苦丁茶的提取及化学成分分析
摘要
苦丁茶是一种珍稀植物“代用茶”，现代药理研究证明它具有多种药理活性和功效，其提取物被用于防治心脏病、动脉硬化、癌症、肿瘤、免疫力低下，炎症、高血压、高血糖等疾病。对于这些功效苦丁茶中许多香气成分、萜类化合物、黄酮类化合物起着重要作用，开展对苦丁茶提取方法和化学成分的研究，具有一定的理论和实际意义。
采用乙醇浸取法、乙醚浸取法、蒸馏萃取法和超声波辅助蒸馏萃取法提取苦丁茶中香气成分，并用GC和GC／MS分析评价。通过比较得出超声波辅助蒸馏萃取法效果最好。提取分离出了19个化合物，主要是醇类、酯类、烯酮类和萜类化合物。
采用索氏提取法、醇提法，热水温浸法、碱提酸沉法、超声波法和微波法对苦丁茶中黄酮类化合物进行了提取。并根据黄酮类化合物与金属离子形成的螯合物在500nm处有最大吸收这一特征反应，用紫外分光光度进行测定，以芦丁为标准品计算含量。分析结果得出，提取效果依次为：超声波法，微波法＞索氏提取法＞醇提法＞碱提酸沉法＞热水温浸法。但微波法不利于工业化，索氏提取耗能大，也不利于工业化。因此本文对超声波法和醇提法设计正交实验，讨论以乙醇为溶
断江工业大李项士李位击文
剂提取黄酮类化合物的最佳工艺条件。通过单因素试验和正交试验得
出，超声波法最佳提取条件是:溶剂为40%乙醇，料液比1:30，超声
波萃取30分钟;乙醇浸提法的最佳条件是:溶剂为80%乙醇，料液
比1:20，回流提取3h。
根据上述优化的超声波提取条件提取苦丁茶，提取物经硅胶柱和
聚酞胺柱色谱分离。硅胶柱用氯仿甲醇不同比例梯度洗脱，最终在氯
仿:甲醇.(100:25)梯度得一淡黄色物质，经红外检测并与标准谱对
照可能为脱氧半乳糖;聚酸胺柱用不同浓度(100/0、30%、500/0、75%、
95%)的乙醇溶液梯度洗脱，反复过柱分离得黄色粉末状物质，经红
外和高效液相色谱鉴定为芦丁。
Kudingcha is a well know tea. Modern pharmacological studies have proved that Kudingcha has many medicinal activities. Whose extract is being used for the preventing and treatment of heart disease, multiple sclerosis, cancer, tumors, autoimmune disease, inflammation, high blood pressure and high blood sugar. These activities mainly result from many aromatic, terpenes and flavonoids compounds in kudingcha. So the studies on extraction and chemical constituents of kudingcha is of great theoretic and practical significance.
The comparative studies of four kinds of extraction aromatic methods are reported. The results showed that ultrasonic wave assistant distillation extraction is the best way. By this method and GC/MS analysis nineteen compounds were extracted and isolated, including alcoholates, esters, sesquitones and terpenes.
Six approaches were used to extract flavonoids from Kudingcha. According to the typical colorimetric reaction that maximum absorbency can be obtained at 510nm when the chelate formed by the combination of flavonoids and metal ion. spectrophotometry was used to determine the total flavonoids content calculated by Rutin standard. The analytical results showed that microwave and ultrasonic wave extraction are best way. But microwave extraction is difficult for industrialization, so design orthogonal experiments to discuss the best extraction. By single factor and orthogonal experiments the results showed that the optimal conditions for ultrasonic wave extraction were 40%ethanol, ratio of material to solution (w:v)1:30, and
extracted for 30 min in ultrasonic wave; and for ethanol extraction were 80%ethanol, ratio of material to solution(w:v)l :20, and refluxed for 3h.
Kudingcha was extracted according to above ultrasonic extraction conditions, isolated by polyamide and silica gel chromatography. Silica gel chromatography column was eluted with a CHCl3-MeOH gradient, in CHC13-CH3OH (100:25) gradient a light yellow powder was obtained It maybe 2-Deoxy-D-galactose identified by IR. Polyamide chromatography was eluted with different percent ethanol (10%, 30%, 50%, 75%, 95%). Eluted again and again, in 30%ethanil only a yellow powder was obtained. It is Rutin identified by IR and HPLC.
采用乙醇浸取法、乙醚浸取法、蒸馏萃取法和超声波辅助蒸馏萃取法提取苦丁茶中香气成分，并用GC和GC／MS分析评价。通过比较得出超声波辅助蒸馏萃取法效果最好。提取分离出了19个化合物，主要是醇类、酯类、烯酮类和萜类化合物。
采用索氏提取法、醇提法，热水温浸法、碱提酸沉法、超声波法和微波法对苦丁茶中黄酮类化合物进行了提取。并根据黄酮类化合物与金属离子形成的螯合物在500nm处有最大吸收这一特征反应，用紫外分光光度进行测定，以芦丁为标准品计算含量。分析结果得出，提取效果依次为：超声波法，微波法＞索氏提取法＞醇提法＞碱提酸沉法＞热水温浸法。但微波法不利于工业化，索氏提取耗能大，也不利于工业化。因此本文对超声波法和醇提法设计正交实验，讨论以乙醇为溶
断江工业大李项士李位击文
剂提取黄酮类化合物的最佳工艺条件。通过单因素试验和正交试验得
出，超声波法最佳提取条件是:溶剂为40%乙醇，料液比1:30，超声
波萃取30分钟;乙醇浸提法的最佳条件是:溶剂为80%乙醇，料液
比1:20，回流提取3h。
根据上述优化的超声波提取条件提取苦丁茶，提取物经硅胶柱和
聚酞胺柱色谱分离。硅胶柱用氯仿甲醇不同比例梯度洗脱，最终在氯
仿:甲醇.(100:25)梯度得一淡黄色物质，经红外检测并与标准谱对
照可能为脱氧半乳糖;聚酸胺柱用不同浓度(100/0、30%、500/0、75%、
95%)的乙醇溶液梯度洗脱，反复过柱分离得黄色粉末状物质，经红
外和高效液相色谱鉴定为芦丁。
Kudingcha is a well know tea. Modern pharmacological studies have proved that Kudingcha has many medicinal activities. Whose extract is being used for the preventing and treatment of heart disease, multiple sclerosis, cancer, tumors, autoimmune disease, inflammation, high blood pressure and high blood sugar. These activities mainly result from many aromatic, terpenes and flavonoids compounds in kudingcha. So the studies on extraction and chemical constituents of kudingcha is of great theoretic and practical significance.
The comparative studies of four kinds of extraction aromatic methods are reported. The results showed that ultrasonic wave assistant distillation extraction is the best way. By this method and GC/MS analysis nineteen compounds were extracted and isolated, including alcoholates, esters, sesquitones and terpenes.
Six approaches were used to extract flavonoids from Kudingcha. According to the typical colorimetric reaction that maximum absorbency can be obtained at 510nm when the chelate formed by the combination of flavonoids and metal ion. spectrophotometry was used to determine the total flavonoids content calculated by Rutin standard. The analytical results showed that microwave and ultrasonic wave extraction are best way. But microwave extraction is difficult for industrialization, so design orthogonal experiments to discuss the best extraction. By single factor and orthogonal experiments the results showed that the optimal conditions for ultrasonic wave extraction were 40%ethanol, ratio of material to solution (w:v)1:30, and
extracted for 30 min in ultrasonic wave; and for ethanol extraction were 80%ethanol, ratio of material to solution(w:v)l :20, and refluxed for 3h.
Kudingcha was extracted according to above ultrasonic extraction conditions, isolated by polyamide and silica gel chromatography. Silica gel chromatography column was eluted with a CHCl3-MeOH gradient, in CHC13-CH3OH (100:25) gradient a light yellow powder was obtained It maybe 2-Deoxy-D-galactose identified by IR. Polyamide chromatography was eluted with different percent ethanol (10%, 30%, 50%, 75%, 95%). Eluted again and again, in 30%ethanil only a yellow powder was obtained. It is Rutin identified by IR and HPLC.
引文
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