鸦胆子内生菌的生物多样性及其抑菌活性初探
详细信息    本馆镜像全文|  推荐本文 |  |   获取CNKI官网全文
摘要
前人研究表明,很多传统中药的内生菌能产生与宿主相同或相近的有效成分。为了更好的保护野生中药资源,近年来许多学者开始从药用植物内生菌中筛选活性菌株或活性代谢产物、利用微生物发酵技术实施工业化生产天然药物。
     鸦胆子是常用的清热解毒,截疟止痢的良药,来源于苦木科鸦胆子属植物Brucea javanica(L.)Merr.的干燥成熟果实,其味苦、性寒,具有较好的抗菌、杀虫功效。现代药理研究显示,鸦胆子油乳因为能有效抑制幽门螺杆菌在临床上用于抗消化道溃疡而鸦胆子油的乙醇提取物对金黄色葡萄球菌等人类致病菌较强的抑制作用。
     本研究选择传统中药鸦胆子为研究对象,对其内生菌的种群结构特征、次生代谢产物的抗菌活性进行考察,开发鸦胆子内生菌的药用价值,对解决鸦胆子原料紧缺的状态、保护现有的野生资源和传统中药的二次开发具有重要的意义。本文的主要研究内容如下:
     1国内外研究综述
     通过查阅大量相关的国内外文献,对其进行归纳整理。综述中主要分析了鸦胆子在化学成分、药理作用、制剂研究、临床应用、资源等方面的研究进展,重点讨论了药用植物内生菌的生物多样性、活性代谢产物的筛选尤其是抑菌作用和拮抗致病菌方面的研究近况。
     2鸦胆子内生菌的初步研究
     鸦胆子内生菌的多样性研究——对鸦胆子不同部位的内生菌进行分离、纯化、鉴定,发现鸦胆子内生菌的组成具有多样性。
     本实验共分离得到151株鸦胆子内生菌,其中内生真菌92株,内生细菌59株。其中从叶中分离的内生真菌数目最多,茎中的内生细菌最多,果实中仅有1株内生真菌和5株内生细菌,且无专属性。
     鸦胆子内生真菌的多样性指数H=2.65,表明其多样性相对较高。内生真菌在鸦胆子植株内的分布既有广泛性又有组织专属性,在不同的组织内的内生菌种类差别明显,同属真菌在不同组织的分布情况差别也较大。92株内生真菌,分别归属于20个属。59株内生细菌包含球菌53株(有荚膜类14株,无荚膜类39株)、杆菌4株、弧菌2株。
     鸦胆子内生菌的抑菌活性——以4种人类致病菌为靶标菌,用滤纸片法考察鸦胆子内生菌发酵液的抑菌活性,共筛选出45株有活性的菌株,其中12株有活性较强,余者对4种靶标菌的抑菌圈均在8mm以下。其中,来自镰孢霉属的7株内生真菌对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌、2株内生细菌对金黄色葡萄球菌、4株对枯草芽孢杆菌的抑制作用较明显。
     鸦胆子的组织培养研究——在采用组织块法分离鸦胆子内生菌的过程中,同时以鸦胆子茎段为外植体,进行了鸦胆子离体培养试验。探讨了基本培养探讨基本培养基和外源激素对其离体再生的初代培养、继代增殖、生根培养的影响并进行移栽试验,完善了前人对鸦胆子组织培养的研究。鸦胆子的不定芽增殖、壮苗、生根的最佳培养基分别为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L11,1/2MS+香蕉汁20g·L-1;1/2MS+IBA0.1mg·L-1+NAA0.1mg·L-1。炼苗基质为细沙时,成活率最高。
It's shown in the relevant literature that endophytes in many traditional Chinese medicine can produce the same or similar active ingredients with their hosts. In order to better protect and develop the limited wild Chinese medicine resources, many scholars screened many effective strains and the active metabolite to bmicroorganism in special ecological environment has close relations with special secondary metabolites, which can be applied in the microbial fermentation technology to the implementation of the industrialized production of natural drugs.
     Brucea javanica is the seeds of the plant Brucea javanica(L.)Merr. which belongs to Brucea of Simaroubaceae. It's a common tradional Qingrejiedu drugs, and it also showed good antibacterial, insecticides efficacy. Pharmacological studies have shown that Brucea javanica oil emulsion was significantly inhibited Helicobacter pylori,therefore it was often used as clinical anti-petic ulcer drugs. The the ethanol extracta of its oil also showed strong inhibition of Staphylococcus aureus and other human pathogens.
     Based on the theories above, searching the population structure of endophytes in Brucea javanica and their antibacterial activity of secondary metabolites is of great significance to explore new drug source and the secondary development of traditional Chinese medicine.
     The paper includes several parts:
     1. The review of domestic and foreign literature
     After reviewing lots of relevant literature, authors summarized the general research situation of Brucea javanica on the chemical composition, pharmacological effects, clinical application of fromulations and resources. Then we turned to the recent progress of medicinal endophyte,including the biological diversity of endophytes in medicinal plant, screening of the active metabolite,especially antibacterial and antagonism of pathogens.
     2.The preliminary studies on endophytes of Brucea javanica(L.)Merr.
     Studies on the biodiversity of endophytes from Brucea javanica:By separating and purifying endophytes from different organs of Brucea javanica again and again,151strains of endophytes were isolated, including92strains of fungi and59strains of endophytic bacteria. The biodiversity is obvious both in the composition of the endophytes species and the viarious distribution in different ogans. The largest number of endophytic fungi,bacteria and actinomycetes were respectively from leaves,sterm and inflorescence. The species of endophyte in fruit is simple and without specificity.
     The diversity index of endophytic fungi H reaches2.65, indicating a high variety of strains relatively. The distribution of endophytic fungi showed both extensity and the specificity in different tissues from Brucea javanica.Simultaneously, the types of endophytes varied in different plant organs, and the same endogenous strain also had clear differences in distribution within different organizations.92endophytic fungi were morphologically identified belonging to20genera.59endophytic bacteria containing53cocci (14with capsule,39without capsule)4bacillus and2vibrio.
     Antibacterial experiment of endophyte from Brucea javanica:To investigate the antibacterial activity of the endophytes'fermentation broth, we chosed4kinds of human pathogens as target bacteria, using the filter paper method, screened a total of45active strains, including12showed strong activity.
     Tissue culture and rapid propapagation research:When using tissue explant method to isolate the endophyte with the sagments of Brucea javanica as explants, like sterm,leaves and inflorescence,we also studied the effects of minimal medium and plant growth regulators on the tissue culture and rapid propapagation. The result showed that the best formula of proliferation, robust seedling and rhizogenesis were MS+6-BA1.0mg-L-1+IBA0.1mg-L-1,1/2MS+banana juice20g-L-1,1/2MS+IBA0.1mg-L-1+NAA0.1mg-L-1, respectively. The survival rate reached the top when using sands as culture medium.
引文
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(2010年版)[S].北京:化学工业出版社,2010.
    [2]中国科学院中国植物志编辑委员会主编.中国植物志[M].北京:科学出版社.1983(第七十六卷第一分卷):10.
    [3]丁晨旭,索有瑞.中药鸦胆子化学成分及药理学研究进展[J].中成药.2006,28(1):117-120.
    [4]曾宪儒,曾涛,韩美丽,等.鸦胆子的组织培养与快速繁殖[J].植物生理学通讯.2008,4(6):1158.
    [5]丘明明,王受武,韦荣芳,等.鸦胆子治疗尖锐湿疣活性成分的提取分离[J].广西中医学院学报,1999,16(4).
    [6]袁佩英.鸦胆子乳剂抑制幽门螺杆菌的临床研究[J].山西中医,1992,8(6):20-25.
    [7]陈美兰,黄璐琦,欧阳少华,等.植物内生菌对道地药材形成的影响[J].中药研究与开发,2006,13(9):40-42.
    [8]谢植干.杀虫植物鸦胆子组织培养和生物活性的初步研究[D].南宁:广西大学,2008:33.
    [9]李克烈,王荣香,陈伟,等.鸦胆子组织培养技术研究[J].热带农业工程.2011,35(1):31-33.
    [10]李林峰.盆栽鸦胆子氮磷钾肥料配方的研究.安徽农业科学[J].2009,37(9):4091-4093,4095.
    [11]李向宏,何凡,李宏,等.海南鸦胆子栽培技术初报[J].园艺文摘.2009,25(1):42-45.
    [12]杨正奇,谢慧嫒,王金锐,等.鸦胆子抗肿瘤活性成分的化学研究[J].天然产物研究与开发,1996,8(2):35-39.
    [13]杨正奇,谢慧媛,王金锐,等.鸦胆子抗肿瘤活性成分的化学研究(Ⅱ)[J].沈阳药科大学学报,1997,14(1):4647.
    [14]Cuendet M, Gills JJ, Pezzuto JM. Brusatol-induced HL-60 cell differentiation involves NF-kappa B activation [J].Cancer Letters 2004,206(1):43-50.
    [15]Cuendet M, Pezzuto JM. Antitumor activity of bruceantin: An old drug with new promise [J]. Journal of Natural Products,2004,67:269-272.
    [16]饶艳英.中药鸦胆子醇提活性物——鸦胆因D的研究[D].贵阳:贵州师范大学,2008.
    [17]张正坤,沈建国,谢荔岩,等.鸦胆子素D对烟草抗烟草花叶病毒的诱导抗性和保护作用[J].科技导报,2008,26(8):31-36.
    [18]李忠,王晓丽.鸦胆子的化学成分[J].天然产物研究与开发,2006,18:60-61,56.
    [19]丁怡,唐星.柱前衍生HPLC法测定鸦胆子油中的脂肪酸含量[J].中草药,2004,35(9):988-991.
    [20]项琪.周莉玲.姚崇舜,等.HPLC法测定鸦胆子油中脂肪酸[J].中草药,2006(3):383-385.
    [21]李福星,张彬,周武,等.几种植物种子油脂的脂肪酸组成研究[J].中国油脂,2005,30(10):74-75.
    [22]张彬,周武,邓丹雯.超临界C02萃取鸦胆子油研究[J].食品科学,2004,25(6):136.
    [23]杨峰,于江,田玉峰,等.鸦胆子的研究概况[J].黑龙江医药,1998,11(2):112-113.
    [24]刘红.鸦胆子治疗扁平疣[J].护理研究,2007,21(17):1533.
    [25]马力,张月宁.鸦胆子油乳诱导肝癌细胞凋亡及对相关基因表达的影响[J].世界华人消化杂志,2004,12(3):559-562.
    [26]尹香菊,栾和芝,安春丽,等.鸦胆子油乳对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其作用机制[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2008.15(4):393-395.
    [28]李民,刘海,从义滋,等.鸦胆子油乳剂对艾氏腹水癌细胞杀伤动力学研究[J].肿瘤,1984,(4):241.
    [29]姚崇舜.鸦胆子油抗肿瘤的研究[J].沈阳药学院学报,1979,11:1.
    [30]刘悦,王禾,符庆吉,等.鸦胆子油乳对膀胱癌影响的实验研究[J].中华泌尿外科杂志,2001,26(6):336-338.
    [31]吕峰,王禾,秦卫军.鸦胆子油乳诱导膀胱癌细胞J82凋亡及其机制的初步研究[J].中国康复理论与实践,2007,13(5):432-433.
    [32]孙概,魏桂珍,王亚湘.鸦胆子油乳加化疗治疗晚期肺癌疗效观察[J].中国中西医结合杂志,2004,33(11):573-575.
    [33]邢海燕,薛惠宁,蒋可.鸦胆子油乳联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌39例——附单纯化疗对照组30例[J].辽宁中医杂志,2004,19(1):78.
    [34]李笑弓,南勋义,党建功.鸦胆子油静脉乳对人肾癌细胞增殖作用的初步研究[J].上海医学,2001,24(8):481-483.
    [35]曾庆华,汤恢焕,李宜雄.鸦胆子油乳剂对大肠癌细胞影响的实验研究[J].中国现代医学杂志,2003,13(15):19.
    [36]张澎田,于中麟,王宝恩,等.植物油乳治疗胃溃疡的实验与临床研究.中华消化杂志,1997,17(1):23-25.
    [37]马汉铭,杜平华.中药材鸦胆子对幽门螺杆菌体外抗菌作用的研究[J].数理医药学杂志,2002,15(2):158.
    [38]袁佩英.鸦胆子乳剂治疗消化道溃疡的临床分析[J].中国新药杂志,1993,2(2):43-44.
    [39]贾勇士,吴树强,吕世良,等.鸦胆子油乳加放射治疗中晚期食管癌[J].中国中药杂志,2008,17(33):2174-2176.
    [40]范晓强,周锡建,李相勇,等.鸦胆子油乳注射液联合鸦胆子油乳注射液联合mFOLFOX方案一线治疗老年进展期胃癌的研究[J].现代中西医结合杂志,2008,17(27):4229-4230,4233.
    [41]于月英,汪尚晏.鸦胆子仁外敷治疗瘢痕患者的护理[J].护理学杂志,2007,22(20):56.
    [42]沈雁,李叶扬,唐毅,等.MTT法测定鸦胆子对人瘢痕成纤维细胞生长的影响[J].中华整形外科杂志,2001,17(3):191.
    [43]黄亚东,赵文,苏志坚,等.碱性成纤维细胞生长因子与鸦胆子乳膏联合应用对兔背创伤愈合的 修复作用[J].中国组织工程研究与临床康复,2007(02):390-392,,396.
    [44]余建军,罗少军,汤少明,等.鸦胆子油静脉乳剂对病理性瘢痕成纤维细胞增殖与凋亡的影响[J].实用医学杂志,2009,25(17):2814-2817.
    [45]于晓光,王继芬,高旭.高脂血症沙鼠卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性变化及鸦胆子油乳剂降脂作用的研究[J].中国老年学杂志,1997,11(3):46-48.
    [46]杨丹.高脂血症沙鼠组织中某些脂酶活性的变化及鸦胆子油乳剂降脂作用[J].哈尔滨医科大学学报,1994,11(5):46-48.
    [47]刘玉玲,张索萍,李小妹.鸦胆子乳膏治疗外阴菜花型尖锐湿疣临床观察[J].河南医科大学学报,2002,2:133-134.
    [46]马汉铭,杜平华.中药材鸦胆子对幽门螺杆菌体外抗菌作用的研究[J].数理医药学杂志,2002,15(2):158.
    [47]林宏英,吴建梅,张文生.鸦胆子油的研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2006,12(4):65-68.
    [48]何明.鸦胆子外用致过敏性休克和药疹1例[J].西南国防医药,2010,20(11):1190-1190.
    [49]孙蓉,杨倩.基于功效和物质基础的鸦胆子毒性研究进展[J].中国药物警戒,2010,7(3):59-161.
    [50]张旭,乔继英,张荣,等.鸦胆子、黄连、白头翁和槟榔对人芽囊原虫体外杀虫作用的比较[J].热带医学杂志,2007,7(11):1044-1047.
    [51]商显坤,韦德卫,周兴华,等.鸦胆子提取物对烟蚜的生物活性研究西南农业学报,2008,21(6):1591-1594.
    [52]覃柳燕.植物提取物对褐飞虱生物活性筛选及作用机理初步研究[D].南宁:广西大学,2005.
    [53]骆焱平,卢远倩,符悦冠.鸦胆子提取物对斜纹夜蛾拒食作用的初步研究[J].现代农药,2009,(2):44-47,53.
    [54]曾涛,黎柳峰,韦德卫,等.鸦胆子提取物对菜青虫幼虫取食和生长发育的影响[J].农药,2006(03):196-198.
    [55]沈建国.两种药用植物对植物病毒及三种介体昆虫的生物活性[D].福州:福建农林大学,2005.
    [56]郭良栋.内生真菌研究进展[J].菌物系统,2001,20(1):148-152.
    [57]黄宝康,秦路平.药用植物内生菌的生物多样性及活性成分[J].药学实践杂志,2006,24(4):193-196.
    [58]何劲,刘蕴哲,康冀川.植物内生菌及其在农业和医学上的用途[J].贵州农业科学,2006,34(3):113-115.
    [59]Seierle A,Stobel G, Seierle D.Taxol and taxane production by Taxomyces andreanae, an endophytic fungus of pacific yew(Taxus brevifolia)[J].Science,1993,260:214.
    [60]崔宇,郑春英,刘松梅,吴丹.药用植物内生菌研究概况[J].黑龙江医药,2007,20(1):41-44.
    [61]李海燕,刘丽.产生物活性物质植物内生菌的研究进展[J].天然产物研究与开发,2004,16(5):482-485.
    [62]陈美兰,黄璐琦,欧阳少华,等.植物内生菌对道地药材形成的影响[J].中药研究与开发,2006,13(9):40-42.
    [63]黄宝康,秦路平.药用植物内生菌的生物多样性及活性成分[J].药学实践杂志,2006,24(4):193-196.
    [64]陈苹,戴好富,解修超,等.海南粗榧内生真菌的分离与初步鉴定[J].微生物学通报,2008,35(9):1455-1460.
    [65]邹文欣,谭仁祥.植物内生菌研究新进展[J].植物学报,2001,43(9):881-892.
    [66]华永丽,欧阳少华,陈美兰,等.药用植物内生真菌研究进展[J].世界科学技术:中医药现代化,2008,10(4):105-111.
    [67]胡克兴.石斛属药用植物内生真菌多样性研究[D].北京:中国协和医科大学,2008.
    [68]李长田,李玉,方浙明,等.东北红豆杉内生真菌的多样性[J].吉林农业大学学报,2004,6:612-615.
    [69]陈晖奇,徐焰平,谢丽华,等.茶树内生真菌的分离及其在寄主组织中的分布特征[J].莱阳农学院学报,2006,23(4):250-254.
    [70]尹建文,陈有为,杨丽源,等.芦荟植物内生真菌的研究I.内生真菌的分离及鉴定[J].微生物学杂志,2004,24(1):25-26.
    [71]杜少康,陈双林,林岱,等.银杏叶部内生真菌多样性的研究[J].菌物学报,2009,28(4):504-511.
    [72]Strobel G A. Endophytes as sources of bioactive products[J].Microbes and Infection,2003,5(6): 535-544.
    [73]余波,赵力,曹建波,等.植物内生菌活性物质研究进展[J].安徽农学通报,2008,14(3):31-32,84.
    [74]曾松荣,徐倩雯,叶保童,等.虎杖内生真菌的分离及其产抗菌活性物质的筛选[J].菌物研究,2005,3(2):24-26.
    [75]Strobel G A,Miller R V,Miller C,et al.Cryptocandin,a potent antimycotic from the endophytic fugus Cryptosporiosis cf.quercina [J].Microbiology,1999,145:1919-1926.
    [76]刘建玲,陈宝宝,雷毅,等.半夏产生物碱内生菌的分离及其抑菌活性的研究[J].西北植物学报,2010,30(4):832-837.
    [77]戴文君,戴好富,陈苹,等.海南粗榧内生真菌抗肿瘤抗菌活性的筛选[J].微生物学通报,2009,36(8):1217-1221.
    [78]周涛,肖亚中,李妍妍,等.茜草内生菌的分离鉴定及其抗菌活性物质研究[J].生物学杂志,2007,24(2):9-12.
    [79]徐文涛,翟梅枝,王伟,等.核桃内生菌研究Ⅱ核桃内生菌G8发酵产物的抑菌活性研究[J].西北农业学报,2008,17(1):82-87.
    [80]何红,蔡学清.内生菌BS-2菌株的抗菌蛋白及其防病作用[J].植物病理学报,2003,33(4):373-378.
    [81]刘杰凤,韩寒泳,张进凤,等.茄类内生菌的分离及拮抗细菌的筛选[J].安徽农业科学,37(3):1160-1162.
    [82]陈志敏,田小曼,吴云锋.火棘内生真菌的分离及抑菌活性测定[J].西北农业学报,2010,19(1):64-67.
    [83]曹鹏,朱永兴,韦革宏.宁夏野生苦豆子中内生菌的分离及拮抗细菌的筛选[J].安徽农业科学,2010,38(24):13098-13099.
    [84]周晓坤,陈钧,韩邦兴,等.水菖蒲内生菌分离与抗菌活性菌株筛选[J].食品科学,2010,31(9):211-215.
    [85]王利国,潘超美.抗肿瘤药用植物及其内生菌活性代谢产物研究进展[J].广州中医药大学学报,2008,25(2):183-186.
    [86]郭波,李海燕,张玲琪.一种产长春碱真菌的分离[J].云南大学学报(自然科学版),1998,20(3):214.
    [87]刘吉华,余伯阳.喜树内生真菌的分离及其抗肿瘤活性代谢产物的筛选方法[J].植物资源与环境学报,2004,13(4):6.
    [88]杨显志,郭仕平,张玲琪,等.鬼臼类植物产鬼臼毒素内生真菌的筛选.天然产物研究与开发,2003,15(5):419-422.
    [89]王军,林永成,吴雄宇,等.从南海红树内生真菌No.2533分离出新的异香豆素[J].中山大学学报(自然科学版),2001,40(1):127-128.
    [90]周松林,陈双林,谭光宏,等.内生真菌天然活性产物的研究进展[J].菌物研究,2008,4(6):1672-3538.
    [91]陈传文,孙前光,朱军,等.三种药用植物内生菌的分离及其抗肿瘤活性菌株的筛选[J].微生物学通报,2010,37(10):1462-1466.
    [92]张永杰,王建锋,黄耀坚,等.4种裸子植物内生真菌抗肿瘤菌株的筛选[J].厦门大学学报(自然科学版),2002,41(6):804.
    [93]张玲琪,王海昆,邵华,等.美登木内生真菌产抗癌物质球毛壳甲素的分离及鉴定[J].中国药学杂志,2002,37(3):172.
    [94]Strobel G A.Rainforest endophytes and bioactive products[J].Critical Reviews in Biotechnoogyl, 2002,22(4):315-330.
    [95]霍娟,陈双林.杜仲内生真菌抗氧化活性[J].南昌大学学报(理科版),2004,28(3):270.
    [96]周生亮,陈双林.薯蓣内生真菌抗氧化活性的初步研究[J].微生物学杂志,2006,26(1):40-43.
    [97]邹文欣,谭仁祥.植物内生菌的生物与次生产物多样性及其潜在应用、李承森主编,植物科学进展(第二卷),1999:183-190.
    [98]乔卿梅,程茂高,王长林.药用植物内生菌在天然药物开发中的应用.郑州牧业工程高等专科学校学报,2008,28(1):24-27.
    [99]唐明娟,郭顺星.内生真菌对台湾金线莲栽培及酶活性的影响[J].中国中药杂志,2004,29(6):517-520.
    [100]俞婕,赵凯鹏,董飞,等.野生铁皮石斛内生菌的分离及促生作用研究[J].现代农业科技,2010,9:96-97.
    [101]郭顺星,曹文苓,高微微.铁皮石斛及金钗石斛菌根真菌的分离及其生物活性测定[J].中国中药杂志,2000,25(6):338-340.
    [102]张集慧,王春兰,郭顺星,等.兰科药用植物的5种内生真菌产生的植物激素[J].中国医学科学院学报,1999,21(6):460-465.
    [103]李爱华,樊明涛,师俊玲.杜仲内生菌的分离及产PDG菌株的筛选[J].西北植物学报,2007,27(3):616-619.
    [104]张雪兵,史应武,王晓霞,等.醉马草内生菌的分离、鉴定及杀虫效果[J].微生物学报,2010,50(4):530-536.
    [105]李伟南,张慧茹.中草药内生菌产生抗生素的研究[J].饲料工业,2007,28(6):63-64.
    [106]南京中医药大学.中药大辞典[M].上海:上海科学技术出版社,2006:985.
    [107]伍建榕,韩素芬,朱有勇,等.云南兰科植物菌根内生真菌种类研究[J].西南林学院学报,2006,26(3):5-10.
    [108]边军昌,冯永辉,杨靖等.中药内生菌的研究进展[J].光明中医,2010,1(25):164-165.
    [109]文才艺,吴元华,田秀玲.植物内生菌研究进展及其存在的问题[J].生态学杂志,2004,23(2):86-91.
    [110]胡桂萍,郑雪芳,尤民生,等.植物内生菌的研究进展[J].福建农业学报,2010,25(2):226-234.
    [111]李雪玲.八角莲植株地下茎内生真菌的分离[J].云南师范学报,2005,25(2):49-52.
    [112]Guo L D,Hyde K DJ,Liew E C Y.Identification of endophytic fungi from Livistona chinensis (Palmae) using morphological and molecular techniques[J].New Phytologist,2000,147(3):617- 630.
    [113]Wang Y,Guo L D,Hyde K D.Taxonomic placement of sterile morphotypes of endophytic fungi from Pinus tabulaeformis (Pinaceae) in northeast China based on rDNA sequences.Fungal Diversity,2005,20:235-260.
    [114]刘金花,吴玲芳,章华伟.黄花蒿内生菌的分离与初步鉴定[J].氨基酸和生物资源,2011,33(4):27-30.
    [115]陈华红,杨颖.植物内生放线菌的分离方法[J].微生物学通报,2006.(4):243-248.
    [116]H.L.巴尼特,B.B.亨特.半知菌属图解[M].科学出版社,1977,10.
    [117]魏景超.真菌鉴定手册[M].上海科学技术出版社,1979,9.
    [118]Sutton B C.The Coelomycetes:fungi imperfecti with pycnidia acervuli and stromata. [M].Kew, Surrey:Commonwealth Mycological Institute,1980.1-696
    [119]Barnett H L,Hunter B B.Illustrated genera of imperfect fungi(4th ed) [M].St.Paul,Minnesota:APS Press,1998.1-218.
    [120]Carmichael J W,BryceKendrick W,Conners I L,et al.Genera of hyphomycetes.Edmonton[M]. Alberta:The University of Alberta Pre 1980.1-386.
    [121]Ellis M B.Dematiaceous hyphomycetes [M].Kew,Surrey. England:Commonwealth Mycological Institute,1971.1-608.
    [122]孙剑秋,郭良栋,臧威.内生真菌Ⅷ.中国药用植物内生真菌两个新记录种[J].菌物研究,2007,26(4):591-593.
    [123]姜于兰,许俊杰,张天宇.黑孢霉属和沃德霉属2个新记录种[J]菌物研究,2010,8(1):10-11,14.
    [124]Petrini O,Stone J,Carroll F E.Endophytic fungi in evergreen shrubs in western Oregon:a preliminary study.Can J Bot,1982,60:789-796.
    [125]Pielou E C.Ecological Diversity[M].New York:John Wiley and Sons Inc,1975.
    [126]段春芳,李枝林,方飞,等.云南几种兰花菌根真菌的分离鉴定[J].西南农业学报2010,23(3):756-759.
    [127]张黎,杨鸣琦.豆类丝核菌次级代谢产物对肿瘤细胞超微结构的影响[J].中国农学通报,2005,21(7):7-9.
    [128]李治滢,陈有为,杨丽源.川乌植物内生真菌抗菌活性的研究[J].天然产物研究与开发,2009,(4):676-678,701.
    [129]陈笑笑,于海宁,应优敏,等.仙鹤草内生真菌的分离鉴定与抗菌活性[J].浙江工业大学学报,2011,39(1):39-43.
    [130]伊艳杰.张长付,时玉,等.小麦白粉菌拮抗真菌的筛选、鉴定及生防效果[J].中国农学通报,2010,14:273-276.
    [131]王颖,马玺,平文祥,等.葡萄孢属-新种[J].菌物研究,2000,64(4):62-64.
    [132]陈毅坚,张灼,王艳,d等.云南红豆杉(Taxus Yunnanensis)内生真菌中产紫杉醇真菌的筛选[J].生物技术,2003,13(2):10-11.
    [133]陈峻青,王伊文,冯成亮,等.杜仲内生真菌的分离鉴定及其对异甜菊醇的生物转化研究[J].东南大学学报:医学版,2011,30(6):861-865.
    [134]周邦靖.常用中药的抗菌作用及其测定方法[M].重庆:科学技术出版社重庆分社,1987.
    [135]杜慧娟,王伯初,米鹏程,等.药用植物内生菌的分离及抗菌活性的初步研究[J].氨基酸和生物资源,2008,30(1):61-64.
    [136]李桂玲,王建锋,黄耀坚,等.几种药用植物内生真菌抗真菌活性的初步研究[J].微生物学通报,2001,28(6):64-68.
    [137]崔晋龙,范黎,丁翠,等.栽培黄芩高活性内生真菌菌株的筛选与鉴定[J].西北植物学报,2007,27,(7):1384-1388.
    [138]李治滢,杨丽源,李绍兰,等.滇南黄草乌内生真菌抗菌活性的筛选[J].时珍国医国药,2009,20(5):1027-1029.
    [139]万文,刘忠华,魏会琴.杂交构树茎段组培快繁体系的建立[J].福建林业科技,2010,37(1):72-76,109.
    [140]王勤华.曹春英.孙曰波,等.红叶椿离体的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学通讯,2004,40(1):73.
    [141]周盛梅,许衡.萱草属植物Hyperion快繁体系的建立[J].嘉兴学院学报,2010,22(6):22-25,28.
    [142]陈继敏,蓝伟泉,陈旭敏,等.不同添加物对石斛兰壮苗生根的影响[J].北方园艺.2009(3):78-81.
    [143]李玉平,邹双全,何碧珠,等.圆齿野鸦椿种子外植体的快繁体系[J].福建农林大学学报,2010,39(5):480-483.
    [144]王会.红叶石楠组培苗生根培养的研究[J].北方园艺,2007(10):178-180.
    [145]郭晓恒,刘涛,杨新杰,等.亚洲薄荷的快速繁殖及炼苗[J].安徽中医学院学报,2010,29(6):59-61.
    [146]王岳英.树莓组织培养生根炼苗技术[J].东北林业大学学报,2010,38(6):121-122.
    [147]李胜,李唯.植物组织培养原理与技术[M].化学工业出版2008.

© 2004-2018 中国地质图书馆版权所有 京ICP备05064691号 京公网安备11010802017129号

地址:北京市海淀区学院路29号 邮编:100083

电话:办公室:(+86 10)66554848;文献借阅、咨询服务、科技查新:66554700