蝴蝶兰组培快繁技术及褐变控制研究
|
摘要
本研究以健康成株的蝴蝶兰花梗腋芽为外植体,采用单因素、二因素完全随机试验设计获得蝴蝶兰无菌苗,筛选出丛生芽途径进行快繁的各阶段的最适培养基;以无菌苗的叶片为外植体采用单因素、二因素完全随机试验设计诱导出类原球茎,进一步分化成无菌苗,筛选出叶片诱导类原球茎进行快繁的各阶段的最适培养基,并且对叶片褐变控制进行研究。研究结果如下:
1、蝴蝶兰诱导丛生芽快繁途径各阶段最适培养基
(1)中部腋芽为最佳部位,萌芽率为43.33%。
(2)花梗腋芽诱导丛生芽最适培养基为1/2MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L+椰乳10%,诱导率达80%,褐变率低。
(3)丛生芽的继代增殖培养基仍沿用诱导培养基,增殖系数为2.89,丛生芽颜色翠绿,生长健壮。
(4)无菌苗生根壮苗最适培养基为1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,生根率100%,平均生根数4.18条,平均叶片数5.23片。
2、叶片诱导类原球茎快繁途径各阶段最适培养基
(1)叶片诱导类原球茎最适培养基为VW+6-BA5.0mg/L+椰乳10%,诱导率为54.44%。诱导的类原球茎个大、饱满,生长健壮,有利于增殖。
(2)类原球茎增殖培养基为1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+香蕉汁200g/L,增殖系数为3.41。增殖速度快,类原球茎颜色翠绿,表面湿润,排列疏松。
(3)类原球茎分化培养基为1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.4mg/L+香蕉汁200g/L,分化整齐一致,移栽成活率高。
(4)其它因素对增殖的影响:液体培养、薄层切割、10个类原球茎切块均有助于增殖。
3、对蝴蝶兰的褐变控制进行研究,结果如下:
(1)对叶片进行10d黑暗预处理,褐变率降至为48.60%。
(2)添加不同种类和浓度的抗褐变剂,均可降低褐变率,以添加2g/LAC效果最好,褐变率降至35.80%,且不影响类原球茎的诱导。
(3)对培养材料进行热激处理1h,褐变率降至45.17%,培养材料长势良好。
In this study,Phalaenopsis culturing-plants induced by peduncle buds as explants from healthy and adulting plants were get in single and double factors’randomized absolutely experiment designs,the best culture mediums in different stages were selected; PLB were induced by young leaves from culturing-plants in single and double factors’randomized absolutely experiment designs and had grown into culturing-plants and best culture mediums in different stages were selected.The research which was on the leaves’control- browning were taken.The main results were as follows:
1、The better culture mediums of inducing tufty buds in different stages are:
(1)The buds which is in the middle are the best explants,germination rate is 43.33%。
(2)The best culture medium which induces tufty buds is1/2MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L+ CM10%,the inducing rate is 80%,the browning rate is lower。
(3)The best culture medium which proliferates tufty buds is the same as the inducing one,the proliferation is 2.89,the tufty buds are healty and green。
(4)The best culture medium which is rooting and sronging is 1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5 mg/L,the rooting rate is 100%,the averaging roots are 4.81 and the averaging leaves are 5.23。
2、The best culture mediums of inducing PLB from leaves in different stages
(1)The best culture medium which induces PLB is VW+6-BA5.0mg/L+CM10%,the inducing rate is 54.44%。PLB are big、full、healthy and propitious to proliferate。
(2)The best culture medium which proliferates PLB is 1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+ Banana Juice200g/L,proliferation is 3.41.PLB proliferated rapidly and arranged lossenly,PLB’s colour is green and surfaces are wet。
(3)The best culture medium which differents PLB is 1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.4mg/L+ Banana Juice200g/L,the PLBS different trimly,rate of survival is improved.
(4)The effects of other factors on proliferation:The liquid-culturing、incising in lamella、block in 10 PLBs are propitious to proliferation。
3、The results of control-browning are as follows:
(1)The darking pretreatment as long as 10 days can reduce browning rate to 48.60%。
(2)Different kinds and concentration of Resist-brownings can reduce browning rate, 2g/LAC is the best one,browning rate is 35.80% and there is no bad influence to inducing PLB。
(3)The heating pretreatment as long as 1 hour can reduce browning rate to 45.17%,the culturing materials are all right。
1、蝴蝶兰诱导丛生芽快繁途径各阶段最适培养基
(1)中部腋芽为最佳部位,萌芽率为43.33%。
(2)花梗腋芽诱导丛生芽最适培养基为1/2MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L+椰乳10%,诱导率达80%,褐变率低。
(3)丛生芽的继代增殖培养基仍沿用诱导培养基,增殖系数为2.89,丛生芽颜色翠绿,生长健壮。
(4)无菌苗生根壮苗最适培养基为1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,生根率100%,平均生根数4.18条,平均叶片数5.23片。
2、叶片诱导类原球茎快繁途径各阶段最适培养基
(1)叶片诱导类原球茎最适培养基为VW+6-BA5.0mg/L+椰乳10%,诱导率为54.44%。诱导的类原球茎个大、饱满,生长健壮,有利于增殖。
(2)类原球茎增殖培养基为1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+香蕉汁200g/L,增殖系数为3.41。增殖速度快,类原球茎颜色翠绿,表面湿润,排列疏松。
(3)类原球茎分化培养基为1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.4mg/L+香蕉汁200g/L,分化整齐一致,移栽成活率高。
(4)其它因素对增殖的影响:液体培养、薄层切割、10个类原球茎切块均有助于增殖。
3、对蝴蝶兰的褐变控制进行研究,结果如下:
(1)对叶片进行10d黑暗预处理,褐变率降至为48.60%。
(2)添加不同种类和浓度的抗褐变剂,均可降低褐变率,以添加2g/LAC效果最好,褐变率降至35.80%,且不影响类原球茎的诱导。
(3)对培养材料进行热激处理1h,褐变率降至45.17%,培养材料长势良好。
In this study,Phalaenopsis culturing-plants induced by peduncle buds as explants from healthy and adulting plants were get in single and double factors’randomized absolutely experiment designs,the best culture mediums in different stages were selected; PLB were induced by young leaves from culturing-plants in single and double factors’randomized absolutely experiment designs and had grown into culturing-plants and best culture mediums in different stages were selected.The research which was on the leaves’control- browning were taken.The main results were as follows:
1、The better culture mediums of inducing tufty buds in different stages are:
(1)The buds which is in the middle are the best explants,germination rate is 43.33%。
(2)The best culture medium which induces tufty buds is1/2MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L+ CM10%,the inducing rate is 80%,the browning rate is lower。
(3)The best culture medium which proliferates tufty buds is the same as the inducing one,the proliferation is 2.89,the tufty buds are healty and green。
(4)The best culture medium which is rooting and sronging is 1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5 mg/L,the rooting rate is 100%,the averaging roots are 4.81 and the averaging leaves are 5.23。
2、The best culture mediums of inducing PLB from leaves in different stages
(1)The best culture medium which induces PLB is VW+6-BA5.0mg/L+CM10%,the inducing rate is 54.44%。PLB are big、full、healthy and propitious to proliferate。
(2)The best culture medium which proliferates PLB is 1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+ Banana Juice200g/L,proliferation is 3.41.PLB proliferated rapidly and arranged lossenly,PLB’s colour is green and surfaces are wet。
(3)The best culture medium which differents PLB is 1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.4mg/L+ Banana Juice200g/L,the PLBS different trimly,rate of survival is improved.
(4)The effects of other factors on proliferation:The liquid-culturing、incising in lamella、block in 10 PLBs are propitious to proliferation。
3、The results of control-browning are as follows:
(1)The darking pretreatment as long as 10 days can reduce browning rate to 48.60%。
(2)Different kinds and concentration of Resist-brownings can reduce browning rate, 2g/LAC is the best one,browning rate is 35.80% and there is no bad influence to inducing PLB。
(3)The heating pretreatment as long as 1 hour can reduce browning rate to 45.17%,the culturing materials are all right。
引文
[1] 胡松华.热带兰花[M].2002,3(1):中国林业出版社:45
[2] 胡松华.蝴蝶兰品种栽培鉴赏[M].广州:广东科技出版社,1996
[3] 黄胜琴,郭建军,叶庆生,等.温度对蝴蝶兰成花诱导的研究初探[J].中山大学学报(自然科学版),2003,42(4):132～134
[4] 谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社,1991,247～253
[5] 尹广远,牛三义,储博彦,等.蝴蝶兰的栽培管理技术[J].河北林业科技,2006,4:60～61
[6] 曾爱平,林绍生,陈义增,等.蝴蝶兰栽培关键技术[J].中国热带农业,2006,5:58～59
[7] 陈卫民,王建宇,胡海英.北方地区蝴蝶兰栽培技术[J].北方园艺,2004(4):38～39
[8] 陈宇勒.洋兰欣赏与栽培图说[M].北京:金盾出版社,2004,140～144
[9] 卢思聪.兰花栽培入门[M].北京:金盾出版社,1990,9
[10] 蔡平里.图解兰花繁殖最新技术[M].台湾:淑馨出版社.1996,28
[11] 傅连芳.蝶兰的快速繁殖[J].热带作物研究,1990(2):24
[12] 曹孜义,刘国民.实用植物组织培养技术教程[M].甘肃科学技术出版社,1996:1～2
[13] 朱至清.植物细胞工程[M].化学工业出版社,2003,50
[14] 颜昌敬.植物组织培养手册[M].上海:上海科学出版社,1990,47
[15] 刘青林,马祎,郑玉梅.花卉组织培养[M].北京:中国农业出版社,2003 年 1 月:1～2
[16] Haberlandt,G.Kulturversuche,Mit Isolierten.Pflanzenzellen[J].Sitzungsber Math-Naturwiss Klasse Kais Akad Wiss Wiss Wien.,1902,111:69～92
[17] Steward F.C,Mapes M.O,Mears K.Growth And Organized Development Of Cultured Cells II Organization[J].In Cultures Grown From Freely Suspended Cells.American Journal of Botany,1958,45:705～708
[18] 熊丽,吴丽芳.观赏花卉的组织培养与大规模生产[M].北京:化学工业出版社,2003,15
[17] Morel.G..Producing virus-free Cymbidiums[J].Am Orchid Soc Bull,1960,29.495～497
[18] Wimber D D.Clonal multiplication of Cymbidium through tissue culture of theshoot meristem[J].Am Orchid Soc Bull,1963,32:105～107
[19] 李浚明.植物组织培养教程[M].中国农业大学出版社,2002,40
[20] 彭立新,王姝,孟广云.蝴蝶兰组织培养快繁研究[J].天津农业科学,1999,(5):27～29
[21] 鲁涤非.花卉学[M].北京:中国农业出版社,1998:298～300
[22] 张树珍,曾宪松,张银东,等.大花蕙兰的组织培养[J].热带作物研究,1995(4):26～28
[23] 王怀宇.蝴蝶兰的快速无性繁殖[J].园艺学报,1989,16(l):73～77
[24] 刘荣维,梅庆超.丛生芽——蝴蝶兰无性快速繁殖的新途径[J].热带作物学报,1993,14(2):105～107
[25] 林金其.蝴蝶兰花梗组织培养研究[J].中国园艺,1985,31(2):84～93
[26] 鲁雪华,郭文杰,徐立晖,等.蝴蝶兰花梗节间段培养繁殖的初步研究[J].园艺学报,2002,29(5):491～492
[27] 刘福林,李淑平.蝴蝶兰花梗的组织培养和植株再生[J].商丘师范学院学报,2001,(6):98～99
[28] 林瑞松.蝴蝶兰组织培养研究[J].中华农业研究,1981,30(2):141～145
[29] 彭立新,王妹.蝴蝶兰组织培养快繁研究[J].天津农业科学,1999,5(2):27～29
[30] 周俊辉,叶超宏,陈旭高.蝴蝶兰原球茎增殖培养的研究[J].仲恺农业技术学院学报,2002,15(3):13～17
[31] 楼建华.温度、光照及栽培基质对蝴蝶兰生长发育的影响[J].浙江农业学报,1995,7(6):464～467
[32] IntuwongO,SagacusY.Clonal propagation of Phalaenopsis by shoot-tip culture[J].Amer Orchid SocBull,1975(93):894～895
[33] Miller.P.N,Anedrson.WC.Invitro bulblet formation indutchiris[J]. Hortiscience,1989,24(6):1028～1031
[34] 曾宋君,彭晓明,张京丽,等.蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖[J].武汉植物学研究,2000,18(4):344～346 [35 彭立新,王姝,孟广云.蝴蝶兰组织培养快繁研究[J].天津农业科学,1999,6:27～29
[36] 张伟,曾伏虎,张苏锋.蝴蝶兰的组织培养与快速繁殖[J].信阳师范学院学报(自然科学版),2004,7:335～337
[37] 张秀清,王志武,刘玉敬,等.蝴蝶兰实生苗不同器官的离体培养[J].植物学通报,1996,13(1):50
[38] 鲁雪华,郭文杰,徐立晖,等.蝴蝶兰花梗节间段培养繁殖的初步研究[J].园艺学报,2002,29(5):491～492
[39] 高汝勇,李会芬,骆冬洁.蝴蝶兰的快速繁殖研究[J].衡水学院学报,2007,9(1):27～29
[40] 马子骏,王鲁彤,卢宇广,等.蝴蝶兰工厂化生产技术研究[J].浙江林学院学报,1998,15(2):192～193
[41] 陈勇,林开县,王君晖.蝴蝶兰的快速繁殖和规模化栽培技术研究[J].浙江大学学报(理学版)2004,1:84～88
[42] 张志国,王黎.铁皮石斛原球茎分化适宜培养基研究[J].中国中药杂志,1993,18(1):18
[43] Ishii Y,Takamura T,Goi M.etal.Callus induction and somatic embryogenesis ofPhalaenopsis[J].Plant Cell Rep, 1998,17:446
[44] 徐晓薇,柴明良,姚丽娟,等.蝴蝶兰类圆球茎增殖和脱分化的研究.浙江农业科学,2006,4:401～403
[45] 宁书祥,张希太.蝴蝶兰的组织培养快速繁殖技术[J].农业科技与信息,2007,7:32～33
[46] Compton ME,Preece JE.Exudation and explant establishment.Intl Assoc[J].Plant Tissue culture Newsl,1986, 50:9～18
[47] 蒋达钜.大花蕙兰组织培养工厂化技术试验与示范推广:[农业推广硕士论文].南京:南京农业大学,2004
[48] 陈银凤,林宏.NAA 和 6-BA 对蝴蝶兰原球茎增殖的影响(简报)[J].亚热带植物科学,2007,36(3):67-68
[49] 王栋,买合木提·克衣木,玉永雄,等.植物组织培养中的褐化现象及其防止措施[J].黑龙江农业科学,2008(1):7～10
[50] 刘真华,葛红,郭绍霞,等.蝴蝶兰组织培养中的褐化控制研究[J].园艺学报,2005,32(4):732～734
[51] 杨美纯.外部因子对蝴蝶兰叶片原球茎状体发生的影响[J].广西植物,2000,20(1):42～46.
[52] Park Myungjoo, Park soonjung. Kim Doohwan. Effect of medium composition on Phalaenopsis micropropagation using lateral buds from flower stalks[J].Korean journal of Horticultural science &Technology, 1998,16(1):42～44
[53] 杨美纯,周岐伟,许鸿源.蝴蝶兰的种子培养[J].广西农业生物科技,2002,21(4):258～260
[54] 王春,俞继英.蝴蝶兰杂交后代的快速繁殖体系研究[J].浙江林业科技,2007,27(2):30～33
[55] 王平,吴海红,赵兴华,等.蝴蝶兰组织培养组成的初步研究[J].沈阳农业大学学报,2004-02,35(1):10～12
[56] 秦凡,周吉源.不同植物生长调节剂对蝴蝶兰快速繁殖的影响[J].武汉植物学研究,2003,21(5):452～456
[57] 林宗铿,黄德贵.蝴蝶兰花梗的组织培养及快繁研究[J].福建热作科技,2001,26(1):6～9
[58] 陈正华.木本植物组织培养及其应用[M].北京:高等教育出版社,1986,456～466
[59] 周俊辉,周家容,曾浩森,等.园艺植物组织培养中的褐化现象及抗褐化研究进展[J].园艺学报,2000,27(增刊):481～486
[60] Loomis WD,Battaile J.Plant phenolic compounds and the isolation of enzymes[J].Phytochem.1966,5:423～438
[61] 丁连忠.抗坏血酸衍生物抑制蘑菇的多酚氧化酶[J].食品科学,1991,67(2):22～25
[62] 王荣钦.外植体部位、激素浓度对卡特兰、蝴蝶兰原球茎形成和增殖的影响[J].福建热作科技,2000,25(1):31～32
[63] 符近.三种不同类型种子休眠、萌发及马占思种子老化过程中的研究:[硕士学位论文].北京:北京农业大学,1996:46
[64] Mulin M.Callus formation form thin cell layers of Anacaedium occidentale L[J].Silva Lusitana,1995,3(2):205～211
[65] Pindel A,Miczvnski K.Regeneration of Cymbidiuan orchids from leaf and root exnlants[J].Floria Horticulture, 1996,8(2):95～105
[66] 仲飞.红星苹果多酚氧化酶某些特征及其抑制剂的研究[J].园艺学报,1998,25(2):184～186
[67] 刘金豹,杜中军,翟衡.葡萄浆果中的主要多酚化合物及影响因素[J].中外葡萄与葡萄酒,2003(2):22～26
[68] 朱红.茶树鲜叶中多酚含量变化的研究[J].四川农业大学学报,1998,16(3):345～348
[69] 曾镭,刘燕.植物组织培养中褐化问题的研究进展[J].安徽农业通报,2007,13(14):49～50
[70] 陈惠娟.植物组织培养中褐变的产生机理及克服措施[J].植物保护,2005,31(2):79～82
[71] 李凤兰,胡国富,胡宝忠.八种不同花色一串红组织培养快繁的研究[J]..生物技术,2005 ,15 (4) :71～73
[72] Loomis WD,Battaile J.Plant phenolic compounds and the isolation of plant enzymes[J].Phyto-chem,1966,5:423～438
[73] 吴晓霞,陈刚,张彪,等.植物组织培养中的褐变的研究进展[J].河北林果研究,2002,(3):284
[74] 罗虹,陈汝民.墨兰的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯,1997,33(6):436～437
[75] 杨增海.园艺植物组织培养[M].北京:农业出版社,1987:64～74
[76] 袁巧平,董茂山,黄钦才.核桃的组织培养[J].植物生理学通讯,1990,(2):43～44
[77] 张林.淡红瑞香的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯,1991,27(6):429～432
[78] 何小玲,王金发.大话飞燕草的组织培养及植株再生[J].植物生理学通讯,1998,34(1):39～40
[79] 李建华.台湾蝴蝶兰产业发展初探与启示[J].台湾农业探索,2001(1):15～18
[80] 陆銮眉,张汉荣.海峡两岸蝴蝶兰产业发展现状与合作前景[J].福建热作科技,2004,29(1):39～41
[81] 杨先芬.工厂化花卉生产[M].北京:中国农业出版社,2002,76
[82] 王家福.花卉组织培养与快繁技术[M].中国林业出版社,2006,5
[83] 马源.蝴蝶兰市场俏销[J].资源开发与市场,2003,19(4):249
[84] 李军,柴向荣,曾宝,等.蝴蝶兰组培工厂化生产技术[J].2004,31(3):413～414
[85] 曹孜义,刘国民.实用植物组织培养技术教程[M].兰州:甘肃科学技术出版社,1996,95～97
[86] 张立全,田松英,张元国,等.蝴蝶兰原球茎的增殖研究[J].北方园艺,2007(3):172～175
[87] 邹金环.蝴蝶兰组培苗移栽成活率研究[J].安徽农业科学,2007,35(14):4131
[88] Bhattarcharjee S,et al.Effect of growth regulating substance on in vitro seed germination of Phalaenopsis Hybrid[J].Indian Agriculturist,1999,43(1/2):79～83
[89] 金波.养兰与赏兰[M].北京:农村读物出版社,2000,24
[90] 刘翠兰,王小芳,李双云,等.蝴蝶兰花梗芽的组织培养[J].山东林业科技,2004,153(4):37
[91] 邵双,关丽杰.蝴蝶兰花梗腋芽诱导的影响因素[J].沈阳化工学院学报,2005,19(2):84～86
[92] 李浚明.植物组织培养[M].中国农业大学出版社,2002:29
[93] 程广有.名优花卉组织培养技术[M]科学技术文献出版社,2003:63
[94] 陈菁瑛,蓝贺胜,陈雄鹰.兰花组织培养与快速繁殖技术[M].中国农业出版社,2004:76
[95] 陈发兴,林顺权,王家福,等.兰花繁育技术的研究进展[J].福建农林大学学报(自然科学版),2002,31(4):476～479
[96] 刘林.诱导蝴蝶兰叶片产生原球茎的研究[J].北方园艺,2003,(6):51
[97] 陈丽,潘瑞炽,陈汝民.墨兰原球茎生长的研究[J].热带亚热带植物学报,1999,7(1):59～64
[98] 张秀清,王志武,王春英,等.蝴蝶兰实生苗原球茎诱导研究[J].莱阳农学院学报,1995,12(1):44～46
[99] 柴向华、李军、朱饱卿,等.金边蝴蝶啊兰的叶片培养[J].热带农业科学,2004,24(3):18～20
[100] 王清连.植物组织培养[M].北京:中国农业出版社,2002
[101] 柯善强.植物细胞的遗传全能性与组织培养形态发生控制[J].武汉植物学研究,1987,5(3):304～311
[102] Steward, F. C,Mapes, M. O,Kent, A,etal.Growth and. development of cultured plant cells.Science,1964,143:20～27
[103] Saunder,J.W.,Bingham,E.T.Cytological observations on genome bhomlogy in eight interspecific hybrids of Phalaenopsis[J].Genetica,1970,12:850～855
[104] Fosket,D.E.Hormonal regulation of growth in cultured plant cells[J].In Vitro Cellular&Developmental Biology-Plant,1978,1:234～240
[105] 崔徵.植物激素与细胞分化及形态发生的关系[J].细胞生物学杂志,1983,5(2):1～5
[106] 朱晋云,杨丽萍,许玉娟,等.大花蕙兰试管苗玻璃化发生原因及防治技术研究[J].山西农业科学,2004,32(3):47～50
[107] 李向英.蝴蝶兰的快速繁殖及栽培管理研究[J].山东农业科学,2000( 4 ):13～14
[108] 罗建平,查学强,姜绍通.药用霍山石斛原球茎的液体悬浮培养[J].中国中药杂志,2003,28(7):611～613
[109] 张治国,刘驿,王黎,等.铁皮石斛原球茎增殖的培养条件研究[J].中草药,1992,23(8):431
[110] 刘敏.花卉组织培养与工厂化生产[M].地质出版社,2002:17～18
[111] 秘彩莉,霍晨敏,冯全义,等.大花蕙兰快速繁殖技术初报[J].河北师范大学学报(自然科学版),2002,26(2):190-192
[112] 陈进勇,程金水,朱滢.中国兰种子试管培养愈伤组织发生的研究[J].北京林业大学学报,1998,20(4):76～79
[113] Nihar Ranjan ,Nayak,Susmita Sahoo,etal.Establishment of thin cross section(TCS)culture method for rapid micro-propagation of Cymbidium aloifolium(L.)Sw.and Dendrobium nobile Lindl.(Orchidaceae) [J].Scientia Horticulturae,2002,94(2):107～116
[114] 顾之中.水稻愈伤组织发生褐化的影响因素研究[J].江西农业大学学报,1992,14:206～211
[115] 宋平,沈丙辉.活性炭培养基对棉花愈伤组织诱导的效果[J].植物生理学通讯,1988(5):47～48
[116] 刘兰英.核桃组培中的褐化及防止措施研究[J].园艺学报,2002,29(2):171～172
[117] 范志强,杜希华,褰兆忠,等.辣椒组织培养中褐变问题的研究[J].山东农业科学,2000,(6):35～36
[118] 张妙霞,孔祥生,郭秀璞.柿树组织培养防止外植体褐变的研究[J].河南农业大学学报,1999,33(1):87～91
[119] 卜学贤,陈维伦.活性炭对培养基中植物生长调节物质的吸附作用[J].植物生理学报, 1988 , 14 (4) :401～405
[120] 门福义.马铃薯的贮存物质[J].马铃薯杂志,1983(1):6
[121] 李琳.活性炭在库拉索芦荟的组织培养中的应用[J].西南农业学报,2005,18(1):105～107
[122] 韦鹏霄,覃伟,岑秀芬,等.不同抗氧化剂预处理防止优质籼稻种胚愈伤组织褐化的研究[J].广西农业生物科学,2005,24(2):109～112
[123] 夏小环,王静,尹梅,等非洲菊叶外植体组培中影响褐化因素及机理初探[J].西南农业学报,2006,19(1):136～138
[124] 黄诚梅,李杨瑞,叶燕萍.甘蔗茎尖培养中减轻酚害[J].植物生理学通讯,2004,40(1):39～41
[125] 罗晓芳,田砚亭,姚洪军.组织培养过程中 PPO 活性和总酚含量的研究[J].北京林业大学学报,1999,21(1):92～95
[126] Ichihashi S,Kako S.Studies on clonal propagation of cattleya through tissue culture methed[J].Browning of cattleya.JJap Soc.Hort.Sci.1977,46:325～330
[127] 孔祥生,张妙霞,杜爱玲等.甜柿离体快繁技术研究[J].华中农业大学学报,1998,17(2):178～186
[128] 陈学森,邓秀新,章文才.培养基及培养条件对银杏愈伤组织黄酮产量的影响[J].园艺学报,1997,24:373～377
[129] Tiainen T.The role of ethylene and reducing agents of anther culture response of tetraploid Potato(Solanum- tuberosum L) [J].Plant Cell Reports,1992,10:604～607
[130] 张启香,方淡明,张晓平.蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖[J].植物资源与环境学报, 2004 , 13 (3) :38～40
[131] Diller Kenneth R.Stress protein enpreddion kinetics[J].Annual Review of Biomedical Engineering,2006,8:403～424
[132] Saltveit M E.Wound induced changes in phenolic metabolism and tissue browning are altered by heat shock[J].Postharvest Biology and Technology,2000,21:61～69
[133] 夏铭,吴绛云,张丽梅.红豆衫组织培养中褐变问题的研究[J].生物技术,1996,6(3):18～20
[134] Loaiza-Velarde Julio G,Saltveit Mikal E.Heat shock applied either before or after wounding reduce browning of lettuce leaf tissue[J].Journal of the American Society for Horticultural Science,2001,126(2):227～230
[2] 胡松华.蝴蝶兰品种栽培鉴赏[M].广州:广东科技出版社,1996
[3] 黄胜琴,郭建军,叶庆生,等.温度对蝴蝶兰成花诱导的研究初探[J].中山大学学报(自然科学版),2003,42(4):132～134
[4] 谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社,1991,247～253
[5] 尹广远,牛三义,储博彦,等.蝴蝶兰的栽培管理技术[J].河北林业科技,2006,4:60～61
[6] 曾爱平,林绍生,陈义增,等.蝴蝶兰栽培关键技术[J].中国热带农业,2006,5:58～59
[7] 陈卫民,王建宇,胡海英.北方地区蝴蝶兰栽培技术[J].北方园艺,2004(4):38～39
[8] 陈宇勒.洋兰欣赏与栽培图说[M].北京:金盾出版社,2004,140～144
[9] 卢思聪.兰花栽培入门[M].北京:金盾出版社,1990,9
[10] 蔡平里.图解兰花繁殖最新技术[M].台湾:淑馨出版社.1996,28
[11] 傅连芳.蝶兰的快速繁殖[J].热带作物研究,1990(2):24
[12] 曹孜义,刘国民.实用植物组织培养技术教程[M].甘肃科学技术出版社,1996:1～2
[13] 朱至清.植物细胞工程[M].化学工业出版社,2003,50
[14] 颜昌敬.植物组织培养手册[M].上海:上海科学出版社,1990,47
[15] 刘青林,马祎,郑玉梅.花卉组织培养[M].北京:中国农业出版社,2003 年 1 月:1～2
[16] Haberlandt,G.Kulturversuche,Mit Isolierten.Pflanzenzellen[J].Sitzungsber Math-Naturwiss Klasse Kais Akad Wiss Wiss Wien.,1902,111:69～92
[17] Steward F.C,Mapes M.O,Mears K.Growth And Organized Development Of Cultured Cells II Organization[J].In Cultures Grown From Freely Suspended Cells.American Journal of Botany,1958,45:705～708
[18] 熊丽,吴丽芳.观赏花卉的组织培养与大规模生产[M].北京:化学工业出版社,2003,15
[17] Morel.G..Producing virus-free Cymbidiums[J].Am Orchid Soc Bull,1960,29.495～497
[18] Wimber D D.Clonal multiplication of Cymbidium through tissue culture of theshoot meristem[J].Am Orchid Soc Bull,1963,32:105～107
[19] 李浚明.植物组织培养教程[M].中国农业大学出版社,2002,40
[20] 彭立新,王姝,孟广云.蝴蝶兰组织培养快繁研究[J].天津农业科学,1999,(5):27～29
[21] 鲁涤非.花卉学[M].北京:中国农业出版社,1998:298～300
[22] 张树珍,曾宪松,张银东,等.大花蕙兰的组织培养[J].热带作物研究,1995(4):26～28
[23] 王怀宇.蝴蝶兰的快速无性繁殖[J].园艺学报,1989,16(l):73～77
[24] 刘荣维,梅庆超.丛生芽——蝴蝶兰无性快速繁殖的新途径[J].热带作物学报,1993,14(2):105～107
[25] 林金其.蝴蝶兰花梗组织培养研究[J].中国园艺,1985,31(2):84～93
[26] 鲁雪华,郭文杰,徐立晖,等.蝴蝶兰花梗节间段培养繁殖的初步研究[J].园艺学报,2002,29(5):491～492
[27] 刘福林,李淑平.蝴蝶兰花梗的组织培养和植株再生[J].商丘师范学院学报,2001,(6):98～99
[28] 林瑞松.蝴蝶兰组织培养研究[J].中华农业研究,1981,30(2):141～145
[29] 彭立新,王妹.蝴蝶兰组织培养快繁研究[J].天津农业科学,1999,5(2):27～29
[30] 周俊辉,叶超宏,陈旭高.蝴蝶兰原球茎增殖培养的研究[J].仲恺农业技术学院学报,2002,15(3):13～17
[31] 楼建华.温度、光照及栽培基质对蝴蝶兰生长发育的影响[J].浙江农业学报,1995,7(6):464～467
[32] IntuwongO,SagacusY.Clonal propagation of Phalaenopsis by shoot-tip culture[J].Amer Orchid SocBull,1975(93):894～895
[33] Miller.P.N,Anedrson.WC.Invitro bulblet formation indutchiris[J]. Hortiscience,1989,24(6):1028～1031
[34] 曾宋君,彭晓明,张京丽,等.蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖[J].武汉植物学研究,2000,18(4):344～346 [35 彭立新,王姝,孟广云.蝴蝶兰组织培养快繁研究[J].天津农业科学,1999,6:27～29
[36] 张伟,曾伏虎,张苏锋.蝴蝶兰的组织培养与快速繁殖[J].信阳师范学院学报(自然科学版),2004,7:335～337
[37] 张秀清,王志武,刘玉敬,等.蝴蝶兰实生苗不同器官的离体培养[J].植物学通报,1996,13(1):50
[38] 鲁雪华,郭文杰,徐立晖,等.蝴蝶兰花梗节间段培养繁殖的初步研究[J].园艺学报,2002,29(5):491～492
[39] 高汝勇,李会芬,骆冬洁.蝴蝶兰的快速繁殖研究[J].衡水学院学报,2007,9(1):27～29
[40] 马子骏,王鲁彤,卢宇广,等.蝴蝶兰工厂化生产技术研究[J].浙江林学院学报,1998,15(2):192～193
[41] 陈勇,林开县,王君晖.蝴蝶兰的快速繁殖和规模化栽培技术研究[J].浙江大学学报(理学版)2004,1:84～88
[42] 张志国,王黎.铁皮石斛原球茎分化适宜培养基研究[J].中国中药杂志,1993,18(1):18
[43] Ishii Y,Takamura T,Goi M.etal.Callus induction and somatic embryogenesis ofPhalaenopsis[J].Plant Cell Rep, 1998,17:446
[44] 徐晓薇,柴明良,姚丽娟,等.蝴蝶兰类圆球茎增殖和脱分化的研究.浙江农业科学,2006,4:401～403
[45] 宁书祥,张希太.蝴蝶兰的组织培养快速繁殖技术[J].农业科技与信息,2007,7:32～33
[46] Compton ME,Preece JE.Exudation and explant establishment.Intl Assoc[J].Plant Tissue culture Newsl,1986, 50:9～18
[47] 蒋达钜.大花蕙兰组织培养工厂化技术试验与示范推广:[农业推广硕士论文].南京:南京农业大学,2004
[48] 陈银凤,林宏.NAA 和 6-BA 对蝴蝶兰原球茎增殖的影响(简报)[J].亚热带植物科学,2007,36(3):67-68
[49] 王栋,买合木提·克衣木,玉永雄,等.植物组织培养中的褐化现象及其防止措施[J].黑龙江农业科学,2008(1):7～10
[50] 刘真华,葛红,郭绍霞,等.蝴蝶兰组织培养中的褐化控制研究[J].园艺学报,2005,32(4):732～734
[51] 杨美纯.外部因子对蝴蝶兰叶片原球茎状体发生的影响[J].广西植物,2000,20(1):42～46.
[52] Park Myungjoo, Park soonjung. Kim Doohwan. Effect of medium composition on Phalaenopsis micropropagation using lateral buds from flower stalks[J].Korean journal of Horticultural science &Technology, 1998,16(1):42～44
[53] 杨美纯,周岐伟,许鸿源.蝴蝶兰的种子培养[J].广西农业生物科技,2002,21(4):258～260
[54] 王春,俞继英.蝴蝶兰杂交后代的快速繁殖体系研究[J].浙江林业科技,2007,27(2):30～33
[55] 王平,吴海红,赵兴华,等.蝴蝶兰组织培养组成的初步研究[J].沈阳农业大学学报,2004-02,35(1):10～12
[56] 秦凡,周吉源.不同植物生长调节剂对蝴蝶兰快速繁殖的影响[J].武汉植物学研究,2003,21(5):452～456
[57] 林宗铿,黄德贵.蝴蝶兰花梗的组织培养及快繁研究[J].福建热作科技,2001,26(1):6～9
[58] 陈正华.木本植物组织培养及其应用[M].北京:高等教育出版社,1986,456～466
[59] 周俊辉,周家容,曾浩森,等.园艺植物组织培养中的褐化现象及抗褐化研究进展[J].园艺学报,2000,27(增刊):481～486
[60] Loomis WD,Battaile J.Plant phenolic compounds and the isolation of enzymes[J].Phytochem.1966,5:423～438
[61] 丁连忠.抗坏血酸衍生物抑制蘑菇的多酚氧化酶[J].食品科学,1991,67(2):22～25
[62] 王荣钦.外植体部位、激素浓度对卡特兰、蝴蝶兰原球茎形成和增殖的影响[J].福建热作科技,2000,25(1):31～32
[63] 符近.三种不同类型种子休眠、萌发及马占思种子老化过程中的研究:[硕士学位论文].北京:北京农业大学,1996:46
[64] Mulin M.Callus formation form thin cell layers of Anacaedium occidentale L[J].Silva Lusitana,1995,3(2):205～211
[65] Pindel A,Miczvnski K.Regeneration of Cymbidiuan orchids from leaf and root exnlants[J].Floria Horticulture, 1996,8(2):95～105
[66] 仲飞.红星苹果多酚氧化酶某些特征及其抑制剂的研究[J].园艺学报,1998,25(2):184～186
[67] 刘金豹,杜中军,翟衡.葡萄浆果中的主要多酚化合物及影响因素[J].中外葡萄与葡萄酒,2003(2):22～26
[68] 朱红.茶树鲜叶中多酚含量变化的研究[J].四川农业大学学报,1998,16(3):345～348
[69] 曾镭,刘燕.植物组织培养中褐化问题的研究进展[J].安徽农业通报,2007,13(14):49～50
[70] 陈惠娟.植物组织培养中褐变的产生机理及克服措施[J].植物保护,2005,31(2):79～82
[71] 李凤兰,胡国富,胡宝忠.八种不同花色一串红组织培养快繁的研究[J]..生物技术,2005 ,15 (4) :71～73
[72] Loomis WD,Battaile J.Plant phenolic compounds and the isolation of plant enzymes[J].Phyto-chem,1966,5:423～438
[73] 吴晓霞,陈刚,张彪,等.植物组织培养中的褐变的研究进展[J].河北林果研究,2002,(3):284
[74] 罗虹,陈汝民.墨兰的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯,1997,33(6):436～437
[75] 杨增海.园艺植物组织培养[M].北京:农业出版社,1987:64～74
[76] 袁巧平,董茂山,黄钦才.核桃的组织培养[J].植物生理学通讯,1990,(2):43～44
[77] 张林.淡红瑞香的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯,1991,27(6):429～432
[78] 何小玲,王金发.大话飞燕草的组织培养及植株再生[J].植物生理学通讯,1998,34(1):39～40
[79] 李建华.台湾蝴蝶兰产业发展初探与启示[J].台湾农业探索,2001(1):15～18
[80] 陆銮眉,张汉荣.海峡两岸蝴蝶兰产业发展现状与合作前景[J].福建热作科技,2004,29(1):39～41
[81] 杨先芬.工厂化花卉生产[M].北京:中国农业出版社,2002,76
[82] 王家福.花卉组织培养与快繁技术[M].中国林业出版社,2006,5
[83] 马源.蝴蝶兰市场俏销[J].资源开发与市场,2003,19(4):249
[84] 李军,柴向荣,曾宝,等.蝴蝶兰组培工厂化生产技术[J].2004,31(3):413～414
[85] 曹孜义,刘国民.实用植物组织培养技术教程[M].兰州:甘肃科学技术出版社,1996,95～97
[86] 张立全,田松英,张元国,等.蝴蝶兰原球茎的增殖研究[J].北方园艺,2007(3):172～175
[87] 邹金环.蝴蝶兰组培苗移栽成活率研究[J].安徽农业科学,2007,35(14):4131
[88] Bhattarcharjee S,et al.Effect of growth regulating substance on in vitro seed germination of Phalaenopsis Hybrid[J].Indian Agriculturist,1999,43(1/2):79～83
[89] 金波.养兰与赏兰[M].北京:农村读物出版社,2000,24
[90] 刘翠兰,王小芳,李双云,等.蝴蝶兰花梗芽的组织培养[J].山东林业科技,2004,153(4):37
[91] 邵双,关丽杰.蝴蝶兰花梗腋芽诱导的影响因素[J].沈阳化工学院学报,2005,19(2):84～86
[92] 李浚明.植物组织培养[M].中国农业大学出版社,2002:29
[93] 程广有.名优花卉组织培养技术[M]科学技术文献出版社,2003:63
[94] 陈菁瑛,蓝贺胜,陈雄鹰.兰花组织培养与快速繁殖技术[M].中国农业出版社,2004:76
[95] 陈发兴,林顺权,王家福,等.兰花繁育技术的研究进展[J].福建农林大学学报(自然科学版),2002,31(4):476～479
[96] 刘林.诱导蝴蝶兰叶片产生原球茎的研究[J].北方园艺,2003,(6):51
[97] 陈丽,潘瑞炽,陈汝民.墨兰原球茎生长的研究[J].热带亚热带植物学报,1999,7(1):59～64
[98] 张秀清,王志武,王春英,等.蝴蝶兰实生苗原球茎诱导研究[J].莱阳农学院学报,1995,12(1):44～46
[99] 柴向华、李军、朱饱卿,等.金边蝴蝶啊兰的叶片培养[J].热带农业科学,2004,24(3):18～20
[100] 王清连.植物组织培养[M].北京:中国农业出版社,2002
[101] 柯善强.植物细胞的遗传全能性与组织培养形态发生控制[J].武汉植物学研究,1987,5(3):304～311
[102] Steward, F. C,Mapes, M. O,Kent, A,etal.Growth and. development of cultured plant cells.Science,1964,143:20～27
[103] Saunder,J.W.,Bingham,E.T.Cytological observations on genome bhomlogy in eight interspecific hybrids of Phalaenopsis[J].Genetica,1970,12:850～855
[104] Fosket,D.E.Hormonal regulation of growth in cultured plant cells[J].In Vitro Cellular&Developmental Biology-Plant,1978,1:234～240
[105] 崔徵.植物激素与细胞分化及形态发生的关系[J].细胞生物学杂志,1983,5(2):1～5
[106] 朱晋云,杨丽萍,许玉娟,等.大花蕙兰试管苗玻璃化发生原因及防治技术研究[J].山西农业科学,2004,32(3):47～50
[107] 李向英.蝴蝶兰的快速繁殖及栽培管理研究[J].山东农业科学,2000( 4 ):13～14
[108] 罗建平,查学强,姜绍通.药用霍山石斛原球茎的液体悬浮培养[J].中国中药杂志,2003,28(7):611～613
[109] 张治国,刘驿,王黎,等.铁皮石斛原球茎增殖的培养条件研究[J].中草药,1992,23(8):431
[110] 刘敏.花卉组织培养与工厂化生产[M].地质出版社,2002:17～18
[111] 秘彩莉,霍晨敏,冯全义,等.大花蕙兰快速繁殖技术初报[J].河北师范大学学报(自然科学版),2002,26(2):190-192
[112] 陈进勇,程金水,朱滢.中国兰种子试管培养愈伤组织发生的研究[J].北京林业大学学报,1998,20(4):76～79
[113] Nihar Ranjan ,Nayak,Susmita Sahoo,etal.Establishment of thin cross section(TCS)culture method for rapid micro-propagation of Cymbidium aloifolium(L.)Sw.and Dendrobium nobile Lindl.(Orchidaceae) [J].Scientia Horticulturae,2002,94(2):107～116
[114] 顾之中.水稻愈伤组织发生褐化的影响因素研究[J].江西农业大学学报,1992,14:206～211
[115] 宋平,沈丙辉.活性炭培养基对棉花愈伤组织诱导的效果[J].植物生理学通讯,1988(5):47～48
[116] 刘兰英.核桃组培中的褐化及防止措施研究[J].园艺学报,2002,29(2):171～172
[117] 范志强,杜希华,褰兆忠,等.辣椒组织培养中褐变问题的研究[J].山东农业科学,2000,(6):35～36
[118] 张妙霞,孔祥生,郭秀璞.柿树组织培养防止外植体褐变的研究[J].河南农业大学学报,1999,33(1):87～91
[119] 卜学贤,陈维伦.活性炭对培养基中植物生长调节物质的吸附作用[J].植物生理学报, 1988 , 14 (4) :401～405
[120] 门福义.马铃薯的贮存物质[J].马铃薯杂志,1983(1):6
[121] 李琳.活性炭在库拉索芦荟的组织培养中的应用[J].西南农业学报,2005,18(1):105～107
[122] 韦鹏霄,覃伟,岑秀芬,等.不同抗氧化剂预处理防止优质籼稻种胚愈伤组织褐化的研究[J].广西农业生物科学,2005,24(2):109～112
[123] 夏小环,王静,尹梅,等非洲菊叶外植体组培中影响褐化因素及机理初探[J].西南农业学报,2006,19(1):136～138
[124] 黄诚梅,李杨瑞,叶燕萍.甘蔗茎尖培养中减轻酚害[J].植物生理学通讯,2004,40(1):39～41
[125] 罗晓芳,田砚亭,姚洪军.组织培养过程中 PPO 活性和总酚含量的研究[J].北京林业大学学报,1999,21(1):92～95
[126] Ichihashi S,Kako S.Studies on clonal propagation of cattleya through tissue culture methed[J].Browning of cattleya.JJap Soc.Hort.Sci.1977,46:325～330
[127] 孔祥生,张妙霞,杜爱玲等.甜柿离体快繁技术研究[J].华中农业大学学报,1998,17(2):178～186
[128] 陈学森,邓秀新,章文才.培养基及培养条件对银杏愈伤组织黄酮产量的影响[J].园艺学报,1997,24:373～377
[129] Tiainen T.The role of ethylene and reducing agents of anther culture response of tetraploid Potato(Solanum- tuberosum L) [J].Plant Cell Reports,1992,10:604～607
[130] 张启香,方淡明,张晓平.蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖[J].植物资源与环境学报, 2004 , 13 (3) :38～40
[131] Diller Kenneth R.Stress protein enpreddion kinetics[J].Annual Review of Biomedical Engineering,2006,8:403～424
[132] Saltveit M E.Wound induced changes in phenolic metabolism and tissue browning are altered by heat shock[J].Postharvest Biology and Technology,2000,21:61～69
[133] 夏铭,吴绛云,张丽梅.红豆衫组织培养中褐变问题的研究[J].生物技术,1996,6(3):18～20
[134] Loaiza-Velarde Julio G,Saltveit Mikal E.Heat shock applied either before or after wounding reduce browning of lettuce leaf tissue[J].Journal of the American Society for Horticultural Science,2001,126(2):227～230