酶解杏仁蛋白制备活性多肽及其降血糖功能研究
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摘要
以杏仁蛋白为研究对象,分别研究了Protamex和Alcalase两种酶酶解过程中各个影响因素对水解度及苦味值的影响,在此基础上采用这两种酶复合水解制备出较低苦味,较高水解度的杏仁多肽,并对其辅助降血糖功能做了评价。
试验对Protamex和Alcalase酶酶解杏仁蛋白工艺进行了优化,在对Protamex酶和Alcalase酶水解单因素试验基础上,通过均匀试验设计建立了杏仁多肽(Almond Peptides Mixture,APM)水解度与其中四个影响因素的回归模型。确定了Protamex酶和Alcalase酶酶解杏仁蛋白的参数最优组合。在单酶水解基础上确立了蛋白酶接力水解工艺,以期降低酶解物的苦味值和提高杏仁蛋白的水解度。在此条件下,实际得到杏仁多肽的水解度为30.23%,平均肽链长度为3.31,平均分子量为381.88,苦味值为1.63。
试验通过对口服杏仁多肽的高低两个糖尿病大鼠剂量组与糖尿病对照组试验期内(42天)血糖的监测发现,杏仁多肽能显著降低糖尿病大鼠血糖值(p<0.01),且杏仁多肽的降糖效果呈现明显的剂量效应关系。杏仁多肽对血糖正常大鼠具有一定的调节作用。通过对口服降糖药与杏仁多肽的对比试验,停药后12天内口服杏仁多肽的口服组血糖的反弹性显著低于饲药组(p<0.01)。
对糖尿病大鼠口服APM后,血清中总胆固醇及甘油三酯均能显著降低(p<0.05)。试验研究发现口服APM组不会对正常大鼠的血清胰岛素产生影响;但对于糖尿病大鼠,两个口服剂量组的下降幅度显著小于对照组(P<0.01);在整个实验期内,高剂量的杏仁多肽对抑制血清胰岛素下降的作用明显好于低剂量(P<0.05)。
The almond protein was hydrolyzed by Protamex and Alcalase to obtain Almond Peptides Mixture(APM).The bitterness and degree of hydrolysis(DH) of APM were studied.Further more the function of APM on auxiliary lowering blood glucose was investigated by rats test.
First, the procedure of hydrolysis of Almond protein by Protamex and Alcalase was optimized in the research.Based on single factor tests of Protamex and Alcalase respectively,a regression model was established with four factors related to the DH of APM by the Uniform Design test.The optimum combination of Protamex and Alcalase was decided.The seguence of hydrolysis of Protamex and Alcalase was determined in terms of the single enzyme.to reduce bitterness and improve DH. The results showed that the actualed DH 30.23%,average length of peptides 3.31, average MW 381.88 and bitterness 1.63 were obtained.
48 rates were classified into 6 groups randomly. Among them 4 groups were injected with STZ(To cause diabetes mellitus,DM) ,2 groups free of injection. Among 4 injectied groups, 2 of them feed with APM. The other two; one feed with water as control, the other feed with Metformin to reduce blood glucose purpose.The results have shown that 2-APM group rates have lower blood glucose level significiently(p<0.01)than the control groups. Also the APM has a regulatory function on blood glucose level of the group free of injected STZ.
Comparing APM feed groups(which injected with STZ). To metformin feed group, the former have shown lower reversing effect of blood glucose level signifciently(p<0.01). The TC and TG of blood plasma injected group were reduced significiently(p<0.05) after feed with APM.Results also have shown that the APM can not influence blood insulin level of the groups free of injection.However, for the injected group and 2-APM group the reduction of blood insulin(BIn) were minimized signiciently (p<0.01). During 42 days observation the high dosage of injection of APM group have shown remarkable inhibition effect on reduction of blood insulin(BIn) than the low dosage of APM(p<0.05).
试验对Protamex和Alcalase酶酶解杏仁蛋白工艺进行了优化,在对Protamex酶和Alcalase酶水解单因素试验基础上,通过均匀试验设计建立了杏仁多肽(Almond Peptides Mixture,APM)水解度与其中四个影响因素的回归模型。确定了Protamex酶和Alcalase酶酶解杏仁蛋白的参数最优组合。在单酶水解基础上确立了蛋白酶接力水解工艺,以期降低酶解物的苦味值和提高杏仁蛋白的水解度。在此条件下,实际得到杏仁多肽的水解度为30.23%,平均肽链长度为3.31,平均分子量为381.88,苦味值为1.63。
试验通过对口服杏仁多肽的高低两个糖尿病大鼠剂量组与糖尿病对照组试验期内(42天)血糖的监测发现,杏仁多肽能显著降低糖尿病大鼠血糖值(p<0.01),且杏仁多肽的降糖效果呈现明显的剂量效应关系。杏仁多肽对血糖正常大鼠具有一定的调节作用。通过对口服降糖药与杏仁多肽的对比试验,停药后12天内口服杏仁多肽的口服组血糖的反弹性显著低于饲药组(p<0.01)。
对糖尿病大鼠口服APM后,血清中总胆固醇及甘油三酯均能显著降低(p<0.05)。试验研究发现口服APM组不会对正常大鼠的血清胰岛素产生影响;但对于糖尿病大鼠,两个口服剂量组的下降幅度显著小于对照组(P<0.01);在整个实验期内,高剂量的杏仁多肽对抑制血清胰岛素下降的作用明显好于低剂量(P<0.05)。
The almond protein was hydrolyzed by Protamex and Alcalase to obtain Almond Peptides Mixture(APM).The bitterness and degree of hydrolysis(DH) of APM were studied.Further more the function of APM on auxiliary lowering blood glucose was investigated by rats test.
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Comparing APM feed groups(which injected with STZ). To metformin feed group, the former have shown lower reversing effect of blood glucose level signifciently(p<0.01). The TC and TG of blood plasma injected group were reduced significiently(p<0.05) after feed with APM.Results also have shown that the APM can not influence blood insulin level of the groups free of injection.However, for the injected group and 2-APM group the reduction of blood insulin(BIn) were minimized signiciently (p<0.01). During 42 days observation the high dosage of injection of APM group have shown remarkable inhibition effect on reduction of blood insulin(BIn) than the low dosage of APM(p<0.05).
引文
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