特殊生境中产细菌素乳杆菌的分离、鉴定及益生特性分析
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摘要
本论文目的在于从健康女性阴道中分离并鉴定产生细菌素、产酸能力强的优势乳杆菌,并对其益生特性作初步研究。分离得到得19 株乳杆菌通过菌落、菌株形态观察以及多项生理生化等常规鉴定,并且通过16S rRNA 基因序列测序鉴定,确定这19 株乳杆菌分属于乳杆菌属(Lactobacillus)内专性同型发酵类型中三个不同的种。其中1-1、1-2、1-3、1-7、51-1、51-4、52-1-1、52-1-2、52-3 共9 株为格氏乳杆菌( Lactobacillus gasseri ), 23-2-1 为唾液乳杆菌 (Lactobacillus.salivarius),23-2-2、23-4、23-5、23-8、32-3、46-1、46-2、46-3、50-3 共9 株为卷曲乳杆菌(Lactobacillus.crispatus)。
这19 株乳杆菌发酵过程中都产生细菌素,除了32-3,51-1,51-4 这3 株菌外,都产生过氧化氢。其36h 发酵液的pH 值都在4 左右。对革兰氏阳性指示菌有强烈的抑制作用,对革兰氏阴性菌以及白色念珠菌均有一定的抑制作用。在杆菌与乳酸球菌以及杆菌之间的拮抗作用实验中,杆菌对同一生境下的乳酸球菌几乎没有抑制作用,杆菌之间,除菌株46-2 对其他的杆菌有抑制作用外,其他的杆菌之间没有抑制作用。
因此这些从人体中分离出来的乳杆菌优势菌群,具有多种维持特殊生境健康的因素,这些作用协同放大,在微环境中会具有强烈的抑制病原菌的功能。本论文所研究的乳杆菌均来源于人体,如应用于人体作为微生态制剂则会具有强大的优势,符合当前女性特殊生境保健的“人性化”潮流。
This research’s order is to isolate lactic acid bacteria that can produce bactericin and lactic acid during fermention from the vagina of 60 healthy women. The 19 strains of bacilliform bacteria were identified by biochemical tests, part of their 16S ribosomal DNA were amplified, sequenced, and phylogenetically placed. The results showed that the lactic acid bacteria were belongs to those special homotype fermention types of Lactobacillus.9 strains belong to Lactobacillus gasseri, one does Lactobacillus.salivarius and the other 9strains do Lactobacillus.crispatus.
They could produce lactic acid , bactericin ,and H2O2 except 3 of them,remaining the acid circumstances and inhibit the growing of the other pathogentic bacteria, such as Staphylococcus aureus, Escherichia.coli etc. They could not inhibit the spherical bacteria that are isolated from the same circumstance and themselves except one strain 46-2.
So these Lactobacillus strains that are isolated from the bodies have several effective actions to keep the vaginal healthy balance. We should use these Lactobacillus strains to make thep robiotics, according to the humanity current of the vaginal health protection.
这19 株乳杆菌发酵过程中都产生细菌素,除了32-3,51-1,51-4 这3 株菌外,都产生过氧化氢。其36h 发酵液的pH 值都在4 左右。对革兰氏阳性指示菌有强烈的抑制作用,对革兰氏阴性菌以及白色念珠菌均有一定的抑制作用。在杆菌与乳酸球菌以及杆菌之间的拮抗作用实验中,杆菌对同一生境下的乳酸球菌几乎没有抑制作用,杆菌之间,除菌株46-2 对其他的杆菌有抑制作用外,其他的杆菌之间没有抑制作用。
因此这些从人体中分离出来的乳杆菌优势菌群,具有多种维持特殊生境健康的因素,这些作用协同放大,在微环境中会具有强烈的抑制病原菌的功能。本论文所研究的乳杆菌均来源于人体,如应用于人体作为微生态制剂则会具有强大的优势,符合当前女性特殊生境保健的“人性化”潮流。
This research’s order is to isolate lactic acid bacteria that can produce bactericin and lactic acid during fermention from the vagina of 60 healthy women. The 19 strains of bacilliform bacteria were identified by biochemical tests, part of their 16S ribosomal DNA were amplified, sequenced, and phylogenetically placed. The results showed that the lactic acid bacteria were belongs to those special homotype fermention types of Lactobacillus.9 strains belong to Lactobacillus gasseri, one does Lactobacillus.salivarius and the other 9strains do Lactobacillus.crispatus.
They could produce lactic acid , bactericin ,and H2O2 except 3 of them,remaining the acid circumstances and inhibit the growing of the other pathogentic bacteria, such as Staphylococcus aureus, Escherichia.coli etc. They could not inhibit the spherical bacteria that are isolated from the same circumstance and themselves except one strain 46-2.
So these Lactobacillus strains that are isolated from the bodies have several effective actions to keep the vaginal healthy balance. We should use these Lactobacillus strains to make thep robiotics, according to the humanity current of the vaginal health protection.
引文
[1] 凌代文 东秀珠等乳酸细菌分类鉴定及实验方法中国轻工业出版社1999年第一版4-82,117-128
[2] 杨洁彬郭兴华等乳酸菌——生物学基础及应用中国轻工业出版社1996年139-167,187-202
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[5] 东秀珠蔡妙英常见细菌系统鉴定手册科学出版社2001 年2 月第一版
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[7] 郭本恒 有益乳酸菌的研究趋势与动态 中国乳业 2001 年 6 月
[8] 徐进 冉陆 罗雪云 乳酸菌细菌素的生物合成与应用 卫生研究 2002 年31卷,第3 期
[9] 香卫钦 于舒宁 张耀林 一株能降解胆固醇的乳酸菌的选育 生物技术2001 年第11 卷 第5 期
[10] 蒋永福 张昆 黎碧娜 天然防腐剂——乳酸链球菌素的研究进展 精细化工 2002 年第19 卷 第8 期
[11] 孔健郝运伟马桂荣一株乳酸菌产类细菌素Enteriocin LK-S1 的初步研究山东大学学报(理学版)2002 年5 月
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[25] 王树坤李万林邢凤有细菌性阴道病的病因及其诊断中国微生态学杂志2002 年第14 卷6 期
[26] 王立生、潘令嘉周殿元阴道微生态及其微生态疗法的研究进展中国微生态学杂志1998 年10 月第10 卷5 期
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[62]郑飞云金建中顾国贤啤酒污染乳酸菌PCR 引物的设计酿酒2002 年第29 卷第2 期
[63]张丽苹徐岩顾国贤聚合酶链式反应(PCR)技术鉴定啤酒腐败菌的最新进展食品与发酵工业2001 年27 卷第5 期
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