酪蛋白溶解过程及其聚集状态研究
摘要
本文采用粘度法对酪蛋白溶液粘度的浓度依赖性、时间依赖性、温度依赖性及Cu~(2+)对酪蛋白溶液粘度的影响进行了系统的研究。通过动态激光光散射仪(DLS)及凝胶渗透色谱仪(GPO)研究了酪蛋白分子的构象。并且利用芘作为荧光探针，研究了酪蛋白及接枝酪蛋白水溶液的疏水微区极性。
结果表明：当酪蛋白溶液浓度小于动态接触浓度时，酪蛋白分子在溶液中主要以孤立链形式存在，溶液粘度较小。当浓度大于临界交叠浓度时，由于分子链间发生缠结，溶液粘度急剧增大。随着放置时间的延长，酪蛋白分子亚单元逐渐分离，溶液粘度下降。当酪蛋白溶液浓度小于临界交叠浓度时，Cu~(2+)主要作用于单个酪蛋白分子内部，使单个分子链内缠结加剧；当溶液浓度大于临界交叠浓度时，Cu~(2+)主要作用在不同酪蛋白分子之间，酪蛋白分子链间缠结加剧。温度升高会使酪蛋白溶液的粘度降低。动态激光光散射和凝胶色谱研究进一步证实了酪蛋白分子亚单元分离。利用芘作为荧光探针可对酪蛋白溶液中的疏水微区进行有效的分析，在不同pH值下，疏水微区的极性不同，与MMA接枝聚合后，酪蛋白溶液中的疏水微区增大，极性显著降低，疏水性增加，表明酪蛋白与MMA接枝聚合发生在酪蛋白疏水微区中。
The effect of concentration, time, temperature and Cu2+ on the viscosity of the casein molecule was investigated systematically by viscosity method. The conformation of casein was studied by DLS and GPC. And the polarity of hydrophobic microdomain of casein and grafted casein in solution was studied using pyrene as fluorescence probe.
The results indicated that viscosity of casein solution is lower and the casein is separated when the concentration of casein solution is lower than Cs. The viscosity of solution increases sharply because the chains of molecule tangle each other when the concentration of solution is higher than C*. Along with the time goes the sub-units of casein apart step by step and viscosity decrease. Cu2+ act mainly on inner of separated casein molecule and make the tangle in it more acute when the concentration of
solution is lower than C*. Cu act mainly between the chains of casein molecule and make the tangle between them more acute when the concentration of solution is higher than C*. The viscosity of casein solution decreased with increasing the temperature. The separation of sub-unit of casein molecule is approved by DLS and GPC. Pyrene was an
effective fluorescence probe for detecting the hydrophobic microdomain of casein in solution. The hydrophobic microdomain of casein solution exhibited different polarity at different pH values. After the graft-copolymerization of methyl methacrylate (MMA) onto casein, the hydrophobic microdomain increased and the polarity decreased, indicating that the graft-copolymerization took place in the hydrophobic microdomain.
结果表明：当酪蛋白溶液浓度小于动态接触浓度时，酪蛋白分子在溶液中主要以孤立链形式存在，溶液粘度较小。当浓度大于临界交叠浓度时，由于分子链间发生缠结，溶液粘度急剧增大。随着放置时间的延长，酪蛋白分子亚单元逐渐分离，溶液粘度下降。当酪蛋白溶液浓度小于临界交叠浓度时，Cu~(2+)主要作用于单个酪蛋白分子内部，使单个分子链内缠结加剧；当溶液浓度大于临界交叠浓度时，Cu~(2+)主要作用在不同酪蛋白分子之间，酪蛋白分子链间缠结加剧。温度升高会使酪蛋白溶液的粘度降低。动态激光光散射和凝胶色谱研究进一步证实了酪蛋白分子亚单元分离。利用芘作为荧光探针可对酪蛋白溶液中的疏水微区进行有效的分析，在不同pH值下，疏水微区的极性不同，与MMA接枝聚合后，酪蛋白溶液中的疏水微区增大，极性显著降低，疏水性增加，表明酪蛋白与MMA接枝聚合发生在酪蛋白疏水微区中。
The effect of concentration, time, temperature and Cu2+ on the viscosity of the casein molecule was investigated systematically by viscosity method. The conformation of casein was studied by DLS and GPC. And the polarity of hydrophobic microdomain of casein and grafted casein in solution was studied using pyrene as fluorescence probe.
The results indicated that viscosity of casein solution is lower and the casein is separated when the concentration of casein solution is lower than Cs. The viscosity of solution increases sharply because the chains of molecule tangle each other when the concentration of solution is higher than C*. Along with the time goes the sub-units of casein apart step by step and viscosity decrease. Cu2+ act mainly on inner of separated casein molecule and make the tangle in it more acute when the concentration of
solution is lower than C*. Cu act mainly between the chains of casein molecule and make the tangle between them more acute when the concentration of solution is higher than C*. The viscosity of casein solution decreased with increasing the temperature. The separation of sub-unit of casein molecule is approved by DLS and GPC. Pyrene was an
effective fluorescence probe for detecting the hydrophobic microdomain of casein in solution. The hydrophobic microdomain of casein solution exhibited different polarity at different pH values. After the graft-copolymerization of methyl methacrylate (MMA) onto casein, the hydrophobic microdomain increased and the polarity decreased, indicating that the graft-copolymerization took place in the hydrophobic microdomain.
引文
[1]张建忠，郦一心．酪蛋白和酪蛋白制品的开发，中国乳品工业，1998，26(6)：31-32
[2]李晓晖．牛乳中酪蛋白的结构特性及其应用，食品工业，2002，(1)：29-31
[3]任娇艳，赵谋明．乳状液中α_(s1)-酪蛋白和β-酪蛋白的结构特点及吸附行为．食品科学，2003，24(6)：154-157
[4]周莉，马文雁，刘剑洪等．酪蛋白接枝聚合改性的研究，深圳大学学报，1993，10(3-4)：59-65
[5]D. Qingzhi, Y.L. Hsien. Acrylonitrile graft copolymerization of casein proteins for enhanced solubility and thermal properities, Journal of Applied Polymer Science, 2000, 77(11), 2543-2551
[6]丁海燕．国内外皮革光亮剂的发展及现状，皮革化工，1999，16(4)：20-22
[7]戴红，张宗才，林波等．酪素的改性及改性产品的性能，皮革科学与工程，1998，8(3)：47-51
[8]李继，余学军，徐丹等．聚硅氧烷和己内酰胺双改性酪素涂饰剂的研制，皮革化工，15(6)：19-20
[9]徐卫国，杨文堂，王新．羟甲基丙烯酸树脂改性酪素皮革顶涂剂合成与应用的探讨，皮革化工，1997，2(2)：14-17
[10]颜世峰，李朝旭，刘本国等．聚乙烯改性及其进展，青岛化工学院学报：自然科学版，2002，23(2)：31-35
[11]曾庆冰，许家瑞，符若文．蛋白质分离色谱填料及其特性，功能高分子学报，2000，13(3)：343—348
[12]张梅，周瑞宝，米宏伟等．醇法大豆浓缩蛋白物理改性研究，粮食与油脂，2003(8)：3-5
[13]武军，李和平，高分子物理及化学，北京：中国轻工业出版社，2001，128-133
[14]林尚安，陆耘，梁兆熙．高分子化学，北京：科学出版社，2000：120—122
[15]潘雁，程镕时．高分子稀溶液粘度的浓度依赖性，高分子通报，2000，(2)：10-17
[16]何曼君，陈维孝，董西侠．高分子物理(修订版)，上海：复旦大学出版社，1990，174
[17]朱麟勇，常志英，李妙贞等．粘度和光谱方法研究二元阴离子型丙烯酰胺共聚物(P_3A)在稀水溶液中的构象变化，感光科学与光化学，2000，18(1)：12-17
[18]张俐娜，薛奇，莫志深等．高分子物理近代研究方法，武汉：武汉大学出版社，2003：67-76
[19]淡宜，陈山玉，张艳芬等．聚丙烯酸／聚氧化乙烯高分子复合溶液的结构与粘度，化学研究与应用，2000，12(2)：156-160
[20]张秋华，骆赞椿，徐敏．水溶性甲壳素衍生物溶液粘度的研究，化学世界，1997，(1)：35-38
[21]韩兆让，刘凤岐，高歌等．聚甲基丙烯酸甲酯(硬球型)乳胶体系内相互作用对粘度的影响，吉林大学学报(理学版)，2002，(1)：95-100
[22]张军，吴石山，郑昌仁等．SBS浓溶液流动行为与粘度模型的研究，高分子材料科学与工程，2002，18(5)：163-166
[23]郑昌仁，徐敏，吴石山等．丁二烯．苯乙烯嵌段共聚物溶液粘度的测定和研究，高分子材料科学与工程，2001，17(6)：78-82
[24]张丽华，汪存东．含盐羟乙基纤维素溶胶的粘度性能研究，应用基础与工程科学学报，2001，9(2-3)：146-149
[25]杨海华，马敬红，陈大俊等．PET／PEN扩链反应共混的研究(Ⅱ．特性粘度及无规度的变化)，高分子材料科学与工程，2002，18(4)：194-197
[26]周楠，周儒领，严晓虎等．高分子单链微凝胶的合成与性质研究，河南大学学报(自然科学版)，2001，31(4)：47-50
[27]张健，张黎明，李卓美．疏水化水溶性两性纤维素接枝共聚物CGAO的合成及其水溶液的粘度性能，纤维素科学与技术，1999，7(2)：9-15
[28]徐敏，严晓虎，程镕时等．树状高分子溶液在粘度计毛细管表面的吸附现象，高分子学报，2001，(4)：476-479
[29]钱家盛，李浩，章于川等．极稀高分子溶液粘度的测定，合肥工业大学学报(自然科学版)，2000，23(6)：1079-1082
[30]潘雁，黄玉惠，陈鸣才等．离聚物共混体系在溶液中分子间缔合的粘度研究，高分子学报，1997，(6)：664-671
[31]潘雁，程镕时，薛锋等．一种新的判断高分子相容性的粘度判据，高分子学报，2002，(6)：746-750
[32]陈永春，陈超，曹红燕等．粘度测定法研究两亲接枝共聚物PMMA-g-PEO在甲苯中的胶束化行为，湖北化工，2002，(2)：18-20
[33]严金龙，孙汝东，柏云杉等．明胶的粘度行为和谱学特征，皮革化工，16(6)：1-3
[34]潘雁，薛锋，傅伟文．多分散高分子的稀溶液粘度．浓度依赖性，广州化学，2002，27(3)：1-5
[35]林尚安，陆耘，梁兆熙．高分子化学，北京：科学出版社，2000：189—190
[36]赵择卿，陆大年，杨定超．光散射技术，北京：纺织工业出版社，1989
[37]郑忠．胶体科学导论，北京：高教育出版社，1989：98
[38]鲁德平，管蓉．聚合物乳液研究中的静态和动态激光光散射技术，胶体与聚合物，2000，18(2)：41—43
[39]张珍坤，左榘等．激光光散射研究丙烯酰胺—丙烯酸共聚物的溶液行为．高分子学报，2002(5)：572—576
[40]北京大学化学系高分子化学教研室．高分子物理实验，北京：北京大学出版社，1983：309—310
[41]杨家祥，张玉慧，许兴友等．荧光光谱在蛋白质分子构象研究中的应用，淮海工学院学报，1999，8(4)：28-31
[42]王守业，徐小龙，刘清亮等．荧光光谱在蛋白质分子构象研究中的应用，化学进展，2001，13(4)：257-260
[43]郭尧君．荧光实验技术及其在分子生物学中的应用，北京：科学出版社，1979
[44]周莉，马文雁，叶锐均等．酪蛋白接枝聚合改性的研究，深圳大学学报，1993，10(3-4)：59-65
[45]潘祖仁．高分子化学，北京：化学工业出版社，2003，236-237
[49]D.Mohan, G. Radhakrishnan, T. Nagabhushanam. Synthesis of casein-g-poly(butyl acrylate). Journal Of Applied Polymer Science, 1980(25), 1799-1806
[47]董擎之，唐闻群，顾利霞．在硫氰酸钠浓水溶液中丙烯腈—酪素接枝共聚的研究，中国纺织大学学报，2000，26(3)：1-4
[48]宋杏茹，刘盈海，刘卫红等．Ag~(3+)引发丙烯酸甲酯与酪素接枝共聚的研究，高分子材料科学与工程，1999，3：162-164
[49]L. Pei , L. Jiang-hong, W. Qun, et.al.. Metal-mediated graft copolymerizaiton of methyl methacrylate onto casein, Macromolecular Symposia, 1999, In press
[50]L. Pei , L. Jiang-hong, W. Qun, et.al.. Synthesis of core-shell latex particles of casein-g-poly(methyl methacrylate), Polymer Preprints, American Chemical Society, 1998, 39(2): 606
[51]周莉，罗力，刘剑洪．甲基丙烯酸甲酯在酪蛋白上接枝共聚的研究，高分子材料，1994，1(3)：5-8，12．
[52]赵茂祥，马世亮．酪素接枝共聚反应系统的研究．江苏化工，1993，21(2)：19-22
[53]董擎之，顾利霞，王逸君等．AN—g—Casein纤维的结构与性能的研究．中国纺织大学学报，2000，26(5)：12-15
[54]杨海洋，朱平平，吴澎等．用高分子溶剂法研究不同高分子之间相互作用，高分子材料科学与工程，2000，16(1)：20-23
[55]M.J. Fresno Contreras, A. Ramiguez, M.M. Jiménez Soriano. Viscosity and temperature relationship in ethanol/water mixtures gelified with Carbopol UltrezTM 10, IL Farmaco, 2001, 56:443-445
[56]北京大学化学系高分子化学教研室．高分子物理实验，北京：北京大学出版社，1983．291-292
[57]Koji Nishida, Keisuke Kaji, Toshiji Kanaya. Theoretical calculation of reduced viscosity of polyelectrolyte solutions. Polymer, 2001, 42:8657-8662
[58]Koji Nishida, Keisuke Kaji, Toshiji Kanaya, etc. Determination of intrinsic viscosity of polyelectrolyte solutions. Polymer, 2002, 43:1295-1300
[59]Daojie Dong, Arthur L.Fricke. Intrinsic viscosity and the molecular weight of kraft ligin. Polymer, 1995, 36(10): 2075-2078
[60]胡红旗，陈鸣才，程镕时．疏水性缔合作用的研究，广州化学，2003，28(1)：26-33
[61]王伟力，毕亚军，钱七虎．聚氨酯交联聚合反应体系粘度的变化．高分子材料科学与工程，2001，17(2)：72-75
[62]卞凤玲，柳明珠．聚N，N-二乙基丙稀酰胺溶液粘度的温度依赖性，物理化学学报，2002，18(9)：776-780
[63]张宣，胡亚男，王义明等．蛋白质的微乳液毛细管电动色谱分离研究，高等学校化学学报，2000，21(8)：1183-1186
[64]陈国亮，李蓉，李华儒．利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质的变性，高等学校化学学报，1997，18(5)：701-705
[65]Vidal, Rajae, Gerbaud, Alain, Vidal, Didier. Short-term effects of high light intensities on soybean nodule activity and photosynthesis, Environmental and Experimental Botany, 1996, 36(3): 349-357
[66]王朝阳，童真，曾钫等．离子型芘衍生物同聚电解质健合平衡的模拟．高分子学报，2002，(6)：729-733
[67]高改玲，房喻，祝兴华．稀水溶液中聚乙烯吡咯烷酮构象行为的荧光研究．高等学校化学学报，2002，23(11)：2177-2181
[68]徐桂英，杨延莲，苑世领等．疏水修饰聚丙烯酸共聚物在水溶液中的缔合作用．高等学校化学学报，2001，22(9)：1567-1569
[69]史向阳，吴世康，孙曹民．荧光探针法研究胶原蛋白的水溶液聚集状态．高分子
学报，1998，(4)：406-411
[70]Ohta. Nobuhiro, Umeuchi. Shiro, Kanada. Takayuki. et.al., system and in an oriented molecular system, Journal of Luminescence, 2000, (87-89): 733-735
[71]Ahn T, Kim J S, Choi H I, Yun C H. Analytical Biochemistry, Development of Peptide Substrates for Trypsin Based on Monomer/Excimer Fluorescence of Pyrene, 2002, 306(2): 247-251
[72]姜永才，叶建平，吴世康．表面活性剂溶液预胶束的形成及其聚集数的测定，化学学报，1992，1080-1084
[73]Ohta. Nobuhiro, Umeuchi. Shiro, Kanada. Takayuki, et.al.. An enhancement of excimer formation rate of pyrene by an external electric field in a PMMA polymer film, Chemical Physics Letters, 1997, 279(3-4): 215-222
[2]李晓晖．牛乳中酪蛋白的结构特性及其应用，食品工业，2002，(1)：29-31
[3]任娇艳，赵谋明．乳状液中α_(s1)-酪蛋白和β-酪蛋白的结构特点及吸附行为．食品科学，2003，24(6)：154-157
[4]周莉，马文雁，刘剑洪等．酪蛋白接枝聚合改性的研究，深圳大学学报，1993，10(3-4)：59-65
[5]D. Qingzhi, Y.L. Hsien. Acrylonitrile graft copolymerization of casein proteins for enhanced solubility and thermal properities, Journal of Applied Polymer Science, 2000, 77(11), 2543-2551
[6]丁海燕．国内外皮革光亮剂的发展及现状，皮革化工，1999，16(4)：20-22
[7]戴红，张宗才，林波等．酪素的改性及改性产品的性能，皮革科学与工程，1998，8(3)：47-51
[8]李继，余学军，徐丹等．聚硅氧烷和己内酰胺双改性酪素涂饰剂的研制，皮革化工，15(6)：19-20
[9]徐卫国，杨文堂，王新．羟甲基丙烯酸树脂改性酪素皮革顶涂剂合成与应用的探讨，皮革化工，1997，2(2)：14-17
[10]颜世峰，李朝旭，刘本国等．聚乙烯改性及其进展，青岛化工学院学报：自然科学版，2002，23(2)：31-35
[11]曾庆冰，许家瑞，符若文．蛋白质分离色谱填料及其特性，功能高分子学报，2000，13(3)：343—348
[12]张梅，周瑞宝，米宏伟等．醇法大豆浓缩蛋白物理改性研究，粮食与油脂，2003(8)：3-5
[13]武军，李和平，高分子物理及化学，北京：中国轻工业出版社，2001，128-133
[14]林尚安，陆耘，梁兆熙．高分子化学，北京：科学出版社，2000：120—122
[15]潘雁，程镕时．高分子稀溶液粘度的浓度依赖性，高分子通报，2000，(2)：10-17
[16]何曼君，陈维孝，董西侠．高分子物理(修订版)，上海：复旦大学出版社，1990，174
[17]朱麟勇，常志英，李妙贞等．粘度和光谱方法研究二元阴离子型丙烯酰胺共聚物(P_3A)在稀水溶液中的构象变化，感光科学与光化学，2000，18(1)：12-17
[18]张俐娜，薛奇，莫志深等．高分子物理近代研究方法，武汉：武汉大学出版社，2003：67-76
[19]淡宜，陈山玉，张艳芬等．聚丙烯酸／聚氧化乙烯高分子复合溶液的结构与粘度，化学研究与应用，2000，12(2)：156-160
[20]张秋华，骆赞椿，徐敏．水溶性甲壳素衍生物溶液粘度的研究，化学世界，1997，(1)：35-38
[21]韩兆让，刘凤岐，高歌等．聚甲基丙烯酸甲酯(硬球型)乳胶体系内相互作用对粘度的影响，吉林大学学报(理学版)，2002，(1)：95-100
[22]张军，吴石山，郑昌仁等．SBS浓溶液流动行为与粘度模型的研究，高分子材料科学与工程，2002，18(5)：163-166
[23]郑昌仁，徐敏，吴石山等．丁二烯．苯乙烯嵌段共聚物溶液粘度的测定和研究，高分子材料科学与工程，2001，17(6)：78-82
[24]张丽华，汪存东．含盐羟乙基纤维素溶胶的粘度性能研究，应用基础与工程科学学报，2001，9(2-3)：146-149
[25]杨海华，马敬红，陈大俊等．PET／PEN扩链反应共混的研究(Ⅱ．特性粘度及无规度的变化)，高分子材料科学与工程，2002，18(4)：194-197
[26]周楠，周儒领，严晓虎等．高分子单链微凝胶的合成与性质研究，河南大学学报(自然科学版)，2001，31(4)：47-50
[27]张健，张黎明，李卓美．疏水化水溶性两性纤维素接枝共聚物CGAO的合成及其水溶液的粘度性能，纤维素科学与技术，1999，7(2)：9-15
[28]徐敏，严晓虎，程镕时等．树状高分子溶液在粘度计毛细管表面的吸附现象，高分子学报，2001，(4)：476-479
[29]钱家盛，李浩，章于川等．极稀高分子溶液粘度的测定，合肥工业大学学报(自然科学版)，2000，23(6)：1079-1082
[30]潘雁，黄玉惠，陈鸣才等．离聚物共混体系在溶液中分子间缔合的粘度研究，高分子学报，1997，(6)：664-671
[31]潘雁，程镕时，薛锋等．一种新的判断高分子相容性的粘度判据，高分子学报，2002，(6)：746-750
[32]陈永春，陈超，曹红燕等．粘度测定法研究两亲接枝共聚物PMMA-g-PEO在甲苯中的胶束化行为，湖北化工，2002，(2)：18-20
[33]严金龙，孙汝东，柏云杉等．明胶的粘度行为和谱学特征，皮革化工，16(6)：1-3
[34]潘雁，薛锋，傅伟文．多分散高分子的稀溶液粘度．浓度依赖性，广州化学，2002，27(3)：1-5
[35]林尚安，陆耘，梁兆熙．高分子化学，北京：科学出版社，2000：189—190
[36]赵择卿，陆大年，杨定超．光散射技术，北京：纺织工业出版社，1989
[37]郑忠．胶体科学导论，北京：高教育出版社，1989：98
[38]鲁德平，管蓉．聚合物乳液研究中的静态和动态激光光散射技术，胶体与聚合物，2000，18(2)：41—43
[39]张珍坤，左榘等．激光光散射研究丙烯酰胺—丙烯酸共聚物的溶液行为．高分子学报，2002(5)：572—576
[40]北京大学化学系高分子化学教研室．高分子物理实验，北京：北京大学出版社，1983：309—310
[41]杨家祥，张玉慧，许兴友等．荧光光谱在蛋白质分子构象研究中的应用，淮海工学院学报，1999，8(4)：28-31
[42]王守业，徐小龙，刘清亮等．荧光光谱在蛋白质分子构象研究中的应用，化学进展，2001，13(4)：257-260
[43]郭尧君．荧光实验技术及其在分子生物学中的应用，北京：科学出版社，1979
[44]周莉，马文雁，叶锐均等．酪蛋白接枝聚合改性的研究，深圳大学学报，1993，10(3-4)：59-65
[45]潘祖仁．高分子化学，北京：化学工业出版社，2003，236-237
[49]D.Mohan, G. Radhakrishnan, T. Nagabhushanam. Synthesis of casein-g-poly(butyl acrylate). Journal Of Applied Polymer Science, 1980(25), 1799-1806
[47]董擎之，唐闻群，顾利霞．在硫氰酸钠浓水溶液中丙烯腈—酪素接枝共聚的研究，中国纺织大学学报，2000，26(3)：1-4
[48]宋杏茹，刘盈海，刘卫红等．Ag~(3+)引发丙烯酸甲酯与酪素接枝共聚的研究，高分子材料科学与工程，1999，3：162-164
[49]L. Pei , L. Jiang-hong, W. Qun, et.al.. Metal-mediated graft copolymerizaiton of methyl methacrylate onto casein, Macromolecular Symposia, 1999, In press
[50]L. Pei , L. Jiang-hong, W. Qun, et.al.. Synthesis of core-shell latex particles of casein-g-poly(methyl methacrylate), Polymer Preprints, American Chemical Society, 1998, 39(2): 606
[51]周莉，罗力，刘剑洪．甲基丙烯酸甲酯在酪蛋白上接枝共聚的研究，高分子材料，1994，1(3)：5-8，12．
[52]赵茂祥，马世亮．酪素接枝共聚反应系统的研究．江苏化工，1993，21(2)：19-22
[53]董擎之，顾利霞，王逸君等．AN—g—Casein纤维的结构与性能的研究．中国纺织大学学报，2000，26(5)：12-15
[54]杨海洋，朱平平，吴澎等．用高分子溶剂法研究不同高分子之间相互作用，高分子材料科学与工程，2000，16(1)：20-23
[55]M.J. Fresno Contreras, A. Ramiguez, M.M. Jiménez Soriano. Viscosity and temperature relationship in ethanol/water mixtures gelified with Carbopol UltrezTM 10, IL Farmaco, 2001, 56:443-445
[56]北京大学化学系高分子化学教研室．高分子物理实验，北京：北京大学出版社，1983．291-292
[57]Koji Nishida, Keisuke Kaji, Toshiji Kanaya. Theoretical calculation of reduced viscosity of polyelectrolyte solutions. Polymer, 2001, 42:8657-8662
[58]Koji Nishida, Keisuke Kaji, Toshiji Kanaya, etc. Determination of intrinsic viscosity of polyelectrolyte solutions. Polymer, 2002, 43:1295-1300
[59]Daojie Dong, Arthur L.Fricke. Intrinsic viscosity and the molecular weight of kraft ligin. Polymer, 1995, 36(10): 2075-2078
[60]胡红旗，陈鸣才，程镕时．疏水性缔合作用的研究，广州化学，2003，28(1)：26-33
[61]王伟力，毕亚军，钱七虎．聚氨酯交联聚合反应体系粘度的变化．高分子材料科学与工程，2001，17(2)：72-75
[62]卞凤玲，柳明珠．聚N，N-二乙基丙稀酰胺溶液粘度的温度依赖性，物理化学学报，2002，18(9)：776-780
[63]张宣，胡亚男，王义明等．蛋白质的微乳液毛细管电动色谱分离研究，高等学校化学学报，2000，21(8)：1183-1186
[64]陈国亮，李蓉，李华儒．利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质的变性，高等学校化学学报，1997，18(5)：701-705
[65]Vidal, Rajae, Gerbaud, Alain, Vidal, Didier. Short-term effects of high light intensities on soybean nodule activity and photosynthesis, Environmental and Experimental Botany, 1996, 36(3): 349-357
[66]王朝阳，童真，曾钫等．离子型芘衍生物同聚电解质健合平衡的模拟．高分子学报，2002，(6)：729-733
[67]高改玲，房喻，祝兴华．稀水溶液中聚乙烯吡咯烷酮构象行为的荧光研究．高等学校化学学报，2002，23(11)：2177-2181
[68]徐桂英，杨延莲，苑世领等．疏水修饰聚丙烯酸共聚物在水溶液中的缔合作用．高等学校化学学报，2001，22(9)：1567-1569
[69]史向阳，吴世康，孙曹民．荧光探针法研究胶原蛋白的水溶液聚集状态．高分子
学报，1998，(4)：406-411
[70]Ohta. Nobuhiro, Umeuchi. Shiro, Kanada. Takayuki. et.al., system and in an oriented molecular system, Journal of Luminescence, 2000, (87-89): 733-735
[71]Ahn T, Kim J S, Choi H I, Yun C H. Analytical Biochemistry, Development of Peptide Substrates for Trypsin Based on Monomer/Excimer Fluorescence of Pyrene, 2002, 306(2): 247-251
[72]姜永才，叶建平，吴世康．表面活性剂溶液预胶束的形成及其聚集数的测定，化学学报，1992，1080-1084
[73]Ohta. Nobuhiro, Umeuchi. Shiro, Kanada. Takayuki, et.al.. An enhancement of excimer formation rate of pyrene by an external electric field in a PMMA polymer film, Chemical Physics Letters, 1997, 279(3-4): 215-222