丹参素钠的提取及注射用丹参素钠的研制
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摘要
丹参素(Danshensu，DA)是从唇形科(Labiatae)鼠尾草属(Salvia)植物丹参(Salvia miltiorrhiza)干燥根部的水提取液中分离得到的一种有效成分，其化学名为D-(+)-β-(3，4-二羟基苯基乳酸)，[D-(+)-β-(3，4-dihydoxy-phenylalanine)]。由于丹参素是一种不稳定的游离酸，故在使用时常将其制成钠盐。丹参素是抗心肌缺血的有效成分，对治疗冠心病有一定疗效。丹参素可抑制血小板的合成、聚集和释放TXA2d等缩血管物质，提高心肌耐缺氧能力，保护心肌，增加冠脉流量。丹参素是许多治疗心血管疾病的中成药的质量控制指标。因此丹参素具有广泛的应用前景。
由于丹参中成份复杂，丹参素在其中的含量低(不到0.5％)，且丹参素含有酚羟基，易氧化，使得丹参素的提取分离非常困难；目前还没有成熟的合成工艺制备丹参素，采用直接合成的方法工业化生产丹参素的设想也不太现实。本论文拟从中药丹参中提取高纯度的丹参素钠，摸索其提取纯化工艺。采用均匀设计方法筛选出了丹参素的最佳提取工艺，通过对丹参提取液进行处理提高了丹参素的含量，通过对大孔吸附树脂富集纯化丹参素工艺条件与参数的考察，探索出丹参素钠的纯化工艺方法及流程，结合其他分离纯化技术最终得到了纯度达95％以上的丹参素钠精制品。该工艺为丹参素的进一步开发利用提供了有益的参考。
本文采用四大谱技术(UV、IR、MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR)对精制品进行了结构确证，并通过热分析法、比旋度和熔点的测定佐证了精制品为丹参素钠。
本文建立了丹参素钠含量测定的高效液相色谱方法，对丹参素钠的稳定性进行了基础研究。考察了pH、光照、氧、离子强度、金属离子等对丹参素钠的稳定性影响；在稳定性考察的基础上，优化处方工艺，制备注射用丹参素钠。
通过对丹参素钠的稳定性研究发现，丹参素钠在偏酸的环境中稳定，在中性或者碱性条件下不稳定；光照可能加速丹参素钠的自氧化过程；O_2会氧化丹参素钠的邻酚羟基，使其形成邻苯二醌式结构；金属离子催化氧化丹参素钠。
在注射用丹参素钠的研究中，以注射用无菌分装产品的基本药剂学要求为指标，初步考察并确定了注射用丹参素钠的处方和制备工艺。
Danshensu[D-(+)-β-(3,4-dihydoxy-phenylalanine)], Danshensu is an effectivecompound extracted from the water phase of the dried roots of Salvia miltiorrhizaof Labiatae Salvia. Because Danshensu is unstable dissociated fatty acid, it is usedas sodium salt.Danshensu is effective anti-myocardial ischemia substance, hascertain effect in curing cornonary heart disease. Danshensu can inhibit bloodplatelet synthesizing, gather and release TXA2d, improve flow rate of cornonarycirculation, protect .cardiac muscle and improve its oxygen-deficiency proofcapability. Meanwhile Danshensu is the quality standard of some Chinese patentdrug. So Danshensu has a broad prospect.
As danshen has lots of components and the content of Danshensu is low,besides Danshensu is easily oxidized for its phenolic parts, so the purificationprocess of Danshensu is quite difficult. And the synthetic route is not practical. Thispaper discusses the method to extract and purify Sodium Danshensu. According tothe uniform design, the extraction technology of Danshensu from Salviamiltiorrhiza was studied in this paper. We improved the content of Danshensuthrough degration. This research studies the extraction and purification ofDanshensu by macrophoros adsorptive resin, and obtains a more simple andreasonable route of technics. Finally, We get 95% purified Sodium Danshensu by macrophoros adsorptive resin together with other methods. It will provide abeneficial reference for the development of Danshensu.
The structure of Sodium Danshensu was validation by four spectrumtechniques (UV、IR、MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR) together with option rotation、melting point and DSC.
A new method to determine the content of Danshensu by HPLC wasestablished,This article presented a foundation research on Sodium Danshensu instability and enhancing stability. The effect of pH, light, oxygen, ionic strength andmetal ion on Sodium Danshensu were examined. Prescription was optimized andSodium Danshensu for injection was produced in base of the former foundationstudy.
From the article,we can conclude that Sodium Danshensu was more stable inacidity than in neutral or alky. Sodium Danshensu could be hydrolyzed in higer pH.The light may accelerate Sodium Danshensu's autoxidation. O_2 could convertortho- phenolic hydroxyl groups into quinone. Metal ion may catalyze SodiumDanshensu's oxidation.
The basic prescription and preparation technology of Sodium Danshensufor injection was initially defined by the study about formulation screeningand technology optimizing, based on the elementary pharmaceutical rule asindex.
由于丹参中成份复杂，丹参素在其中的含量低(不到0.5％)，且丹参素含有酚羟基，易氧化，使得丹参素的提取分离非常困难；目前还没有成熟的合成工艺制备丹参素，采用直接合成的方法工业化生产丹参素的设想也不太现实。本论文拟从中药丹参中提取高纯度的丹参素钠，摸索其提取纯化工艺。采用均匀设计方法筛选出了丹参素的最佳提取工艺，通过对丹参提取液进行处理提高了丹参素的含量，通过对大孔吸附树脂富集纯化丹参素工艺条件与参数的考察，探索出丹参素钠的纯化工艺方法及流程，结合其他分离纯化技术最终得到了纯度达95％以上的丹参素钠精制品。该工艺为丹参素的进一步开发利用提供了有益的参考。
本文采用四大谱技术(UV、IR、MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR)对精制品进行了结构确证，并通过热分析法、比旋度和熔点的测定佐证了精制品为丹参素钠。
本文建立了丹参素钠含量测定的高效液相色谱方法，对丹参素钠的稳定性进行了基础研究。考察了pH、光照、氧、离子强度、金属离子等对丹参素钠的稳定性影响；在稳定性考察的基础上，优化处方工艺，制备注射用丹参素钠。
通过对丹参素钠的稳定性研究发现，丹参素钠在偏酸的环境中稳定，在中性或者碱性条件下不稳定；光照可能加速丹参素钠的自氧化过程；O_2会氧化丹参素钠的邻酚羟基，使其形成邻苯二醌式结构；金属离子催化氧化丹参素钠。
在注射用丹参素钠的研究中，以注射用无菌分装产品的基本药剂学要求为指标，初步考察并确定了注射用丹参素钠的处方和制备工艺。
Danshensu[D-(+)-β-(3,4-dihydoxy-phenylalanine)], Danshensu is an effectivecompound extracted from the water phase of the dried roots of Salvia miltiorrhizaof Labiatae Salvia. Because Danshensu is unstable dissociated fatty acid, it is usedas sodium salt.Danshensu is effective anti-myocardial ischemia substance, hascertain effect in curing cornonary heart disease. Danshensu can inhibit bloodplatelet synthesizing, gather and release TXA2d, improve flow rate of cornonarycirculation, protect .cardiac muscle and improve its oxygen-deficiency proofcapability. Meanwhile Danshensu is the quality standard of some Chinese patentdrug. So Danshensu has a broad prospect.
As danshen has lots of components and the content of Danshensu is low,besides Danshensu is easily oxidized for its phenolic parts, so the purificationprocess of Danshensu is quite difficult. And the synthetic route is not practical. Thispaper discusses the method to extract and purify Sodium Danshensu. According tothe uniform design, the extraction technology of Danshensu from Salviamiltiorrhiza was studied in this paper. We improved the content of Danshensuthrough degration. This research studies the extraction and purification ofDanshensu by macrophoros adsorptive resin, and obtains a more simple andreasonable route of technics. Finally, We get 95% purified Sodium Danshensu by macrophoros adsorptive resin together with other methods. It will provide abeneficial reference for the development of Danshensu.
The structure of Sodium Danshensu was validation by four spectrumtechniques (UV、IR、MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR) together with option rotation、melting point and DSC.
A new method to determine the content of Danshensu by HPLC wasestablished,This article presented a foundation research on Sodium Danshensu instability and enhancing stability. The effect of pH, light, oxygen, ionic strength andmetal ion on Sodium Danshensu were examined. Prescription was optimized andSodium Danshensu for injection was produced in base of the former foundationstudy.
From the article,we can conclude that Sodium Danshensu was more stable inacidity than in neutral or alky. Sodium Danshensu could be hydrolyzed in higer pH.The light may accelerate Sodium Danshensu's autoxidation. O_2 could convertortho- phenolic hydroxyl groups into quinone. Metal ion may catalyze SodiumDanshensu's oxidation.
The basic prescription and preparation technology of Sodium Danshensufor injection was initially defined by the study about formulation screeningand technology optimizing, based on the elementary pharmaceutical rule asindex.
引文
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