太和香椿总黄酮成分分析及其抗氧化作用研究
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摘要
目的：优化香椿总黄酮的提取工艺,比较太和香椿五个品种的总黄酮含量。建立太和香椿中槲皮素含量的测定方法,比较太和香椿四个品种的槲皮素含量。测定太和香椿腌制前后总黄酮含量及营养成分的变化。观察槲皮素对人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MAD)含量的影响。
方法：
1、设计正交实验对提取总黄酮的酶解水提法进行优化,以浸提液中总黄酮得率作为考察指标。采用最佳提取方法比较太和香椿五个品种的总黄酮含量。
2、采用高效液相色谱法检测槲皮素含量,色谱柱为shim-pack:vp-ODS柱,流动相为甲醇-水(1:1,稀磷酸调pH为2.50),检测波长为368nm,流速为1.0ml·mim-1。
3、以新鲜太和香椿和腌制7天的太和香椿作对照。分别采用乙醇浸提法、超声波辅助法、酶解水提法三种不同提取方法,以浸提液中总黄酮得率作为考察指标,比较香椿腌制前后总黄酮含量。分别采用考马斯亮蓝法、硫酸苯酚法、氧化还原滴定法,以蛋白质含量、可溶性糖含量以及维生素C含量为检测指标,比较太和香椿腌制前后营养成分含量。
4、用槲皮素对MRC-5进行处理,用羟胺法检测细胞中SOD含量,比色法检测细胞中MAD含量。
结果：
1、酶解水提法的最佳提取条件是酶用量15 U/g,酶解时间90 min,酶解后水提时间120 min,料液比1：40。五个品种中红油椿的总黄酮含量最高,黑油椿次之,其次是红椿和青椿,毛椿的总黄酮含量最少。
2、太和香椿中槲皮素浓度在83.2～187.2μg·ml-1范围内线性关系良好,r=0.9995。槲皮素含量最高的为红椿,其次是红油椿,黑油椿槲皮素含量略低于红油椿,含量最低的为青椿。
3、三种提取方法均表明腌制七天后香椿总黄酮含量略有降低,维生素C与蛋白质含量下降明显,而可溶性糖含量明显上升。
4、与正常对照组相比,用药组MRC-5中SOD活性明显增加,MDA含量明显下降。
结论：
1、酶解水提法是一种提取太和香椿中总黄酮的较优方法。太和香椿的总黄酮含量比较高,具有非常高的药用和食用价值。
2、本实验采用的高效液相色谱法回收率、精密度良好,操作简单,适用于太和香椿中槲皮素含量的测定。
3、香椿腌制七天后,其总黄酮与其它营养成分均受到不同程度的破坏,其营养价值远低于新鲜的香椿,该实验数据可为以后研究香椿的食用及保存方法提供有价值的参考数据。
4、槲皮素具有较强的抗氧化作用。
Purpose:To optimize the extraction process of total flavonoids of Toona sinensis and to compare the content of total flavonoids in Toona sinensis among five defferent species cultivated in Taihe county.To establish HPLC method for the determination of quercetin in Toona sinensis cultivated in Taihe county. To compare meletin of Toona sinensis among four defferent species cultivated in Taihe county.To determine the content of total flavonoids and nutrient component in fresh and pickled Toona sinensis. To observe effects of quercetin on activity of SOD and MDA of human fetal lung diploid fibroblasts (MRC-5).
Methods:
1. Designing the orthogonal experiment optimizes Enzyme treatment,by referring the yield of total flavonoids in extraction.Use the best extraction method to extract the total flavonoids from five species of Toona sinensis cultivated in Taihe county,and compare the size of its content.
2. The HPLC analysis was performed on a shim-pack:vp-ODS column with methanol-water(1:1,adjust pH to 2.50 by dilute phosphoric acid) as the mobile phase,the detective wavelength was 368nm,the flow rate was 1.0ml·mim-1.
3. Using three different methods:ethanol ertraction,ultrasonic ertraction,enzyme treatment to determine the content of total flavonoids in fresh and seven-day pickled Toona sinensis with the yield of total tlavonoid as examine items.using coomassie brilliant blue method, phenol sulfuric acid method and redox titration,with the content of protein, soluble sugar and Vc as examine items,to determine the content change of nutrient component in fresh and seven-day pickled Toona sinensis.
4. MRC-5 cell lines were treated with quercetin.Using hydroxylamine ethod and chemical colorimetry method to determine the contents of SOD and MDA.
Results:
1. Here are the best extraction condition of Enzyme treatment. The dosage of enzyme is 15 U/g, the time of Enzymolysis is 90 min, the time of the extraction after enzymolysis is 120 min, and the ratio between solid and liquid is 1:40. The total flavonoid content of red oil toona is the highest, followed by black oil toona, red toona, green toona, and hairy toona is the least.
2. Quercetin at the concentrations of 83.2～187.2μg·ml-1 showed good linearity(r=0.9995). The quercetin content of red toona is the highest, followed by red oil toona, black oil toona, and green toona is the least.
3. The analysis show a significantly decrease of protein and and Vc in seven-day pickled Toona sinensis,the decrease of total flavonoids isn't so significantly.;And the increase of soluble sugar is also not so significantly.
4. Compared with those in the control group, the activity of SOD increased obviously, and the content of MDA were decreased significantly in the drug group.
Conclusion:
1. Enzyme treatment is a better method of total flavonoids extraction. The total flavonoid content of Toona sinensis cultivated in Taihe county is relatively high, with very high value.
2. The HLP method was simple,sensitive and reliable.lt can be uesd for the content determination of quercetin.
3. After be pickled,the total flavonoid and nutrient component in Toona sinensis were varyingdegrees damged,it's nutritional value were significantly lower than fresh Toona sinensis.This experimental data can be a valuable reference for the study of eating and preservation methods of Toona sinensis.
4. Quercetin has a strong antioxidant properties.
方法：
1、设计正交实验对提取总黄酮的酶解水提法进行优化,以浸提液中总黄酮得率作为考察指标。采用最佳提取方法比较太和香椿五个品种的总黄酮含量。
2、采用高效液相色谱法检测槲皮素含量,色谱柱为shim-pack:vp-ODS柱,流动相为甲醇-水(1:1,稀磷酸调pH为2.50),检测波长为368nm,流速为1.0ml·mim-1。
3、以新鲜太和香椿和腌制7天的太和香椿作对照。分别采用乙醇浸提法、超声波辅助法、酶解水提法三种不同提取方法,以浸提液中总黄酮得率作为考察指标,比较香椿腌制前后总黄酮含量。分别采用考马斯亮蓝法、硫酸苯酚法、氧化还原滴定法,以蛋白质含量、可溶性糖含量以及维生素C含量为检测指标,比较太和香椿腌制前后营养成分含量。
4、用槲皮素对MRC-5进行处理,用羟胺法检测细胞中SOD含量,比色法检测细胞中MAD含量。
结果：
1、酶解水提法的最佳提取条件是酶用量15 U/g,酶解时间90 min,酶解后水提时间120 min,料液比1：40。五个品种中红油椿的总黄酮含量最高,黑油椿次之,其次是红椿和青椿,毛椿的总黄酮含量最少。
2、太和香椿中槲皮素浓度在83.2～187.2μg·ml-1范围内线性关系良好,r=0.9995。槲皮素含量最高的为红椿,其次是红油椿,黑油椿槲皮素含量略低于红油椿,含量最低的为青椿。
3、三种提取方法均表明腌制七天后香椿总黄酮含量略有降低,维生素C与蛋白质含量下降明显,而可溶性糖含量明显上升。
4、与正常对照组相比,用药组MRC-5中SOD活性明显增加,MDA含量明显下降。
结论：
1、酶解水提法是一种提取太和香椿中总黄酮的较优方法。太和香椿的总黄酮含量比较高,具有非常高的药用和食用价值。
2、本实验采用的高效液相色谱法回收率、精密度良好,操作简单,适用于太和香椿中槲皮素含量的测定。
3、香椿腌制七天后,其总黄酮与其它营养成分均受到不同程度的破坏,其营养价值远低于新鲜的香椿,该实验数据可为以后研究香椿的食用及保存方法提供有价值的参考数据。
4、槲皮素具有较强的抗氧化作用。
Purpose:To optimize the extraction process of total flavonoids of Toona sinensis and to compare the content of total flavonoids in Toona sinensis among five defferent species cultivated in Taihe county.To establish HPLC method for the determination of quercetin in Toona sinensis cultivated in Taihe county. To compare meletin of Toona sinensis among four defferent species cultivated in Taihe county.To determine the content of total flavonoids and nutrient component in fresh and pickled Toona sinensis. To observe effects of quercetin on activity of SOD and MDA of human fetal lung diploid fibroblasts (MRC-5).
Methods:
1. Designing the orthogonal experiment optimizes Enzyme treatment,by referring the yield of total flavonoids in extraction.Use the best extraction method to extract the total flavonoids from five species of Toona sinensis cultivated in Taihe county,and compare the size of its content.
2. The HPLC analysis was performed on a shim-pack:vp-ODS column with methanol-water(1:1,adjust pH to 2.50 by dilute phosphoric acid) as the mobile phase,the detective wavelength was 368nm,the flow rate was 1.0ml·mim-1.
3. Using three different methods:ethanol ertraction,ultrasonic ertraction,enzyme treatment to determine the content of total flavonoids in fresh and seven-day pickled Toona sinensis with the yield of total tlavonoid as examine items.using coomassie brilliant blue method, phenol sulfuric acid method and redox titration,with the content of protein, soluble sugar and Vc as examine items,to determine the content change of nutrient component in fresh and seven-day pickled Toona sinensis.
4. MRC-5 cell lines were treated with quercetin.Using hydroxylamine ethod and chemical colorimetry method to determine the contents of SOD and MDA.
Results:
1. Here are the best extraction condition of Enzyme treatment. The dosage of enzyme is 15 U/g, the time of Enzymolysis is 90 min, the time of the extraction after enzymolysis is 120 min, and the ratio between solid and liquid is 1:40. The total flavonoid content of red oil toona is the highest, followed by black oil toona, red toona, green toona, and hairy toona is the least.
2. Quercetin at the concentrations of 83.2～187.2μg·ml-1 showed good linearity(r=0.9995). The quercetin content of red toona is the highest, followed by red oil toona, black oil toona, and green toona is the least.
3. The analysis show a significantly decrease of protein and and Vc in seven-day pickled Toona sinensis,the decrease of total flavonoids isn't so significantly.;And the increase of soluble sugar is also not so significantly.
4. Compared with those in the control group, the activity of SOD increased obviously, and the content of MDA were decreased significantly in the drug group.
Conclusion:
1. Enzyme treatment is a better method of total flavonoids extraction. The total flavonoid content of Toona sinensis cultivated in Taihe county is relatively high, with very high value.
2. The HLP method was simple,sensitive and reliable.lt can be uesd for the content determination of quercetin.
3. After be pickled,the total flavonoid and nutrient component in Toona sinensis were varyingdegrees damged,it's nutritional value were significantly lower than fresh Toona sinensis.This experimental data can be a valuable reference for the study of eating and preservation methods of Toona sinensis.
4. Quercetin has a strong antioxidant properties.
引文
[1]江苏新医学院.中药大辞典.第一版[M].上海：上海科学技术出版社,1986：5422
[2]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编(下册)[M].第一版.北京：人民卫生出版社.1978：467.
[3]李曙轩主编.中国农业百科全书-蔬菜卷[M].北京：农业出版社,1990
[4]辛永萍,马勤.香椿种质资源分布及经济价值,陕西农业科学,2008(3)：85-87
[5]张仲平,牛超,孙英.香椿叶黄酮类成分的分离与鉴定[J].中药材,2001,24(10)：725-726
[6]Wang K J,Yang C R,Zhang Y J.Phenolic antioxidants from Chinese toon(fresh young leaves and shoots of Toona sinensis)[J].Food chemistry,2007,101(1):365-71.
[7]田迪英,杨荣华.香椿的抗菌作用研究[J].食品工业科技,2002,23(11)：21-22
[8]HsiehTJ,LiuTZ,ChiaYC,etal.Protective effect of methyl gallate from Toona sinensis (Meliaceae) against hydrogen Peroxide-induced oxidative stress and DNA damage in MDCK cells[J].Food Chem Toxicol,2004,42:843-850.
[9]齐荣水,马进智.桃花心木誉香椿[J].陕西林业,2001(04)：35
[10]董彩虹,聂发玉.香椿资源的研究、开发现状川.生物学杂志,2002,19(6)：35-37.
[11]金波,东惠茹.香椿芽的营养、色素及贮藏中的生理变化[J].上海农业学报,1994,10(4)：84-88
[12]彭密军.香椿中八种微量元素的快速分析[J.中国林副特产.2000(1)：1-2
[13]王鹏程,涂炳坤,叶要妹等.不同时期不同种源香椿芽营养成分分析[J]湖北农业科学,2001(6)：56-57
[14]候怀恩,孟庆法,武雪芬.香椿老叶开发利用价值研究[J].中国林副特产.1997(2)：17-19.
[15]徐欣,王远程,杨峰等.香椿籽油的制取、精炼及品质分析[J].中国粮油学报,1994,9(3)：38-40
[16]程传格,王晓,江婷等.香椿籽油成分的Gc-Ms分析[J].分析测试学报,2001,20(4)：74-76
[17]陈铁山,罗忠萍,崔宏安等.香椿化学成分的初步研究[J].陕西林业科技,2000,(2)：12-20.
[18]李秀信,张院民,刘青利等.香椿叶中黄酮成分的分析鉴定[J].西北林学院学报.2001,16(增)：86-55
[19]张仲平,孙英,牛超等.香椿多酚类化合物的提取、分离和薄层研究[J].中国野生植物资源,2002,21(4)：52-53
[20]张仲平,牛超,孙英.香椿叶黄酮类成分的分离与鉴定[J].中药材,2001,24(10)：725-726
[21]邱琴,刘静,陈婷婷等.不同方法提取的香椿子挥发油的气质联用成分分析[J].药物分析杂志,2007,27(3)：400-405
[22]Liu Zhong-Liang, MaTian-Bo,SunLi-Ming.Analysis of the essential oil from the seeds of toona sinensis by GC-MS[J].Chinese pharmaceutical Joumal,2002,37(2):94-96
[23]程桂英,程传格,王晓等.香椿种子挥发油成分的GC/MS分析[J].山东师大学报(自然科学版).2001,16(2)：235-240
[24]朱玉凤,周琴妹,丰国炳等.香椿皮与臭椿皮的体抗菌作用比较[J].中国现代应用药学杂志,1999,16(6)：19-20
[25]禄文林,李秀信.香椿皂苷的提取及抑菌活性的研究[J].内蒙古农业大学学报,2008,29(1)：227-229
[26]时新刚,刘海亮,周延生等.香椿叶总黄酮抗氧化作用研究[J].果蔬加工,2006(5)：48
[27]张京芳,张强,陆刚等.香椿叶提取物对高血脂症小鼠脂质代谢的调节作用及抗氧化功能的影响[J].中国食品学报,2007,7(4)：3-6
[28]桑继峰.太和香椿的特征特性与丰产栽培技术[J].农技服务,2009,26(7)：108-109
[29]桑继峰.太和香椿常见品种及加工技术[J].农技服务,2009,26(7)：110
[30]姚新生,天然药物化学[M].北京,人民卫生出版社,2003
[31]李秀信,刘青利,张院民等.香椿叶总黄酮提取方法研究[J].西北林学院学,2002,17(1)：68-69
[32]何竞旻,王瑞侠,黄劲松.超声波在药用植物提取中的应用研究[J].池州学院学报,2009,23(3)：67-69
[33]Vinatoru, Maricela Toma,Otilia Radu, et al. The use of ultrasound for the extraction of bioactive principles from plant materials[J].Ultrasonics Sonochemistry,1997,4:135
[34]李胜华.超声波提取翻白草中总黄酮优化工艺研究[J].食品科技,2008(1)：167-170
[35]杨吉霞,蔡俊鹏,祝玲.纤维素酶在中药成分提取中的应用[J].中药材,2005,28(1)：64-67
[36]陈栋,周永传.酶法在中药提取中的应用和进展[J].中国中药杂志,2007,32(2)：99-101
[37]张黎,陈志武,王俞等.银杏叶总黄酮抗炎作用及机制的探讨[J].安徽医科大学学报,2001,36(5)：350
[38]张文平,陈惠群,张文书,等.千里光总黄酮的抗炎作用研究[J].时珍国医国药,2008,19(3)：605-607.
[39]王玮,白月,王俊平.黄芩茎叶总黄酮对大鼠气囊滑膜炎抗炎作用机制的研究[J].沈阳医学院学报,2008,10(1)：24-25
[40]聂犇,余陈欢,王芳芳,等.石荠芋总黄酮镇痛作用及其作用机制研究[J].中国实用医药,2007,2(21)：116-117.
[41]Bergmanrn,Varshavsky,Gottlebhe, et al.The antioxdant activity of aqueousspinach extraet:chemical identification of active fractions[J].phytochemistry,2001,58(1):143-152
[42]唐丽华,徐向毅,游本刚,等.珍珠菜总黄酮苷的抗肿瘤作用及机制研究[J].上海中医药杂志,2007,41(5)：74-76.
[43]田晓丰,曹宏,田力.金雀异黄素对人肝癌SMMC27721细胞生长抑制和凋亡的影响[J].吉林大学学报(医学版),2009,35(3)：499-502
[44]朱军,沈维干,张育等.金雀异黄素抑制SGC7901细胞增殖、迁移和粘附的研究[J].实用临床医药杂志,2008,12(3)：28-33
[45]马玉红.脂质过氧化反应的研究[J].2007,37(5)：38-40
[46]李建喜,杨志强,王学智.活性氧自由基在动物机体内的生物学作用[J].动物医学进展,2006,27(10)：33-36
[47]朱海扬,曾慧兰.黄酮类化合物药理作用的研究进展[J].山东医药,2009,49(17)：114-115
[48]高国粉,南劲松,田晓乐,等.榛花总黄酮的提取及抗氧化活性的研究[J].中华中 医药杂志,2007.22(8)：547-549.
[49]刘寿先,徐金彰.山楂叶总黄酮对小鼠的抗氧化作用[J].咸宁学院学报(医学版),2006,2(6)：477-479
[50]唐瑛,罗祖友,严奉伟,等.藤茶总黄酮对小鼠的体内外抗氧化作用研究[J].中国医院药学杂志,2006,26(12)：1449-1452.
[51]周晓霞,苏佩清,刘智.黄芩茎叶总黄酮对糖尿病防治作用的实验研究[J].中药新药与临床药理,2006,17(6)：419-421.
[52]吕雄文,李俊,邹宇宏,等.老鹰茶总黄酮降血糖作用的实验研究[J].中国中医药科技,2008,15(2)：119-121
[53]陈乃富,谷仿丽,韩邦兴,等.蕨菜黄酮对高脂血症大鼠脂代谢的影响[J].中国中医药科技,2007,14(6)：423-424
[54]王丽,石耀辉,占海英等.银杏叶联合来适可治疗肾病综合症高血脂症临床观察[J].中国中医杂志,2000,19(4)：33-34
[55]张建华,陈志武,武征.杜鹃花总黄酮预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的延迟相保护作用[J].中国中医基础医学杂志,2007,13(3)：192-194.
[56]金辉,吕文伟,崔新明,等.蒲黄总黄酮对急性心肌梗死犬血清中微量元素及心肌细胞超微结构的影响[J].中草药,2008,39(1)：97-99,122.
[57]覃斐章,林兴,张绪东,等.柿叶黄酮对L-NAME诱导的高血压大鼠血压的影响[J].现代中医药,2008,28(3)：61-63.
[58]陈丛瑾,黄克瀛,李德良,等.AlCl3显色分光光度法测定香椿叶总黄酮的含量[J].分析试验室,2006,25(12)：91-94.
[59]张岩,曹国杰,张燕等.黄酮类化合物的提取以及检测方法的研究进展[J].食品研究与开发,2008,29(1)：154-158
[60]乔文涛,张静,俞凌雁.含羞草中总黄酮提取纯化工艺研究[J].时珍国医国药.2009,20(8)：1986-1987
[61]陈丛瑾,黄克瀛,王贵武.香椿叶总黄酮不同提取方法的比较[J].食品研究与开发,2008,29(3)：57-60
[62]徐丽珊,张萍华,张瑜.松针总黄酮的提取工艺优化研究[J].浙江师范大学学报(自然科学版).2009,32(2)：207-211
[63]张敏,程志飞,王鹏.不同酶解条件对米糠蛋白提取率影响的研究[J].食品科学,2008,29(9)：178-180
[64]奚奇辉,李士敏.纤维素酶在竹叶总黄酮提取中的应用[J].中草药,2004,35(2)：166-167
[65]韩章远,韩永龙,孟祥乐等.酶解技术在中药提取中的应用进展[J].广州化工,2009,37(6)：12-17
[66]Xing X F, M a J Y, Yu H F, et al. Application of cellulase in extraction of total flavonoid of Rad ix P uerariae [J], Chin T rad it H erb Drug s,2001,32 (1):37-38
[67]M a T T. Primary study of cellulase applied in Chinese drugs' extraction [J], Chin T rad it H erb D rug s,1994,25(3):123
[68]陈丛瑾,黄克瀛,王贵武,等.香椿叶总黄酮不同提取方法的比较[J].食品研究与开发,2008,29(3)：57-60.
[69]贺丹霞,张伟,秦民坚.不同产地野菊花中黄酮类成分含量的HPLC分析[J].植物资源与环境学报,2009,18(3)：91-93
[70]马致洁,董红红,李振等.不同款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量分析及HPLC指纹图谱研究[J].中草药,2009,40(8)：1305-1308
[71]熊丽,陈晓辉,梁健.RP-HPLC同时测定田基黄药材中异槲皮苷、槲皮苷和槲皮素的含量[J].药物分析杂志,2008,28(10)：1619-1622
[72]李颖,王昌禄,刘常金.利用反相高效液相色谱测定香椿叶中槲皮素含量[J]氨基酸和生物资源.2006,28(4)：74-76
[73]闰磊,何再安,刘众文.大孔树脂分离纯化山楂总黄酮的研究[J].湖北中医学院学报.2007,9(2)：33-35
[74]杨星昊,刘海,丁安伟.大孔吸附树脂分离纯化小蓟总黄酮的研究[J].浙江中医杂志,2006,41(4)：50-52
[75]陈凯云,杨武亮,龚千峰.大孔吸附树脂富集大蓟中总黄酮类成分的工艺研究[J].时珍国医国药.2007,18(10)：2362-2364
[76]战旗.香椿叶中槲皮素的提取分离鉴定[J].山东中医药大学学报,2000,5
[77]郭朝晖,蒋生祥.高效液相色谱法在补益中药活性成分测定中的应用[J].中医药学刊,2004,22(11)：2136-2137；2145
[78]谢雪芳.香椿芽的腌制加工[J].科学种养,2007,5：58
[79]李忠英,罗跃中,温拥军.水仙花中总黄酮超声提取工艺的研究[J].现代中药研究与实践.2008,22(6)：67-69
[80]伍晓春.超声波辅助提取菊花总黄酮的工艺研究[J].中国酿造.2008,19：56-58
[81]谢明华,蔡鑫君,陈稀烦.超声提取麦冬总黄酮的工艺研究[J].海峡药学,2008,20(11)：15-17
[82]黄婉玉,曹炜,李菁.考马斯亮蓝法测定果汁中蛋白质的含量[J].食品与发酵工业,2009,35(5)：160-162
[83]Bradford1,A rapid and sensitive method for the quantitation of micro gram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding [J]. Analytical Biochemistry,1976,72:248-254.
[84]李月.苯酚-硫酸法测定食品总糖方法的应用和改进[J].中国卫生检验杂志.2003,13(4)：506
[85]高丽君,王汉忠,崔建华.苯酚-硫酸法测定自首乌中多糖含量[J].山东农业大学学报(自然科学版),2004,35(2)：295-297
[86]范树国,魏朔,邱璐.5种常见野菜维生素C含量的测定[J].江苏农业科学.2009.4：301-302
[87]Foyer C H, Row E J,Walker D A. Measurements of the ascorbate content of sp inach leaf p rotop lasts and chlorop lasts during illumination[J]. Planta,1983,157: 239-244.
[88]中华人民共和国国家标准.蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定方法[S].GB 12392290：596-599
[89]王萍,朱祝军.腌制加工对不同品种叶用芥菜抗氧化物质含量和抗氧化活性的影响[J].核农学报.2006,20(6)：516-520
[90]邓晓华,张学义.刺嫩芽加工过程中维生C的变化[J].中国林副特产.2009,4：21-2
[91]张和义.香椿贮藏保鲜与加工利用[J].中国果菜,2004,3：25-27
[92]周志才,王美兰.香椿腌制及储藏过程中品质变化的研究[J].食品科学.2004.25(12)：180-183
[93]王春霖,郭芳,王永利.自由基与衰老[J]河北医科大学学报,2005,26(4)：308-311
[94]Shinohara R, Mano T. Nagasaka A, et al. Lipid peroxidation leverls in tat cardiac muscle are affected by age and thyroid status[J].J Endocrinol,2000,164 (1):972192.
[95]王艳芳,王新华,朱宇同.槲皮素药理作用研究进展[J].天然产物研究与开 发,2003,15(2)：171-173
[96]Reiterer G, Toborek M, Hennig B. Quercetin protects against linoleic acid- induced porcine endothelial cell dysfunction [J]. J. Nutr,2004,134(4):771
[97]Murota K, Terao J. Antioxidative flavonoid quercetin:implication of its intestinal absorption and metabolism [J]. Arch. Biochem. Biophys.2003,417(1):12
[98]任荣军.大孔树脂吸附技术在黄酮类成分分离纯化中的应用[J].中国药业,2008,17(16)：71-73
[99]周光姣,周亚球.浅析大孔吸附树脂[J].时珍国医国药,2006,17(4)：589-590
[100]高伟城,蓝晓庆,潘馨.大孔吸附树脂在分离纯化总黄酮化合物中的应用[J].海峡药学,2009,21(7)：26-27
[101]Kuklmann M K. Inhibition of oxidant induced Lipid peroxidation in renal tubular epithelial cells(LIC-PK1)by quercetion [J]. Free Radic Research,1998,29(5): 451-460
[2]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编(下册)[M].第一版.北京：人民卫生出版社.1978：467.
[3]李曙轩主编.中国农业百科全书-蔬菜卷[M].北京：农业出版社,1990
[4]辛永萍,马勤.香椿种质资源分布及经济价值,陕西农业科学,2008(3)：85-87
[5]张仲平,牛超,孙英.香椿叶黄酮类成分的分离与鉴定[J].中药材,2001,24(10)：725-726
[6]Wang K J,Yang C R,Zhang Y J.Phenolic antioxidants from Chinese toon(fresh young leaves and shoots of Toona sinensis)[J].Food chemistry,2007,101(1):365-71.
[7]田迪英,杨荣华.香椿的抗菌作用研究[J].食品工业科技,2002,23(11)：21-22
[8]HsiehTJ,LiuTZ,ChiaYC,etal.Protective effect of methyl gallate from Toona sinensis (Meliaceae) against hydrogen Peroxide-induced oxidative stress and DNA damage in MDCK cells[J].Food Chem Toxicol,2004,42:843-850.
[9]齐荣水,马进智.桃花心木誉香椿[J].陕西林业,2001(04)：35
[10]董彩虹,聂发玉.香椿资源的研究、开发现状川.生物学杂志,2002,19(6)：35-37.
[11]金波,东惠茹.香椿芽的营养、色素及贮藏中的生理变化[J].上海农业学报,1994,10(4)：84-88
[12]彭密军.香椿中八种微量元素的快速分析[J.中国林副特产.2000(1)：1-2
[13]王鹏程,涂炳坤,叶要妹等.不同时期不同种源香椿芽营养成分分析[J]湖北农业科学,2001(6)：56-57
[14]候怀恩,孟庆法,武雪芬.香椿老叶开发利用价值研究[J].中国林副特产.1997(2)：17-19.
[15]徐欣,王远程,杨峰等.香椿籽油的制取、精炼及品质分析[J].中国粮油学报,1994,9(3)：38-40
[16]程传格,王晓,江婷等.香椿籽油成分的Gc-Ms分析[J].分析测试学报,2001,20(4)：74-76
[17]陈铁山,罗忠萍,崔宏安等.香椿化学成分的初步研究[J].陕西林业科技,2000,(2)：12-20.
[18]李秀信,张院民,刘青利等.香椿叶中黄酮成分的分析鉴定[J].西北林学院学报.2001,16(增)：86-55
[19]张仲平,孙英,牛超等.香椿多酚类化合物的提取、分离和薄层研究[J].中国野生植物资源,2002,21(4)：52-53
[20]张仲平,牛超,孙英.香椿叶黄酮类成分的分离与鉴定[J].中药材,2001,24(10)：725-726
[21]邱琴,刘静,陈婷婷等.不同方法提取的香椿子挥发油的气质联用成分分析[J].药物分析杂志,2007,27(3)：400-405
[22]Liu Zhong-Liang, MaTian-Bo,SunLi-Ming.Analysis of the essential oil from the seeds of toona sinensis by GC-MS[J].Chinese pharmaceutical Joumal,2002,37(2):94-96
[23]程桂英,程传格,王晓等.香椿种子挥发油成分的GC/MS分析[J].山东师大学报(自然科学版).2001,16(2)：235-240
[24]朱玉凤,周琴妹,丰国炳等.香椿皮与臭椿皮的体抗菌作用比较[J].中国现代应用药学杂志,1999,16(6)：19-20
[25]禄文林,李秀信.香椿皂苷的提取及抑菌活性的研究[J].内蒙古农业大学学报,2008,29(1)：227-229
[26]时新刚,刘海亮,周延生等.香椿叶总黄酮抗氧化作用研究[J].果蔬加工,2006(5)：48
[27]张京芳,张强,陆刚等.香椿叶提取物对高血脂症小鼠脂质代谢的调节作用及抗氧化功能的影响[J].中国食品学报,2007,7(4)：3-6
[28]桑继峰.太和香椿的特征特性与丰产栽培技术[J].农技服务,2009,26(7)：108-109
[29]桑继峰.太和香椿常见品种及加工技术[J].农技服务,2009,26(7)：110
[30]姚新生,天然药物化学[M].北京,人民卫生出版社,2003
[31]李秀信,刘青利,张院民等.香椿叶总黄酮提取方法研究[J].西北林学院学,2002,17(1)：68-69
[32]何竞旻,王瑞侠,黄劲松.超声波在药用植物提取中的应用研究[J].池州学院学报,2009,23(3)：67-69
[33]Vinatoru, Maricela Toma,Otilia Radu, et al. The use of ultrasound for the extraction of bioactive principles from plant materials[J].Ultrasonics Sonochemistry,1997,4:135
[34]李胜华.超声波提取翻白草中总黄酮优化工艺研究[J].食品科技,2008(1)：167-170
[35]杨吉霞,蔡俊鹏,祝玲.纤维素酶在中药成分提取中的应用[J].中药材,2005,28(1)：64-67
[36]陈栋,周永传.酶法在中药提取中的应用和进展[J].中国中药杂志,2007,32(2)：99-101
[37]张黎,陈志武,王俞等.银杏叶总黄酮抗炎作用及机制的探讨[J].安徽医科大学学报,2001,36(5)：350
[38]张文平,陈惠群,张文书,等.千里光总黄酮的抗炎作用研究[J].时珍国医国药,2008,19(3)：605-607.
[39]王玮,白月,王俊平.黄芩茎叶总黄酮对大鼠气囊滑膜炎抗炎作用机制的研究[J].沈阳医学院学报,2008,10(1)：24-25
[40]聂犇,余陈欢,王芳芳,等.石荠芋总黄酮镇痛作用及其作用机制研究[J].中国实用医药,2007,2(21)：116-117.
[41]Bergmanrn,Varshavsky,Gottlebhe, et al.The antioxdant activity of aqueousspinach extraet:chemical identification of active fractions[J].phytochemistry,2001,58(1):143-152
[42]唐丽华,徐向毅,游本刚,等.珍珠菜总黄酮苷的抗肿瘤作用及机制研究[J].上海中医药杂志,2007,41(5)：74-76.
[43]田晓丰,曹宏,田力.金雀异黄素对人肝癌SMMC27721细胞生长抑制和凋亡的影响[J].吉林大学学报(医学版),2009,35(3)：499-502
[44]朱军,沈维干,张育等.金雀异黄素抑制SGC7901细胞增殖、迁移和粘附的研究[J].实用临床医药杂志,2008,12(3)：28-33
[45]马玉红.脂质过氧化反应的研究[J].2007,37(5)：38-40
[46]李建喜,杨志强,王学智.活性氧自由基在动物机体内的生物学作用[J].动物医学进展,2006,27(10)：33-36
[47]朱海扬,曾慧兰.黄酮类化合物药理作用的研究进展[J].山东医药,2009,49(17)：114-115
[48]高国粉,南劲松,田晓乐,等.榛花总黄酮的提取及抗氧化活性的研究[J].中华中 医药杂志,2007.22(8)：547-549.
[49]刘寿先,徐金彰.山楂叶总黄酮对小鼠的抗氧化作用[J].咸宁学院学报(医学版),2006,2(6)：477-479
[50]唐瑛,罗祖友,严奉伟,等.藤茶总黄酮对小鼠的体内外抗氧化作用研究[J].中国医院药学杂志,2006,26(12)：1449-1452.
[51]周晓霞,苏佩清,刘智.黄芩茎叶总黄酮对糖尿病防治作用的实验研究[J].中药新药与临床药理,2006,17(6)：419-421.
[52]吕雄文,李俊,邹宇宏,等.老鹰茶总黄酮降血糖作用的实验研究[J].中国中医药科技,2008,15(2)：119-121
[53]陈乃富,谷仿丽,韩邦兴,等.蕨菜黄酮对高脂血症大鼠脂代谢的影响[J].中国中医药科技,2007,14(6)：423-424
[54]王丽,石耀辉,占海英等.银杏叶联合来适可治疗肾病综合症高血脂症临床观察[J].中国中医杂志,2000,19(4)：33-34
[55]张建华,陈志武,武征.杜鹃花总黄酮预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的延迟相保护作用[J].中国中医基础医学杂志,2007,13(3)：192-194.
[56]金辉,吕文伟,崔新明,等.蒲黄总黄酮对急性心肌梗死犬血清中微量元素及心肌细胞超微结构的影响[J].中草药,2008,39(1)：97-99,122.
[57]覃斐章,林兴,张绪东,等.柿叶黄酮对L-NAME诱导的高血压大鼠血压的影响[J].现代中医药,2008,28(3)：61-63.
[58]陈丛瑾,黄克瀛,李德良,等.AlCl3显色分光光度法测定香椿叶总黄酮的含量[J].分析试验室,2006,25(12)：91-94.
[59]张岩,曹国杰,张燕等.黄酮类化合物的提取以及检测方法的研究进展[J].食品研究与开发,2008,29(1)：154-158
[60]乔文涛,张静,俞凌雁.含羞草中总黄酮提取纯化工艺研究[J].时珍国医国药.2009,20(8)：1986-1987
[61]陈丛瑾,黄克瀛,王贵武.香椿叶总黄酮不同提取方法的比较[J].食品研究与开发,2008,29(3)：57-60
[62]徐丽珊,张萍华,张瑜.松针总黄酮的提取工艺优化研究[J].浙江师范大学学报(自然科学版).2009,32(2)：207-211
[63]张敏,程志飞,王鹏.不同酶解条件对米糠蛋白提取率影响的研究[J].食品科学,2008,29(9)：178-180
[64]奚奇辉,李士敏.纤维素酶在竹叶总黄酮提取中的应用[J].中草药,2004,35(2)：166-167
[65]韩章远,韩永龙,孟祥乐等.酶解技术在中药提取中的应用进展[J].广州化工,2009,37(6)：12-17
[66]Xing X F, M a J Y, Yu H F, et al. Application of cellulase in extraction of total flavonoid of Rad ix P uerariae [J], Chin T rad it H erb Drug s,2001,32 (1):37-38
[67]M a T T. Primary study of cellulase applied in Chinese drugs' extraction [J], Chin T rad it H erb D rug s,1994,25(3):123
[68]陈丛瑾,黄克瀛,王贵武,等.香椿叶总黄酮不同提取方法的比较[J].食品研究与开发,2008,29(3)：57-60.
[69]贺丹霞,张伟,秦民坚.不同产地野菊花中黄酮类成分含量的HPLC分析[J].植物资源与环境学报,2009,18(3)：91-93
[70]马致洁,董红红,李振等.不同款冬花药材中槲皮素和山柰素的定量分析及HPLC指纹图谱研究[J].中草药,2009,40(8)：1305-1308
[71]熊丽,陈晓辉,梁健.RP-HPLC同时测定田基黄药材中异槲皮苷、槲皮苷和槲皮素的含量[J].药物分析杂志,2008,28(10)：1619-1622
[72]李颖,王昌禄,刘常金.利用反相高效液相色谱测定香椿叶中槲皮素含量[J]氨基酸和生物资源.2006,28(4)：74-76
[73]闰磊,何再安,刘众文.大孔树脂分离纯化山楂总黄酮的研究[J].湖北中医学院学报.2007,9(2)：33-35
[74]杨星昊,刘海,丁安伟.大孔吸附树脂分离纯化小蓟总黄酮的研究[J].浙江中医杂志,2006,41(4)：50-52
[75]陈凯云,杨武亮,龚千峰.大孔吸附树脂富集大蓟中总黄酮类成分的工艺研究[J].时珍国医国药.2007,18(10)：2362-2364
[76]战旗.香椿叶中槲皮素的提取分离鉴定[J].山东中医药大学学报,2000,5
[77]郭朝晖,蒋生祥.高效液相色谱法在补益中药活性成分测定中的应用[J].中医药学刊,2004,22(11)：2136-2137；2145
[78]谢雪芳.香椿芽的腌制加工[J].科学种养,2007,5：58
[79]李忠英,罗跃中,温拥军.水仙花中总黄酮超声提取工艺的研究[J].现代中药研究与实践.2008,22(6)：67-69
[80]伍晓春.超声波辅助提取菊花总黄酮的工艺研究[J].中国酿造.2008,19：56-58
[81]谢明华,蔡鑫君,陈稀烦.超声提取麦冬总黄酮的工艺研究[J].海峡药学,2008,20(11)：15-17
[82]黄婉玉,曹炜,李菁.考马斯亮蓝法测定果汁中蛋白质的含量[J].食品与发酵工业,2009,35(5)：160-162
[83]Bradford1,A rapid and sensitive method for the quantitation of micro gram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding [J]. Analytical Biochemistry,1976,72:248-254.
[84]李月.苯酚-硫酸法测定食品总糖方法的应用和改进[J].中国卫生检验杂志.2003,13(4)：506
[85]高丽君,王汉忠,崔建华.苯酚-硫酸法测定自首乌中多糖含量[J].山东农业大学学报(自然科学版),2004,35(2)：295-297
[86]范树国,魏朔,邱璐.5种常见野菜维生素C含量的测定[J].江苏农业科学.2009.4：301-302
[87]Foyer C H, Row E J,Walker D A. Measurements of the ascorbate content of sp inach leaf p rotop lasts and chlorop lasts during illumination[J]. Planta,1983,157: 239-244.
[88]中华人民共和国国家标准.蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定方法[S].GB 12392290：596-599
[89]王萍,朱祝军.腌制加工对不同品种叶用芥菜抗氧化物质含量和抗氧化活性的影响[J].核农学报.2006,20(6)：516-520
[90]邓晓华,张学义.刺嫩芽加工过程中维生C的变化[J].中国林副特产.2009,4：21-2
[91]张和义.香椿贮藏保鲜与加工利用[J].中国果菜,2004,3：25-27
[92]周志才,王美兰.香椿腌制及储藏过程中品质变化的研究[J].食品科学.2004.25(12)：180-183
[93]王春霖,郭芳,王永利.自由基与衰老[J]河北医科大学学报,2005,26(4)：308-311
[94]Shinohara R, Mano T. Nagasaka A, et al. Lipid peroxidation leverls in tat cardiac muscle are affected by age and thyroid status[J].J Endocrinol,2000,164 (1):972192.
[95]王艳芳,王新华,朱宇同.槲皮素药理作用研究进展[J].天然产物研究与开 发,2003,15(2)：171-173
[96]Reiterer G, Toborek M, Hennig B. Quercetin protects against linoleic acid- induced porcine endothelial cell dysfunction [J]. J. Nutr,2004,134(4):771
[97]Murota K, Terao J. Antioxidative flavonoid quercetin:implication of its intestinal absorption and metabolism [J]. Arch. Biochem. Biophys.2003,417(1):12
[98]任荣军.大孔树脂吸附技术在黄酮类成分分离纯化中的应用[J].中国药业,2008,17(16)：71-73
[99]周光姣,周亚球.浅析大孔吸附树脂[J].时珍国医国药,2006,17(4)：589-590
[100]高伟城,蓝晓庆,潘馨.大孔吸附树脂在分离纯化总黄酮化合物中的应用[J].海峡药学,2009,21(7)：26-27
[101]Kuklmann M K. Inhibition of oxidant induced Lipid peroxidation in renal tubular epithelial cells(LIC-PK1)by quercetion [J]. Free Radic Research,1998,29(5): 451-460