂志,1994,9(5)：263-264.
[107]Singh M. Biochemical and Cytochemical alterations in liver and kidney following experimental fluorosis[J]. Fluoride,1984,17(2):81.
[108]刘晓松,李京玉.氟与铜、铁、镁元素在动物机体内相关性的研究[J].内蒙古兽医,1995,1：2-4.
[109]高勤,王守立,于燕妮.自由基在慢性氟中毒大鼠肾脏损伤中的作用[J].中国地方病学杂志,2001,20(2)：94-97.
[110]梁刚,孙贵范,李影奕.氟对大鼠脂质过氧化和抗氧化能力的影响[J].中国地方病学杂志,2001,20(2)：109-110.
[111]陈杨,于燕妮,吕学霞.氧化应激在燃煤污染型氟中毒大鼠中的作用[J].中国实用医药,2008,3(4)：1-3.
[112]边建朝,赵力军,等.氟中毒大鼠肝肾自由基代谢及硒对其影响[J].生物化学与生物物理进展,1997,24(6)：561-563.
[2]李勇,孙棉铃,吴德生,等.应用全胚胎培养技术研究氟的发育毒性[J].环境与健康杂志,1995,12(6)：250-252.
[3]陈杨,于燕妮.氧自由基与氟中毒[J].中国地方病学杂志,2009,28(2)：234-236.
[4]何爱娥.氟的生理作用及安全用氟[J].临床口腔医学杂志,2007,8(23)：497-498.
[5]姚明勤.微量元素氟的营养价值和危害[J].中国食物与营养,1997,4：26-27.
[6]官志忠,于燕妮,张华,等.地方性氟中毒流行因素、病理损害及防治措施研究[J].医学研究杂志,2007,36(4)：62-63.
[7]郄文娟,黄鸿雁,李素娟,等.两种必需微量元素的生物功能[J].微量元素与健康研究,2001,18(3)：77.
[8]何凤生.中华职业医学[M].北京：人民卫生出版社,1979.382-388.
[9]张继剀,毛淑贤.人体必需微量元素与人类健康[J].甘肃科技,2005,21(3)：183-184.
[10]Bartlett JD, Dwyer SE, Beniash E, et al. Fluorosis:a new model and new insights[J]. J DentRes,2005,84(9):832.
[11]曾昭华,曾雪萍.氟、氯、溴、碘等卤族元素与人体健康的关系[J].湖南地质,2002,21(3)：221-224.
[12]徐辉,井玲,李广生.过量氟对肾细胞内游离钙及钙泵的影响[J].中国地方病学杂志,2006,25(4)：379-381.
[13]陶新,许梓荣,汪以真.氟中毒对动物健康影响的研究进展[J].中国畜牧杂志,2006,42(3)：61-63.
[14]谭郁彬.氟对机体代谢及各系统的影响[J].中国地方病防治杂志,1994,9(3)：163-165.
[15]张维东,张勇,刘国艳,等.氟对大鼠甲状腺超微结构的影响[J].中国地方病学杂志,2008,27(6)：622-624.
[16]王成学,马洪顺,陈塑寰.氟中毒对骨密度影响实验研究[J]. 中国地方病防治杂志,2005,20(6)：339-340.
[17]马晓英,朱静媛,等.高氟区儿童血清骨钙素与降钙素含量测定[J].中国学校卫生,2007,28(3)：244-245.
[18]于燕妮,刘家骝,王守立. 慢性氟中毒大鼠骨骼自由基含量及病理形态学研究[J].中国地方病学杂志,2000,19(5)：337-339.
[19]刘晓秋,张秀云,李广生.自由基与氧化应激在氟中毒骨病变发生中的作用[J].中国地方病防治杂志,2001,16(1)：4-6.
[20]高晨光,张爱君.氟对运动系统的毒性作用[J].中国地方病防治杂志,2007,22(3)：195-196.
[21]何瑞波,杜华杰,杨亚奇.氟中毒大鼠睾丸细胞DNA和RNA变化的荧光组织化学研究[J].武警医学院学报,2001,10(3)：186-187.
[22]甄炯,陈荣安,王慧娟.慢性氟中毒大鼠睾丸超微结构观察[J].职业医学,1994,21(4)：11-12.
[23]江琴,朱静媛,姜春霞.氟对大鼠睾丸生殖细胞增殖细胞核抗原表达的影响[J].中国地方病学杂志,2005,24(5)：520-522.
[24]张本忠,高小玲,吴德生.氟致大鼠胚胎发育毒性及其机理的体外实验研究[J].卫生研究,2002,31(6)：420-422.
[25]程晓天,王三祥,高建国.氟中毒大鼠脑组织MBP、NSE、氟含量及CHE活性分析[J].中国地方病学杂志,2002,21(5)：357-358.
[26]高建国,王三祥,程晓天.氟对大鼠脑髓鞘碱性蛋白及髓鞘磷脂质损伤的研究[J].中国地方病学杂志,2003,22(1)：28-30.
[27]邵千里,王亚南,李良文.慢性氟中毒患者认知功能缺损的初步研究[J].中国地方病学杂志,2003,22(4)：336-338.
[28]袁淑德,宋可钦,吕优英.实验性慢性氟中毒鼠脑5-羟色胺含量和更新率变化的分区性研究[J].中国地方病防治杂志,1993,8(2)：145.
[29]陈学军,薛占瑞,王玉清.慢性氟中毒大鼠中缝大核5-羟色胺神经元免疫细胞化学研究[J].锦州医学院学报,2003,24(1)：13-15.
[30]张海谋.氟对免疫分子影响的研究进展[J].工业卫生与职业病,1998,24(1)：43-46.
[31]韩博,史言,卢广忠.氟对动物免疫功能的影响[J].饲料博览,1999,11(1)：19-20.
[32]陈骏汇,宋世震,徐增光.氟致大鼠免疫系统的损伤及其机制探讨[J].职业医学,1997,24(2)：16-17.
[33]叶榕,管继如,张国军.有机氟作业工人免疫功能及脂质过氧化水平的观察[J].中国工业医学杂志2000,13(1)：11-12.
[34]李克俊,黄志军,杨岩.职业性氟接触者的血清免疫球蛋白和几种酶活性改变及抗氟灵干预效果分析[J].中国职业医学,2000,27(2)：28-30.
[35]Chlubek D. Fluoride and oxidative stress[J]. Fluoride,2003,36(4):217-228.
[36]徐辉,常明,李广生,等.氟中毒大鼠骨、肾组织自由基水平的变化[J].中国地方病防治杂志,2004,19(4)：193-195.
[37]Hanen B, Francoise C, Tahia B, et al. Oxidative stress induced by fluoride in adult mice and their suckling pups[J]. Exp Toxicol Pathol,2007,58(5):339-349.
[38]张静敏,王春艳,李新,等.氟中毒大鼠肾组织抗氧化酶基因水平的变化[J].中国地方病防治杂志,2009,24(2)：88-90.
[39]李健学,全笑江,吴云鹏.氟对大鼠肝、肾、脑细胞活性氧代谢的影响[J].地方病通报,1995,10(2)：10-12.
[40]宋沈超,魏赞道.铝在氟中毒病因中的地位实验研究[J].贵阳医学院学报,1991,163：217-225.
[41]Saralakumari D, Rao PR. Erythrocyte glutathione metabolism in human chronic fluoride toxicity[J]. Biochem Int,1991,232:349-57.
[42]买买提艾力·斯迪克,沙娜瓦尔·塔希.微量元素铜的分布与营养生理作用[J].新疆畜牧业,2009,(3)：45.
[43]袁施彬,何平,陈代明.微量元素铜的营养生理功能和促进生长机制[J].饲料工业,2004,25(7)：23-25.
[44]傅可为,刘晓雁,汤瑞琦,等.氟对鸡胚肢软骨细胞毒作用及铜对其拮抗效应的研究[J].中国地方病防治杂志,1995,10(2)：84-85.
[45]刘青松.锌的生理功能与临床疾病的关系[J].职业与健康,2006,22(21)：1836-1837.
[46]孟晋宏,梁哲,鞠躬.锌对人体生理功能的影响及作用机制[J].微量元素与 健康研究,1997,14(3)：54-56.
[47]曹谨玲,陈剑杰.微量元素锌的生理功能及其应用研究[J].家畜生态,2003,24(4)：62-65.
[48]张爱君,朱岱,都春华.微量元素与地方性氟中毒[J].中国地方病防治杂志,1999,14(5)：281-284.
[49]白雪涛,包克光.锌锰钼对大鼠小肠吸收的影响[J].中国地方病学杂志,1996,15(4)：205.
[50]陈国广,陈振华,李学明,等.钙锌的生理作用及其体内吸收的相互影响[J].中国食物与营养.2006,(3)：61-61.
[51]顾清.钙的生理功能及代谢的研究进展[J].中国食品卫生杂志,2002,14(6)：29-33.
[52]王雄清,陈封政.人体钙的生理作用与合理补钙[J].锦阳师范学院学报,2004,23(5)：62-65.
[53]葛相金,姜玉亭,唐国华,等.高密市饮水型氟中毒地区中老年人骨关节炎患病情况调查[J].预防医学论坛2006,12(1)：57-58.
[54]李万里,王萍,王守英.钙与鸡冠花提取物对氟中毒大鼠骨代谢的影响[J].新乡医学院学报,1999,16(4)：289-291.
[55]吴坤.营养与食品卫生[M].北京：人民卫生出版社2004.41-45.
[56]倪凤伟,谢立群,黄长青.饮水型地方性氟中毒病区儿童发中微量元素测定[J].中华医学研究杂志,2005,5(12)：1312-1313.
[57]朱绯,李术,周良生,等.氟中毒致贫血的研究进展[J].东北农业大学学报,2009,40(1)：134-137.
[58]李淑华.镁缺乏对人体健康的危害[J].中国校医,2000,6(14)：232.
[59]许丽萍,周金苟.老年人血清镁缺乏现象的观察[J].苏州大学学报(医学版),2002,22(3)：248.
[60]陈继英.硒、镁、铜-人体不可缺少的微量元素[J].药膳食疗研究,1999,2：21.
[61]白云,刘风贞.镁与氟相互作用的研究近况[J].环境与健康杂志,2001,18(1)：56-58.
[62]方冬虹,李延兵.氧化应激与糖尿病肾病[J].药品评价,2010,1：12-15.
[63]梁刚,于露洋,李富君,等.砷对小鼠脂质过氧化和抗氧化能力的影响[J]. 中国公共卫生杂志,1999,15(1)：26-27.
[64]冯国基,王福忠.血液过氧化氢酶测定及临床应用[J].国外医学临床生物化学与检验分册,1994,17(4)：167-168.
[65]李省,陈悦,许启泰,等.自由基与氟中毒对RNA代谢影响[J].中国公共卫生,2007,23(1)：113.
[66]刘红,冯桂英,刘立志.饮水氟浓度不同地区中小学生血清LPO的检测[J].哈尔滨医科大学学报,1999,(2)：119.
[67]张秀云,徐辉,李广生.氟化钠对血管平滑肌细胞氧化应激水平的影响[J].中国地方病防治杂志,2003,18(4)：199-201.
[68]刘连,徐园园,许洁.氟对大鼠自由基、氧化应激及超微结构影响[J].中国公共卫生,2009,25(9)：1114-1116.
[69]李健学,全笑江,宋世震,等.氟与硒对离体大鼠肝酶和氧自由基代谢的影响[J].卫生研究,1995,24(3)：148-151.
[70]郭晓英,陈爱莉.氟对大鼠肝脏氧化应激及超微结构的影响[J].中国医科大学学报,2005,(4)：321-322.
[71]李卫华,范奇元,申立军,等.环境内分泌干扰物2-溴丙烷对大鼠睾丸毒性的研究[J].生殖与避孕,2001,21(3)：157-161.
[72]杨建明,蒋学之,刘洪,等.铅的肾脏毒性与细胞凋亡的关系[J].广东微量元素科学,1998,5(4)：39-42.
[73]吴起清,钟近洁,白生宾.饮水型大鼠氟中毒动物模型的建立[J].中国高等医学教育,2009,(3)：120-121.
[74]曹进,赵燕,刘箭卫.砖茶型氟中毒的动物模型[J].中国地方病学杂志,1998,17(5)：287-290.
[75]陈树君,孙玉敏,孟羽俊.慢性氟中毒对雄性大鼠肝脏的损伤及其抗氧化能力的影响[J].环境与健康杂志,2008,25(8)：714-715.
[76]陈贤,赵红刚.盐制杜仲对小鼠生长发育与脏器系数的影响[J].四川中医,2005,23(11)：29-31.
[77]薛诚,陈学,杨克敌.硒锌对氟致肾脏损伤的拮抗作用研究[J].卫生研究,2000,29(1)：21-23.
[78]邹万忠.肾脏疾病的病理变化及肾脏的基本结构和功能[J].继续医学教育, 2006,20(27)：32-35.
[79]王丽华,孙殿军,石玉霞,等.饮茶型氟中毒动物模型建立及组织病理学观察[J].中国地方病学杂志,2003,22(1)：22-24.
[80]杨克敌,王爱国,王桂珍.硒对氟所致肾脏病理和超微结构改变的影响[J].中国公共卫生学报,1996,15(3)：156-157.
[81]张福军,康龙丽,于琳华.摄入过量氟实验大鼠肾脏形态损害与体内氟含量及血清MDA的关系[J].西安医科大学学报,2000,21(6)：515-517.
[82]丁振若,于文彬,苏明权,郝晓柯.现代检验医学[M].北京：人民军医出版社,2007.487-490.
[83]阳世光,袁爱武,郭锡素.不同浓度的安氟醚对肝肾功能的影响[J].实用临床医学,2005,6(4)：47-49.
[84]鲁家才,库宝庆,莫扬.四项生化指标在肾功能损伤中的意义和临床评价[J].国际检验医学杂志,2006,27(9)：841—842.
[85]农嵩,张树球,李朝敢.接氟工人血和尿液指标的检测分析[J].中国工业职业医学杂志,2003,16(1)：43-44.
[86]李光晨,张文博,中曜明.氟中毒家兔肾脏功能与细胞周期的变化[J].中国实验诊断学,2007,11(12)：1591-1592.
[87]颜世铭.微量元素的吸收[J].广东微量元素科学,2008,15(10)：70.
[88]徐增光,陈荣安,章孟本.“拮氟锐”抗氟毒性的研究.中国地方病防治杂志,1994,9(3)：136.
[89]陈荣安,李健学,张裕曾.电解铝作业对工人健康的影响及硼砂饮料保健作用的研究.职业医学,1993,20(2)：66.
[90]何生虎,等.高氟对绵羊铜吸收影响的研究[J].宁夏农学院学报,1998,19(2)：15-17.
[91]陈培忠,云中杰,李涛,等.地方性氟中毒与病区内外环境中化学元素关系分析[J]. 中国公共卫生,2002,18(4)：433-434.
[92]刘珊,吴天秀,廖进民.氟化钠对大鼠血清微量元素的影响[J].广东微量元素科学,2009,16(3)：22-25.
[93]莫志亚,郭英杰,李晓惠.氟中毒人群及大鼠体内微量元素测定分析[J].中国地方病防治杂志,2006,21(1)：44-45.
[94]陈应康,田培燕,叶劲松.燃煤型氟骨症患者血清钙、磷及碱性磷酸酶的变化[J].河北北方学院学报,2008,25(4)：27-28.
[95]韩培,刘洪武,张志兴.氟中毒大鼠血清碱性磷酸酶活性及钙、磷水平的动态变化[J].中国地方病防治杂志,1995,10(3)：130-132.
[96]宋世震,龚太平.氟对大鼠血清微量元素含量的影响及“抗氟灵”干预作用的研究[J].微量元素与健康研究,1998,15(1)：13-14.
[97]黄志军,罗晓芳,王翠,等.过量氟对电解铝工人血清微量元素及钙调节激素的关系[J].河南医学研究,2000,9(3)：278-279.
[98]王守英,席景砖,李福成.血清化学元素与地方性氟中毒的关系[J].新乡医学院学报.22(3)：198-199.
[99]李建国,王平.氟病区老年性白内障患者血清及晶体中微量元素分析[J].中国地方病防治杂志.1996,11(3)：158-159.
[100]杨克敌,王桂珍,王爱国,等.氟硒联合作用对大鼠体内铜、锌、铁影响的研究[J].环境与健康杂志,1996,13(2)：52-55.
[101]高嵩,郝兵,黄长青.过量氟化物所致机体血液生物化学变化[J].中国地方病杂志,2005,20(6)：346-348.
[102]阿斯木古丽·克力木,刘开泰,连军,等.维生素C、E对氟中毒大鼠尿氟排泄的影响[J].新疆医科大学学报,2007,30(4)：352-353.
[103]曹晖,郭雄,许鹏,等.过量氟对大鼠不同组织铜、锌、铁、锰、硒水平的影响[J],中国地方病学杂志,2003,22(4)：315-317.
[104]张文岚,赵虹,薛立娟,等.过量摄氟后大鼠肾细胞内钙水平与氧化应激损伤研究[J].中国地方病学杂志,2004,23(1)：25-27.
[105]马丽英,刘开泰,肖碧玉.氟化钠对大鼠肝、肾无机元素影响的动态观察[J].现代预防医学,1996,23(4)：208-209.
[106]刘开泰,肖碧玉,姜平.氟砷联合作用对大鼠肾脏9种无机元素含量的影响[J].中国地方病防治杂志,1994,9(5)：263-264.
[107]Singh M. Biochemical and Cytochemical alterations in liver and kidney following experimental fluorosis[J]. Fluoride,1984,17(2):81.
[108]刘晓松,李京玉.氟与铜、铁、镁元素在动物机体内相关性的研究[J].内蒙古兽医,1995,1：2-4.
[109]高勤,王守立,于燕妮.自由基在慢性氟中毒大鼠肾脏损伤中的作用[J].中国地方病学杂志,2001,20(2)：94-97.
[110]梁刚,孙贵范,李影奕.氟对大鼠脂质过氧化和抗氧化能力的影响[J].中国地方病学杂志,2001,20(2)：109-110.
[111]陈杨,于燕妮,吕学霞.氧化应激在燃煤污染型氟中毒大鼠中的作用[J].中国实用医药,2008,3(4)：1-3.
[112]边建朝,赵力军,等.氟中毒大鼠肝肾自由基代谢及硒对其影响[J].生物化学与生物物理进展,1997,24(6)：561-563.