草苁蓉环烯醚萜苷对肝癌前病变大鼠肝脏标志酶及抗氧化酶的影响
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摘要
目的研究草苁蓉环烯醚萜苷(iridoid glucosides from Boschniakia rosscica, IGBR)对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine, DEN)诱导的大鼠肝癌前病变的肝脏组织匀浆及线粒体的标志酶及抗氧化酶活力的影响,进而探索其抗化学致癌的可能机制。
方法将60只Wistar雄性大鼠随机分为5个组,各组为12只,分别为正常对照组(Saline-BD-PH)、模型组(DEN-AAF-PH)、草苁蓉环烯醚萜苷低剂量组(DEN-AAF+125mg/kg IGBR-PH)、草苁蓉环烯醚萜苷中剂量组(DEN-AAF+250mg/kg IGBR-PH)、草苁蓉环烯醚萜苷高剂量组(DEN-AAF+500mg/kg IGBR-PH)。模型组和草苁蓉环烯醚萜苷组按照Solt-Farber氏法制作大鼠肝癌前病变模型。实验开始第一周起给大鼠经腹腔注射DEN200mg/kg,第二周至第八周模型组和各草苁蓉环烯醚萜苷组给予0.008%乙酰氨基芴,同时草苁蓉环烯醚萜苷组各组灌胃草苁蓉环烯醚萜苷。第三周后进行肝部分切除术。第八周后处死大鼠,观察大鼠肝脏形态变化,制作肝脏组织匀浆及肝脏线粒体,测定天门冬氨酸氨基转肽酶(aspartate transaminase, AST)、丙氨酸氨基转肽酶(alanine transaminase, ALT)、谷酰胺转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物岐化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-PX)、谷胱甘肽-S-转移酶活性(glutathione-S-transferase,GST)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。
结果1.草苁蓉环烯醚萜苷促进大鼠食欲,能改善大鼠的精神状态、皮毛色泽。2.模型组肝癌前病变时大鼠肝脏组织匀浆AST、ALT、γ-GT、GST活性和MDA含量显著高于正常对照组,SOD、CAT、GSH-PX活性显著低于正常对照组；肝脏线粒体GST活性和MDA含量显著高于正常对照组,SOD、CAT、GSH-PX活性显著低于正常对照组。草苁蓉环烯醚萜苷组肝脏组织匀浆γ-GT、ALT、AST、GST活性和MDA含量显著降低,SOD、CAT、GSH-PX活性显著回升；肝脏线粒体GST活性和MDA含量显著降低,SOD、CAT、GSH-PX活性显著回升。
结论草苁蓉环烯醚萜苷对二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌前病变肝脏组织具有明显的保护作用,防止脂质过氧化和增强抗氧化酶活性。
Objective:To study the effect of iridoid glucosides from Boschniakia rossica (IGBR) on liver tissue homogenate、Mitochondrial Marker Enzyme and antioxidative enzymes of rats with hepatic preneoplasia induced by diethylnitrosamine (DEN) and investigatc the possible mechanism of its anti-tumor.
Methods:Sixty male Wistar rats were randomly assigned into five groups, each groupHave 12 rats. control group [saline-basal diet (BD)-partial hepatectecomy (PH)], model group[(DEN-acetylaminoflofluorene(AAF)-PH)], IGBR low dose group (DEN-AAF+125mg/kgIGBR-PH), IGBR medium dose group (DEN-AAF+250mg/kg IGBR-PH) and IGBR high dose group (DEN-AAF+500mg/kg IGBR-PH). Observe the change of hepatic in rats, and make liver tissue homogenate and Hepatic mitochondria after the eight week execute rats, determination of the content of aspartate amino-transferdse (AST), alanine trasaminase (ALT), y-glutamy transpeptidase (y-GT), catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-PX), glutathione-S-transferase (GST), and malondialdehyde (MDA).
Result:IGBR obviously improved the weigh gain, mental state, color pattern for rats. the rats in model group liver tissue homogenate AST、ALT、γ-GT、GST activity and MDA level were increased,and the SOD,CAT, GSH-PX activities were dereased in model group before hepatic preneoplastic; compare with model group, the mitochondria in liver GST activity and MDA content were increased and SOD、CAT、GSH-PX activity were decreased. IGBR liver tissue homogenate reduced the activities of y-GT、ALT、AST、GST and MDA content, SOD、CAT、GSH-PX activity firm up; GST activity and MDA content were reduced, and SOD、CAT、GSH-PX activity have firm up in liver tissue homogenate.
Conclusion:IGBR exhibited obvious protection effect on DEN induced rats hepatic preneoplastic lesions, prevent its lipid peroxidation and enhance antioxidant enzymes activity.
方法将60只Wistar雄性大鼠随机分为5个组,各组为12只,分别为正常对照组(Saline-BD-PH)、模型组(DEN-AAF-PH)、草苁蓉环烯醚萜苷低剂量组(DEN-AAF+125mg/kg IGBR-PH)、草苁蓉环烯醚萜苷中剂量组(DEN-AAF+250mg/kg IGBR-PH)、草苁蓉环烯醚萜苷高剂量组(DEN-AAF+500mg/kg IGBR-PH)。模型组和草苁蓉环烯醚萜苷组按照Solt-Farber氏法制作大鼠肝癌前病变模型。实验开始第一周起给大鼠经腹腔注射DEN200mg/kg,第二周至第八周模型组和各草苁蓉环烯醚萜苷组给予0.008%乙酰氨基芴,同时草苁蓉环烯醚萜苷组各组灌胃草苁蓉环烯醚萜苷。第三周后进行肝部分切除术。第八周后处死大鼠,观察大鼠肝脏形态变化,制作肝脏组织匀浆及肝脏线粒体,测定天门冬氨酸氨基转肽酶(aspartate transaminase, AST)、丙氨酸氨基转肽酶(alanine transaminase, ALT)、谷酰胺转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物岐化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-PX)、谷胱甘肽-S-转移酶活性(glutathione-S-transferase,GST)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。
结果1.草苁蓉环烯醚萜苷促进大鼠食欲,能改善大鼠的精神状态、皮毛色泽。2.模型组肝癌前病变时大鼠肝脏组织匀浆AST、ALT、γ-GT、GST活性和MDA含量显著高于正常对照组,SOD、CAT、GSH-PX活性显著低于正常对照组；肝脏线粒体GST活性和MDA含量显著高于正常对照组,SOD、CAT、GSH-PX活性显著低于正常对照组。草苁蓉环烯醚萜苷组肝脏组织匀浆γ-GT、ALT、AST、GST活性和MDA含量显著降低,SOD、CAT、GSH-PX活性显著回升；肝脏线粒体GST活性和MDA含量显著降低,SOD、CAT、GSH-PX活性显著回升。
结论草苁蓉环烯醚萜苷对二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌前病变肝脏组织具有明显的保护作用,防止脂质过氧化和增强抗氧化酶活性。
Objective:To study the effect of iridoid glucosides from Boschniakia rossica (IGBR) on liver tissue homogenate、Mitochondrial Marker Enzyme and antioxidative enzymes of rats with hepatic preneoplasia induced by diethylnitrosamine (DEN) and investigatc the possible mechanism of its anti-tumor.
Methods:Sixty male Wistar rats were randomly assigned into five groups, each groupHave 12 rats. control group [saline-basal diet (BD)-partial hepatectecomy (PH)], model group[(DEN-acetylaminoflofluorene(AAF)-PH)], IGBR low dose group (DEN-AAF+125mg/kgIGBR-PH), IGBR medium dose group (DEN-AAF+250mg/kg IGBR-PH) and IGBR high dose group (DEN-AAF+500mg/kg IGBR-PH). Observe the change of hepatic in rats, and make liver tissue homogenate and Hepatic mitochondria after the eight week execute rats, determination of the content of aspartate amino-transferdse (AST), alanine trasaminase (ALT), y-glutamy transpeptidase (y-GT), catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-PX), glutathione-S-transferase (GST), and malondialdehyde (MDA).
Result:IGBR obviously improved the weigh gain, mental state, color pattern for rats. the rats in model group liver tissue homogenate AST、ALT、γ-GT、GST activity and MDA level were increased,and the SOD,CAT, GSH-PX activities were dereased in model group before hepatic preneoplastic; compare with model group, the mitochondria in liver GST activity and MDA content were increased and SOD、CAT、GSH-PX activity were decreased. IGBR liver tissue homogenate reduced the activities of y-GT、ALT、AST、GST and MDA content, SOD、CAT、GSH-PX activity firm up; GST activity and MDA content were reduced, and SOD、CAT、GSH-PX activity have firm up in liver tissue homogenate.
Conclusion:IGBR exhibited obvious protection effect on DEN induced rats hepatic preneoplastic lesions, prevent its lipid peroxidation and enhance antioxidant enzymes activity.
引文
[1]邓敬桓,秦雪.原发性肝癌发生机制的研究进展[J].环境与健康杂志,2007,24(11).
f2]曹爱中,黄爱龙.乙型肝炎病毒相关性肝癌发病机制研究进展[J].国际病毒学杂志.2009,16(1)：12-15.
[3]Hassan MM, Hwang LY, Hatten CJ, et al. Risk factors for hepatocellular carcinoma: synergism of alcohol with viral heaptitis and diabetes mellitus[J]. Hepatology,2002, 36:1206-1213.
[4]Parkin DM, Bray FI, Devess SS. Cancer burden in the year 2000. The global pieture[J]. Eur J Cancer,2001,37 Supple 8:S4-S66.
[5]丰平,刘树红,李霞,等.槲芪散对肝癌前病变大鼠肝脏线粒体结构的影响[J].中医药理与临床.2008,24(1)：56-57.
[6]Faber E. Approaches to cancer prevention duction and perspective[J]. Proc Arn Assoc Cancer,1988,29:527.
[7]腾红丽.原发性肝癌中医药临床研究进展[J].中国中医药信息杂志.2005,12(9)：103-105.
[8]Chang WC, Li JS, Li SD, et al. Study on the biological properties of Boschniakia rossica[J]. China Med Mater,1988,11:9.
[9]王秀丽,宋志坚.草苁蓉研究进展[M].黑龙江科技信息.2009,20：122
[10]尹宗柱,金海玲,李天洙.草苁蓉甲醇提取物对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝脏癌前病变的抑制作用[J].中国中药杂志,1998,23(7)：424-426.
[11]金艳峰.草苁蓉乙醇提取物对人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及凋亡的干预作用[D].延吉：延边大学,2007.
[12]金明,李勇,朴春梅,等.草苁蓉提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对血清一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响[J].延边大学医学学报,2001,24(4)：247-249.
[13]汪霞.草苁蓉环烯醚萜苷对DEN诱导的肝癌前病变大鼠血清抗氧化酶活性的影响[D].延吉：延边大学,2010.
[14]彭慧慧.补充HMB对不同运动时间后大鼠骨骼肌损伤的保护作用及机制研究[D].扬州：扬州大学,2006.
[15]Ferlay J, Autier P, Boniol M, et al. Estimates of the cancer incidence and mortality in Europe in 2006[J]. Annals of oncology,2007,18(3):581-592.
[16]陈永福.寒热刺激对二乙基亚硝胺诱发性肝癌模型大鼠肿瘤生物学特性的影响[D].上海：第二军医大学,2009
[17]贺凤.运动性血色素下降发生过程中大鼠血清及肝脏MDA、SOD、GSH-PX变化的动态观察[D].北京：北京体育大学,2004.
[18]卢峻,陈英松,阿古拉等.蒙医温针对大鼠疲劳型肝脏MDA、GSH含量及GSH-PX、SOD活性的影响[J].针刺研究.2007,32(3)：167-169.
[19]Powers SK, DeRuisseau KC, Quindry J. Dietary antioxidants and exercise[J]. Sports Sci,2004,22(1):81-94
[20]Vina J, Gimeno A, Sastre J, et al. Mechanism of free radical production in exhaustive exercise in humans and rats:role of xanthine oxidase and protection by allopurinol[J]. IUBMB Life,2000,49(6):539-544
[21]Travis CC, McClain TW, Birkner PD. Diethylnitrosarnine induced hepaticarcino-genesis in rats:atheoretical study[J]. Toxicol Pharmacol.1991,109.
[22]丁仕义,蔡金华.大鼠肝细胞癌模型的建立及MR成像研究[J].第三军医大学学报,2002,24(6)：643-645.
[23]Okubo H, Moriyama M, Tanaka N, et al. Detection of serum and intrahepatic hepatocyte growth factor during DEN-induced carcinogenesis in the ratt[J]. Hepatol Res,2002,24(4):385.
[24]刘振国.柴胡皂甙d(SSd)对二乙基亚硝胺致大鼠肝癌的抑制作用和免疫功能的影响[D].兰州：兰州大学,2008.
[25]Thomas P, Fugnumn R, Aranyi C, et al. The efect ofdimethylnitrosamine on host resistance and immunity[J]. Toxicol Appl pharmacol,1985,77(2):219-229.
[26]刘家国,赵洪进,刘艳娟等.富硒麦芽对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌发生的影响[J].福建农林大学学报,2007,36(4)：405-410
[27]彭海燕,章永红,样早,等.豆楮方对DEN诱发大鼠肝癌的防治作用[J].南京 中医药大学学报,2007,23(1)：58-60.
[28]文朝阳,史争鸣,李霞等.槲寄生总碱和多糖对黄曲霉菌毒素诱发大鼠肝癌前病变时血清同工酶含量的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,2009,23(3)：201-207.
[29]党双锁,张正国,袁利超,等.大黄素和黄芪多糖对大鼠实验性肝癌的抑制作用[J].西安交通大学学报,2006,27(3)：250-253.
[30]叶健,徐锡坤,周建伟,等.复方半枝莲防治二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的研究[J].中国中西医结合消化杂志,2002,10(2)：67-70.
[31]张学武,张学斌.珍珠梅提取物对DEN所致大鼠肝癌前病变抑制作用的研究[J].中国实用方剂学杂志,2004,10(4)：33-35.
[32]韩锐.抗癌药物研究进展与实验技术[M].北京：北京医科大学,中国协和医科大学联合出版社,1997,108.
[33]王守峰.疏肝降胃合剂配合动脉化疗栓塞治疗晚期原发性肝癌38例[J].广西中医药,2006,29(4)
[34]王海涛.活性氧的信号分子的作用[J].生命的化学,2001,21(1)：46-52.
[35]Cross CE, Borish ET. Oxygen radicals and human disease[J]. Ann Intern Med,1987, 107:526-545.
[36]Allen RG, Balin AK. Oxidative influence on development and differention:an overview of a free radical theory Of development[J]. Free Radical Biol Med,1989, 6(6):631-661.
[37]黄晓欣,张爱华,洪峰等.碳酸锂对抗AFB1诱导大鼠肝癌过程中MDA、4-HNE的表达及意义[J]. Carcino genesis teratogenesis mutagenesis.17(3):133-135.
[38]Chait A. Methods for assessing lipid and lipoprotein oxidation[J].Curr Opin Lipidol,1992,3(2):389.
[39]田志杰,沈南,吕仕杰,等.高强度微波辐射对Wistar大鼠血清SOD、HSP70和肝脏MDA、Mit肿胀的影响[J].四川动物,2009,28(4)：528-531.
[40]Ohyashiki T, Sakata N, Mastsui K. A Decerease of lipid fluidity of the porcine intestinal hrushhorder membranes by trement with malondialdehyde[J]. J Biochem, 1992,111:419
[41]邓海平,俞诗源,陈玉琴,等.X射线辐射对仔鼠体重、皮毛生长及肝、肾脏组 织SOD、CAT活力及MDA含量的影响[J].动物学报,2008,54(6)：1029-1037.
[42]Frank V, Eva V, James FD,2001. The role of active oxygen species in plant signal transductiori[J]. Plant Science 161:405-414
[43]沈明花,尹宗柱.草苁蓉提取物对二乙基亚硝胺诱发的肝脏癌前病变大鼠抗氧化活力的影响[J].中国中药杂志,1999,24(12)：746-748.
[44]沈明花,全吉淑,柳明珠,等.草苁蓉提取物对二乙基亚硝胺诱发的肝脏癌前病变大鼠抗氧化酶活力及肿瘤坏死因子的影响[J].四川中医,2004,22(2)：24-26.
[45]钟正贤,陈学芬,李燕婧,等.显齿驼葡萄叶提取物对大鼠肝癌前病变模型抗氧化酶活性的影响[J].中医药导报,2009,15(8)：1-3.
[46]文朝阳,史争鸣,李霞,等.槲寄生总碱和多糖对黄曲霉菌毒素诱发大鼠肝癌前病变时血清同工酶含量的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,2009,23(3)：201-207.
[47]Pettersen I, Andersen JH, Bjornland K, MathisenQ, Bremnes R, Wellman M, et al. Heterogeneity in gammaglutamyltransferase mRNA expression and glycan structures. Search for tumor-specific variants in human liver metastases and colon carcinoma cells[J]. Biochim Biophys Acta,2003,1648(1-2):210-218.
[48]Pettersen I, Andersen JH, Bjornland K, Mathisen Q, Bremnes R, Wellman M, et al. Heterogeneity in gamma-glutamyltransferase Mrna expression and glycan structures.Search for tumor-specific variants in human liver metastases and colon carcinoma cells[J]. Biochim Biophys Acta,2003,1648(1-2):210-218.
[49]李兴华,王丽英,李广生.LEC鼠自发性肝癌谷胱甘肽S-转移酶表达的意义[J].吉林大学学报,2005,31(1)：25-26.
[50]Okawa K, Nakano H, Kakizaki I, et al. Identification of glutathione S-transferase P-1 as the class Pi from dominantely expressed inmouse hepatic adenomas[J]. Jpn J Cancer Res,1998,89:641-648.
[51]Yonezawa K, Nakagama H, Tajima R, et al. Effects of soy protein isolate on LEC rats, a model of Wilson disease:mechanisms underlying enhancement of liver cell damage[J].Biochem biophys Res Common,2003,302(2):271-274.
[52]刘德传,吴仕九,丁辉,等.清香散对湿热型肝癌模型组大鼠ALT、AST、IL-8水平的影响[J].陕西中医,2004,25(5)：473-475
[53]孙步彤,盛传伦,关勇,等.线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶测定及其应用价值[J].中国实验诊断学,2005,9(5)：770-772.
[54]Clairce LS, Pagadigorria FM, Ana MK, et al. Effects of methotrexate on calcium flux-in rat liver mitochondria, microsomes and plasma membrane vesicles[J]. Comparative Biochemistry and Physiology, Part C,2006,143:340-348.
[55]黄琳,陆付耳,杨小玉,等.黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体氧化应激的影响[J].中国中西医结合杂志,2008,28(8)：725-728.
[56]毛德文,邱华,余晶,等.解毒化瘀Ⅱ方对实验性肝衰竭大鼠肝脏坏死面积及肝线粒体超微结构的影响[J].广西中医药,2006,29(8)：46-49.
[57]苏新友,李世珍,李树静,等.原发性肝癌术前介入治疗的疗效评价[J].中国辐射卫生，2004,13(2)：150-151.
[58]Kohn EC, Litta LA, Molecular insights into cancer invasion:strategies for prevention and intervention[J]. Cancer Res,1995,55:1856.
[1]Chang WC, Li'JS, Li SD, et al. Study on the biological properties of Boschniakia rossica [J]. China Med Mater,1988,11:9.
[2]王秀丽,宋志坚.草苁蓉研究进展[J].黑龙江科技信息,2009,20：122.
[3]杨树春,于海峰,王雪松,等.草苁蓉资源的开发与利用[J].特种经济动植物,1998,1(1)：18-20.
[4]杨树春,马俊莹,郭宝英,等.草苁蓉寄生机理的研究[J].特产研究,2003,(2)：19-23.
[5]郑红月,腾杰,王冰,等.草苁蓉的形态组织鉴定[J].中药材,2001,24(8)557-559.
[6]王宝荣,屠鹏飞,邓秀兰.东北草苁蓉的形态组织鉴定[J].中药材,1999,22(2)：67-69.
[7]桂明玉,张红桂,金永日,等.草苁蓉化学成分的研究[J].中国药学杂志,1997,32(4)：204-206.
[8]刘景河,梁忠岩.草苁蓉化学成分与药理研究进展[J].特产研究,2001,(4)：55-58.
[9]李向高,郑友兰.草苁蓉生药学及其化学成分的研究[J].吉林农业大学学报,1985,(7)：92-95.
[10]魏春雁,孙启良,张晶,等.草苁蓉碱性化学成分的研究[J].吉林农业大学学报,1994,16(12)：145-148.
[11]桂明玉,张红桂,吴广宣,等.草苁蓉脂肪酸成分分析[J].白求恩医科大学学报,1995,(21)：149.
[12]陈颖,汪树理,陈德锋.草苁蓉氨基酸和营养元素含量的测定[J].氨基酸和生物资源,2008,30(2)：74-76.
[13]李树殿,武逵,张军伟.长白山草苁蓉化学成分研究Ⅱ、糖类成分的分析[J].中药材,1987,(1)：39.
[14]常桂英,孙仓,娇艳春.草苁蓉花序水溶性多糖的研究[J].通化师院学报,1997,(3)：50-52.
[15]魏民,张丽萍,梁忠岩,等.草苁蓉根、茎水溶性多糖BRT的分离与鉴定[J].东 北师大学报,2003,35(1)：74-77.
[16]梁敏, 卜秀玲,刘瑛.草苁蓉多糖研究进展[J].食品与药品,2009,11(9)：65-67.
[17]李树殿,邱春.长白山草灰蓉化学成分研究Ⅲ无机成分的分析[J].中药材,1988,11(5)：40-41.
[18]易以军,曹正中,吴厚鸣,等.草苁蓉化学成分的研究[J].药学学报,1999,34(9)：686-689.
[19]姜勇男,郑承勋,李红花,等.草苁蓉对小鼠抗体分泌细胞的影响[J].延边医学院学报,1992,15(3)：170-173.
[20]张庆镐,李红花,魏成淑,等.草苁蓉多糖对小鼠白细胞介素-2产生的影响[J].延边大学医学学报,2000,23(1)：37-38.
[21]林碧湖,寺西强.人IL-2的提纯、性状及其对B细胞的作用[J].中国免疫学杂志,1985,1(3)：2.
[22]陆德源.现代免疫学[M].上海：上海科学技术出版社,1993，,65.
[23]张庆镐,李英信,李红花,等.草苁蓉多糖对小鼠体液免疫功能的影响[J].延边大学医学学报,1999,22：26-28
[24]侯元,霍德胜,魏艳君,等.草苁蓉多糖的抗肿瘤作用及免疫调节作用[J].吉林大学学报,2007,33(6)：1022-1025
[25]郑荣梁.衰老的自由基学说[M].实用老年医学,1992,6(1)：31
[26]Cui YH, Wang XL, LiuQ, et al. Influences of antioxidation of salvianolic acid B on proliferation of cultured hepatic stellate cells[J]. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi,2002, 10(3):317.
[27]朴龙,蔡英兰,金香子,等.草苁蓉提取物对亚急性衰老大鼠的抗衰老作用[J].延边大学医学学报,2003,26(1)：18-21.
[28]许士凯,主编.抗衰老药物的药理与作用[M].上海：上海中医学院出版社,1987,118.
[29]吴春福.依据自由基学说研究人参茎叶皂甙的抗衰老作用[J].沈阳药学院学报,1992,9(1)：37.
[30]朴龙,张学武,金香子,等.草苁蓉提取物对衰老大鼠脑组织自由基德影响[J].中 西医结合学报,2003,1(2)：125-127.
[31]赵增翰.脂褐素的研究及其进展[J].国外医学老年医学分册,1981,4：146.
[32]金美善,李莲花,姜逢春,等.草苁蓉对体外培养乳鼠肝细胞抗衰老作用的研究[J].延边大学医学学报,1997,20(4)：223-226.
[33]刘平,葛迎春,王本祥.细胞衰老与抗衰老[J].中国老年学杂志,1994,14(2)：110.
[34]沈明花,全吉淑,柳明洙,等.草苁蓉提取物对大鼠肝癌前病变模型血清抗氧化酶活性及肿瘤坏死因子的影响[J].山东中医杂志,2004,23(2)：97-99.
[35]金艳峰.草苁蓉乙醇提取物对人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及凋亡的干预作用[D].延吉：延边大学,2007
[36]钟慈声,孙安阳主编.一氧化氮的生物医学[M],上海：上海医科大学出版社.1997,341.
[37]高社军.一氧化氮的生物学特性及抗肿瘤作用机制[J].国外医学肿瘤学分册,1999,26(5)：260.
[38]Sagar SM, Singh G, Hodson DL, et al. Nitric oxide and anticancer theraph[J]. Cancer Treal Reu,1995,21:159.
[39]金明,李勇,朴春梅,等.草苁蓉提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对血清一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响[J].延边大学医学学报,2001,24(4)：247-249.
[40]张新,王胜惠.草苁蓉90%醇提取物对荷瘤H22小鼠生存时间及S180瘤重的影响[J].黑龙江省学术年会论文集,2006,631-633.
[41]潘理会,李春辉,孙嘉斌.草苁蓉及氧化苦参碱治疗肝纤维化的实验研究[J].承德医学院学报,2005,22(3).
[42]朴虎林,金帅星,朴熙绪等.草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝纤维化的影响[J].中国临床医药研究杂志,2003,108：11271-11273.
[43]Baskin DS, Browning JL, Pirozzolo FJ, et al. Brain cholineacetyl transferase and mental function in Alzheimer disease[J]. Arch Neur-01,1999,56(9):1121-1123.
[44]周丽莎,朱书秀,王小月.草苁蓉提取物对AD大鼠海马区bFGF及学习记忆的影响[J].陕西中医,2008,29(10)：1431-1434.
[45]Ou YW, Huang YL, Da CD, et al. Electroacupuneture reduces rat's neuronal ische- mic injuryand enhances the expression of basic fibroblast growthfactor[J]. J Shanxi Med Univ,2000,31:68-70.
[46]周丽莎,朱书秀,望庐山.草苁蓉提取物对AD模型大鼠学习记忆能力及神经元凋亡的影响[J].时珍国医国药,2009,20(12)：2971-2972.
[47]张艳,明亮,章家胜,等.草苁蓉的促智作用[J].安徽医科大学学报,1994,29(3)：181-183.
[48]尹学哲,许惠仙,金爱花,等.草苁蓉提取物对高脂血症家兔血浆脂蛋白脂质过氧化的影响[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(11)：132-134.
[49]李秀英,陈洁华,张玉菊.复方草苁蓉对小鼠耐缺氧和抗疲劳作用的影响[J].吉林医学信息,1999,9：43-44.
[50]郑毅男.草苁蓉化学成分的研究[J].吉林农业大学学报,1987,9(1)：31.
[51]曹红子,玄延花,张成镐,等.草苁蓉提取物抗柯萨奇B3病毒的实验研究[J].中国中医药科技,2002,9(2)：106-107.
[52]于庆海,高大远,朴光春,等.草苁蓉实验药理研究[J].中药材,1993,16(7)：34.
f2]曹爱中,黄爱龙.乙型肝炎病毒相关性肝癌发病机制研究进展[J].国际病毒学杂志.2009,16(1)：12-15.
[3]Hassan MM, Hwang LY, Hatten CJ, et al. Risk factors for hepatocellular carcinoma: synergism of alcohol with viral heaptitis and diabetes mellitus[J]. Hepatology,2002, 36:1206-1213.
[4]Parkin DM, Bray FI, Devess SS. Cancer burden in the year 2000. The global pieture[J]. Eur J Cancer,2001,37 Supple 8:S4-S66.
[5]丰平,刘树红,李霞,等.槲芪散对肝癌前病变大鼠肝脏线粒体结构的影响[J].中医药理与临床.2008,24(1)：56-57.
[6]Faber E. Approaches to cancer prevention duction and perspective[J]. Proc Arn Assoc Cancer,1988,29:527.
[7]腾红丽.原发性肝癌中医药临床研究进展[J].中国中医药信息杂志.2005,12(9)：103-105.
[8]Chang WC, Li JS, Li SD, et al. Study on the biological properties of Boschniakia rossica[J]. China Med Mater,1988,11:9.
[9]王秀丽,宋志坚.草苁蓉研究进展[M].黑龙江科技信息.2009,20：122
[10]尹宗柱,金海玲,李天洙.草苁蓉甲醇提取物对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝脏癌前病变的抑制作用[J].中国中药杂志,1998,23(7)：424-426.
[11]金艳峰.草苁蓉乙醇提取物对人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及凋亡的干预作用[D].延吉：延边大学,2007.
[12]金明,李勇,朴春梅,等.草苁蓉提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对血清一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响[J].延边大学医学学报,2001,24(4)：247-249.
[13]汪霞.草苁蓉环烯醚萜苷对DEN诱导的肝癌前病变大鼠血清抗氧化酶活性的影响[D].延吉：延边大学,2010.
[14]彭慧慧.补充HMB对不同运动时间后大鼠骨骼肌损伤的保护作用及机制研究[D].扬州：扬州大学,2006.
[15]Ferlay J, Autier P, Boniol M, et al. Estimates of the cancer incidence and mortality in Europe in 2006[J]. Annals of oncology,2007,18(3):581-592.
[16]陈永福.寒热刺激对二乙基亚硝胺诱发性肝癌模型大鼠肿瘤生物学特性的影响[D].上海：第二军医大学,2009
[17]贺凤.运动性血色素下降发生过程中大鼠血清及肝脏MDA、SOD、GSH-PX变化的动态观察[D].北京：北京体育大学,2004.
[18]卢峻,陈英松,阿古拉等.蒙医温针对大鼠疲劳型肝脏MDA、GSH含量及GSH-PX、SOD活性的影响[J].针刺研究.2007,32(3)：167-169.
[19]Powers SK, DeRuisseau KC, Quindry J. Dietary antioxidants and exercise[J]. Sports Sci,2004,22(1):81-94
[20]Vina J, Gimeno A, Sastre J, et al. Mechanism of free radical production in exhaustive exercise in humans and rats:role of xanthine oxidase and protection by allopurinol[J]. IUBMB Life,2000,49(6):539-544
[21]Travis CC, McClain TW, Birkner PD. Diethylnitrosarnine induced hepaticarcino-genesis in rats:atheoretical study[J]. Toxicol Pharmacol.1991,109.
[22]丁仕义,蔡金华.大鼠肝细胞癌模型的建立及MR成像研究[J].第三军医大学学报,2002,24(6)：643-645.
[23]Okubo H, Moriyama M, Tanaka N, et al. Detection of serum and intrahepatic hepatocyte growth factor during DEN-induced carcinogenesis in the ratt[J]. Hepatol Res,2002,24(4):385.
[24]刘振国.柴胡皂甙d(SSd)对二乙基亚硝胺致大鼠肝癌的抑制作用和免疫功能的影响[D].兰州：兰州大学,2008.
[25]Thomas P, Fugnumn R, Aranyi C, et al. The efect ofdimethylnitrosamine on host resistance and immunity[J]. Toxicol Appl pharmacol,1985,77(2):219-229.
[26]刘家国,赵洪进,刘艳娟等.富硒麦芽对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌发生的影响[J].福建农林大学学报,2007,36(4)：405-410
[27]彭海燕,章永红,样早,等.豆楮方对DEN诱发大鼠肝癌的防治作用[J].南京 中医药大学学报,2007,23(1)：58-60.
[28]文朝阳,史争鸣,李霞等.槲寄生总碱和多糖对黄曲霉菌毒素诱发大鼠肝癌前病变时血清同工酶含量的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,2009,23(3)：201-207.
[29]党双锁,张正国,袁利超,等.大黄素和黄芪多糖对大鼠实验性肝癌的抑制作用[J].西安交通大学学报,2006,27(3)：250-253.
[30]叶健,徐锡坤,周建伟,等.复方半枝莲防治二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌的研究[J].中国中西医结合消化杂志,2002,10(2)：67-70.
[31]张学武,张学斌.珍珠梅提取物对DEN所致大鼠肝癌前病变抑制作用的研究[J].中国实用方剂学杂志,2004,10(4)：33-35.
[32]韩锐.抗癌药物研究进展与实验技术[M].北京：北京医科大学,中国协和医科大学联合出版社,1997,108.
[33]王守峰.疏肝降胃合剂配合动脉化疗栓塞治疗晚期原发性肝癌38例[J].广西中医药,2006,29(4)
[34]王海涛.活性氧的信号分子的作用[J].生命的化学,2001,21(1)：46-52.
[35]Cross CE, Borish ET. Oxygen radicals and human disease[J]. Ann Intern Med,1987, 107:526-545.
[36]Allen RG, Balin AK. Oxidative influence on development and differention:an overview of a free radical theory Of development[J]. Free Radical Biol Med,1989, 6(6):631-661.
[37]黄晓欣,张爱华,洪峰等.碳酸锂对抗AFB1诱导大鼠肝癌过程中MDA、4-HNE的表达及意义[J]. Carcino genesis teratogenesis mutagenesis.17(3):133-135.
[38]Chait A. Methods for assessing lipid and lipoprotein oxidation[J].Curr Opin Lipidol,1992,3(2):389.
[39]田志杰,沈南,吕仕杰,等.高强度微波辐射对Wistar大鼠血清SOD、HSP70和肝脏MDA、Mit肿胀的影响[J].四川动物,2009,28(4)：528-531.
[40]Ohyashiki T, Sakata N, Mastsui K. A Decerease of lipid fluidity of the porcine intestinal hrushhorder membranes by trement with malondialdehyde[J]. J Biochem, 1992,111:419
[41]邓海平,俞诗源,陈玉琴,等.X射线辐射对仔鼠体重、皮毛生长及肝、肾脏组 织SOD、CAT活力及MDA含量的影响[J].动物学报,2008,54(6)：1029-1037.
[42]Frank V, Eva V, James FD,2001. The role of active oxygen species in plant signal transductiori[J]. Plant Science 161:405-414
[43]沈明花,尹宗柱.草苁蓉提取物对二乙基亚硝胺诱发的肝脏癌前病变大鼠抗氧化活力的影响[J].中国中药杂志,1999,24(12)：746-748.
[44]沈明花,全吉淑,柳明珠,等.草苁蓉提取物对二乙基亚硝胺诱发的肝脏癌前病变大鼠抗氧化酶活力及肿瘤坏死因子的影响[J].四川中医,2004,22(2)：24-26.
[45]钟正贤,陈学芬,李燕婧,等.显齿驼葡萄叶提取物对大鼠肝癌前病变模型抗氧化酶活性的影响[J].中医药导报,2009,15(8)：1-3.
[46]文朝阳,史争鸣,李霞,等.槲寄生总碱和多糖对黄曲霉菌毒素诱发大鼠肝癌前病变时血清同工酶含量的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,2009,23(3)：201-207.
[47]Pettersen I, Andersen JH, Bjornland K, MathisenQ, Bremnes R, Wellman M, et al. Heterogeneity in gammaglutamyltransferase mRNA expression and glycan structures. Search for tumor-specific variants in human liver metastases and colon carcinoma cells[J]. Biochim Biophys Acta,2003,1648(1-2):210-218.
[48]Pettersen I, Andersen JH, Bjornland K, Mathisen Q, Bremnes R, Wellman M, et al. Heterogeneity in gamma-glutamyltransferase Mrna expression and glycan structures.Search for tumor-specific variants in human liver metastases and colon carcinoma cells[J]. Biochim Biophys Acta,2003,1648(1-2):210-218.
[49]李兴华,王丽英,李广生.LEC鼠自发性肝癌谷胱甘肽S-转移酶表达的意义[J].吉林大学学报,2005,31(1)：25-26.
[50]Okawa K, Nakano H, Kakizaki I, et al. Identification of glutathione S-transferase P-1 as the class Pi from dominantely expressed inmouse hepatic adenomas[J]. Jpn J Cancer Res,1998,89:641-648.
[51]Yonezawa K, Nakagama H, Tajima R, et al. Effects of soy protein isolate on LEC rats, a model of Wilson disease:mechanisms underlying enhancement of liver cell damage[J].Biochem biophys Res Common,2003,302(2):271-274.
[52]刘德传,吴仕九,丁辉,等.清香散对湿热型肝癌模型组大鼠ALT、AST、IL-8水平的影响[J].陕西中医,2004,25(5)：473-475
[53]孙步彤,盛传伦,关勇,等.线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶同工酶测定及其应用价值[J].中国实验诊断学,2005,9(5)：770-772.
[54]Clairce LS, Pagadigorria FM, Ana MK, et al. Effects of methotrexate on calcium flux-in rat liver mitochondria, microsomes and plasma membrane vesicles[J]. Comparative Biochemistry and Physiology, Part C,2006,143:340-348.
[55]黄琳,陆付耳,杨小玉,等.黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠肝脏线粒体氧化应激的影响[J].中国中西医结合杂志,2008,28(8)：725-728.
[56]毛德文,邱华,余晶,等.解毒化瘀Ⅱ方对实验性肝衰竭大鼠肝脏坏死面积及肝线粒体超微结构的影响[J].广西中医药,2006,29(8)：46-49.
[57]苏新友,李世珍,李树静,等.原发性肝癌术前介入治疗的疗效评价[J].中国辐射卫生，2004,13(2)：150-151.
[58]Kohn EC, Litta LA, Molecular insights into cancer invasion:strategies for prevention and intervention[J]. Cancer Res,1995,55:1856.
[1]Chang WC, Li'JS, Li SD, et al. Study on the biological properties of Boschniakia rossica [J]. China Med Mater,1988,11:9.
[2]王秀丽,宋志坚.草苁蓉研究进展[J].黑龙江科技信息,2009,20：122.
[3]杨树春,于海峰,王雪松,等.草苁蓉资源的开发与利用[J].特种经济动植物,1998,1(1)：18-20.
[4]杨树春,马俊莹,郭宝英,等.草苁蓉寄生机理的研究[J].特产研究,2003,(2)：19-23.
[5]郑红月,腾杰,王冰,等.草苁蓉的形态组织鉴定[J].中药材,2001,24(8)557-559.
[6]王宝荣,屠鹏飞,邓秀兰.东北草苁蓉的形态组织鉴定[J].中药材,1999,22(2)：67-69.
[7]桂明玉,张红桂,金永日,等.草苁蓉化学成分的研究[J].中国药学杂志,1997,32(4)：204-206.
[8]刘景河,梁忠岩.草苁蓉化学成分与药理研究进展[J].特产研究,2001,(4)：55-58.
[9]李向高,郑友兰.草苁蓉生药学及其化学成分的研究[J].吉林农业大学学报,1985,(7)：92-95.
[10]魏春雁,孙启良,张晶,等.草苁蓉碱性化学成分的研究[J].吉林农业大学学报,1994,16(12)：145-148.
[11]桂明玉,张红桂,吴广宣,等.草苁蓉脂肪酸成分分析[J].白求恩医科大学学报,1995,(21)：149.
[12]陈颖,汪树理,陈德锋.草苁蓉氨基酸和营养元素含量的测定[J].氨基酸和生物资源,2008,30(2)：74-76.
[13]李树殿,武逵,张军伟.长白山草苁蓉化学成分研究Ⅱ、糖类成分的分析[J].中药材,1987,(1)：39.
[14]常桂英,孙仓,娇艳春.草苁蓉花序水溶性多糖的研究[J].通化师院学报,1997,(3)：50-52.
[15]魏民,张丽萍,梁忠岩,等.草苁蓉根、茎水溶性多糖BRT的分离与鉴定[J].东 北师大学报,2003,35(1)：74-77.
[16]梁敏, 卜秀玲,刘瑛.草苁蓉多糖研究进展[J].食品与药品,2009,11(9)：65-67.
[17]李树殿,邱春.长白山草灰蓉化学成分研究Ⅲ无机成分的分析[J].中药材,1988,11(5)：40-41.
[18]易以军,曹正中,吴厚鸣,等.草苁蓉化学成分的研究[J].药学学报,1999,34(9)：686-689.
[19]姜勇男,郑承勋,李红花,等.草苁蓉对小鼠抗体分泌细胞的影响[J].延边医学院学报,1992,15(3)：170-173.
[20]张庆镐,李红花,魏成淑,等.草苁蓉多糖对小鼠白细胞介素-2产生的影响[J].延边大学医学学报,2000,23(1)：37-38.
[21]林碧湖,寺西强.人IL-2的提纯、性状及其对B细胞的作用[J].中国免疫学杂志,1985,1(3)：2.
[22]陆德源.现代免疫学[M].上海：上海科学技术出版社,1993，,65.
[23]张庆镐,李英信,李红花,等.草苁蓉多糖对小鼠体液免疫功能的影响[J].延边大学医学学报,1999,22：26-28
[24]侯元,霍德胜,魏艳君,等.草苁蓉多糖的抗肿瘤作用及免疫调节作用[J].吉林大学学报,2007,33(6)：1022-1025
[25]郑荣梁.衰老的自由基学说[M].实用老年医学,1992,6(1)：31
[26]Cui YH, Wang XL, LiuQ, et al. Influences of antioxidation of salvianolic acid B on proliferation of cultured hepatic stellate cells[J]. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi,2002, 10(3):317.
[27]朴龙,蔡英兰,金香子,等.草苁蓉提取物对亚急性衰老大鼠的抗衰老作用[J].延边大学医学学报,2003,26(1)：18-21.
[28]许士凯,主编.抗衰老药物的药理与作用[M].上海：上海中医学院出版社,1987,118.
[29]吴春福.依据自由基学说研究人参茎叶皂甙的抗衰老作用[J].沈阳药学院学报,1992,9(1)：37.
[30]朴龙,张学武,金香子,等.草苁蓉提取物对衰老大鼠脑组织自由基德影响[J].中 西医结合学报,2003,1(2)：125-127.
[31]赵增翰.脂褐素的研究及其进展[J].国外医学老年医学分册,1981,4：146.
[32]金美善,李莲花,姜逢春,等.草苁蓉对体外培养乳鼠肝细胞抗衰老作用的研究[J].延边大学医学学报,1997,20(4)：223-226.
[33]刘平,葛迎春,王本祥.细胞衰老与抗衰老[J].中国老年学杂志,1994,14(2)：110.
[34]沈明花,全吉淑,柳明洙,等.草苁蓉提取物对大鼠肝癌前病变模型血清抗氧化酶活性及肿瘤坏死因子的影响[J].山东中医杂志,2004,23(2)：97-99.
[35]金艳峰.草苁蓉乙醇提取物对人肝癌SMMC-7721细胞株增殖及凋亡的干预作用[D].延吉：延边大学,2007
[36]钟慈声,孙安阳主编.一氧化氮的生物医学[M],上海：上海医科大学出版社.1997,341.
[37]高社军.一氧化氮的生物学特性及抗肿瘤作用机制[J].国外医学肿瘤学分册,1999,26(5)：260.
[38]Sagar SM, Singh G, Hodson DL, et al. Nitric oxide and anticancer theraph[J]. Cancer Treal Reu,1995,21:159.
[39]金明,李勇,朴春梅,等.草苁蓉提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对血清一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响[J].延边大学医学学报,2001,24(4)：247-249.
[40]张新,王胜惠.草苁蓉90%醇提取物对荷瘤H22小鼠生存时间及S180瘤重的影响[J].黑龙江省学术年会论文集,2006,631-633.
[41]潘理会,李春辉,孙嘉斌.草苁蓉及氧化苦参碱治疗肝纤维化的实验研究[J].承德医学院学报,2005,22(3).
[42]朴虎林,金帅星,朴熙绪等.草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝纤维化的影响[J].中国临床医药研究杂志,2003,108：11271-11273.
[43]Baskin DS, Browning JL, Pirozzolo FJ, et al. Brain cholineacetyl transferase and mental function in Alzheimer disease[J]. Arch Neur-01,1999,56(9):1121-1123.
[44]周丽莎,朱书秀,王小月.草苁蓉提取物对AD大鼠海马区bFGF及学习记忆的影响[J].陕西中医,2008,29(10)：1431-1434.
[45]Ou YW, Huang YL, Da CD, et al. Electroacupuneture reduces rat's neuronal ische- mic injuryand enhances the expression of basic fibroblast growthfactor[J]. J Shanxi Med Univ,2000,31:68-70.
[46]周丽莎,朱书秀,望庐山.草苁蓉提取物对AD模型大鼠学习记忆能力及神经元凋亡的影响[J].时珍国医国药,2009,20(12)：2971-2972.
[47]张艳,明亮,章家胜,等.草苁蓉的促智作用[J].安徽医科大学学报,1994,29(3)：181-183.
[48]尹学哲,许惠仙,金爱花,等.草苁蓉提取物对高脂血症家兔血浆脂蛋白脂质过氧化的影响[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(11)：132-134.
[49]李秀英,陈洁华,张玉菊.复方草苁蓉对小鼠耐缺氧和抗疲劳作用的影响[J].吉林医学信息,1999,9：43-44.
[50]郑毅男.草苁蓉化学成分的研究[J].吉林农业大学学报,1987,9(1)：31.
[51]曹红子,玄延花,张成镐,等.草苁蓉提取物抗柯萨奇B3病毒的实验研究[J].中国中医药科技,2002,9(2)：106-107.
[52]于庆海,高大远,朴光春,等.草苁蓉实验药理研究[J].中药材,1993,16(7)：34.