白僵菌工业化生产与防治天牛技术的研究
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摘要
为了改变我国目前白僵菌（Beauveria）作坊式生产的状况，提供大批量优
质高效的白僵菌产品，本文对白僵菌的工业化生产和白僵菌的新剂型——
无纺布菌条的制作技术进行了系统的研究。同时，通过不同白僵菌菌株和不
同放菌方式对松褐天牛（Monochamus alternatus Hope）和光肩星天牛
（Aloplophora glabripennis Motschulsky）进行了一系列试验。
通过验证前人的研究结果，认为麸皮培养基（6％鼓皮煮汁+1％蔗糖
+2％豆饼粉+0.05％K2HPO4）是经济而又适合工业化生产的球孢白僵菌液
体种子培养基。用不同pH的培养基培养白僵菌，结果是：pH 6.0-7.0最适
合球孢白僵菌的生长，在相同培养时间内菌丝产量最高，过酸或过碱环境都
不利于球孢白僵菌的生长。
在白僵菌液体发酵过程中，处于迅速生长期的菌丝活力最强，是接种
的最佳时期。分别用20℃、25℃和30℃三个不同温度的液体培养基培养球
孢白僵菌，每12小时取样测定生物产量并作生长曲线。结果为25℃培养48
小时的球孢白僵菌生长速率最高、生物量较大，是接种的最佳时期。
以产孢量为指标，通过正交试验筛选白僵菌固态发酵的培养基，结果
是：90％麦麸+5％玉米粉+5％黄豆粉的物理性状较好，营养充分，能有效
地促进白僵菌的生长和产孢，产孢量达244.7亿/克。
在白僵菌用20M~2固体发酵罐进行固态发酵的过程中，通过多次测定培
养基含水率发现整个发酵过程损失10％左右的水分。对全麸皮培养基来说，
最佳的起始含水率为60—65％。最佳通气条件为：前12小时不通气，12—
48小时通气量为1：2，48—144小时的通气量为1：1。而温度只需在12—48
±8小时内用风机或罐内管道通冷水进行控制，其它时间不需要降温。
用培养基涂片萌发法测定出罐、干燥结束和加工粉碎后三个阶段的活
孢率，发现众邦公司现有的干燥和粉碎工艺对白僵菌孢子的损伤太大，生产
的终产品基本不合格。用振动流化床（ZLG系列，常州市范群干燥设备有
限公司）进行常温干燥，能最大限度地减轻对白僵菌抱子的损伤，活抱率维
持在 95％以上，是千燥生物制剂比较合适的设备。
白僵菌无纺布菌条是真菌杀虫剂的新剂型，它具有许多方面的优点，
我们对无纺布菌条制作技术进行了深入研究，通过测定不同培养条件下无纺一
布菌条产抱量的多少，确定制作无纺布菌条的最佳条件为：鼓皮培养基（6
％鼓皮煮汁＋l％蔗糖 ＋ 2％豆饼粉＋0．05％KZHPO4＋l％琼脂），接种量
1：3．5，接种温度T＜38oC，培养温度T二25C，湿度90—95％，培养时间
为 6—7天，最终产抱量可达 1．2 ｛UcmZ。
通过多次生物测定筛选了一株对松褐天牛成虫毒力较高的菌株Bb202
和两个对光肩星天牛成虫毒力较高的菌株，即球袍白僵菌MT和卵抱白僵菌
ND用于野外防治试验。同时发现金龟子绿僵菌Ma83对两种天牛均表现出
稳定的高毒力。
在生物测定的基础上，用Bb202菌株采用无纺布菌条和喷高抱粉两种
不同的放菌方式对松褐天牛进行了初步的防治试验。结果是：防治后松褐天
牛的虫株率下降了 31．l％，解剖木中高抱粉处理区的幼虫死亡率为 74．7％，
无纺布菌条处理区为 41二％，而对照区只有 32．3％，说明用白僵菌防治松褐
天牛有一定的效果。
用MT和ND两个菌株，每个菌株采用无纺布菌条和喷雾两种不同的放
菌方式共五个处理，即对照、MT菌条、MT喷雾、ND菌条和ND喷雾对
光肩星天牛成虫进行挂笼放菌试验。试验中，每个处理挂30个笼子，每个
笼子放 5头（2雄＋3雌）光肩星天牛成虫，野外观察员＼10天。通过不同处
理光肩星天牛成虫的产卵刻槽数、死亡率、校正死亡率和感染率的分析比较，
结果为：①对照处理的产卵刻槽数为16石个／株，明显高于处理组的产卵刻
槽数；ND菌株处理的产卵刻敞为 8．9个／＄，比 MT菌株的产卵刻槽数 （l．9
个／株）少；但同一菌株不同处理之间的产卵刻槽数差异不显著；②ND菌
株的死亡率和校正死亡率均高于MT菌株；同一菌株的不同处理之间，无纺
布菌条处理的死亡率和校正死亡率均较喷雾处理高；＠用 ND菌株处理的感
染率高于MT菌株，而同一菌株的不同处理之间，感染率差异不明显。因此，
在现有四种处理中，ND菌条处理的效果最好。
对试验树胸径大小与光肩星天牛产卵刻槽进行相关性分析，并用聚丙
烯酞胺凝胶平板电泳法测定由虫尸所得的不同分离株的球抱白僵菌和卵抱白
2
僵
In order to produce vast amounts of high quality biopesticides, fermentation of Beauveria bassiana and a new kind of biorational pest control formulation, nonwoven fabric band impregnated with B. Bassiana spores, were studied. At the same time, field experiments against Monochamus alternatus and Anoplophora glabripemis were carried out in order to decide a proper way of controlling M. alternatus and A. glabripennis.
Wheat bran medium, containing 6% wheat bran filtrate, 1% sugar, 2% soybean powder and 0.05% K,HP04, was found to be the best medium for B. Bassiana in submerged fermentation. The most suitable initial pH was 6.0-7.0, which is the natural pH of wheat bran medium.
A technology was developed for mycelium production of B. bassiana in submerged culture. The fungus grew well at 20-25 癈 but very poorly at 30 "C. The biomass fits well to a logistic growth model at a given temperature. Based on observation and modeling, the optimal culture temperature, and harvesting and inoculating time were 25 癈 and 48h respectively.
As to solid-state fermentation of B. Bassiana in a 20m3 solid fermenter, a solid medium containing 90% wheat bran, 5% maize flour and 5% soy bean powder was determined to be the best medium with excellent physical properties and sufficient nutrition through an orthogonal test. The spore count of the primary product was 244.7 X108 spores per gram. About 10% moisture was lost during
fermentation and the best moisture proved to be 60-65% for wheat bran medium. The best aeration ratio was: 0 in 12h. 1:1 in 12-48h and 1:2 for fermentation after 48h. To emit heat released by substantial growth of mycelium, it is necessary to control the temperature with air pumping or water cooling from 12h to 48 ?h.
The present desiccating and grinding systems in Zhongbang Co. were tested and proved to be unsuitable for B. bassiana because most of the condia were dead after the process. A new desiccating system, which can dry the primary product at normal temperature, is necessary to keep the condia viable.
Nonwoven fabric bands impregnated with B. Bassiana spores, a novel fungal insecticide formulation, were developed by a Japanese company. Nitto Denko. for longicorn beetle control. The improvement of the medium for making nonwoven fabric bands with B. bassiana spores was made with a cheaper wheat bran medium at an optimal inoculum ratio of 1:3.5. The suitable inoculating temperature was less than 38癈. and the suitable incubation temperature was 25癈 with an optimal humidity of 90-95% for 6-7 days.
Bioassays were carried out against the pine sawyer. Monochamus alternatus and the Asian longhorned beetle. Anoplophora glabripennis. The results were: Bb202 proved to be the most virulent against \t. alternatus among the strains of Beauveria spp.: the MT strain of B. bassiana. and ND strain of B. brongniartii proved to be two of the most virulent strains against A. glabripennis. Ma83. however, was the most virulent strain to both beetle species among the strains tested of entomogenous fungi.
In the field test against M. alternatus. Bb202 was used by two different methods, band impregnated with Bb202 and Bb202 spray. The results were: the percentage infected trees in the treated plot declined by 31.1 % as compared to the control plot; the mortality of the M. alternatus larvae was 74.7% in the sprayed plot, 41.2% in the banded plot and 32.3% in the control plot, suggesting that B. bassiana suppressed M. alternatus population to a certain degree.
In cage test I against A. glabripennis, two strains, MT and ND, and two application techniques, non-woven fabric fungal bands and spraying, were tested.
There were four treatments, ND bands, ND spray, MT bands, MT spray and a control, with 30 cages for each treatment. A total of 150 cages were used. Five beetles, two males and three females, were put into each cage, 750 beetles in total, and were observed for 10 days in the field. The results were as follows: as to the oviposition sites per tree, an average of 16.6 oviposition sites were recorded
质高效的白僵菌产品，本文对白僵菌的工业化生产和白僵菌的新剂型——
无纺布菌条的制作技术进行了系统的研究。同时，通过不同白僵菌菌株和不
同放菌方式对松褐天牛（Monochamus alternatus Hope）和光肩星天牛
（Aloplophora glabripennis Motschulsky）进行了一系列试验。
通过验证前人的研究结果，认为麸皮培养基（6％鼓皮煮汁+1％蔗糖
+2％豆饼粉+0.05％K2HPO4）是经济而又适合工业化生产的球孢白僵菌液
体种子培养基。用不同pH的培养基培养白僵菌，结果是：pH 6.0-7.0最适
合球孢白僵菌的生长，在相同培养时间内菌丝产量最高，过酸或过碱环境都
不利于球孢白僵菌的生长。
在白僵菌液体发酵过程中，处于迅速生长期的菌丝活力最强，是接种
的最佳时期。分别用20℃、25℃和30℃三个不同温度的液体培养基培养球
孢白僵菌，每12小时取样测定生物产量并作生长曲线。结果为25℃培养48
小时的球孢白僵菌生长速率最高、生物量较大，是接种的最佳时期。
以产孢量为指标，通过正交试验筛选白僵菌固态发酵的培养基，结果
是：90％麦麸+5％玉米粉+5％黄豆粉的物理性状较好，营养充分，能有效
地促进白僵菌的生长和产孢，产孢量达244.7亿/克。
在白僵菌用20M~2固体发酵罐进行固态发酵的过程中，通过多次测定培
养基含水率发现整个发酵过程损失10％左右的水分。对全麸皮培养基来说，
最佳的起始含水率为60—65％。最佳通气条件为：前12小时不通气，12—
48小时通气量为1：2，48—144小时的通气量为1：1。而温度只需在12—48
±8小时内用风机或罐内管道通冷水进行控制，其它时间不需要降温。
用培养基涂片萌发法测定出罐、干燥结束和加工粉碎后三个阶段的活
孢率，发现众邦公司现有的干燥和粉碎工艺对白僵菌孢子的损伤太大，生产
的终产品基本不合格。用振动流化床（ZLG系列，常州市范群干燥设备有
限公司）进行常温干燥，能最大限度地减轻对白僵菌抱子的损伤，活抱率维
持在 95％以上，是千燥生物制剂比较合适的设备。
白僵菌无纺布菌条是真菌杀虫剂的新剂型，它具有许多方面的优点，
我们对无纺布菌条制作技术进行了深入研究，通过测定不同培养条件下无纺一
布菌条产抱量的多少，确定制作无纺布菌条的最佳条件为：鼓皮培养基（6
％鼓皮煮汁＋l％蔗糖 ＋ 2％豆饼粉＋0．05％KZHPO4＋l％琼脂），接种量
1：3．5，接种温度T＜38oC，培养温度T二25C，湿度90—95％，培养时间
为 6—7天，最终产抱量可达 1．2 ｛UcmZ。
通过多次生物测定筛选了一株对松褐天牛成虫毒力较高的菌株Bb202
和两个对光肩星天牛成虫毒力较高的菌株，即球袍白僵菌MT和卵抱白僵菌
ND用于野外防治试验。同时发现金龟子绿僵菌Ma83对两种天牛均表现出
稳定的高毒力。
在生物测定的基础上，用Bb202菌株采用无纺布菌条和喷高抱粉两种
不同的放菌方式对松褐天牛进行了初步的防治试验。结果是：防治后松褐天
牛的虫株率下降了 31．l％，解剖木中高抱粉处理区的幼虫死亡率为 74．7％，
无纺布菌条处理区为 41二％，而对照区只有 32．3％，说明用白僵菌防治松褐
天牛有一定的效果。
用MT和ND两个菌株，每个菌株采用无纺布菌条和喷雾两种不同的放
菌方式共五个处理，即对照、MT菌条、MT喷雾、ND菌条和ND喷雾对
光肩星天牛成虫进行挂笼放菌试验。试验中，每个处理挂30个笼子，每个
笼子放 5头（2雄＋3雌）光肩星天牛成虫，野外观察员＼10天。通过不同处
理光肩星天牛成虫的产卵刻槽数、死亡率、校正死亡率和感染率的分析比较，
结果为：①对照处理的产卵刻槽数为16石个／株，明显高于处理组的产卵刻
槽数；ND菌株处理的产卵刻敞为 8．9个／＄，比 MT菌株的产卵刻槽数 （l．9
个／株）少；但同一菌株不同处理之间的产卵刻槽数差异不显著；②ND菌
株的死亡率和校正死亡率均高于MT菌株；同一菌株的不同处理之间，无纺
布菌条处理的死亡率和校正死亡率均较喷雾处理高；＠用 ND菌株处理的感
染率高于MT菌株，而同一菌株的不同处理之间，感染率差异不明显。因此，
在现有四种处理中，ND菌条处理的效果最好。
对试验树胸径大小与光肩星天牛产卵刻槽进行相关性分析，并用聚丙
烯酞胺凝胶平板电泳法测定由虫尸所得的不同分离株的球抱白僵菌和卵抱白
2
僵
In order to produce vast amounts of high quality biopesticides, fermentation of Beauveria bassiana and a new kind of biorational pest control formulation, nonwoven fabric band impregnated with B. Bassiana spores, were studied. At the same time, field experiments against Monochamus alternatus and Anoplophora glabripemis were carried out in order to decide a proper way of controlling M. alternatus and A. glabripennis.
Wheat bran medium, containing 6% wheat bran filtrate, 1% sugar, 2% soybean powder and 0.05% K,HP04, was found to be the best medium for B. Bassiana in submerged fermentation. The most suitable initial pH was 6.0-7.0, which is the natural pH of wheat bran medium.
A technology was developed for mycelium production of B. bassiana in submerged culture. The fungus grew well at 20-25 癈 but very poorly at 30 "C. The biomass fits well to a logistic growth model at a given temperature. Based on observation and modeling, the optimal culture temperature, and harvesting and inoculating time were 25 癈 and 48h respectively.
As to solid-state fermentation of B. Bassiana in a 20m3 solid fermenter, a solid medium containing 90% wheat bran, 5% maize flour and 5% soy bean powder was determined to be the best medium with excellent physical properties and sufficient nutrition through an orthogonal test. The spore count of the primary product was 244.7 X108 spores per gram. About 10% moisture was lost during
fermentation and the best moisture proved to be 60-65% for wheat bran medium. The best aeration ratio was: 0 in 12h. 1:1 in 12-48h and 1:2 for fermentation after 48h. To emit heat released by substantial growth of mycelium, it is necessary to control the temperature with air pumping or water cooling from 12h to 48 ?h.
The present desiccating and grinding systems in Zhongbang Co. were tested and proved to be unsuitable for B. bassiana because most of the condia were dead after the process. A new desiccating system, which can dry the primary product at normal temperature, is necessary to keep the condia viable.
Nonwoven fabric bands impregnated with B. Bassiana spores, a novel fungal insecticide formulation, were developed by a Japanese company. Nitto Denko. for longicorn beetle control. The improvement of the medium for making nonwoven fabric bands with B. bassiana spores was made with a cheaper wheat bran medium at an optimal inoculum ratio of 1:3.5. The suitable inoculating temperature was less than 38癈. and the suitable incubation temperature was 25癈 with an optimal humidity of 90-95% for 6-7 days.
Bioassays were carried out against the pine sawyer. Monochamus alternatus and the Asian longhorned beetle. Anoplophora glabripennis. The results were: Bb202 proved to be the most virulent against \t. alternatus among the strains of Beauveria spp.: the MT strain of B. bassiana. and ND strain of B. brongniartii proved to be two of the most virulent strains against A. glabripennis. Ma83. however, was the most virulent strain to both beetle species among the strains tested of entomogenous fungi.
In the field test against M. alternatus. Bb202 was used by two different methods, band impregnated with Bb202 and Bb202 spray. The results were: the percentage infected trees in the treated plot declined by 31.1 % as compared to the control plot; the mortality of the M. alternatus larvae was 74.7% in the sprayed plot, 41.2% in the banded plot and 32.3% in the control plot, suggesting that B. bassiana suppressed M. alternatus population to a certain degree.
In cage test I against A. glabripennis, two strains, MT and ND, and two application techniques, non-woven fabric fungal bands and spraying, were tested.
There were four treatments, ND bands, ND spray, MT bands, MT spray and a control, with 30 cages for each treatment. A total of 150 cages were used. Five beetles, two males and three females, were put into each cage, 750 beetles in total, and were observed for 10 days in the field. The results were as follows: as to the oviposition sites per tree, an average of 16.6 oviposition sites were recorded
引文
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