蝙蝠葛碱胶囊的制备工艺及制剂质量研究
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摘要
北豆根为防己科植物蝙蝠葛(Menispermum dauricum DC.)的干燥根茎,为常用中药。其提取物临床上常用于治疗咽喉炎。近年来研究发现北豆根中的蝙蝠葛碱(Dauricine)对高血压和心律失常有较好的治疗作用,因此将蝙蝠葛碱开发为新药蝙蝠葛碱胶囊用于临床具有十分重要的现实意义。
本项研究按照国家《中药、天然药物注册分类及申报资料要求》的标准和《中药新药质量标准的技术要求》,运用现代科技手段,对蝙蝠葛碱的提取、分离纯化工艺、制剂成型性工艺及制剂质量等新药药学部分内容做了较为深入的研究。首先以蝙蝠葛酚性总碱含量为指标,采用酸溶碱沉法筛选出酚性总碱的最佳提取工艺,采用此工艺分别对三批不同来源北豆根药材进行提取分离得到酚性总碱,经测定提取物中酚性总碱含量在73.63%～80.72%之间;继以蝙蝠葛碱含量为指标,在酚性总碱的基础上首次应用萃取法分离纯化得到蝙蝠葛碱,经HPLC法测定蝙蝠葛碱的平均含量为93.22%;最后将该蝙蝠葛碱制备为胶囊剂。同时按《中国药典2005版》和《中药新药质量标准研究的技术要求》对制剂的质量进行了研究,采用高效液相色谱法对三批蝙蝠葛碱胶囊中的蝙蝠葛碱进行含量测定,结果表明:三批制剂蝙蝠葛碱的含量在91.61～95.24%之间。
本实验对蝙蝠葛碱的提取、分离纯化工艺、剂型成型性工艺、制剂质量等新药药学部分做了较为深入的研究,为蝙蝠葛碱胶囊的研制奠定了重要的药学基础。
Rhizoma Menispermi, the Rhizoma of Menispermum dauricum DC is a kind of Traditional Chinese Medicine in common use and Rhizoma Menispermi tablet, the substance extracted from it is clinically used in treating faucitis. Presently, It is found that the Dauricine have eminent curative effect on diseases of hypertension as well as cardiac arrhythmia . For this reason to develop capsules of Dauricine has significant practical importance.
The research is a study on extraction, separation , purification, preparation technology and quality control of capsules of Dauricine by modern techniques, according to the technical requirement in the researches on Traditional Chinese Medicine, the criterion of new Traditional Chinese Medicines in the management of leechdom enrollment .First of all with whole alkaloid of hydroxybenzene as the standard substance , method of Acid-dissolve and alkali-precipitate extraction and preparation are applied on the three different resources of Rhizoma Menispermi, it is found that contest of whole alkaloid of hydroxybenzene of the source drug lie in between percent 73.63 and percent 80.72. Secondly, with extraction method to part Dauricine from whole alkaloid of hydroxybenzene for the first time. Through High performance liquid chromatography the average content of Dauricine is percent 93.22. According to Chinese pharmacopoeia, the technical requirement in the researches on Traditional Chinese Medicine, do research on quality control of capsules of Dauricine, through High performance liquid chromatography, it is found that contest of capsules of Dauricine lie in between percent 91.61 and percent 95.24.
The study is on the techniques of extraction, separation , purification , preparation technology and quality control of gelatin capsule of Dauricine, which establishes an important base for the preparation of new Traditional Chinese Medicines.
本项研究按照国家《中药、天然药物注册分类及申报资料要求》的标准和《中药新药质量标准的技术要求》,运用现代科技手段,对蝙蝠葛碱的提取、分离纯化工艺、制剂成型性工艺及制剂质量等新药药学部分内容做了较为深入的研究。首先以蝙蝠葛酚性总碱含量为指标,采用酸溶碱沉法筛选出酚性总碱的最佳提取工艺,采用此工艺分别对三批不同来源北豆根药材进行提取分离得到酚性总碱,经测定提取物中酚性总碱含量在73.63%～80.72%之间;继以蝙蝠葛碱含量为指标,在酚性总碱的基础上首次应用萃取法分离纯化得到蝙蝠葛碱,经HPLC法测定蝙蝠葛碱的平均含量为93.22%;最后将该蝙蝠葛碱制备为胶囊剂。同时按《中国药典2005版》和《中药新药质量标准研究的技术要求》对制剂的质量进行了研究,采用高效液相色谱法对三批蝙蝠葛碱胶囊中的蝙蝠葛碱进行含量测定,结果表明:三批制剂蝙蝠葛碱的含量在91.61～95.24%之间。
本实验对蝙蝠葛碱的提取、分离纯化工艺、剂型成型性工艺、制剂质量等新药药学部分做了较为深入的研究,为蝙蝠葛碱胶囊的研制奠定了重要的药学基础。
Rhizoma Menispermi, the Rhizoma of Menispermum dauricum DC is a kind of Traditional Chinese Medicine in common use and Rhizoma Menispermi tablet, the substance extracted from it is clinically used in treating faucitis. Presently, It is found that the Dauricine have eminent curative effect on diseases of hypertension as well as cardiac arrhythmia . For this reason to develop capsules of Dauricine has significant practical importance.
The research is a study on extraction, separation , purification, preparation technology and quality control of capsules of Dauricine by modern techniques, according to the technical requirement in the researches on Traditional Chinese Medicine, the criterion of new Traditional Chinese Medicines in the management of leechdom enrollment .First of all with whole alkaloid of hydroxybenzene as the standard substance , method of Acid-dissolve and alkali-precipitate extraction and preparation are applied on the three different resources of Rhizoma Menispermi, it is found that contest of whole alkaloid of hydroxybenzene of the source drug lie in between percent 73.63 and percent 80.72. Secondly, with extraction method to part Dauricine from whole alkaloid of hydroxybenzene for the first time. Through High performance liquid chromatography the average content of Dauricine is percent 93.22. According to Chinese pharmacopoeia, the technical requirement in the researches on Traditional Chinese Medicine, do research on quality control of capsules of Dauricine, through High performance liquid chromatography, it is found that contest of capsules of Dauricine lie in between percent 91.61 and percent 95.24.
The study is on the techniques of extraction, separation , purification , preparation technology and quality control of gelatin capsule of Dauricine, which establishes an important base for the preparation of new Traditional Chinese Medicines.
引文
[1]曲戈霞 五种活血化瘀药的筛选研究沈阳药学院学报1989,6(1):16
[2]郑晓敏,杨官娥,郑佳林 山豆根类生药研究进展 山西职工医学院学报2001,11(3):2
[3]陈淑娟RP-HPLC法对不同产地蝙蝠葛几种主要生物碱的测定药物分析杂志1999,19(2):79-81
[4]张彦周,冯义柏,黄恺,等.蝙蝠葛碱对心肌去甲肾上腺素出胞释放的影响[J].中国药理学通报,1998,14(1):45-47.
[5]朱接全,潘铁成,曾繁典,等.蝙蝠葛碱和利多艮因对人心房和兔房室结细胞动作电位及窦房结功能的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,1990,4(4):244.
[6]郭东林,夏敬生,顾世芬,等.蝙蝠葛碱对奎尼丁诱发的豚鼠乳头肌早后去极化及触发活动的作用[J].中国药理学与毒理学杂志,1998,12(4):253-255.
[7]XIA J ing-Sheng,TU Hong,L I Zhen,et al.Dauricine supp ressedCsCI-induced early afterdepolarizations and triggered arrhythmias in rabbit heart in vivo[J].Acta Pharmacologica Sinica,1999,20(6):513-516.
[8]郝铁来,曹剑英,张 辉,等.蝙蝠葛碱抗缺血/再灌注性室颤及其机制[J].中国医院药学杂志,2002,22(3):142-143.
[9]张彦周,冯义柏,黄恺,等.蝙蝠葛碱对豚鼠缺氧心脏释放去甲肾上腺素量的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,1999,13(2):123-126.
[10]孙玉斌,关福兰,金万宝.蝙蝠葛碱对麻醉犬心肌耗氧量的影响[J].中国医科大学学报,1995,24(3):236-239.
[11]罗湘,曾繁典,胡崇家.蝙蝠葛碱在体外对轻度修饰的脂蛋白诱导人单核细胞血小板源生长因子β蛋白量的影响[J],中国药理学与毒理学杂志,1996,10(2):123-126.
[12]罗湘,曾繁典,胡崇家.蝙蝠葛碱对内皮素诱导培养的平滑肌细胞增殖的影响[J].中国循环杂志,1997,12(3):215-217.
[13]郭小庄主编 中国中草药大辞典162页天津:天津科技翻译出版公司
[14]杜佐化等 蝙幅葛碱的抗炎镇痛作用中国药理学报1986,7(5):419-422
[15]康铁邦,黄才,梁念慈.5种抗血小板药对大鼠肝酪蛋白激酶Ⅱ的影响[J].中国 药理学通报,1996,12(3):254-257.
[16]刘俊田.山豆根碱对实验性血栓形成的影响[J].西安医科大学学报,1991,12(1):33-35.
[17]曾国钱.蝙蝠葛碱抑制卡西霉素刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放血小板活化因子[J].中国药理学通报,1990,11(4):346-350.
[18]鲁有明.蝙蝠葛碱对高K+引起突起Ca2+内流的影响[J].中国药理学通报,1991,7(2):141.
[19]刁航,唐旭东,周克元.蝙蝠葛碱和胡椒碱对两株鼻咽癌细胞增殖的影响[J].广东医学院学报,2003,21(1):16-17.
[20]崔燎,潘毅生.粉防己碱和蝙蝠葛碱对人白血病细胞株HL60和K562的生长抑制作用[J].中国药理学通报,1995,
[21]何琪杨,盂凡宏,张鸿卿.粉防己碱和蝙蝠葛碱减低抗三尖杉酯碱的人白血病HL60细胞对阿霉素的抗性[J].中国药理学报,1996,17(2):179-181.
[22]李建华,秦凤绮,杨佩满.蝙蝠葛碱逆转K562/ADM细胞多耐药性的研究[J].大连医科大学学报,2002,24(2):94-96.
[23]郑晓敏,杨官娥,郑佳林.山豆根类生药研究进展[J].山西职工医学院学报,2001,11(1):59-61.
[24]陈淑娟,杨毅梅,刘奕明,等.蝙蝠葛碱大鼠体内药物代谢动力学研究[J].中国药理学通报,2001,17(2):225-233.
[25]VerpoorteR,NiessenWMA.Liquidchromatographyeou-pledwithmassspectrometryin theanalysisofalkaloids[J].PhytochemAnal,1994,5(5):217-232.
[26]PoplM,FahnrichJ,TarV.Chromatographicanalysisofal-kaloids[M].NewYork:Marcel Dekker,1990.
[27]KabulovBD,YakonovALD.High-performanceliquidchr-omatographyofalkaloids[J].ChemNatCompd(Engl.Trans),1992,27(5):521-540.
[28]傅应华,韩伟东,徐宏祥.高效液相色谱法同时测定马钱子中士的宁和马钱子碱的含量[J].中国药科大学学报,1998,29(4):281-283.
[29]GolkiewiczW,KuczynskiJ.High-performanceliquidchro-matographyofsomealkaloid sonunmodifiedsilicagel with a queous organics olventmixtures[J].JChromatogrA,1994,686(1):85-91.
[30]周桂生,刘乃强,孙信功 硅胶柱准离子交换色谱法测定马钱子中士的宁的含量[J].中国药学杂志,1997,32(9):553-555.
[31]刘乃强,周桂生,张新琴用正交试验法对硅胶柱准离子交换色谱溶剂系统的研究[J].中国药学杂志,1997,32(1):31-33.
[32]魏清芳,李康乐,叶青正相硅胶反相洗脱色谱法测定复方黄连素注射液的含量[J].中国药科大学学报,1996,27(9):534-536.
[33]Haberlein,TschierschKP.Effectsofsurfacestructureofreversedphasesontheseparatio nofalkaloids by HPLC[J].Pharmazie,1994,49(4):769-775.
[34]McCalleyDV.Revcrsed-phasesHPLCofbasicsamples-anupdate[J].LC-GCAsiaPacifi c,1999,2(3):37-44.
[35]朱龙,封满良,万秀琴 吗啡和海洛因等生物碱的高效液相色谱化学光测定[J].分析化学,1996,24(11):1295-1297.
[36]朱丹妮,谭丰萍,高山林HPLC-ELSD分析测定贝母类药材中生物碱[J].药物分析杂志,2000,20(2):87-90.
[37]王智民 现代中药的化学研究方法[J].中国中药杂志,2000,25(2):70-72.
[38]ChuangWC,YoungDS,LiuLK.Liquidchromatographic-electrospraymassspectromctr icanalysisofcoptidisrhizoma[J].JchromatogrA,1996,755(1):19-26.
[39]李晓海,周同惠HPLC法在生物碱分析中的研究进展 中草药2002.33(4):368-371
[40]潘锡平,胡崇家 咸宁产蝙蝠葛生物碱成分分析.中药材.1991.14(12):31-32
[41]王栋,刘岩,李红波正交试验法优选北豆根总生物碱的提取工艺 哈尔滨商业大学学报(自然科学版)2005.2(21):19-20
[42]张月江,刘惠军,赵淑明北豆根生物碱提取工艺筛选 时珍国医国药 2002.7(10):594
[43]周珏 北豆根中成分分离及含量测定方法的研究甘肃中医2003,16(12):8-10
[44]杜小曦 中药新药制备工艺研究的技术要求及问题分析 中国药学杂志2001,26(12):,802-80
[2]郑晓敏,杨官娥,郑佳林 山豆根类生药研究进展 山西职工医学院学报2001,11(3):2
[3]陈淑娟RP-HPLC法对不同产地蝙蝠葛几种主要生物碱的测定药物分析杂志1999,19(2):79-81
[4]张彦周,冯义柏,黄恺,等.蝙蝠葛碱对心肌去甲肾上腺素出胞释放的影响[J].中国药理学通报,1998,14(1):45-47.
[5]朱接全,潘铁成,曾繁典,等.蝙蝠葛碱和利多艮因对人心房和兔房室结细胞动作电位及窦房结功能的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,1990,4(4):244.
[6]郭东林,夏敬生,顾世芬,等.蝙蝠葛碱对奎尼丁诱发的豚鼠乳头肌早后去极化及触发活动的作用[J].中国药理学与毒理学杂志,1998,12(4):253-255.
[7]XIA J ing-Sheng,TU Hong,L I Zhen,et al.Dauricine supp ressedCsCI-induced early afterdepolarizations and triggered arrhythmias in rabbit heart in vivo[J].Acta Pharmacologica Sinica,1999,20(6):513-516.
[8]郝铁来,曹剑英,张 辉,等.蝙蝠葛碱抗缺血/再灌注性室颤及其机制[J].中国医院药学杂志,2002,22(3):142-143.
[9]张彦周,冯义柏,黄恺,等.蝙蝠葛碱对豚鼠缺氧心脏释放去甲肾上腺素量的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,1999,13(2):123-126.
[10]孙玉斌,关福兰,金万宝.蝙蝠葛碱对麻醉犬心肌耗氧量的影响[J].中国医科大学学报,1995,24(3):236-239.
[11]罗湘,曾繁典,胡崇家.蝙蝠葛碱在体外对轻度修饰的脂蛋白诱导人单核细胞血小板源生长因子β蛋白量的影响[J],中国药理学与毒理学杂志,1996,10(2):123-126.
[12]罗湘,曾繁典,胡崇家.蝙蝠葛碱对内皮素诱导培养的平滑肌细胞增殖的影响[J].中国循环杂志,1997,12(3):215-217.
[13]郭小庄主编 中国中草药大辞典162页天津:天津科技翻译出版公司
[14]杜佐化等 蝙幅葛碱的抗炎镇痛作用中国药理学报1986,7(5):419-422
[15]康铁邦,黄才,梁念慈.5种抗血小板药对大鼠肝酪蛋白激酶Ⅱ的影响[J].中国 药理学通报,1996,12(3):254-257.
[16]刘俊田.山豆根碱对实验性血栓形成的影响[J].西安医科大学学报,1991,12(1):33-35.
[17]曾国钱.蝙蝠葛碱抑制卡西霉素刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放血小板活化因子[J].中国药理学通报,1990,11(4):346-350.
[18]鲁有明.蝙蝠葛碱对高K+引起突起Ca2+内流的影响[J].中国药理学通报,1991,7(2):141.
[19]刁航,唐旭东,周克元.蝙蝠葛碱和胡椒碱对两株鼻咽癌细胞增殖的影响[J].广东医学院学报,2003,21(1):16-17.
[20]崔燎,潘毅生.粉防己碱和蝙蝠葛碱对人白血病细胞株HL60和K562的生长抑制作用[J].中国药理学通报,1995,
[21]何琪杨,盂凡宏,张鸿卿.粉防己碱和蝙蝠葛碱减低抗三尖杉酯碱的人白血病HL60细胞对阿霉素的抗性[J].中国药理学报,1996,17(2):179-181.
[22]李建华,秦凤绮,杨佩满.蝙蝠葛碱逆转K562/ADM细胞多耐药性的研究[J].大连医科大学学报,2002,24(2):94-96.
[23]郑晓敏,杨官娥,郑佳林.山豆根类生药研究进展[J].山西职工医学院学报,2001,11(1):59-61.
[24]陈淑娟,杨毅梅,刘奕明,等.蝙蝠葛碱大鼠体内药物代谢动力学研究[J].中国药理学通报,2001,17(2):225-233.
[25]VerpoorteR,NiessenWMA.Liquidchromatographyeou-pledwithmassspectrometryin theanalysisofalkaloids[J].PhytochemAnal,1994,5(5):217-232.
[26]PoplM,FahnrichJ,TarV.Chromatographicanalysisofal-kaloids[M].NewYork:Marcel Dekker,1990.
[27]KabulovBD,YakonovALD.High-performanceliquidchr-omatographyofalkaloids[J].ChemNatCompd(Engl.Trans),1992,27(5):521-540.
[28]傅应华,韩伟东,徐宏祥.高效液相色谱法同时测定马钱子中士的宁和马钱子碱的含量[J].中国药科大学学报,1998,29(4):281-283.
[29]GolkiewiczW,KuczynskiJ.High-performanceliquidchro-matographyofsomealkaloid sonunmodifiedsilicagel with a queous organics olventmixtures[J].JChromatogrA,1994,686(1):85-91.
[30]周桂生,刘乃强,孙信功 硅胶柱准离子交换色谱法测定马钱子中士的宁的含量[J].中国药学杂志,1997,32(9):553-555.
[31]刘乃强,周桂生,张新琴用正交试验法对硅胶柱准离子交换色谱溶剂系统的研究[J].中国药学杂志,1997,32(1):31-33.
[32]魏清芳,李康乐,叶青正相硅胶反相洗脱色谱法测定复方黄连素注射液的含量[J].中国药科大学学报,1996,27(9):534-536.
[33]Haberlein,TschierschKP.Effectsofsurfacestructureofreversedphasesontheseparatio nofalkaloids by HPLC[J].Pharmazie,1994,49(4):769-775.
[34]McCalleyDV.Revcrsed-phasesHPLCofbasicsamples-anupdate[J].LC-GCAsiaPacifi c,1999,2(3):37-44.
[35]朱龙,封满良,万秀琴 吗啡和海洛因等生物碱的高效液相色谱化学光测定[J].分析化学,1996,24(11):1295-1297.
[36]朱丹妮,谭丰萍,高山林HPLC-ELSD分析测定贝母类药材中生物碱[J].药物分析杂志,2000,20(2):87-90.
[37]王智民 现代中药的化学研究方法[J].中国中药杂志,2000,25(2):70-72.
[38]ChuangWC,YoungDS,LiuLK.Liquidchromatographic-electrospraymassspectromctr icanalysisofcoptidisrhizoma[J].JchromatogrA,1996,755(1):19-26.
[39]李晓海,周同惠HPLC法在生物碱分析中的研究进展 中草药2002.33(4):368-371
[40]潘锡平,胡崇家 咸宁产蝙蝠葛生物碱成分分析.中药材.1991.14(12):31-32
[41]王栋,刘岩,李红波正交试验法优选北豆根总生物碱的提取工艺 哈尔滨商业大学学报(自然科学版)2005.2(21):19-20
[42]张月江,刘惠军,赵淑明北豆根生物碱提取工艺筛选 时珍国医国药 2002.7(10):594
[43]周珏 北豆根中成分分离及含量测定方法的研究甘肃中医2003,16(12):8-10
[44]杜小曦 中药新药制备工艺研究的技术要求及问题分析 中国药学杂志2001,26(12):,802-80