垂花蕙兰离体快繁体系的建立
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摘要
本试验以垂花蕙兰的种子和侧芽为材料,进行了离体快繁的研究。在垂花蕙兰离体快繁技术研究中,筛选了诱导、增殖与分化、生根和壮苗培养的最佳培养基配方以及适宜试管苗栽培的基质,建立了垂花蕙兰离体快繁体系。主要结果如下:
1、垂花蕙兰种子无菌播种技术体系的建立。适宜蒴果表面消毒的方法是先用72%乙醇处理1min,再蘸95%乙醇在酒精灯火焰上灼烧2次;适宜种子萌发的培养基配方为1/2MS+6-BA1.0 mg/L +NAA1.0 mg/L +AC0.5 g/L,液体培养方式有利于种子萌发,液体振荡培养效果更佳;适宜原球茎增殖的培养基是1/2MS+6-BA1.0mg/L +NAA0.5 mg/L +KT1.0 mg/L +100g/L椰乳+AC0.5 g/L;接种密度和培养方式对原球茎增殖有较大的影响,每瓶接10个原球茎及液体振荡培养有利于原球茎增殖;适宜原球茎分化的培养基配方为1/2MS+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L+ AC0.5g/L;适宜幼苗壮苗生根的培养基是1/2MS+IBA1 mg/L+50g/L土豆泥。
2、垂花蕙兰丛生芽途径组培快繁技术体系的建立。适宜侧芽表面消毒的方法是先用72%乙醇浸泡30s,然后用0.1%的升汞溶液处理8min,用无菌水冲洗3～4次,剥去外面1～2片叶,再用15%的次氯酸钠溶液处理4min;春季3月份取侧芽,侧芽消毒效果好,成活率高;适宜丛生芽诱导的培养基是1/2MS+6-BA4.0mg/L +NAA0.2mg/L+ AC0.5g/L;适宜丛生芽增殖的培养基为1/2MS+6-BA4.0mg/L +NAA0.1mg/L+ AC0.5g/L;适宜丛生芽苗壮苗生根的培养基为1/2MS+NAA2.0mg/L+香蕉泥50g/L+AC1g/L;适宜试管苗移栽的基质是苔藓,试管苗移栽成活率高达100%。
In this study, the seeds and lateral buds of pendent Cymbidium were used as a source of initial explants for rapid propagation in vitro. The suitable medium formulas were screened including induction, proliferation and differentiation, plantlet rooting and transplanting.Finally the regeneration system of pendent Cymbidium was established.The results were as follows:
1、The establishment of sterile germination technology system.The best way of sterilizing capsule was as follows: it was dipped in 72% ethanol for 1 min, then burned by the alcohol lamp two times after dipped in 95% ethanol.The best medium for seeds induction was 1/2MS+6- BA 1.0mg/L + NAA 1.0mg/L + AC 0.5g/L. The condition of liquid shaking culture was better due to its conductive to seed germination.The best medium for PLBs proliferation was 1/2MS+6-BA1.0mg/L +NAA 0.5mg/L +KT 1.0 mg/L + CM 100g/L +AC 0.5g/L. The inoculation density and culture methods had greater impacted proliferation. 10 PLBS and liquid shaking culture was conductive to buds proliferation.The best medium for PLBs differentiation was 1/2MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L+ AC 0.5 g/L.The best medium for rooting and seedling cultivation was 1/2MS+IBA1mg/L+ mashed potatoes 50g/L.
2、The establishment of Buds means tissue culture system. The suitable methods of sterilizing of lateral buds: it was dipped in 72% ethyl alcohol for 30s, then agitating in a solution of 0.1% HgCl2 for 8 min, and rinsed three-four times with sterile distilled water, and stripped out 1-2 leaves, and further agitating in a solution of 15% sodium hypochlorite for 4 min.The best medium for buds induction was 1/2MS+ 6-BA 4.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L + AC 0.5 g/L.The best medium for buds proliferation was 1/2MS+6-BA 4.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L + AC 0.5g/L.The best medium for buds root and seedling cultivation was 1/2MS + NAA 2.0mg/L+ banana 50g/L+AC 1g/L.The best planting medum was moss. The survival rate of transplanted plantlets was up to 100%.
1、垂花蕙兰种子无菌播种技术体系的建立。适宜蒴果表面消毒的方法是先用72%乙醇处理1min,再蘸95%乙醇在酒精灯火焰上灼烧2次;适宜种子萌发的培养基配方为1/2MS+6-BA1.0 mg/L +NAA1.0 mg/L +AC0.5 g/L,液体培养方式有利于种子萌发,液体振荡培养效果更佳;适宜原球茎增殖的培养基是1/2MS+6-BA1.0mg/L +NAA0.5 mg/L +KT1.0 mg/L +100g/L椰乳+AC0.5 g/L;接种密度和培养方式对原球茎增殖有较大的影响,每瓶接10个原球茎及液体振荡培养有利于原球茎增殖;适宜原球茎分化的培养基配方为1/2MS+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L+ AC0.5g/L;适宜幼苗壮苗生根的培养基是1/2MS+IBA1 mg/L+50g/L土豆泥。
2、垂花蕙兰丛生芽途径组培快繁技术体系的建立。适宜侧芽表面消毒的方法是先用72%乙醇浸泡30s,然后用0.1%的升汞溶液处理8min,用无菌水冲洗3～4次,剥去外面1～2片叶,再用15%的次氯酸钠溶液处理4min;春季3月份取侧芽,侧芽消毒效果好,成活率高;适宜丛生芽诱导的培养基是1/2MS+6-BA4.0mg/L +NAA0.2mg/L+ AC0.5g/L;适宜丛生芽增殖的培养基为1/2MS+6-BA4.0mg/L +NAA0.1mg/L+ AC0.5g/L;适宜丛生芽苗壮苗生根的培养基为1/2MS+NAA2.0mg/L+香蕉泥50g/L+AC1g/L;适宜试管苗移栽的基质是苔藓,试管苗移栽成活率高达100%。
In this study, the seeds and lateral buds of pendent Cymbidium were used as a source of initial explants for rapid propagation in vitro. The suitable medium formulas were screened including induction, proliferation and differentiation, plantlet rooting and transplanting.Finally the regeneration system of pendent Cymbidium was established.The results were as follows:
1、The establishment of sterile germination technology system.The best way of sterilizing capsule was as follows: it was dipped in 72% ethanol for 1 min, then burned by the alcohol lamp two times after dipped in 95% ethanol.The best medium for seeds induction was 1/2MS+6- BA 1.0mg/L + NAA 1.0mg/L + AC 0.5g/L. The condition of liquid shaking culture was better due to its conductive to seed germination.The best medium for PLBs proliferation was 1/2MS+6-BA1.0mg/L +NAA 0.5mg/L +KT 1.0 mg/L + CM 100g/L +AC 0.5g/L. The inoculation density and culture methods had greater impacted proliferation. 10 PLBS and liquid shaking culture was conductive to buds proliferation.The best medium for PLBs differentiation was 1/2MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L+ AC 0.5 g/L.The best medium for rooting and seedling cultivation was 1/2MS+IBA1mg/L+ mashed potatoes 50g/L.
2、The establishment of Buds means tissue culture system. The suitable methods of sterilizing of lateral buds: it was dipped in 72% ethyl alcohol for 30s, then agitating in a solution of 0.1% HgCl2 for 8 min, and rinsed three-four times with sterile distilled water, and stripped out 1-2 leaves, and further agitating in a solution of 15% sodium hypochlorite for 4 min.The best medium for buds induction was 1/2MS+ 6-BA 4.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L + AC 0.5 g/L.The best medium for buds proliferation was 1/2MS+6-BA 4.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L + AC 0.5g/L.The best medium for buds root and seedling cultivation was 1/2MS + NAA 2.0mg/L+ banana 50g/L+AC 1g/L.The best planting medum was moss. The survival rate of transplanted plantlets was up to 100%.
引文
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