鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定与PCR检测方法的建立
摘要
鸡传染性喉气管炎(Infctious laryngotracheitis )是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的鸡的一种急性接触性呼吸道传染病。该病毒属于α-疱疹病毒亚科、禽疱疹病毒I型。病鸡表现呼吸困难,咳出血性渗出物变主要发生在喉头和气管部分,气管黏膜肿胀、出血和糜烂,表面附着渗出物或黄色干酪样假膜。该病各种年龄的鸡均可发生,主要见于大鸡( 40--9 0日龄),中小鸡也易感,孔雀、雉鸡、火鸡和鹌鹑等也有发生。鸡的感染率可达9 0%--1 0 0%。死亡率为5 %--2 0 %,若控制不及时可达7 0 %,视毒株毒力而异。鸡传染性喉气管炎传播快,死亡率高,是危害养鸡业的主要疾病之一。为了进一步了解其在河南流行情况以及建立快速检测方法,本文开展了下列内容的研究并取得预期结果:
本实验针对漯河、许昌、平顶山等几家鸡场发生ILT进行病毒的分离鉴定,结果分离出3株鸡传染性喉气管炎病毒株。同时根据GenBank注册发表的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列,设计并筛选出1对引物扩增ILTV TK基因片段长为400 bp。以ILTV疫苗株的DNA为模板,进行特异性和灵敏性试验,结果该对引物检测ILTV DNA的最小检测量为1.20 ng,与NDV、H9亚型AIV、IBV灭活抗原、大肠杆菌以及沙门氏菌等抗原无交叉反应。用所建立的方法对发病禽场分离的病毒株进行临床检测,结果与病毒分离和动物回归试验结果相一致。结果表明本研究建立了快速有效的传染性喉气管炎PCR检测方法,并可应用于临床检测和诊断,该方法的建立为快速诊断与控制传染性喉气管炎奠定了基础。
本实验针对漯河、许昌、平顶山等几家鸡场发生ILT进行病毒的分离鉴定,结果分离出3株鸡传染性喉气管炎病毒株。同时根据GenBank注册发表的传染性喉气管炎病毒(ILTV)的TK基因序列,设计并筛选出1对引物扩增ILTV TK基因片段长为400 bp。以ILTV疫苗株的DNA为模板,进行特异性和灵敏性试验,结果该对引物检测ILTV DNA的最小检测量为1.20 ng,与NDV、H9亚型AIV、IBV灭活抗原、大肠杆菌以及沙门氏菌等抗原无交叉反应。用所建立的方法对发病禽场分离的病毒株进行临床检测,结果与病毒分离和动物回归试验结果相一致。结果表明本研究建立了快速有效的传染性喉气管炎PCR检测方法,并可应用于临床检测和诊断,该方法的建立为快速诊断与控制传染性喉气管炎奠定了基础。
引文
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