利用RAPD标记研究百合的遗传多样性
摘要
百合(Lilium)是我国的传统花卉,适于做切花、盆花和园林布景。我国是世界百合的分布中心,拥有约全世界一半以上的品种,但是由于各种人为和自然原因使得我国百合资源遭到严重破坏和流失,导致多样性逐年降低。此外,我国在百合的育种方面非常薄弱,目前还没有培育出较知名的百合杂交品种或品系,当前国内商业栽培种球主要依赖于国外进口。
本研究利用RAPD技术对采集到的53个百合品种进行遗传多样性的分析及亲缘关系的鉴定,以期为进一步建立百合核心种质以及更好地利用资源打下基础,为我国百合育种工作提供参考。通过研究,取得了以下进展:
1.从全国各地收集到了53份百合种质,其中野生种21份,栽培种32份,为百合种质资源研究和保存打下了基础。
2.优化了百合RAPD-PCR的循环条件,得出了适合百合RAPD分析的“双退火温度”循环程序:即37℃30s 5个循环和48℃38个循环的PCR扩增。
3.用125个随机引物对10份东方百合杂交系栽培种进行了RAPD分析,成功地筛选出了30个适合于百合RAPD分析的随机引物,这些引物可以扩增出丰富清晰的条带。
Lily is a famous traditional flower in China. It can be used as food, medicine and ornamental plants. China, the center of lily origin, has over half of all lily species all over the world and has a large number of wild species with high genetic diversity. However, a lot of them are in danger of extinction because of natural disasters, pest and so on. While for some reasons, the breeding of lily is undeveloped in China. At present, almost no famous varieties and cultivars were developed in china, and most of the lily bulbs in commercial use are imported.
The genetic diversity of 53 wild species and cultivars of lilies were analyzed by RAPD for the purpose of providing bases of establishing lily core germplasm and better utilization of lily resources. Through study, the following progresses have been made:
1. 53 lily gerplasm including 21 wild species and 32 cultivars from all over the China was collected and preserved.
2. The RAPD-PCR condition for lily has been optimized, and the suitable RAPD condition was the amplification for 5 cycles at 37℃for 30s followed by 38 cycles at 48℃.
3. 30 random primers which could amplify polymorphic and clear bands were selected out for RAPD analysis of lily among 125 primers through
本研究利用RAPD技术对采集到的53个百合品种进行遗传多样性的分析及亲缘关系的鉴定,以期为进一步建立百合核心种质以及更好地利用资源打下基础,为我国百合育种工作提供参考。通过研究,取得了以下进展:
1.从全国各地收集到了53份百合种质,其中野生种21份,栽培种32份,为百合种质资源研究和保存打下了基础。
2.优化了百合RAPD-PCR的循环条件,得出了适合百合RAPD分析的“双退火温度”循环程序:即37℃30s 5个循环和48℃38个循环的PCR扩增。
3.用125个随机引物对10份东方百合杂交系栽培种进行了RAPD分析,成功地筛选出了30个适合于百合RAPD分析的随机引物,这些引物可以扩增出丰富清晰的条带。
Lily is a famous traditional flower in China. It can be used as food, medicine and ornamental plants. China, the center of lily origin, has over half of all lily species all over the world and has a large number of wild species with high genetic diversity. However, a lot of them are in danger of extinction because of natural disasters, pest and so on. While for some reasons, the breeding of lily is undeveloped in China. At present, almost no famous varieties and cultivars were developed in china, and most of the lily bulbs in commercial use are imported.
The genetic diversity of 53 wild species and cultivars of lilies were analyzed by RAPD for the purpose of providing bases of establishing lily core germplasm and better utilization of lily resources. Through study, the following progresses have been made:
1. 53 lily gerplasm including 21 wild species and 32 cultivars from all over the China was collected and preserved.
2. The RAPD-PCR condition for lily has been optimized, and the suitable RAPD condition was the amplification for 5 cycles at 37℃for 30s followed by 38 cycles at 48℃.
3. 30 random primers which could amplify polymorphic and clear bands were selected out for RAPD analysis of lily among 125 primers through
引文
[1] 马克平.试论生物多样性的概念[J].生物多样性, 1993, 1( 1): 20-22.
[2] WEA, 中国科学院生物多样性委员会译.全球生物多样性策略[M]. 北京: 中国标准出版社, 1992.
[3] 沈浩, 刘登义.遗传多样性概述[J].生物学杂志, 2001, 18( 3): 5-9.
[4] 钱迎倩, 马克平.生物多样性研究的原理与方法[M]. 北京, 1994. 13-36.
[5] 冯夏莲, 何承忠, 张志毅等.植物遗传多样性研究方法概述[J].南林学院学报, 2006( 26): 69-79.
[6] 夏铭.遗传多样性研究进展[J].生态学杂志, 1999, 18( 3): 92-96.
[7] 管敏强, 陈锡文, 赵惠玲等.分子标记技术及其应用[J].实验动物科学与管理, 2005, 22( 1): 48-50.
[8] Chowdhur Y.Molecular analysis of organelle DNA of different subspecies of rice and the genomic stability of mtDNA in tissue cultured cells of rice[J].Theor Appl Genet, 1998, 76: 533-539.
[9] Grodzicker T, Williams J, Sharp P, et al. Physical mapping of temperature sensitive- mutations of adenoviruses[J].Cold Spring Harbor Symposium of Quantitative Biology, 1974, 39( 4): 39-46.
[10] 许云华, 沈洁.DNA分子标记技术及其原理[J].连云港师范高等专科学校学报, 2003( 03): 78-82.
[11] 王和勇, 陈敏, 廖志华等.RFLP、RAPD、AFLP分子标记及其在植物生物技术中的应用[J].生物学杂志, 1999, 16( 04): 24-25.
[12] 王晓辉, 刘桂林.DNA分子标记技术[J].畜禽业, 2003( 06): 50-51.
[13] 白晶, 张月学, 杨冬鹤等.几种重要的分子标记原理及RAPD 应用[J].哈尔滨师范大学自然科学学报, 2004, 20( 5): 89-91.
[14] Welsh J, McClelland M.Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers[J].Nucleic Acids Research, 1990, 18( 721): 3-8.
[15] Mullis K, Faloona F.Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase catalysed chain reaction[J].Methods of Enzymology, 1987, 255: 335-350.
[16] 卢江.随机放大多态性DNA(RAPD) 一种新的分子遗传标记技术[J].植物学报, 1993( 35): 119-127.
[17] Vos P, Hoger R, Bleeker M, et al.AFLP: A New Technique for DNA Finger Printing[J].Nule. Acids Res, 1995, 23: 4407-4414.
[18] Litt M, Luty J.A hypervariable microsatellite revealed by in vitro amplification of a dinucleotide repeat within the cardiac muscle actin gene[J].American Journal of Human, 1989, 44: 398-401.
[19] Zietkielvicz E, Rafalski A, Labuda D, et al.Genome fingerprinting by simple sequencerepeat(SSR)-anchored polymerase chain reaction amplifiation[J].Genomics, 1994, 20( 2): 176-183.
[20] Olson M, Hood L, Cantor C, et al.A common language for physical mapping of the human genome[J].Science, 1989, 24: 1434–1435.
[21] Staub J, Serquen F, Gupta M, et al.Genetic markers, map construction, and their application in plant breeding[J].Hort Science, 1996, 31( 5): 729-741.
[22] 杨业华.普通遗传学[M]. 北京: 高等教育出版社, 2000.
[23] 王永飞, 马三梅, 刘翠萍等遗传标记的发展和分子标记的.遗传标记的发展和分子标记的检测技术[J].西北农林科技大学学报(自然科学版), 2001, 29( 6): 130-136.
[24] 李磊, 王沛政, 秦利等.陆地棉分子遗传图谱的构建[J].新疆农业科学, 2006, 3( 04):306-309.
[25] 曹永国, 王国英, 王守才等.玉米RFLP遗传图谱的构建及矮生基因定位[J].科学通报, 1999, 44( 20): 2178-2182.
[26] 兰进好, 张宝石.玉米分子遗传图谱的SSR和AFLP标记构建[J].西北农林科技大学学报(自然科学版), 2004, 32( 12): 28-32.
[27] 张立阳, 张凤兰, 王美等.大白菜永久高密度分子遗传图谱的构建[J].园艺学报, 2005, 32( 02): 249-255.
[28] 于拴仓, 王永健, 郑晓鹰等.大白菜分子遗传图谱的构建与分析[J].中国农业科学, 2003, 36( 02): 190-195.
[29] 马玉银, 马国军.水稻基因组物理图谱和遗传图谱的整合[J].扬州教育学院学报, 2006, 24( 03): 3-8.
[30] Harushima Y, Yano M, Shomura A, et al.A high-density rice genetic linkage map with 2275 markers using a single F2 populatio[J].Genetics, 1998, 148: 479-494.
[31] 詹秋文.高粱分子遗传图谱研究进展[J].安徽技术师范学院学报, 2005, 19( 06): 12-17.
[32] 卢为国, 盖钧镒, 郑永战等.大豆遗传图谱的构建和抗胞囊线虫(Heterodera glycines Ichinohe)的QTL分析[J].作物学报, 2006, 32( 09):1272-1279.
[33] 刘峰, 陈受宜.大豆分子遗传图谱的构建和重要农艺性状基因定位[J].云南大学学报(自然科学版), 1999, 32( S3): 143.
[34] 马三梅, 王永飞, 王得元等.农作物分子遗传图谱的研究进展[J].干旱地区农业研究, 2004, 22( 04): 101-108.
[35] 蔡友铭, 武雯, 邹惠渝等.分子标记在花卉研究中的应用现状[J].南京林业大学学报(自然科学版), 2002, 26( 2): 84-86.
[36] Barcaccia G, Tavoletti S, Falcinelli M, et al.Verification of the parthenogenetic capability of unreduced eggs in an alfalfa mutant by a progeny test based on morphological and molecular marker[J].Plant Breeding, 1997, 116: 475-479.
[37] Livneh O, Nagler Y, Tal Y, et al.RFLP an alysis ofa hybrid cultivar of pepper and its use in distinguishing between parental lines and in hybrid identification[J].Seed Sci.Technol, 1990, 18: 209-214.
[38] Demek T, Adams R, Chibhar R, et al.Potential taxonomies use of random amplified polymorphism DNA(RAPD):A case study in Brassi[J].Theor Appl Genet, 1992, 84.
[39] Olufowote J, Xu Y, al XCE, et al.Comparative evaluation of within-cultivar variation of rice (Oryza sativa L. ) using microsatellite and RFLP markers[J].Genome, 1997, 40: 370-378.
[40] 辛景树, 郭景伦, 张软斌等.几种常用分子标记技术在种子纯度和品种真实性鉴定方面的比较与分析[J].种子, 2005, 24( 01): 58-60.
[41] Camargo L, Williams P, Obsbomn T, et al.Mapping of quantitative trait locicontrolling resistance of Brassica oleracea to Xanthomonas campestris pv. Campestris[J]. Phytopathology, 1995, 85( 10): 1296-1300.
[42] Holton T, Brughera F, Dr. al LE, et al.Cloning and expressing of cytochrome P genes controlling flower colour[J].Nature London, 1993, 366( 6452): 276-279.
[43] Holton T, Brughera F.Cloning and expression of flavonol synthase from Petunia hybrida[J].Plant Jnumal, 1993, 4( 6): 1003-1010.
[44] Scovel G, Meir H, Ovadis M, et al.RAPD and RFLP markers tightly linked to the locus controlling carnation(Dianthus caryophyllus)flower type[J].Thaor Appl Genet, 1998, 96: 117-122.
[45] Huang N.Pyramiding of bacterial blight resistance gene in rice: maker-assisted selection using RFLP and PCR[J].Thero Appl Genet, 1997, 95: 313-320.
[46] Ganal SMGM.Chromosome landing: A paradigm for map-based gene cloning in plant with large genome[J].Tends Genet, 1995, 11: 63-68.
[47] 景润春, 黄青阳, 朱英国等.图位克隆技术在分离植物基因中的应用[J].遗传, 2000( 03): 180-185.
[48] 王康才.百合栽培新技术[M]. 北京: 中国农业出版社, 1999.
[49] 赵祥云, 王树栋, 陈新露等.百合[M]. 北京: 中国农业出版社, 2000.
[50] 杜明芸, 宁召民.百合的资源分布和开发利用[J].山东林业科技, 2005( 02): 18-19.
[51] 汪发瓒, 唐进.中国植物志(第一版)[M]. 北京: 科技出版社, 1980.
[52] 王连英.花卉学[M]. 北京: 中国林业出版社, 1988. 362-364.
[53] 龙雅宜, 张金政, 张兰年等.百合— — 球根花卉之王[M]. 北京: 金盾出版社, 1999.
[54] 吕书年, 赵鹂.百合属植物资源的保护与利用[J].丽水师范专科学校学报, 2001( 05): 40-44.
[55] 杨利平.高寒地区百合的栽培与繁育[M]. 黑龙江: 东北林业大学出版社, 2001.
[56] 陈俊愉, 程绪珂.中国花经[M]. 上海: 上海文化出版社, 1989.
[57] 蔡曾煜.现代百合的种群分类[J].中国花卉盆景, 2001( 12): 12-13.
[58] 张西丽, 周厚高, 周焱等.百合品种间的数量分类研究[J].广西植物, 2000, 20( 04): 25-28.
[59] 毛钧, 张明宇, 虞泓等.泸定百合普洱居群遗传与变异研究[J].云南大学学报(自然科学版), 2003, 25( S1): 91-96.
[60] 王红霞, 杨保胜.通江百合形态变异式样研究[J].河南科技学院学报(自科版), 2005, 25( 03): 8-10.
[61] 贾琳, 陆巧玲, 虞泓等.泸定百合遵义居群与牟定居群的遗传多样性研究[J].云南大学学报(自然科学版), 2003, 25( S1): 84-90.
[62] 何显静, 李标, 周利杰等.云南5种百合形态多样性研究[J].黑龙江农业科学, 2003( 06): 26-28.
[63] 王红霞, 张艳芬, 杨保胜等.百合属植物核型变异式样对比分析[J].河南科技学院学报(自科版), 2006, 34( 04): 38-40.
[64] 王红霞, 王文锋, 丰慧根等.两种百合染色体变异比较研究[J].生物学杂志, 2006, 23( 02): 42-44.
[65] 王红霞, 杨保胜.通江百合形态变异式样研究[J].河南科技学院学报(自科版), 2005, 25( 03): 8-10.
[66] 王红霞, 杨保胜.岷江百合居群核型变异研究[J].河南职业技术师范学院学报, 2003, 31( 03): 40-43.
[67] 杨利平, 丁冰, 刘香环等.东北百合属植物的细胞遗传多样性[J].东北林业大学学报, 1996, 24( 05): 19-23.
[68] 虞泓, 王红霞, 游丹等.泸定百合居群染色体形态研究[J].云南大学学报(自然科学版), 2000( 01):62-67.
[69] 岳玲, 雷家军, 胡新颖等.大花卷丹和卷丹的核型研究[J].黑龙江农业科学, 2006( 06): 41-43.
[70] 李思锋, 黎斌, 祁桦等.秦岭百合科部分类群的细胞学研究(英文)[J].西北植物学报, 2003, 23( 11): 1945-1955.
[71] 邵建章,张定成,杨连珍.安徽百合属细胞学研究[J].安徽师范大学学报(自然科学版), 1994( 02): 39-47.
[72] 周厚高, 张西丽, 王中仁等.几个百合品种遗传亲缘关系的等位酶分析[J].西南农业学报, 1999, 12( 04): 92-95.
[73] 贾月慧, 张克中, 王葳蕤等.几种中国野生百合的过氧化物酶同工酶[J].东北林业大学学报, 2005, 33( 02): 15-17.
[74] 李雪, 文婕英, 曾小英等.百合属几种植物亲缘关系的可溶性蛋白质和过氧化物酶分析[J].西北师范大学学报(自然科学版), 2005, 41( 06): 58-60.
[75] 辛广, 侯冬岩, 刘琳琳等.5种东方百合过氧化物酶同工酶的分析[J].鞍山师范学院学报, 2003, 5( 06): 59-61.
[76] Yamagishi M.Detection of section specific random amplified polymorphic DNA(RAPD) markersin Lilinm[J].Theor Appl Genet, 1995, 91( 6): 830-835.
[77] Yamagishi M, Abe H, Nakano M, et al.PCR-based Molecular Makers In Asiatic Hybrid lily[J]., 2002( 96): 225-234.
[78] Lee W, Choi S, Kim S, et al.An application of random amplified polymorphic DNA(RAPD) to systematics of some species of Cilium in Korea.[J].Korean Journal of Plant Taxonomy, 1993, 23( 2): 35-42.
[79] 赵祥云,陈新露,方海等.用RAPD标记评价百合品种间遗传关系[J].北京农学院学报, 1995( 02):58-63.
[80] 肖艳, 周厚高, 黄子锋等.新铁炮百合自交初代遗传多样性的RAPD分析[J].园艺学报, 2005( 03):524-526.
[81] 宋朝枢, 徐荣章, 张清华等.中国珍稀濒危保护植物[M]. 北京: 中国林业出版社, 1989.
[82] Nei M, Li W.Mathenatics model for studying geneticvariation in terns of restriction endonucleases[J].Proc Natl Acad Sci, 1979, 76: 5269-5273.
[83] 汪小全, 邹喻苹, 张大明等.RAPD应用于遗传多样性和系统学研究中的问题[J].植物学报, 1996, 38( 12): 954-962.
[84] Graham J, McNicol R, McNicol J, et al.A comparison of methods for the estimation of genetic diversity in strawberry cultivars[J].Theor Appl Genet, 1996, 93: 402-406.
[85] Ilbi H.RAPD markers assisted varietal identification and genetic purity test in pepper, Capsicum annuum[J].Scientia Hort., 2003, 97: 211-218.
[86] 黄永芳, 杨懋勋, 柳军等.广东野百合DNA提取和RAPD条件的优化[J].热带亚热带植物学报, 2006, 14( 03): 251-255.
[87] 钱忠英, 蔡润, 潘俊松等.黄瓜RAPD体系的优化与应用[J].上海交通大学学报(农业科学版), 2003, 21( 03): 8-13.
[88] 乔玉山, 章镇, 房经贵等.中国李RAPD的优化反应体系及其在品种鉴定中的应用[J].果树学报, 2003, 20( 06): 445-449.
[89] 王永飞, 原英霞, 马三梅等.大白菜RAPD扩增体系的优化研究[J].烟台师范学院学报(自然科学版), 2002, 18( 03): 195-198.
[90] 孟凡娟, 李景富, 许向阳等.番茄随机扩增DNA多态性体系的条件优化[J].生物技术通讯, 2005, 16( 04): 2-4.
[91] 沈程文, 罗军武, 刘春林等.茶树RAPD分析体系的优化[J].生命科学研究, 2002, 6( 02): 179-182.
[92] 刘春林, 阮颖, 官春云等.油菜RAPD反应体系的优化研究[J].湖南农业大学学报, 2001, 27( 06): 432-433.
[93] 邹喻苹, 葛颂, 王晓东等.系统与进化植物学中的分子标记[M]. 北京: 科学出版社, 2001. 36-41.
[94] 左志锐, 高俊平, 刘春等.百合遗传多样性及亲缘关系的RAPD分析[J].园艺学报, 2005, 32( 03):68-73.
[95] Williams J, Kubelik A, Livak K, et al.DNA polymophisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers[J].Nucl Acids Res., 1990, 18: 6231-6235.
[96] 彭镜毅. 台湾维管束植物编码索引. 2003.
[97] 台湾植物志编辑委员会. 台湾植物志. 6(ed1). 台北: 现代关系出版社; 2003. p 147.
[98] 浅野义人.百合种间远缘杂交之研究[J].园艺学会杂志, 1977, 46( 2): 267-273.
[99] Okazaki K, Umada Y.interspecific hybrids of lilium longiflorum and L. xflormolongi with L. rubellum and L. japonicum through embryo culture[J].Japan Soc Hort Sci, 1992, 60( 4): 997-1002.
[100] 赵庆芳, 马世荣, 曾小英等.百合栽培品种资源的RAPD分析[J].兰州大学学报(自然科学版), 2005, 41( 02): 30-33.
[2] WEA, 中国科学院生物多样性委员会译.全球生物多样性策略[M]. 北京: 中国标准出版社, 1992.
[3] 沈浩, 刘登义.遗传多样性概述[J].生物学杂志, 2001, 18( 3): 5-9.
[4] 钱迎倩, 马克平.生物多样性研究的原理与方法[M]. 北京, 1994. 13-36.
[5] 冯夏莲, 何承忠, 张志毅等.植物遗传多样性研究方法概述[J].南林学院学报, 2006( 26): 69-79.
[6] 夏铭.遗传多样性研究进展[J].生态学杂志, 1999, 18( 3): 92-96.
[7] 管敏强, 陈锡文, 赵惠玲等.分子标记技术及其应用[J].实验动物科学与管理, 2005, 22( 1): 48-50.
[8] Chowdhur Y.Molecular analysis of organelle DNA of different subspecies of rice and the genomic stability of mtDNA in tissue cultured cells of rice[J].Theor Appl Genet, 1998, 76: 533-539.
[9] Grodzicker T, Williams J, Sharp P, et al. Physical mapping of temperature sensitive- mutations of adenoviruses[J].Cold Spring Harbor Symposium of Quantitative Biology, 1974, 39( 4): 39-46.
[10] 许云华, 沈洁.DNA分子标记技术及其原理[J].连云港师范高等专科学校学报, 2003( 03): 78-82.
[11] 王和勇, 陈敏, 廖志华等.RFLP、RAPD、AFLP分子标记及其在植物生物技术中的应用[J].生物学杂志, 1999, 16( 04): 24-25.
[12] 王晓辉, 刘桂林.DNA分子标记技术[J].畜禽业, 2003( 06): 50-51.
[13] 白晶, 张月学, 杨冬鹤等.几种重要的分子标记原理及RAPD 应用[J].哈尔滨师范大学自然科学学报, 2004, 20( 5): 89-91.
[14] Welsh J, McClelland M.Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers[J].Nucleic Acids Research, 1990, 18( 721): 3-8.
[15] Mullis K, Faloona F.Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase catalysed chain reaction[J].Methods of Enzymology, 1987, 255: 335-350.
[16] 卢江.随机放大多态性DNA(RAPD) 一种新的分子遗传标记技术[J].植物学报, 1993( 35): 119-127.
[17] Vos P, Hoger R, Bleeker M, et al.AFLP: A New Technique for DNA Finger Printing[J].Nule. Acids Res, 1995, 23: 4407-4414.
[18] Litt M, Luty J.A hypervariable microsatellite revealed by in vitro amplification of a dinucleotide repeat within the cardiac muscle actin gene[J].American Journal of Human, 1989, 44: 398-401.
[19] Zietkielvicz E, Rafalski A, Labuda D, et al.Genome fingerprinting by simple sequencerepeat(SSR)-anchored polymerase chain reaction amplifiation[J].Genomics, 1994, 20( 2): 176-183.
[20] Olson M, Hood L, Cantor C, et al.A common language for physical mapping of the human genome[J].Science, 1989, 24: 1434–1435.
[21] Staub J, Serquen F, Gupta M, et al.Genetic markers, map construction, and their application in plant breeding[J].Hort Science, 1996, 31( 5): 729-741.
[22] 杨业华.普通遗传学[M]. 北京: 高等教育出版社, 2000.
[23] 王永飞, 马三梅, 刘翠萍等遗传标记的发展和分子标记的.遗传标记的发展和分子标记的检测技术[J].西北农林科技大学学报(自然科学版), 2001, 29( 6): 130-136.
[24] 李磊, 王沛政, 秦利等.陆地棉分子遗传图谱的构建[J].新疆农业科学, 2006, 3( 04):306-309.
[25] 曹永国, 王国英, 王守才等.玉米RFLP遗传图谱的构建及矮生基因定位[J].科学通报, 1999, 44( 20): 2178-2182.
[26] 兰进好, 张宝石.玉米分子遗传图谱的SSR和AFLP标记构建[J].西北农林科技大学学报(自然科学版), 2004, 32( 12): 28-32.
[27] 张立阳, 张凤兰, 王美等.大白菜永久高密度分子遗传图谱的构建[J].园艺学报, 2005, 32( 02): 249-255.
[28] 于拴仓, 王永健, 郑晓鹰等.大白菜分子遗传图谱的构建与分析[J].中国农业科学, 2003, 36( 02): 190-195.
[29] 马玉银, 马国军.水稻基因组物理图谱和遗传图谱的整合[J].扬州教育学院学报, 2006, 24( 03): 3-8.
[30] Harushima Y, Yano M, Shomura A, et al.A high-density rice genetic linkage map with 2275 markers using a single F2 populatio[J].Genetics, 1998, 148: 479-494.
[31] 詹秋文.高粱分子遗传图谱研究进展[J].安徽技术师范学院学报, 2005, 19( 06): 12-17.
[32] 卢为国, 盖钧镒, 郑永战等.大豆遗传图谱的构建和抗胞囊线虫(Heterodera glycines Ichinohe)的QTL分析[J].作物学报, 2006, 32( 09):1272-1279.
[33] 刘峰, 陈受宜.大豆分子遗传图谱的构建和重要农艺性状基因定位[J].云南大学学报(自然科学版), 1999, 32( S3): 143.
[34] 马三梅, 王永飞, 王得元等.农作物分子遗传图谱的研究进展[J].干旱地区农业研究, 2004, 22( 04): 101-108.
[35] 蔡友铭, 武雯, 邹惠渝等.分子标记在花卉研究中的应用现状[J].南京林业大学学报(自然科学版), 2002, 26( 2): 84-86.
[36] Barcaccia G, Tavoletti S, Falcinelli M, et al.Verification of the parthenogenetic capability of unreduced eggs in an alfalfa mutant by a progeny test based on morphological and molecular marker[J].Plant Breeding, 1997, 116: 475-479.
[37] Livneh O, Nagler Y, Tal Y, et al.RFLP an alysis ofa hybrid cultivar of pepper and its use in distinguishing between parental lines and in hybrid identification[J].Seed Sci.Technol, 1990, 18: 209-214.
[38] Demek T, Adams R, Chibhar R, et al.Potential taxonomies use of random amplified polymorphism DNA(RAPD):A case study in Brassi[J].Theor Appl Genet, 1992, 84.
[39] Olufowote J, Xu Y, al XCE, et al.Comparative evaluation of within-cultivar variation of rice (Oryza sativa L. ) using microsatellite and RFLP markers[J].Genome, 1997, 40: 370-378.
[40] 辛景树, 郭景伦, 张软斌等.几种常用分子标记技术在种子纯度和品种真实性鉴定方面的比较与分析[J].种子, 2005, 24( 01): 58-60.
[41] Camargo L, Williams P, Obsbomn T, et al.Mapping of quantitative trait locicontrolling resistance of Brassica oleracea to Xanthomonas campestris pv. Campestris[J]. Phytopathology, 1995, 85( 10): 1296-1300.
[42] Holton T, Brughera F, Dr. al LE, et al.Cloning and expressing of cytochrome P genes controlling flower colour[J].Nature London, 1993, 366( 6452): 276-279.
[43] Holton T, Brughera F.Cloning and expression of flavonol synthase from Petunia hybrida[J].Plant Jnumal, 1993, 4( 6): 1003-1010.
[44] Scovel G, Meir H, Ovadis M, et al.RAPD and RFLP markers tightly linked to the locus controlling carnation(Dianthus caryophyllus)flower type[J].Thaor Appl Genet, 1998, 96: 117-122.
[45] Huang N.Pyramiding of bacterial blight resistance gene in rice: maker-assisted selection using RFLP and PCR[J].Thero Appl Genet, 1997, 95: 313-320.
[46] Ganal SMGM.Chromosome landing: A paradigm for map-based gene cloning in plant with large genome[J].Tends Genet, 1995, 11: 63-68.
[47] 景润春, 黄青阳, 朱英国等.图位克隆技术在分离植物基因中的应用[J].遗传, 2000( 03): 180-185.
[48] 王康才.百合栽培新技术[M]. 北京: 中国农业出版社, 1999.
[49] 赵祥云, 王树栋, 陈新露等.百合[M]. 北京: 中国农业出版社, 2000.
[50] 杜明芸, 宁召民.百合的资源分布和开发利用[J].山东林业科技, 2005( 02): 18-19.
[51] 汪发瓒, 唐进.中国植物志(第一版)[M]. 北京: 科技出版社, 1980.
[52] 王连英.花卉学[M]. 北京: 中国林业出版社, 1988. 362-364.
[53] 龙雅宜, 张金政, 张兰年等.百合— — 球根花卉之王[M]. 北京: 金盾出版社, 1999.
[54] 吕书年, 赵鹂.百合属植物资源的保护与利用[J].丽水师范专科学校学报, 2001( 05): 40-44.
[55] 杨利平.高寒地区百合的栽培与繁育[M]. 黑龙江: 东北林业大学出版社, 2001.
[56] 陈俊愉, 程绪珂.中国花经[M]. 上海: 上海文化出版社, 1989.
[57] 蔡曾煜.现代百合的种群分类[J].中国花卉盆景, 2001( 12): 12-13.
[58] 张西丽, 周厚高, 周焱等.百合品种间的数量分类研究[J].广西植物, 2000, 20( 04): 25-28.
[59] 毛钧, 张明宇, 虞泓等.泸定百合普洱居群遗传与变异研究[J].云南大学学报(自然科学版), 2003, 25( S1): 91-96.
[60] 王红霞, 杨保胜.通江百合形态变异式样研究[J].河南科技学院学报(自科版), 2005, 25( 03): 8-10.
[61] 贾琳, 陆巧玲, 虞泓等.泸定百合遵义居群与牟定居群的遗传多样性研究[J].云南大学学报(自然科学版), 2003, 25( S1): 84-90.
[62] 何显静, 李标, 周利杰等.云南5种百合形态多样性研究[J].黑龙江农业科学, 2003( 06): 26-28.
[63] 王红霞, 张艳芬, 杨保胜等.百合属植物核型变异式样对比分析[J].河南科技学院学报(自科版), 2006, 34( 04): 38-40.
[64] 王红霞, 王文锋, 丰慧根等.两种百合染色体变异比较研究[J].生物学杂志, 2006, 23( 02): 42-44.
[65] 王红霞, 杨保胜.通江百合形态变异式样研究[J].河南科技学院学报(自科版), 2005, 25( 03): 8-10.
[66] 王红霞, 杨保胜.岷江百合居群核型变异研究[J].河南职业技术师范学院学报, 2003, 31( 03): 40-43.
[67] 杨利平, 丁冰, 刘香环等.东北百合属植物的细胞遗传多样性[J].东北林业大学学报, 1996, 24( 05): 19-23.
[68] 虞泓, 王红霞, 游丹等.泸定百合居群染色体形态研究[J].云南大学学报(自然科学版), 2000( 01):62-67.
[69] 岳玲, 雷家军, 胡新颖等.大花卷丹和卷丹的核型研究[J].黑龙江农业科学, 2006( 06): 41-43.
[70] 李思锋, 黎斌, 祁桦等.秦岭百合科部分类群的细胞学研究(英文)[J].西北植物学报, 2003, 23( 11): 1945-1955.
[71] 邵建章,张定成,杨连珍.安徽百合属细胞学研究[J].安徽师范大学学报(自然科学版), 1994( 02): 39-47.
[72] 周厚高, 张西丽, 王中仁等.几个百合品种遗传亲缘关系的等位酶分析[J].西南农业学报, 1999, 12( 04): 92-95.
[73] 贾月慧, 张克中, 王葳蕤等.几种中国野生百合的过氧化物酶同工酶[J].东北林业大学学报, 2005, 33( 02): 15-17.
[74] 李雪, 文婕英, 曾小英等.百合属几种植物亲缘关系的可溶性蛋白质和过氧化物酶分析[J].西北师范大学学报(自然科学版), 2005, 41( 06): 58-60.
[75] 辛广, 侯冬岩, 刘琳琳等.5种东方百合过氧化物酶同工酶的分析[J].鞍山师范学院学报, 2003, 5( 06): 59-61.
[76] Yamagishi M.Detection of section specific random amplified polymorphic DNA(RAPD) markersin Lilinm[J].Theor Appl Genet, 1995, 91( 6): 830-835.
[77] Yamagishi M, Abe H, Nakano M, et al.PCR-based Molecular Makers In Asiatic Hybrid lily[J]., 2002( 96): 225-234.
[78] Lee W, Choi S, Kim S, et al.An application of random amplified polymorphic DNA(RAPD) to systematics of some species of Cilium in Korea.[J].Korean Journal of Plant Taxonomy, 1993, 23( 2): 35-42.
[79] 赵祥云,陈新露,方海等.用RAPD标记评价百合品种间遗传关系[J].北京农学院学报, 1995( 02):58-63.
[80] 肖艳, 周厚高, 黄子锋等.新铁炮百合自交初代遗传多样性的RAPD分析[J].园艺学报, 2005( 03):524-526.
[81] 宋朝枢, 徐荣章, 张清华等.中国珍稀濒危保护植物[M]. 北京: 中国林业出版社, 1989.
[82] Nei M, Li W.Mathenatics model for studying geneticvariation in terns of restriction endonucleases[J].Proc Natl Acad Sci, 1979, 76: 5269-5273.
[83] 汪小全, 邹喻苹, 张大明等.RAPD应用于遗传多样性和系统学研究中的问题[J].植物学报, 1996, 38( 12): 954-962.
[84] Graham J, McNicol R, McNicol J, et al.A comparison of methods for the estimation of genetic diversity in strawberry cultivars[J].Theor Appl Genet, 1996, 93: 402-406.
[85] Ilbi H.RAPD markers assisted varietal identification and genetic purity test in pepper, Capsicum annuum[J].Scientia Hort., 2003, 97: 211-218.
[86] 黄永芳, 杨懋勋, 柳军等.广东野百合DNA提取和RAPD条件的优化[J].热带亚热带植物学报, 2006, 14( 03): 251-255.
[87] 钱忠英, 蔡润, 潘俊松等.黄瓜RAPD体系的优化与应用[J].上海交通大学学报(农业科学版), 2003, 21( 03): 8-13.
[88] 乔玉山, 章镇, 房经贵等.中国李RAPD的优化反应体系及其在品种鉴定中的应用[J].果树学报, 2003, 20( 06): 445-449.
[89] 王永飞, 原英霞, 马三梅等.大白菜RAPD扩增体系的优化研究[J].烟台师范学院学报(自然科学版), 2002, 18( 03): 195-198.
[90] 孟凡娟, 李景富, 许向阳等.番茄随机扩增DNA多态性体系的条件优化[J].生物技术通讯, 2005, 16( 04): 2-4.
[91] 沈程文, 罗军武, 刘春林等.茶树RAPD分析体系的优化[J].生命科学研究, 2002, 6( 02): 179-182.
[92] 刘春林, 阮颖, 官春云等.油菜RAPD反应体系的优化研究[J].湖南农业大学学报, 2001, 27( 06): 432-433.
[93] 邹喻苹, 葛颂, 王晓东等.系统与进化植物学中的分子标记[M]. 北京: 科学出版社, 2001. 36-41.
[94] 左志锐, 高俊平, 刘春等.百合遗传多样性及亲缘关系的RAPD分析[J].园艺学报, 2005, 32( 03):68-73.
[95] Williams J, Kubelik A, Livak K, et al.DNA polymophisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers[J].Nucl Acids Res., 1990, 18: 6231-6235.
[96] 彭镜毅. 台湾维管束植物编码索引. 2003.
[97] 台湾植物志编辑委员会. 台湾植物志. 6(ed1). 台北: 现代关系出版社; 2003. p 147.
[98] 浅野义人.百合种间远缘杂交之研究[J].园艺学会杂志, 1977, 46( 2): 267-273.
[99] Okazaki K, Umada Y.interspecific hybrids of lilium longiflorum and L. xflormolongi with L. rubellum and L. japonicum through embryo culture[J].Japan Soc Hort Sci, 1992, 60( 4): 997-1002.
[100] 赵庆芳, 马世荣, 曾小英等.百合栽培品种资源的RAPD分析[J].兰州大学学报(自然科学版), 2005, 41( 02): 30-33.