穿心莲内酯对小鼠呼吸道非特异性免疫功能的影响
详细信息    本馆镜像全文|  推荐本文 |  |   获取CNKI官网全文
摘要
目的:研究穿心莲内酯对呼吸道非特异性免疫功能的影响,探索穿心莲内酯治疗呼吸系统疾病新的作用机制。方法:用鼠伤寒沙门氏菌菌液对小鼠进行滴鼻感染,造出细菌性肺炎动物模型。将此肺炎模型小鼠随机分为模型组、穿心莲内酯高、低剂量治疗组,并设立正常对照组。对模型组和正常对照组小鼠,用生理盐水(0.5ml/只)腹腔注射;对穿心莲内酯高、低剂量组小鼠分别按200mg/kg、100mg/kg进行腹腔注射给药。自由饮水和采食,一周后,在最后一次给药,24h后。用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉;进行小鼠眼球摘除采血,血样收至含有肝素钠的收集管中供血常规测定;脱颈处死小鼠,打开气管用生理盐水进行灌注,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。打开胸腔和腹腔,取肺脏、脾脏和胸腺,测定各组小鼠肺脏,脾脏和胸腺指数;显微镜下观察HE染色肺组织的病理变化、计算BALF中单核巨噬细胞吞噬功能和T淋巴细胞阳性百分率;比浊法测定BALF中溶菌酶的活性;用小鼠双抗体夹心ABC-ELISA试剂盒测定BALF中分泌型免疫球蛋白A和干扰素-γ的含量。结果:与正常对照组相比,细菌性肺炎模型组小鼠肺脏、胸腺及脾脏指数显著升高(p<0.01);其中肺脏发生组织形态学变化,主要为炎性细胞浸润,毛细血管充血,肺泡壁增厚,纤维蛋白渗出等;血液中白细胞总数(WBC)淋巴细胞数量(LYM)、单核细胞数量(MON)和中性粒细胞数量(GRA)都有显著升高(p<0.05);支气管肺泡灌洗液中肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能显著升高(p<0.05);分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和干扰素-γ(INF-γ)含量显著升高(p<0.01);而BALF中溶菌酶的含量显著降低(p<0.01)。与模型组比较,穿心莲内酯治疗组小鼠肺组织的病理变化得到缓解改善,炎症明显减轻;肺脏、脾脏和胸腺指数有显著降低(p<0.05);脾脏和胸腺增生得到有效控制;BALF中AM的吞噬功能和溶菌酶的含量得到显著提高(p<0.01);BALF中sIgA和IFN-γ含量基本降低到正常水平。结论:穿心莲内酯可缓解鼠伤寒沙门氏菌诱导的小鼠肺部炎症,其作用机制可能与增强巨噬细胞吞噬功能和溶菌酶活性;改善肺部病变,缓解炎症;抑制细菌感染诱导的免疫器官增生;间接地使BALF中sIgA分泌及IFN-γ表达降低并接近正常水平相关。
Objective:To investigate the effect of andrographolide on the respiratoty tract nonspecific immune functions.Methods:The mice model of pneumonia were built up. The pneumonia mice were treated with different concentrations of andrographolide.A week later,the thmus index,the spleen index,the phagocytosis of macrophages and the contents of secretory immunoglobulin A(sIgA) and interferon-γ(IFN-γ) in the bronchoalveolar lavage fluid(BALF) of pneumonia mice were tested.Results: Compared with the nomal group,the thmus index,the spleen index,and the contents of secretory immunoglobulin A(sIgA) and interferon-γ(IFN-γ) in the model group increased obviously,the contents of lysozyme decreased in the BALF.Compared with the model group,the thmus index,the spleen index,and the contents of secretory immunoglobulin A(sIgA) and interferon-γ(IFN-γ) in the BALF of high dose andrographolide group decreased obviously,the phagocytosis of macrophages in the BALF of high dose andrographolide group increased significantly.Conclusion:The mechanism of andrographolide is complex,andrographolide has the enhancement on the phagocytosis of macrophages and the contents of lysozyme,has the inhibitory action on immunity organs,the secretion of sIgA and the content of IFN-γ.
引文
1.丁建中,张六通,龚权,邱幸儿,陈刚,朱慧玲,张渊.桑杏汤对温燥小鼠气管纤毛运动与呼吸道液及免疫功能的影响[J].中药药理与临床,2006,22(5):4-5.
    2.丁雁,朱永华.中药鼻腔喷雾剂对易感儿童体液免疫功能的影响.中华儿科杂志[J],1999,37(4):231-233.
    3.马健.肺毒清冲剂对大鼠巨噬细胞功能的影响[J].江苏中医,1998,16(9):41
    4.牛妙龄.中药穿琥宁佐治小儿支气管肺炎50例[J].实用医技杂志,2005,12(11):3082-3083
    5.王飞,张廷模.感毒清口崩片防治呼吸道病毒感染药效及免疫机理研究[D].四川:成都中医药大学,2006
    6.王明香,夏立红,康妍萌,张桂菊.益气活血法防治小儿反复呼吸道感染136例[J].山东中医药大学学报,2005,29(2):115-117.
    7.王浴生,邓文龙,薛春生.中药药理与应用[M].人民卫生出版社,1998:866
    8.王玺坤,李玉英,王林.补肺健脾颗粒对小鼠免疫功能的影响[J].中药新药与临床药理,2001,12(6):428-430.
    9.邓文龙.脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯药理作用研究[J].药学学报,1980,15(10):590
    10.邓雷鸣,董俊明.补锌及穿心莲穴位封闭治疗婴幼儿慢性腹泻的疗效观察颜观色[J].中医药研究,1998,14(3):41
    11.韦晗宁.银杏叶提取物保护大鼠免疫功能的研究[D].广西:广西医科大学,2000
    12.冯学斌,刘风,袭柱婷,孙丰润.柴桂合剂对儿童反复呼吸道感染者血浆IL-6、IL-8、TNF-a及T淋巴细胞功能的影响[J].中国中西医结合杂志,2006,26 (10):945-947.
    13.卢岩.大鼠脑缺血时肺脏病理形态改变及内皮素-1含量变化[D].吉林大学硕士学位论文,2001:10
    14.史利卿,邱全瑛.宣肺解毒颗粒剂对FM1株病毒感染小鼠呼吸器官病理学改变的影响[J].北京中医药大学学报,2000,23(5):33-35.
    15.左建平,赵维民,杨以阜.穿心莲内酯及衍生物的医学用途[P].中国专利:03129127.9,2003-11-12
    16.刘峻,王峥涛.新穿心莲内酯对体外活化小鼠巨噬细胞的影响[J].中国天然药物,2005,3(5):308-311
    17.刘峻,唐庆九,王峥涛.新穿心莲内酯对小鼠巨噬细胞呼吸爆发及淋巴细胞增殖的影响[J].中国新药与临床杂志,2005,24(3):206-209
    18.刘菲菲,何世勤.穿琥宁抑制H3N2病毒诱导细胞凋亡.江西医药[J],2001,36(3):185
    19.吕翠霞,姜建国.清营解表法对流感病毒感染小鼠免疫调节机制的实验研究[D].北京中医药大学博士学位论文,2005:5
    20.孙振华,陈志琳,徐立春,王山喜,王树槐.莲必治并用生物、化学疗法抑制体内肿瘤生长的试验研究.浙江中西医结合杂志[J],2001,11(2):88
    21.孙振华.莲必治促进人淋巴细胞生长的实验研究.中国现代实用医药.成都科技大学出版社[M],1999:108
    22.朱辛为,李质馨,窦肇华.T淋巴细胞标记染色-ANAE法的改进[J].解剖学杂志,2003,26(3):300-301.
    23.余丽君,陈祥银,周卫辉.连翘、甘草、山豆根合剂对肺泡巨噬细胞活化和气道高反应性的抑制作用[J].中医药学报,1999,4:46-48.
    24.吴佩雁.穿心莲油纱与湿润烧伤膏治疗浅Ⅱ烧伤的疗效比较[J].汕头大学医学院学报,1997,10(3):70
    25.吴基良,郑敏,刘叔珍,李立中,罗德生.穿心莲根总酮对实验性心肌缺血的影响[J].中药药理与临床,1996,12(5):17
    26.宋晓鸽,唐照高,唐照亮,侯正明,章复清,袁静.艾炙对实验性大鼠抗炎作用和红细胞免疫功能的影响[J].中国中医药信息杂志,1999,6(12):31-32
    27.宋诸臣,张葆春,彭春雷.地榆升白片对晚期非小细胞肺癌患者CD4~+/CD8~+ 及自然杀伤细胞活性的影响[J].临床荟萃,2005,20(4):215-216.
    28.张一萍,舒可成,彭刚.复方穿琥宁涂膜剂的研究[J].中国药业,2009,9(8):11
    29.张永辉,刘宗花,杜红丽,宋伟涛,王嫱,刘巨源,杨廷桐,王全志.中药泡桐花浸膏对哮喘豚鼠肺组织作用的病理学研究[J].新乡医学院学报,2002,19(6):473-475.
    30.张旭晨,阮英茆.肺舒灵对金黄地鼠肺泡巨噬细胞产生肿瘤坏死因子的影响[J].中国中药杂志,1999,24(11):686-688。
    31.张志勇,王炳南.脱水穿心莲内酯琥珀酯半酯单钟盐在家兔体内的药代动力学研究[J].华西药学杂志,1995,12(1):5
    32.张明安,朱作金,宋志军,施佳.不同浓度NO_2对免疫功能的影响.广西医科大学学报,1985:2(1):1-5
    33.张瑶珍,唐锦治,张玉全,徐慧珍.穿心莲提取物抗血小板聚集与释放作用及其机理的研究[J].中国中西医结合杂志,1997,14(1):28
    34.李立中,吴庆基,郭贤成.穿心莲注射液对麻醉狗的降压作用[J].中医药杂志,1999,13(3):46
    35.李伟元,阿宜瑞.复感宁方对复感儿唾液淀粉酶活性及T淋巴细胞的影响[J].中医药学刊,2004,22(11):85-86.
    36.李红,叶里红.穿心莲片辅助药物流产的临床观察[J].云南中医中药杂志,2002,23(1):21
    37.李良桥,康尔芳,贾丹兵.穿心莲的拓宽应用[J].中医药学报,1995,23(4):18
    38.李建春,韩晓伟.定喘汤雾化吸入对哮喘豚鼠呼吸道微生态影响的实验研究[D].辽宁:辽宁中医学院硕士学位论文,2005
    39.李健明,陈志勇,林昌松.穿琥宁粉针联合抗生素治疗上呼吸道感染160例疗效观察[J].中国中医急症,2003,12(1):37
    40.李睿,杨锡强.小鼠卡介苗新生期接种和呼吸道合胞病毒感染对免疫状态和实验性哮喘的影响[D].重庆医科大学,2005
    41.杜红,牛欣,冯前进.穿心莲内酯W制剂抗炎机制的探讨.第二届中药现代化新剂型新技术国际学术会议[C],2006:523-525
    42.杜红,牛欣,冯前进.穿心莲内酯新型载药系统抗炎作用及其机制研究[D].北京中医药大学,2005
    43.汪宝琪,庞志功,汪丛莹,尹鸿.用化学发光法研究家兔穿心莲内酯的药物动力参数[J].沈阳药科大学学报,1995,12(1):5
    44.邵国青.猪气喘病防制的药物与疫苗[J].中国动物保健,2003,(8):21-22
    45.邹洪,袁悼斌.穿心莲内酯的电化学研究[J].分析试验室,1997,16(4):1
    46.陈文慧,袁嘉丽,韩妮萍,姚政,陈涛.急性上呼吸道感染中医证型与口咽部微生态平衡相关性初步研究[J].云南中医学院学报,2004,28(2):10-12。
    47.陈平圣.穿心莲抗癌作用的实验研究[J].实用中西医药杂志,19911(4):176
    48.陈壮林,徐辉甫.穿心莲片辅助治疗儿童幽门螺杆菌相关性胃炎45例[J].中国中西医结合杂志,2001,21(17):70
    49.陈国祥,丁伯平,徐瑶,杨解人,陈斌,毛德法,顾学峰,黄家伦.穿心莲胶囊抗炎作用研究[J].现代中西医结合杂志,2000,10(11):1004
    50.陈祥银,赵青,赵磊,张磊,张蕙莲,吴云清,斯勤,原琪,周卫辉,严仪昭.中药制剂对烟雾剌激所致地鼠呼吸道炎症的保护作用[J].基础医学与临床,1999,19(1):69-72。
    51.陈敏武,徐德然,王峥涛,徐珞珊,徐国钧.RP-HPLC法测定不同产地及收期的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量[J].中国药科大学学报.1999,30(4):291-293
    52.陈清高,严忠兰,王智强.口服穿心莲治疗急性上呼吸道感染疗效观察[J].河南诊断与治疗杂志,1995,9(3):171
    53.周庆伟,李素云,王海峰.痰热清注射液治疗急性下呼吸道感染300例[J].陕西中医,2005,26(4):301-304.
    54.季宇彬主编,中药有效成分药理与应用[J].黑龙江科学技术出版社,1995.12
    55.林红,侯继文,杨玉先,余向文.中药制剂佐治小儿反复呼吸道感染的疗效及免疫功能观察[J].实用医学杂志,2003,19(3):314-315.
    56.畅高升,田赵华.替代抗生素的中草药[J].动物保健,1999,5:27
    57.罗登山.穿心莲注射液治疗顽固性荨麻疹[J].成空药学,1990,(3):6
    58.郑虎占.中药现代研究与应用[M].学苑出版社,1991.1
    59.郑敏,吴基良,尹时华,吴基良,鲍翠玉.穿心莲内酯对大鼠脑缺血-再灌注损伤的影响[J].医药导报,2004,23(10):708
    60.金伯泉.细胞和分子免疫学[M].北就科学出版社,2001:183-184
    61.姜欣,李建春,金岩,杨述知,刘丽翔.定喘汤雾化吸入对DPB的呼吸道微生态影响及改善呼吸因难的实验研究[J].中国微生态学杂志.2001,13(1)60-61.
    62.姜欣,李建春,韩晓伟,孙涛.雾化吸入定喘汤对口腔溶菌酶与微生态失衡的调节作用[J].中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志,2002,10(6):295.
    63.柳献共.穿心莲引起上腹痛1例报告[J].新医学,1997,18(2):7
    64.胡明灿,华晓鹃.穿心莲片(胶丸)不良反应及其研讨[J].光明中医,1998,13(1):47
    65.胡海燕.中西医结合治疗慢性支气管炎急性发作的临床与实验研究[J].湖北中医杂志,2001,23(5):6-8.
    66.赵雪琴,严语.双黄连雾化吸入对毛细支气管炎患儿T细胞免疫功能作用的研究[J].交通医学,2001,15(1):98.
    67.唐光华,黄启福,姜良铎.艾麻口服液对慢性支气管炎模型大鼠气道病理损伤的影响[J].北京中医药大学报,2002,25(5):26-29.
    68.唐照亮,宋晓鸽,侯正明,陈全珠,章复清,袁静,陈向涛,许冠荪.大鼠海马内微量注射6-羟多巴胺对艾炙抗炎免疫作用的影响[J].针刺杂志,2000,25(3):184-187
    69.夏立红,王明香,康妍萌,张桂菊,张维东.益气活血口服液免疫增强及抗呼吸道病毒实验研究.山东中医药大学学报,2005,29(4):306-309
    70.夏怡丰,耿建国.穿心莲内酯(Andro)抗炎机制的研究[D].中科院上海生物化学与细胞生物学研究所,2004
    71.徐立春,徐芳.莲必治注射液治疗恶性肿瘤的临床观察[J].江苏麟临床医学杂志,2000,4(4):277
    72.徐国钧.中国药材学[M].北京:医药科技出版社,1993:1581
    73.徐金富,瞿介明.宿主防御呼吸道感染机制研究进展[J].中国呼吸与危重监护杂志,2002,1(2):121-125.
    74.徐路珊.中国药材学[M].中国医药科技出版社,1996:1580
    75.郭志凌,赵华月,郑信华.穿心莲根提取液抗心肌缺血-再灌注心肌细胞损伤与氧自由基的关系[J].中药药理与临床,1993,9(4):17
    76.郭志凌,赵华月,郑信华.穿心莲提取物对缺血-再灌注心肌细胞K+、Na+、Ca+、Mg+的作用[J].同济医科大学学报,1994,23(3):205
    77.顾珺,蒋瑾瑾,沈朝斌等.玉屏风散对小鼠气道变态反应性疾病Th1/Th2平衡的影响[J].上海中医药杂志,2005,39(7):50-52.
    78.崔华雷,卢奕,秦明放,姚智,鲁焕章.活血清解灵对ACST大鼠肺组织内NOS及肺泡巨噬细胞分泌NO的调节作用[J].中国中西医结合外科杂志,2000,6(5):335-335.
    79.梁龙,戴静,杨大坚.穿心莲防治心血管疾病的研究进展[J].中草药,1996,27(1):52
    80.梁汝坚.穿心莲内酯治疗上呼吸道感染效效观察[J].广东医学,1998,19(6):473
    81.黄国平,康建民,何建峰,胡速成,胡跃出,陈东兴.参芪大枣汤治疗反复呼吸道感染临床观察[J].中国中西医结合杂志,2001,21(6):460.
    82.黄泰康.常用中药成分与药理手册[M].中国医药科技出版社,1999:1465
    83.黄添友.穿心莲内酯抑制小鼠对免疫系统影响的实验研究[J].第一军医大学学报,1986,6(2):143
    84.黄葵,唐保国.溶菌酶及其在畜牧业中的应用[J].兽药与饲料添加剂,2007,12(2):29-31
    85.彭光勇,周峰,丁如宁.莲必治注射液对免疫功能的调节作用[J].中国中药杂志,2002,27(2):147
    86.彭光勇,周峰.莲必治注射液(穿心莲内酯)对免疫功能的调节作用[J].中国中药杂志,2002,27(2):147-150
    87.董秀琳,胡晓光,李晓光,张凤琴,刘凤霞,刘艳.穿琥宁注射液治疗急性 胃肠道感染165例[J].中医药信息,1997,14(2):30
    88.谢丛华,周云峰,彭纲,刘晖,陈纪,夏明童.当归对小鼠放射性肺损伤过程中TNF-a水平的影响[J].中华放射肿瘤学杂志,2005,14(1):59-63.
    89.韩国柱.中草药药代动力学[M].中国医药科技出版社,1990.10
    90.寥世煌.病毒净滴眼液对单纯疱疹性角膜炎疗效研究[J].中国中医眼科杂志,1992,2(1):5
    91.熊继安,卢宏达.香菇多糖注射液对反复呼吸道感染患者免疫功能的影响[J].药物流行病学杂志,2000,9(3):126-127.
    92.裴秀英,许红平,韩梅,阚捷,高乐,俞红,赵素民.参芪防感口服液治疗小儿反复呼吸道感染60例[J].陕西中医,2000,21(8):342.
    93.薛志远.穿心莲穴位注射为主治疗咳嗽30例[J].医药导报,2001,20(1):40
    94.Ajoy Basak,Sam Cooper,Andree G.Roberge.Implication of the proprotein convertases furin,PC5 and PC7 in the cleavage of surface glycoproteins of Hong Kong,Ebola and respiratory syncytial viruses:a comparative analysis with fluorogenic peptides.Biochem.J,2001,353-537
    95.Akbarsha Ma,Muruqaian P.Aspects if the male reproductive toxicity/male antifertility property of andrographolide in albino rats:effect on the testis and the cauda epididymidal spermatozoa.Phytother Res,2000,14(4):432
    96.Bathhuu,J.,Hattori,K.,Takano,F.,Fushiya,S.,Oshiman,K.,and Fujimiya,Y.Suppression of NO production in activated macrophages in vitro and ex vivo by neoandrographolide isolated from Andropgraphis paniculata.Biol.Pharm.Bull.2002(25):1169-1174.
    97.Calabrese C,Berman SH,Babish JG,Ma X,Shinto L,Dorr M,Wells K,Wenner CA,Standish LJ.A phase I trial of andrographolide in HIV positive patients and normal volunteers.Phytother.Res.2000,14(5):333
    98.Calabrese C,et al.A phase I rial of andrographolide in HIV positive patients and normal volunteers.Phytother.Res.2000,14(5):333
    99. Chiou, W.F., Lin, J.J., and chen, C.F. Andrographolide suppresses the expression of inducible nitric oxide synthase in macrophage and restores the vasoconstriction in rat aorta treate with lipopolysaccharide. Br. J. Pharmacol. 1998(125):327-334.
    100.Deng WL,Nie RJ,Liu JY.Phann Bull, 1982, 17(4): 195-198
    101.Wohlleben G, Muller J, Tatsch U, Hambrecht C, Herz U, Renz H, Schmitt E, Moll H, Erb KJ. Influenza A virus infection inhibits the efficient recruitment of Th2 cells into the airways and the developmentof airway eosinophilia. J Immunology, 2003,170:4601-4611
    102.Hiratsuka T. Identification of human -defensins-2 in respiratory tract, plasma and its increase in bacterial pneumoniae. Biochem Biophys Res Commun , 1998, 249(3) :943-947.
    
    103.K.Yamaguchi. Spectral Data Natural Products Vol.I:478, 1970
    104.Kapil A, Koul IB, Banerjee SK, Gupta BD. Antihepatotoxic effcts of majors diterenoid constituents of Andrographis paniculata.Biochem Pharmacol, 1993,46(12):182
    105.Leelarasaee A, Trakulsomboon S, Sittisomwonq N. Undetectable anti-bacterialactibity of Andrographis paniculata. Med Assoc Thal, 1990,73:299
    106.Liunggren HG, Karre K. In search of the missing self: MHC molecules and NK cell recognition . Immunol Today, 1990, 11: 237-244.
    107.Lu, X.L, Zhang, S.L., and Wang, Z.S. Analysis of andrographolide compounds. I. Ion pair high performance liquid chromatographic analysis of andrographolide derivatives. Acta. Pharmaceutica Sinica 1981(16): 182-189.
    108.Prajjol K S Ingha, S Roy, Antim icrobial activity of Andrographis paniculata[J]. J Cell Biochem, 2005, 95 (5): 970-978
    109.Puki A, Saxena R, Saxena R P, Saxena KC, Srivastava V, Tandon JS. Immunostimulant Agents from Andrographis Paniculata. Journal Products, 1993,56(7):995.
    110.R.Ajaya Kumar, K.Sridevi, N.Vijaya Kumar, S.Nanduri, S.Rajagopal Anticancer and immunostimulatory compounds rom Andrographis panivulata[J].Journal of Ethnopharmacology,2004,92:291-295
    111.Rich RR,Flesher TA,Shcarer WT.Clinical immunology.2nded.England:Mosby 2001:785-812.
    112.Shen YC,Eggleston K.andrographolide prevents oxyen radical production by human neutrophils:possible mechanism involved in its anti-inflammatory effect.Br J Pharmacol,2002,135(2):399
    113.Takakuni Matauda,Masanori Kuroyanagi,Chen Pharm Bull1994,42(6)1216-1225
    114.Trinchieri G.Biology of natural killer cells.Adv Immunol,1989,47:189.
    115.Van Schaik SM,Obot N,Enhorning G,Hintz K,Hancock GE,Stack AM,Welliver RC.Role of interferon gamma in the pathogenesis of primary respiratory syncytial virus infection in BALB/c mice[J].J Med Virol,2000,62(2):257-266
    116.W.A Boorsma:Med's lands plant 1896,18:63
    117.Welsh Da,Mason CM.Host defense in respiratoty infections.Med Clin North Am,2001:85:1329-1347.

© 2004-2018 中国地质图书馆版权所有 京ICP备05064691号 京公网安备11010802017129号

地址:北京市海淀区学院路29号 邮编:100083

电话:办公室:(+86 10)66554848;文献借阅、咨询服务、科技查新:66554700