双色茉莉组织培养技术体系研究
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摘要
本研究以双色茉莉(Brunfelsia latifolia)的茎段进行组织培养体系的建立，通过全面组合设计、正交设计，结合方差分析、极差分析、多重比较，着重研究双色茉莉茎段培养的最佳培养基配方及培养程序，以建立双色茉莉组培快繁体系。结果表明：
1 双色茉莉组培快繁的外植体以4月和10月的茎段好，茎段中部诱导的不定芽粗，叶片大，长势好，分化率高。
2 初代培养：培养基1/2MS+IBA0.1mg/L+NAA0.01mg/L+BA3mg/L+KT2mg/L的效果最好。
3 继代培养：培养基为MS+IBA0.5mg/L+BA3mg/L+活性炭0.2％，35天时平均增值系数为5.92，大于2cm芽率为47.16％，活性炭对芽苗的伸长生长有促进作用，继代次数影响芽苗的增殖分化，以继代6代以内最好。
4 生根培养：瓶内生根培养基1/2MS+IBA0.5mg/L+BA0.2mg/L+糖30g对双色茉莉的生根较好，生根率88.16％，平均根长4.96cm。瓶外生根为1/2蛭石+1/2珍珠岩+ASD5mg/L，生根率35.76％，平均根长6.49cm。
5 炼苗与移栽：有根双色茉莉移栽成活率高于无根苗，经强光闭瓶锻炼有利于提高移栽成活率，成活率达83.24％。炼苗适合的基质是蛭石：珍珠岩为1：1。
The stem of Brunfesia latifolia was used as explant to establish the technique systm of tissue culture.With Orthogonal design and analysis of variance,, we wanted to find out the best medium composition and the culture process in Brunfesia latifolia. The results were as follows:
(1) As inoculation explant ,the middle stem of Brunfelsia latifolia in April ,May and Octomber was better than the other parts of the stem
(2) Iniation culture: medium with l/2MS,IBA0.1mg/L ,NAA0.01mg/L ,BA3mg/L and KT2mg/L was the optimal.
(3 ) Subculture: With MS,IBA0.5mg/L,BA3mg/L and actived carbon 0.2% as subculture medium, the increasing coefficient in 35d was 5.92.and nurslings above 2cm were 47.16% of the differentiated total buds. Actived carbon could prompt the growth of buds. Subculture generation had an influence on propagation and differentiation of buds. In general, the sixth generation was the best.
(4) Rooting culture: For rooting culture, medium with MS,IBA0.5mg/L,BA3mg/L and sugar 30 g was the best with rooting rate 88.16% and average length of root 4.96cm, while rooting substrate with 1/2 perlite ,1/2 vermiculite and ASD5 mg/L was the best, rooting rate35.76% and average length of root6.49cm.
(5) Transplantion: In transplanting, the survival rate of Brunfelsia latifolia roots was higher than that of Brunfelsia latifolia with no roots . Through strong illumination and in closed bottle, the survival rate could be improved to 83.24% .Substrate with perlite and vermiculite by 1 to 1 was the optimal.
1 双色茉莉组培快繁的外植体以4月和10月的茎段好，茎段中部诱导的不定芽粗，叶片大，长势好，分化率高。
2 初代培养：培养基1/2MS+IBA0.1mg/L+NAA0.01mg/L+BA3mg/L+KT2mg/L的效果最好。
3 继代培养：培养基为MS+IBA0.5mg/L+BA3mg/L+活性炭0.2％，35天时平均增值系数为5.92，大于2cm芽率为47.16％，活性炭对芽苗的伸长生长有促进作用，继代次数影响芽苗的增殖分化，以继代6代以内最好。
4 生根培养：瓶内生根培养基1/2MS+IBA0.5mg/L+BA0.2mg/L+糖30g对双色茉莉的生根较好，生根率88.16％，平均根长4.96cm。瓶外生根为1/2蛭石+1/2珍珠岩+ASD5mg/L，生根率35.76％，平均根长6.49cm。
5 炼苗与移栽：有根双色茉莉移栽成活率高于无根苗，经强光闭瓶锻炼有利于提高移栽成活率，成活率达83.24％。炼苗适合的基质是蛭石：珍珠岩为1：1。
The stem of Brunfesia latifolia was used as explant to establish the technique systm of tissue culture.With Orthogonal design and analysis of variance,, we wanted to find out the best medium composition and the culture process in Brunfesia latifolia. The results were as follows:
(1) As inoculation explant ,the middle stem of Brunfelsia latifolia in April ,May and Octomber was better than the other parts of the stem
(2) Iniation culture: medium with l/2MS,IBA0.1mg/L ,NAA0.01mg/L ,BA3mg/L and KT2mg/L was the optimal.
(3 ) Subculture: With MS,IBA0.5mg/L,BA3mg/L and actived carbon 0.2% as subculture medium, the increasing coefficient in 35d was 5.92.and nurslings above 2cm were 47.16% of the differentiated total buds. Actived carbon could prompt the growth of buds. Subculture generation had an influence on propagation and differentiation of buds. In general, the sixth generation was the best.
(4) Rooting culture: For rooting culture, medium with MS,IBA0.5mg/L,BA3mg/L and sugar 30 g was the best with rooting rate 88.16% and average length of root 4.96cm, while rooting substrate with 1/2 perlite ,1/2 vermiculite and ASD5 mg/L was the best, rooting rate35.76% and average length of root6.49cm.
(5) Transplantion: In transplanting, the survival rate of Brunfelsia latifolia roots was higher than that of Brunfelsia latifolia with no roots . Through strong illumination and in closed bottle, the survival rate could be improved to 83.24% .Substrate with perlite and vermiculite by 1 to 1 was the optimal.
引文
1．王奇志．海南省热带花卉业现状及发展对策．热带农业科学．2001，1：44～47
2．陈新荣，云南省花卉业发展前景．云南热作科技．2001，24(1)：29～30，37
3．赵梁军，王守聪．我国花卉业首次亮家底冲国花卉报．1999，10(5)：1～2
4．河北省花卉业现状及发展对策．河北林果研究．2000，2：156～160
5．杨先芬．花卉与花卉栽培．中国农业出版社．1998
6．郑万钧．中国树木志．第一卷．中国林业出版社，1983
7．陈有民主编，园林树木学冲国林业出版社．1988
8．杨秋生等．鸳鸯茉莉扦插繁殖试验初报．河南农业科学，1991(3)，18～19
9．曹孜义、刘国民．适用植物组织培养技术教程．甘肃科学技术出版社．1996
10．谭文澄、戴策刚主编，观赏植物组织培养技术．中国林业出版社．1997
11．陈正华主编．木本植物组织培养及其应用．高等教育出版社．1986
12．鲁涤非主编．花卉学．中国农业出版社．1998
13．邵宏波等．花卉园艺植物快繁研究现状(1)，植物杂志．1994，2：20～21
14．陈振光．园艺植物离体培养学．中国农业出版社．1996
15．陈维纶．植物生物技术改良．北京：中国科学技术出版社，1991，213
16．夏镇澳．植物组织培养与农业，植物生理学通讯．1995，3(1)：62～64
17.Kee-Youep Paek,Lu-Kwang,Bong-hee Han. Perspective and handicaps for commericial application of micropropagation in Korea. Advances in Development Biology and Biotechnology of Higher Plants. Published Korea Soc.Plant Tissue Culture. 1993,38～70
18.Nandro,W and H.Chaverra,Commercial micropropagation in South and Central America. Micropropagation Technology and Application. Kluwer Academic Pulishers,Printed in the Nthefiands. 1991,199～204
19.Pierik,RLM.Commercial micropropagation in Europe and Israel.Micropropagation Technology and Application. Kluwer Academic Pulishers,Prubted in the Netherlands. 1991,155～166
20．裘文达．园艺植物组织培养，上海科学出版社．1986
21．罗士韦．植物组织与细胞培养研究的进展．1978，4：91～112
22．韩碧文．植物组织培养研究的进展．中国植物生理学史料汇编．(中国植物生理学会)1993，61
23．周永春．应大力加强我国植物生物技术的发展．植物生物技术和作物改良(孙敬山、陈维纶主编)．中国科技出版社．1990，2
24．陈俊愉等．中国花经上海文化出版社．1990
25．郎明林等．鸳鸯茉莉试管快繁，植物生理学通讯．2000，36(5)，437
26，顾淑荣．园艺植物组织培养和应用．北京科学技术出版社．1989
27．中国现场统计研究会农业优化组著．农业正交设计法，北京：冶金工业出版社．1994，10：35～37
28．郑启发等．正交试验法在龙眼和荔枝组织培养中的应用．果树科学．2000，17(4)：269～272
29．南京农业大学主编．田间试验和统计方法．北京：农业出版社，1994
30．何松林等．切花月季萨曼砂组织培养微繁的研究．华北农学报．1996，11(3)：117
31．林大为．红边朱蕉茎尖的离体培养和快速繁殖．植物生理学通讯．1991，27(2)：211
32．许智宏等．用离体培养无性繁殖三倍体无子西瓜．植物生理学报．1979，5(2)：245～251
33．杨长春、魏文雄等．木本果树组织培养快繁工厂化生产几个要素的研究．植物学通报．1992(增刊)，2～5
34.Winton,L.Shoot and tree production from aspen tissue culmre. Amer. J.Bot, 1970,57(6):904～909
35 J. M. Bonga D. J. Durzan 主编．林木组织培养．中国林业出版社．1985
36 杨文钰等．植物化控．四川科学技术出版社．1997
37 谷瑞升．植物离体培养器官发生调空机制的研究进展
38 刘云龙．组织培养中植物生长调节剂的调控
39 韩德元．植物生长调节剂原理与应用．北京科学技术出版社．1997
40 Bhojwani,S.S. And Radzan, M.K. PlantTissue culture, Theory and Practice Amstedam, ElseviJ. Stockigit,E.M.Weller andB.Dens. Formation culture of Catharanthus. In:W. Barz et al er, 1983
41 Zenk,M.H.EL-shasi,H.Arens,,ed. Plant Tissue Culture and Its Biotechnological Application P.27～43.Sprinser-Verlag, Berlin, 1977
42 刘用生、李友勇．植物组织培养活性炭的使用．植物生理学通讯．1994，30(3)：214～217
43 卜学贤等．活性炭在植物细胞组织培养中的作用，植物学通报．1988，5(1)：1～5
44 卜学贤等．活性炭对培养基中植物生长调节物质的吸附作用．植物生理学报．1998，14(4)：401
45 Bustamante MA.6-BA andAC on embrogenal axis of colos in vitro culture. InVitro. 1991,27(3)46～47
46 Uis.The effect of AC and Gellan gom on protoplast of grape. Agri Biol Chem. 1990 54 (1): 207～208
47 韩文埃．活性炭在甜樱桃组织培养中的应用．落叶果树．2001，3：7～8
48 赖家业．活性炭在土柠檬组织培养中的应用．广西热作科技．1999，4：10～11
49 颜昌敬编．植物组织培养手册上海．上海科学技术出版社．1990
50 Capuana M Giannlni R,Lambardi Mmicropropagation of muture plants of Cyperus.atta Horticticut, 1991,289:91
51 Mudge KW,Micropropagation of mugo pune grommm embryonic and seeding explants. Hortsci, 1986,21(21):298
52 Mohamed-Yaseen Y. Micropropagation of Psidium L. by using explant of deesling. Hortsci. 1992,27(6):692
53 Smith RH. In vitro propagation of milling merton apple rootstocks. Hurtsci. 1980, 15(5):597
54 余新大、张国富等．细胞工程．科学普及出版社，1988，21～22
55 王冬梅、黄学林．细胞分裂素类物质在植物组织培养中的作用机制．植物生理学通讯．1996，32(5)：373～377
56 潘瑞帜、董愚得．植物生理学．高等教育出版社．138
57 柯善强．植物细胞的遗传全能性与组织培养形态发生控制．武汉植物学研究．1987，5(3)：304～311
58 柏新富．草莓试管苗生根技术的改进研究．烟台师范学院学报(自然科学版)．2001，17(1)：34～36
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58 柏新富．草莓试管苗生根技术的改进研究．烟台师范学院学报(自然科学版)．2001，17(1)：34～36