毛喉鞘蕊花有效成分及质量分析研究
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摘要
毛喉鞘蕊花Coleus forskohlii Briq.系唇形科(Labiatae)鞘蕊花属(Coleus Lour.)植物。现代药理研究表明，该植物对支气管哮喘、充血性心力衰竭、肿瘤转移、青光眼等具有良好的治疗效果。民间以全草煎服，治疗咳喘、心慌、头晕等症疗效甚佳。在毛喉鞘蕊花药理作用和临床疗效的基础上，本论文对毛喉鞘蕊花的物质基础进行了相关研究。
采用溶剂法和色谱法对该药用植物的有效成分进行了提取分离研究，从中得到11个单体成分，鉴定了其中的10个化合物，分别为异佛斯可林(Ⅰ)，1，6-二乙酰氧基-7-去乙酰氧基-9-去羟基佛斯可林(Ⅱ)，6-乙酰氧基-9-去羟基佛斯可林(Ⅲ)，6-乙酰氧基佛斯可林(Ⅳ)，1，6-二乙酰氧基-9-去羟基佛斯可林(Ⅴ)，柳杉酚(Ⅵ)，β-谷甾醇(Ⅶ)，麦角甾-6，22-双烯-5α，8α-环二氧-3β-醇(Ⅷ)，麦角甾-6，9(11)，22-三烯-5α，8α-环二氧-3β-醇(Ⅸ)，3β，28-二羟基-12-烯-乌苏烷(Ⅹ)。其中化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为新化合物，化合物Ⅴ为首次从天然植物中分离到，化合物Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ为首次从该属植物中提出。
毛喉鞘蕊花主要有效部位为二萜类成分，采用HPLC-ELSD色谱法对其有效部位进行了指纹图谱的研究。标定了色谱图中19个共有峰，方法重现性和稳定性好，从而为毛喉鞘蕊花药材的移植和资源品质的评价提供了一定的科学依据。
在毛喉鞘蕊花有效成分研究的基础上，对该药用植物的性状、鉴别、检查、含量测定等方面进行了系统研究，制定了较为明确的质量标准。以其有效部位为目标确定的薄层色谱鉴别方法具有较强的专属性；以其主要有效成分异佛斯可林为指标建立的含量测定方法，具有高灵敏度，重现性好，可靠性强的特点。从而大大提高了该药材原制定的地方标准，能有效控制毛喉鞘蕊花的质量。
Coleus forskohlii Briq. ,a perennial dried herb of Labiatae.,is a folk traditional Chinese medicine against cough, asthma, acute and chronic bronchitis, dizziness and fluster. The plant has been investigated as a promising drug for the treatment of congestional cardiomyopathy, glaucoma, cancer of liver and stomach by local and international scholars because of its unique adenylate cyclase stimulated activity. Based on its pharmacology and clinical research, we have carried on relevant experiments on it.
The extraction and isolation from the whole plants of Coleus forskohlii Briq. were accomplished and 11 constituents were isolated from its ether fraction by various kinds of chromatographies. Ten of them were elucidated on the basis of spectral data as follows: isoforskolin ( I ) ,la,6β-diacetoxy-8,13-epoxylabd-14-en-ll-one ( II ) ,la-hydroxy-6p,7p-diacetoxy-8,13-epoxylabd-14-en-ll-one ( III ) ,la,9a-dihydroxy-6p,7a-diacetoxy-8,13-epoxylabd-14-en-ll-one (IV ) ,lα,6β,7β-triacetoxy-8,13-epoxylabd-14-en-ll-one ( V ) , sugiol ( VI ) ,p-sitosterol ( VII ) ,ergosta-6,22-dien-5α,8α-epidioxy-3β-ol ( VIII ) , ergosta-6,9(ll),22-trien-5α,8α-epidioxy-3β-ol (IX) ,3β,28-dihydroxy-12-en-ursane ( X ) . Among them, compound II, III, IV are new diterpenes of the manoyl oxide series. Compound V was obtained as a natural product firstly. Compound VIII, IX, X were isolated for the first time from Coleus Lour, genus.
The mainly active fraction is diterpenes in Coleus forskohlii Briq.. The fingerprint on diterpenes was studied by HPLC-ELSD, with the result that 19 peaks were common. The method is stable,well repeated and may offer abundant scientific basis for the transplantation and quality evaluation of Coleus forskohlii Briq..
After studying active compositions of Coleus forskohlii Briq., we have made more systematic research on it, including trait identification, microscopic identification, qualitative and quantitative analysis of isoforskolin, upon which the quality standard was established. The TLC identification according to the active fraction was unique to some extent, and the quantitative analysis determined by the mainly active constituent -isoforskolin was highly sensitive, well repeated and promisingly reliable. The study greatly improved the former local standard of Coleus forskohlii Briq.thus,can effectively control its quality.
采用溶剂法和色谱法对该药用植物的有效成分进行了提取分离研究，从中得到11个单体成分，鉴定了其中的10个化合物，分别为异佛斯可林(Ⅰ)，1，6-二乙酰氧基-7-去乙酰氧基-9-去羟基佛斯可林(Ⅱ)，6-乙酰氧基-9-去羟基佛斯可林(Ⅲ)，6-乙酰氧基佛斯可林(Ⅳ)，1，6-二乙酰氧基-9-去羟基佛斯可林(Ⅴ)，柳杉酚(Ⅵ)，β-谷甾醇(Ⅶ)，麦角甾-6，22-双烯-5α，8α-环二氧-3β-醇(Ⅷ)，麦角甾-6，9(11)，22-三烯-5α，8α-环二氧-3β-醇(Ⅸ)，3β，28-二羟基-12-烯-乌苏烷(Ⅹ)。其中化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为新化合物，化合物Ⅴ为首次从天然植物中分离到，化合物Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ为首次从该属植物中提出。
毛喉鞘蕊花主要有效部位为二萜类成分，采用HPLC-ELSD色谱法对其有效部位进行了指纹图谱的研究。标定了色谱图中19个共有峰，方法重现性和稳定性好，从而为毛喉鞘蕊花药材的移植和资源品质的评价提供了一定的科学依据。
在毛喉鞘蕊花有效成分研究的基础上，对该药用植物的性状、鉴别、检查、含量测定等方面进行了系统研究，制定了较为明确的质量标准。以其有效部位为目标确定的薄层色谱鉴别方法具有较强的专属性；以其主要有效成分异佛斯可林为指标建立的含量测定方法，具有高灵敏度，重现性好，可靠性强的特点。从而大大提高了该药材原制定的地方标准，能有效控制毛喉鞘蕊花的质量。
Coleus forskohlii Briq. ,a perennial dried herb of Labiatae.,is a folk traditional Chinese medicine against cough, asthma, acute and chronic bronchitis, dizziness and fluster. The plant has been investigated as a promising drug for the treatment of congestional cardiomyopathy, glaucoma, cancer of liver and stomach by local and international scholars because of its unique adenylate cyclase stimulated activity. Based on its pharmacology and clinical research, we have carried on relevant experiments on it.
The extraction and isolation from the whole plants of Coleus forskohlii Briq. were accomplished and 11 constituents were isolated from its ether fraction by various kinds of chromatographies. Ten of them were elucidated on the basis of spectral data as follows: isoforskolin ( I ) ,la,6β-diacetoxy-8,13-epoxylabd-14-en-ll-one ( II ) ,la-hydroxy-6p,7p-diacetoxy-8,13-epoxylabd-14-en-ll-one ( III ) ,la,9a-dihydroxy-6p,7a-diacetoxy-8,13-epoxylabd-14-en-ll-one (IV ) ,lα,6β,7β-triacetoxy-8,13-epoxylabd-14-en-ll-one ( V ) , sugiol ( VI ) ,p-sitosterol ( VII ) ,ergosta-6,22-dien-5α,8α-epidioxy-3β-ol ( VIII ) , ergosta-6,9(ll),22-trien-5α,8α-epidioxy-3β-ol (IX) ,3β,28-dihydroxy-12-en-ursane ( X ) . Among them, compound II, III, IV are new diterpenes of the manoyl oxide series. Compound V was obtained as a natural product firstly. Compound VIII, IX, X were isolated for the first time from Coleus Lour, genus.
The mainly active fraction is diterpenes in Coleus forskohlii Briq.. The fingerprint on diterpenes was studied by HPLC-ELSD, with the result that 19 peaks were common. The method is stable,well repeated and may offer abundant scientific basis for the transplantation and quality evaluation of Coleus forskohlii Briq..
After studying active compositions of Coleus forskohlii Briq., we have made more systematic research on it, including trait identification, microscopic identification, qualitative and quantitative analysis of isoforskolin, upon which the quality standard was established. The TLC identification according to the active fraction was unique to some extent, and the quantitative analysis determined by the mainly active constituent -isoforskolin was highly sensitive, well repeated and promisingly reliable. The study greatly improved the former local standard of Coleus forskohlii Briq.thus,can effectively control its quality.
引文
1．中国植物志编委会，中国植物志．北京：科学出版社，1977(第66卷)：536—544
2. Shah V.;Bhat S.V.;et al.The occurrence of forskolin in the labiatae.Planta Medica. 1980,39:183-185.
3．江苏植物所等编著，新华本草纲要(第一册)．上海：上海科技出版社，1988：438
4．张绍宽，彩叶草的栽培与管理，花木盆景：花卉园艺，2000，12：6-7
5．江苏植物所等编著，新华本草纲要(第一册)．上海：上海科技出版社，1991：430
6．赵延卓，金歧端，鞘蕊苏药材及其人工栽培，昆明医学院学报，1996，17(1)：27-29
7．王宗玉，吴大刚，我国毛喉鞘蕊花的发掘与研究进展，天然产物研究与开发，1995，7(2)：73-75
8. Gabetta B., Zint G.,et al.Minor diterpenoidsofcoleusforskohlii. Phytochemistry, 1989,28(3):859-862.
9. Akhila A.;, Rani K.;et al. Biogenetic relationship of polyoxygenated diterpenes in coleus forskohlii.Phytochemistry,1990,29(3):821-824.
10. Painuly P., Katti S.B.,et al. Diterpenes from Coleus forskohlii:Structures of Coleonol-E &Coleonol-F. Indian Journal of Chemistry, 1979,18B:214-216.
11. Bhat S.V., Bajwa B.S.,et al.Struetures and stereochemistry of new labdane diterpenoids from Coleus forskohlii Briq. Tetrahedron Letters, 1977,19:1669-1672.
12. Anil K.S.,Michael J.G.,et al.ldentity of Coleus with Forskolin:strueture revision of a base-catalysed rearrangement product. Tetrahedron Letters, 1985,26(5):551-554.
13. Khandelwal Y., Jotwani B.R.,et al.lsolation,structure elucidaion and synthesis of 1-deoxyforskolin.Tetrahedron, 1989,45 (3):763-766.
14. Ahmed Bahar, Vishwakarma R.A..Coleoside,a monoterpene glycoside from Coleus forskohlii. Phytochemistry, 1988,27(10):3309-3310.
15. Katti S. B.,Jauhari P.K.,et al.New diterpenes from Coleus forskohlii: structures of the diterpenes,coleonol-D,coleol & coleonone.Indian Journal of Chemistry, 1979,17B:321-323.
16. Tandon J.S.,Katti S.B.,et al.Chemistry & antihypertensive activity of coleonol derivatives. Indian Journal of chemistry. 1984,23B:67-69.
17．金岐端，和碧荷，毛喉鞘蕊花的微量成分，云南植物研究，1998，20(4)：469-473
18．金岐端，谢显厚，木全章，毛喉鞘蕊花的化学成分研究，天然产物研究与开发，1990，2(3)：6-9
19．宁永成编著，有机化合物结构鉴定与有机波谱学(第二版)．科技出版社，2001
20．于德泉，杨俊山主编，分析化学手册(第七分册：核磁共振波谱分析)．北京：化学工业出版社，2000，第二版
21．丛浦珠，苏克曼主编，分析化学手册(第九分册：质谱分析)．北京：化学工业出版社，2000，第二版
22．李朝明，林中文等，黄鞘蕊花中两个新的醌式二萜，云南植物研究，1993，15(4)：403-407
23．李朝明，林中文等，黄鞘蕊花的化学成分，云南植物研究，1991，13(3)：327-330
24．李朝明，林中文等，毛萼鞘蕊花的化学成分，云南植物研究，1992，14(2)：198-202
25．李朝明，张桂华等，毛萼鞘蕊花甲素的结构，云南植物研究，1991，13(2)：216-218
26．姚春所，沈云亨等，毛喉鞘蕊花的化学成分，天然产物研究与开发，2002，14(2)：1-6
27．梅双喜，张宏杰等，黄鞘蕊花中的艾里莫芬烷型倍半萜，植物学报，2001，43(8)：868-870
28．穆青，张朝明等，肉叶鞘蕊花化学成分的研究，中国中药杂志，1996，21(2)：104-105
29．李苑惠，朱光辉等，云南民族中草药毛喉鞘蕊花中的微量元素，微量元素与健康研究，1999，16(1)：50-51
30．王亮，王光灿等，云南民族中草药毛喉鞘蕊花中微量砷的形态分析，中药材，1999，22(12)：633-634
31．陈植和，王新华等，滇产毛喉鞘蕊花提取成分的药理作用，昆明医学院学报，1991，12(1)：19-22
32．陈植和，王新华等，毛喉鞘蕊花乙酸乙酯提取物对呼吸道平滑肌的解痉作用，昆明医学院学报，1990，11(3)：1-3
33．谢怀平，李毅琳等，复方鞘蕊苏颗粒剂治疗小儿支气管哮喘的临床研究，中华医药荟萃杂志，2003，2(2)：23-24
34．张炜，毕小利等，鞘蕊苏复方治疗肺热证的临床研究，辽宁中医杂志，2001，28(7)：408-409
35．杨为民，李新华等，佛斯可林类似物激动腺苷酸环化酶及抑制兔高眼压探讨，眼科研究，2001，19(1)：1-4
36．李新华，王德成等，异佛斯可林、毛果芸香碱和噻吗洛尔滴眼对兔眼房水动力学的影响，昆明医学院学报，1994，15(3)：1-5
37．马国义，陈植和等，异佛斯可林对大鼠及豚鼠全血血小板聚集的抑制作用，昆明医学院学报，1994，15(1)：18-21
38．陈必义，雷秀玲等，1-乙酰佛斯可林和异佛斯可林对大鼠血流动力学的影响，昆明医学院学报，1994，15(3)：53-55
39．张建明，孟琨等，毛喉萜对UMRl06细胞表皮生长因子受体的下行调节作用，生物化学与生物物理学报，1993，25(3)：307
40．管考梅，柳惠图等，毛喉萜对人胃癌细胞BGC．852中蛋白激酶c及其亚类的影响，生物化学杂志，1995，11(3)：316-318
41．王祥，张岭漪等，Forskolin对人胃癌细胞增殖影响的实验研究，肿瘤防治杂志，2003，10(9)：928-930
42．王祥，马力，毛喉萜对人肝癌细胞增殖影响的实验研究．兰州医学院学报，2003，29(2)：3-5
43．陈万生，贾鑫明等，甘西鼠尾草化学成分研究，药学学报，2003，38(5)：354-357
44．万辉，褐圆孔牛肝菌化学成分的研究，中草药，2000，31(5)：328-330
45．高锦明等，耳状网褶菌的化学成分，西北植物学报，2002，22(2)：391-395
46．严小红等，一种南海海绵(Acanthella sp．)的化学成分研究，天然产物研究与开发，2003，15(3)：199-202
47. Gauvin, A.; Smadja, J.;et al. Isolation of bioactive 5 α ,8 α -epidioxy sterols from the marine sponge Luffarieila cf. variabilis. Canadian Journal of Chemistry. 2000, 78(7): 986-992.
48．孟正本，何立夏，枯草化学成分研究，中国药科大学学报，1995，26(6)：329-331
49．国家药品监督管理局，中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)，国药管注[2000]348号
50．魏泱，丁明玉，蒸发光散射检测技术，色谱，2000，18(5)：399-401
51．A．Kuch等，双一模式ELSD：广泛应用的性能优化，国外分析仪器，2001，4：21-24
52．国家药典委员会，中药注射剂指纹图谱实验研究技术指南(试行)，国家药典委员会网站
53．云南省卫生厅，云南省药品标准(1987-1992)，1993：114
54．国家药典委员会，中华人民共和国药典(一部)，北京：化学工业出版社，2000
55．吴勇，陈金和，湖北移植与云南原产鞘蕊苏平喘药效学比较，中国医院药学杂志，2004，24(4)：211-212
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55．吴勇，陈金和，湖北移植与云南原产鞘蕊苏平喘药效学比较，中国医院药学杂志，2004，24(4)：211-212