青藏高原油菜蜂花粉脂肪酸的提取及分析
|
摘要
本课题以青藏高原油菜蜂花粉为原料，采用生物酶法破壁，然后较为系统地研究了破壁和未破壁油菜蜂花粉油的提取、理化性质的测定和脂肪酸分析，为开发和利用青藏高原丰富的油菜蜂花粉资源提供了理论依据和优化的工艺方法。
研究结果如下：
1.超临界CO_2萃取油菜蜂花粉油的工艺切实可行，其最佳工艺：萃取压力为20MPa，萃取温度为35℃，CO_2流速为15L/h，一级分离的压力为8MPa，一级分离的温度为55℃，花粉粒度为20～40目，萃取时间2～3h。最佳条件下，破壁油菜蜂花粉油的萃取率为9.69%，未破壁油菜蜂花粉油的萃取率为9.25%。
2.石油醚冷浸提取油菜蜂花粉油的最佳条件是浸提时间为36h，固液比为1：15g/mL，花粉粒度为40～60目。在最佳条件下，破壁油菜蜂花粉油得率为8.73%，未破壁花粉油得率为7.81%。
3.经测定并比较超临界CO_2萃取法和石油醚冷浸提取法萃取的破壁和未破壁油菜蜂花粉油的理化性质，超临界CO_2萃取法是较为理想的提取方法。超临界CO_2萃取法制得的破壁油菜粉花粉油水分及挥发物含量为0.038%、折光指数（n~(25)）为1.4933、酸价为10.49mgKOH/g、皂化价为148.40、过氧化价为9.6meq/kg、碘价为149.57、由燃烧热测定方法测得的热值为41.75KJ/g；超临界CO_2萃取法制得的未破壁油菜粉花粉油水分及挥发物含量为0.039%、折光指数（n~(25)）为1.4916、酸价为13.31mgKOH/g、皂化价为101.61、过氧化价为9.4meq/kg、碘价为147.23、由燃烧热测定方法测得的热值为42.37KJ/g。
4.确定了最佳色谱条件：柱温：采用程序升温条件为110℃（3min）10℃/min240℃（20min）；检测器的温度250℃；分流进样模式；气化室温度250℃；H2 :Air流量比50：500mL/min。简易碱式甲酯化方法的较佳的反应条件为：正己烷-乙醚（1：2）作为萃取剂，0.5mol/L的甲醇钠甲醇溶液作为衍生催化剂，反应时间为10min。在最佳的色谱分析条件和甲酯化条件建立后，对用不同方法提取的破壁和未破壁油菜蜂花粉油中的脂肪酸进行了定性和定量分析，并且对其中的脂肪酸组成进行了比较。
The study using Qinghai-Tibet Plateau rape bee pollen as raw material and the biological enzymatic wall-broken method, focused on extraction of the wall-broken and wall-unbroken Rape bee pollen oil, analysis of its physical-chemical properties and fatty acid composition. It supplied a theoretic basis and optimum processing technics for empoldering and utilizing the rich resources of rape bee pollen of the Qinghai-Tibet Plateau.
The results of the study were as followings.
1. The process of supercritical carbon dioxide extraction of rape bee pollen oil was practicable, its optimum condition of extraction were as follows: extraction pressure and separation I pressure were 20MPa and 8MPa respectively. Extraction temperature and separation I temperature was 35℃and 55℃respectively. CO_2 flow rate was 15L/h. The grain size of pollen was 20～40 mesh.Extraction time was 2～3h. The extraction rate of wall-broken and wall-unbroken rape bee pollen oil was 9.69% and 9.25% in the optimum condition, respectively.
2. The optimum cold soak extraction conditions of fatty Acids in rape bee pollen of the Qinghai-Tibet Plateau with petroleum ether as solvent: extraction time was 36 hours. The ratio of the pollen weight and solvent volume was 1:15(g/mL). The grain size of pollen was greater than 40 mesh. The yield ratios of wall-broken and wall-unbroken rape bee pollen oil were 8.73% and 7.81% in the optimum condition, respectively.
3. It was testified by determining the physical-chemical properties of wall-broken and wall-unbroken rape bee pollen oil and then comparing them that supercritical CO_2 extraction was better than petroleum ether cold soak extraction. The content of moisture and volatile, refractive index (n~(25)), acid value, saponification value, peroxide value, iodine value, the burning heat value of wall-broken rape bee pollen oil extracted by Supercritical CO_2 extraction were 0.038%, 1.4933, 10.49mgKOH/g, 148.40, 9.6meq/kg, 149.57, 41.75KJ/g, respectively. The ones of wall-unbroken rape bee pollen oil extracted by Supercritical CO_2 extraction were 0.039%, 1.4916, 13.31mg KOH/g, 101.61, 9.4 meq/kg, 147.23, 42.37KJ/g, respectively.
4. The optimum chromatographic conditions were found: oven tempera -ture: temperature-programmed conditions was 110℃(3min)10℃/ min240℃(20min); detector temperature: 250℃; injector temperature: 250℃; split injection; flow ratio of H2:Air: 50:500mL/min. The better reaction conditions of the simplified method of alkaline methylesterefication were as follows: n-hexane-ether (1:2) as extractant, 0.5mol/L sodium methoxide in methanol solution as derived catalyst, reaction time for 10min. The wall-broken and wall-unbroken rape bee pollen oils which were extracted by different methods were analyzed qualitatively and quantitatively and the fatty acids compositions were compared in the optimum chromatographic and methyl -esterefication conditions.
研究结果如下：
1.超临界CO_2萃取油菜蜂花粉油的工艺切实可行，其最佳工艺：萃取压力为20MPa，萃取温度为35℃，CO_2流速为15L/h，一级分离的压力为8MPa，一级分离的温度为55℃，花粉粒度为20～40目，萃取时间2～3h。最佳条件下，破壁油菜蜂花粉油的萃取率为9.69%，未破壁油菜蜂花粉油的萃取率为9.25%。
2.石油醚冷浸提取油菜蜂花粉油的最佳条件是浸提时间为36h，固液比为1：15g/mL，花粉粒度为40～60目。在最佳条件下，破壁油菜蜂花粉油得率为8.73%，未破壁花粉油得率为7.81%。
3.经测定并比较超临界CO_2萃取法和石油醚冷浸提取法萃取的破壁和未破壁油菜蜂花粉油的理化性质，超临界CO_2萃取法是较为理想的提取方法。超临界CO_2萃取法制得的破壁油菜粉花粉油水分及挥发物含量为0.038%、折光指数（n~(25)）为1.4933、酸价为10.49mgKOH/g、皂化价为148.40、过氧化价为9.6meq/kg、碘价为149.57、由燃烧热测定方法测得的热值为41.75KJ/g；超临界CO_2萃取法制得的未破壁油菜粉花粉油水分及挥发物含量为0.039%、折光指数（n~(25)）为1.4916、酸价为13.31mgKOH/g、皂化价为101.61、过氧化价为9.4meq/kg、碘价为147.23、由燃烧热测定方法测得的热值为42.37KJ/g。
4.确定了最佳色谱条件：柱温：采用程序升温条件为110℃（3min）10℃/min240℃（20min）；检测器的温度250℃；分流进样模式；气化室温度250℃；H2 :Air流量比50：500mL/min。简易碱式甲酯化方法的较佳的反应条件为：正己烷-乙醚（1：2）作为萃取剂，0.5mol/L的甲醇钠甲醇溶液作为衍生催化剂，反应时间为10min。在最佳的色谱分析条件和甲酯化条件建立后，对用不同方法提取的破壁和未破壁油菜蜂花粉油中的脂肪酸进行了定性和定量分析，并且对其中的脂肪酸组成进行了比较。
The study using Qinghai-Tibet Plateau rape bee pollen as raw material and the biological enzymatic wall-broken method, focused on extraction of the wall-broken and wall-unbroken Rape bee pollen oil, analysis of its physical-chemical properties and fatty acid composition. It supplied a theoretic basis and optimum processing technics for empoldering and utilizing the rich resources of rape bee pollen of the Qinghai-Tibet Plateau.
The results of the study were as followings.
1. The process of supercritical carbon dioxide extraction of rape bee pollen oil was practicable, its optimum condition of extraction were as follows: extraction pressure and separation I pressure were 20MPa and 8MPa respectively. Extraction temperature and separation I temperature was 35℃and 55℃respectively. CO_2 flow rate was 15L/h. The grain size of pollen was 20～40 mesh.Extraction time was 2～3h. The extraction rate of wall-broken and wall-unbroken rape bee pollen oil was 9.69% and 9.25% in the optimum condition, respectively.
2. The optimum cold soak extraction conditions of fatty Acids in rape bee pollen of the Qinghai-Tibet Plateau with petroleum ether as solvent: extraction time was 36 hours. The ratio of the pollen weight and solvent volume was 1:15(g/mL). The grain size of pollen was greater than 40 mesh. The yield ratios of wall-broken and wall-unbroken rape bee pollen oil were 8.73% and 7.81% in the optimum condition, respectively.
3. It was testified by determining the physical-chemical properties of wall-broken and wall-unbroken rape bee pollen oil and then comparing them that supercritical CO_2 extraction was better than petroleum ether cold soak extraction. The content of moisture and volatile, refractive index (n~(25)), acid value, saponification value, peroxide value, iodine value, the burning heat value of wall-broken rape bee pollen oil extracted by Supercritical CO_2 extraction were 0.038%, 1.4933, 10.49mgKOH/g, 148.40, 9.6meq/kg, 149.57, 41.75KJ/g, respectively. The ones of wall-unbroken rape bee pollen oil extracted by Supercritical CO_2 extraction were 0.039%, 1.4916, 13.31mg KOH/g, 101.61, 9.4 meq/kg, 147.23, 42.37KJ/g, respectively.
4. The optimum chromatographic conditions were found: oven tempera -ture: temperature-programmed conditions was 110℃(3min)10℃/ min240℃(20min); detector temperature: 250℃; injector temperature: 250℃; split injection; flow ratio of H2:Air: 50:500mL/min. The better reaction conditions of the simplified method of alkaline methylesterefication were as follows: n-hexane-ether (1:2) as extractant, 0.5mol/L sodium methoxide in methanol solution as derived catalyst, reaction time for 10min. The wall-broken and wall-unbroken rape bee pollen oils which were extracted by different methods were analyzed qualitatively and quantitatively and the fatty acids compositions were compared in the optimum chromatographic and methyl -esterefication conditions.
引文
[1]于学玲,朱荣誉,史劲松.蜂花粉的开发及其破壁技术.中国野生植物资源,1998, 17(4): 33.
[2]丁蕾,支崇远.花粉的医疗保健作用研究近况.中国乡村医药杂志, 2006,13( 12): 47-48.
[3]李兴安,蒋滢,王尉平.花粉抗脑衰老大鼠基因组DNA RAPD分子标记的实验研究.中国养蜂, 2003, 54(2): 8-9.
[4]李嘉蓉.天然药物化学实验.北京:中国医药科技出版社, 1998.4-7.
[5]张继杰.天然药物化学实验.北京:人民卫生出版社, 1997.7-9.
[6]张代佳,刘传斌,修志龙,等.微波技术在植物胞内有效成分提取中的应用.中草药, 2000, 31(9): 5-6.
[7] patrick M. Membrane Separation Process. Amsterdam Elsevier Scientific,Publishing Compang, 1976, 107.
[8]王洪武,李次芬,余颂涛,等.花粉对食饵性高血脂家兔凝血和纤溶功能的影响.军医进修学院学报, 1992, 13( 1): 60.
[9] PRATT D. E. Water soluble antioxidant activity soybeans. Food Science,1972, 37: 322-323.
[10] PRFAT D. E. Lipid antioxidants in plant tissue. Food Science, 1965, 30:737-742.
[11] RAFAT H.S . Hydroxy radaical scavenging activity of flavonoids. Phytouchmistry, 1987, 26: 2489-2491.
[12]田清涞,张震,陈清芬,等.蜂花粉降血脂、抗氧化和防衰老作用的研究.老年医学杂志, 1991, 22(4): 357-359.
[13]刘建涛,赵利,苏伟,等.蜂花粉生物活性物质的研究进展.食品科学,2006, 27(12): 909-911.
[14]许具晔.蜂花粉对人体的保健作用.农产品加工, 2004, (10): 24-25.
[15] Zhang x, Habib F K, Ross M. Isolation and characterization of a cyclic hydroxamic acid from a pollen extract, which inhibits cancerous cell growth in vitro. Med Chem, 1995, 38: 735.
[16]王开发.花粉营养成分与花粉资源利用.上海:复旦大学出版社,1993.59-67.
[17]刘小力,刘晓毅,石维妮.四种市售蜂花粉产品氨基酸组成测定与营养功能分析.中国食物与营养, 2008,( 7): 53-55.
[18]王开发,耿越.花粉中碳水化合物的研究.蜜蜂杂志, 1998,( 4): 3-5.
[19]涂文利,耿越,张静静,等.八种花粉中脂肪酸组分分析.营养学报,2005,27(4): 351-352.
[20]宋心仿,邵有全.蜜蜂产品的应用与检测加工技术.北京:中国农业出版社, 2000.39.
[21] M. G. Campos.Age-Induced Diminution of Radical Scaenging Capacity in Bee Pollen and the Contribution of Constituent Flavonoids. Agricultural and Food Chemistry, 2003, 51: 742-745.
[22] J. Serra Bonvehi. Evaluation of Ployheolic and Flavonaid Compounds in Honeybee-Collected Pollen in Spain. Agricultural and Food Chemistry, 2001, 49:1848-1853.
[23]王开发,耿越.花粉中黄酮类研究.养蜂科技, 1997, (3): 8-12.
[24]毛礼米,王开发.我国花粉资源应用及其研究进展.自然杂志, 1997, 20( 5): 271-275.
[25]王开发,张玉兰,张盛隆.花粉中核酸的研究.蜜蜂杂志,1997,( 7):11-12.
[26]李雷,高庆菊,王贻节.“寿尔康”口服液的抗衰老作用研究.蜜蜂杂志,2002,( 6): 6-8.
[27]赵立新,喻陆.松花粉抗衰老作用的实验研究.现代医学, 2004, 32(2):74-76.
[28] Semesei, Rao G., Rchardson. A expression of super-oxide dismutase and catalaes in rat brain as a function of age.Mech Aging Dev., 1991, 58: 13-19.
[29]石玉平,卢挺,王永宁.油菜蜂花粉中黄酮类物质清除羟基自由基的研究.食品科学, 2004, 25( 11): 300-302.
[30] Scarfiotti C. Free radicals,atherosclerosis,aging,and Related dysmetabolic pathologies:pathological clinical aspects. Eur J Cancer Prev.1997, 6: 31-36.
[31]王开发,王隆华,支祟远,等.玉米花粉黄酮类物质对清除自由基的作用.中国养蜂, 2001, 52(6): 4-6.
[32]曹炜,尉亚辉,郭斌,等.用荧光探针法研究茶叶花粉黄酮对氧自由基致鼠红细胞膜氧化损伤的保护作用.光子学报, 2002, 31( 4): 394-397.
[33]许子俊,余海茹,郭玉兰,等.油菜蜂花粉对小鼠免疫功能的影响.西北药学杂志, 1993, 8(1): 24-26.
[34]钱伯初,臧星星,刘雪莉,等.蜂花粉对营养不良小鼠免疫功能低下的影响.养蜂科技, 1991,( 2): 23-26.
[35]龚维桂,李军,横田正实.蜂花粉对顺铂副作用的影响.浙江省医学科学院学报, 1991,( 7): 5-7.
[36]伏纬华,陈压,横田正实.蜂花粉中抗细菌毒和免疫增强成分的分离及生物活性测定.现代应用药学, 1993, l0(l): 1-3.
[37]陆明,王开发.花粉、花粉多糖、灵芝孢子抑制肿瘤作用的对比研究.蜜蜂杂志, 2002, (11): 5-6.
[38]杨新跃,刘志勇,汪礼国,等.蜂花粉多糖液抑制肿瘤作用的实验研究.江西农业大学学报, 2006, 28(2): 293-295.
[39]万开科,宋艳玲,季爱雪,等.油菜花粉十二肽和类似物的合成及性质的研究.高等学校化学学报, 1995, 16( 4): 543-548.
[40]许家喜,金声.罂粟花粉十三肽类似物的合成及其结构与抗肿瘤活性关系研究.高等学校化学学报, 1999, 20(5): 722-726.
[41]张志友,房林华,许欣欣,等.枣花粉提取物抗肿瘤效应及其机理的探讨.中国公共卫生学报, 1997, 16( 2): 81.
[42]余颂涛,王喜群,陈伟,等.玉米花粉对高血脂症及动脉粥样硬化的影响.中草药, 1990, 21( 9): 20-23.
[43]王洪武,余颂涛,王士雯,等.玉米花粉对食饵性高血脂家兔凝血和纤溶功能的影响.中草药, 1990, 21( 10): 21-24.
[44]王开发,王隆华,支崇远等.玉米花粉黄酮类物质对SD大鼠降血脂作用的研究.放射免疫学杂志, 2002, 15(6): 368-370.
[45]王明锁,陈政,黄美英,等.蜂花粉对受照大鼠抗辐射效应的研究.辐射研究与辐射工艺学报, 1998, l6(2): 110-112.
[46]曹幼甫,蒋滢,毛棣华,等.蜂花粉对γ射线受照大鼠骨髓造血组织影响的病理学研究.中华放射医学与防护杂志, 1998, 18( 4): 269-270.
[47]王茂山,范华芬.蜂花粉对血液和造血系统的影响.中草药,1993,24( 11):588-590, 601.
[48]周玲仙,绍萍,陈彦红.荞麦花粉抗贫血作用的实验研究.昆明医学院学报, 1994, 15( 3): 11-13.
[49]耿越,王开发,张玉兰,等.40种常见花粉相对营养价值评价.天然产物研究与开发, 2000, 12(6): 40-45.
[50]胡福良,玄红专,朱威,等.花粉、蜂胶对糖尿病SD大鼠的影响.中国养蜂, 2003, 54( 4): 9-11.
[51]蒋滢,孔庆旺,舒仲,等.花粉抗糖尿病实验动物研究.中国养蜂, 1996,( 4): 8.
[52]宋心仿,杨万晶,李翠霞.花粉口服液治疗糖尿病患者.蜜蜂杂志, 1991,( 6): 6-7.
[53]钱伯初,刘雪莉,藏星星,等.花粉醇的抗前列腺增生作用.中华泌尿外科杂志, 1992, 13( 5): 365-368.
[54]王志平,陈一戎,刘国栋,等.花粉提取物对前列腺增生细胞作用的研究.中华泌尿外科杂志, 1995, 16( 12): 732-733.
[55]刘雪莉,朱丽秋,袁玉英,等.蜂花粉治疗老龄犬前列腺增生的形态学观察.中草药, 1990, 21( 4): 20-22.
[56]许立薇,侯晞.油菜花粉对小鼠体重增长和学习记忆的影响.基层中药杂志, 2000, 14( 4): 11.
[57]章华础,王开发,肖祥熊,等.花粉治疗功能性便秘的临床观察及机理探讨.放射免疫学杂志, 1995, 8( 2): 71-74.
[58]庄月明,钱伯初.蜂花粉的护肝作用.浙江医学, 1989, 11( 1): 55-56.
[59]胡福良,李英华.蜂花粉在畜牧业中的利用研究进展.甘肃畜牧兽医,2001, 31(3): 31-33.
[60]罗曼,蒋立科.蛋清破花粉壁的研究.天然产物研究与开发,1999,11(3):58-62.
[61]李道平,梁昭燕,张军平,等.超声波在花粉破壁技术中的应用.陕西师大学报, 1992, 20( 1): 87.
[62]苗前,杜红霞,王文正.玉米花粉几种机械破壁方法的研究.食品科学,1997, 18( 11): 43-45.
[63]周顺华,陶乐仁,徐斐,等.用液氮淬冷法进行花粉破壁的实验研究.上海理工大学学报, 2002, 24( 3): 233-237.
[64]吕耀奎.花粉高压气流法的破壁技术.食品科学, 1989,( 8): 17-20.
[65]袁耀东,陈黎红,吕丽萍.蜂花粉发酵破壁技术及花粉营养蜜的研制.中国养蜂, 2000, 51( 2): 8-9.
[66]徐斐,汤坚.发酵花粉饮料的初步研制.食品科技, 1999,( 6): 41-43.
[67]周忠泽,李玉成.洋槐花粉的破壁技术及口服液的研制.安徽大学学报,2000, 24( 1): 94-95.
[68]房柱.花粉.北京:农业出版社, 1985.14-23.
[69]唐维,张星海.花粉破壁方法的研究进展.食品与发酵工业,2003,29( 2):86-92.
[70]毕艳兰.油脂化学.北京:化学工业出版社, 2005.5-6.
[71]钟耀光.功能食品.北京:化学工业出版社, 2004.121-128.
[72]鲍建民.多不饱和脂肪酸的生理功能及安全性.中国食物与营养, 2006,(1): 45-46.
[73]吴时敏,裘爱泳,吴谋成.胎儿、婴幼儿的功能性多不饱和脂肪酸需要概况.中国乳品工业, 2001, 29( 3): 21-23.
[74]董杰明,吴瑞华,袁昌鲁,等.γ-亚麻酸的保健作用.卫生研究.2003,32 (3): 299-301.
[75] Kinchington D. , Randall S. , Winter M. , et al.Lithium gamma-lino -lenatc-induced cytotoxicity against cells chronically infected with HIV-1. FEBS Left, 1993, 330 (2): 219-221.
[76] Bakshi A., Mukherjeed, Bakshi M., et al. Gammalinolenic acid therapy of human gliomas. Nutr, 2003, 19(4): 305-309.
[77]邢旭光,郭国庆,孙晗笑,等.γ-亚麻酸的防病抗病作用.中国公共卫生, 2002, 18 ( 12): 1513-1515.
[78]卢艳花.中药有效成分提取分离技术.北京:化学工业出版社, 2005.2.
[79]吴时敏.功能性油脂.北京:中国轻工业出版社, 2001.16.
[80]倪培德.油脂加工技术.北京:化学工业出版社, 2002.187.
[81]陈开勋,严安,葛红光.超临界C02萃取火棘油.中国油脂,1999, 24 (4):43-44.
[82]马海乐,陈钧.超临界CO2萃取小麦胚芽油的试验研究.农业工程学报,1996, 12( 1): 182-186.
[83]孙爱东,尹卓容,蔡同一,等. CO2超临界萃取技术提取月见草油的工艺研究.中国油脂, 1998, 23( 5): 40-42.
[84]张慧敏,孙容芳,于同泉,等.超临界CO2流体萃取杏仁油的研究.粮油食品科技, 2001, 9( 1): 29-30, 41.
[85]丁怡,唐星.柱前衍生HPLC法测定薏苡仁油中的脂肪酸含量.药物分析杂志, 2004, 24( 3): 249-252.
[86]黄玉华,邓泽元.芝麻中脂肪酸成分的GC分析.现在食品科技, 2006,22( 2): 225-226.
[87]于燕波,臧鹏,付元华,等.近红外光谱法快速测定植物油中脂肪酸含量.光谱学与光谱分析, 2008, 28( 7): 1554-1558.
[88]李继平,王艳丽,张广宁,等.槐花脂肪酸成分的GC-MS分析.辽宁师范大学学报, 2008, 31( 1): 70-71.
[89]孙庆杰,丁霄霖.超临界流体萃取番茄籽油的研究.中国油脂,1998,23(3):12-14.
[90]葛发欢,史庆龙,沈永康,等.菜籽油脚中天然VE和脂肪酸的超临界CO2萃取分离及其GC-MS分析.中药材, 1997, 20( 4): 188-190.
[91]马海乐,陈钧,吴守一,等.超临界CO2萃取小麦胚芽油的实验研究.农业工程学报, 1996, 12( 1): 182-186.
[92]董海洲,万本屹,刘传富,等.葡萄籽油超临界二氧化碳萃取最佳工艺参数及其理化特性的研究.中国粮油学报, 2004, 19( 5): 55-57.
[93]潘家国,段怡,吴惠勤,等.油菜蜂花粉中脂肪酸的GC-MS分析.分析测试学报, 2003, 22( 1): 74-76.
[94]王永宁,卢挺,石玉平.油菜蜂花粉酶法破壁研究.天然产物研究与开发,2004, 16( 3): 228-230.
[95]李英华,吕秀阳,胡福良,等.花粉中化学成分的研究现状及发展趋势.中国现代应用药学杂志, 2006, 23(7): 613-615.
[96]梁惠花,刘晓河,王志宝.坝上油菜蜂花粉中脂肪油的提取及稳定性研究.中成药, 2004, 26 (9): 768-769.
[97]王开发,潘建国,支崇远.花粉多不饱和脂肪酸研究与展望.食品科技,2002, (7): 66-68.
[98]尹凯丹,张奇志.食品理化分析.北京:化学工业出版社, 2008.73-83.
[99]侯曼玲.食品分析.北京:化学工业出版社, 2008.47-50.
[100]复旦大学.物理化学实验.北京:高等教育出版社, 1999.43-48.
[101]王肇慈.粮油食品品质分析.北京:中国轻工业出版社,2000.128-131.
[102]杨培慧,郑志雯,赵秋香,等.食用植物油脂肪酸的高分辨气相色谱分析.中国油脂, 2003, 28(7): 48-50.
[103]韩国麟.油脂化学.郑州:河南科技出版社, 1995.250-251.
[104]余珠花,喻玖宏.填充柱气相色谱法测油脂脂肪酸组成条件的优化.武汉工业学院学报, 2004, 23(4): 57-59.
[105]杨培慧,郑志雯,赵秋香,等.食用植物油脂肪酸的高分辨气相色谱分析.中国油脂, 2003, 28(7): 48-50.
[106]肖昌珍,吴渝,甘东生,等.食用植物油掺伪检测.中国油料作物学报,1999, 21(1): 63-66.
[107]李飞.色谱分离工作条件的优化原则.环境科学与技术,2003,26( 4):18-19.
[2]丁蕾,支崇远.花粉的医疗保健作用研究近况.中国乡村医药杂志, 2006,13( 12): 47-48.
[3]李兴安,蒋滢,王尉平.花粉抗脑衰老大鼠基因组DNA RAPD分子标记的实验研究.中国养蜂, 2003, 54(2): 8-9.
[4]李嘉蓉.天然药物化学实验.北京:中国医药科技出版社, 1998.4-7.
[5]张继杰.天然药物化学实验.北京:人民卫生出版社, 1997.7-9.
[6]张代佳,刘传斌,修志龙,等.微波技术在植物胞内有效成分提取中的应用.中草药, 2000, 31(9): 5-6.
[7] patrick M. Membrane Separation Process. Amsterdam Elsevier Scientific,Publishing Compang, 1976, 107.
[8]王洪武,李次芬,余颂涛,等.花粉对食饵性高血脂家兔凝血和纤溶功能的影响.军医进修学院学报, 1992, 13( 1): 60.
[9] PRATT D. E. Water soluble antioxidant activity soybeans. Food Science,1972, 37: 322-323.
[10] PRFAT D. E. Lipid antioxidants in plant tissue. Food Science, 1965, 30:737-742.
[11] RAFAT H.S . Hydroxy radaical scavenging activity of flavonoids. Phytouchmistry, 1987, 26: 2489-2491.
[12]田清涞,张震,陈清芬,等.蜂花粉降血脂、抗氧化和防衰老作用的研究.老年医学杂志, 1991, 22(4): 357-359.
[13]刘建涛,赵利,苏伟,等.蜂花粉生物活性物质的研究进展.食品科学,2006, 27(12): 909-911.
[14]许具晔.蜂花粉对人体的保健作用.农产品加工, 2004, (10): 24-25.
[15] Zhang x, Habib F K, Ross M. Isolation and characterization of a cyclic hydroxamic acid from a pollen extract, which inhibits cancerous cell growth in vitro. Med Chem, 1995, 38: 735.
[16]王开发.花粉营养成分与花粉资源利用.上海:复旦大学出版社,1993.59-67.
[17]刘小力,刘晓毅,石维妮.四种市售蜂花粉产品氨基酸组成测定与营养功能分析.中国食物与营养, 2008,( 7): 53-55.
[18]王开发,耿越.花粉中碳水化合物的研究.蜜蜂杂志, 1998,( 4): 3-5.
[19]涂文利,耿越,张静静,等.八种花粉中脂肪酸组分分析.营养学报,2005,27(4): 351-352.
[20]宋心仿,邵有全.蜜蜂产品的应用与检测加工技术.北京:中国农业出版社, 2000.39.
[21] M. G. Campos.Age-Induced Diminution of Radical Scaenging Capacity in Bee Pollen and the Contribution of Constituent Flavonoids. Agricultural and Food Chemistry, 2003, 51: 742-745.
[22] J. Serra Bonvehi. Evaluation of Ployheolic and Flavonaid Compounds in Honeybee-Collected Pollen in Spain. Agricultural and Food Chemistry, 2001, 49:1848-1853.
[23]王开发,耿越.花粉中黄酮类研究.养蜂科技, 1997, (3): 8-12.
[24]毛礼米,王开发.我国花粉资源应用及其研究进展.自然杂志, 1997, 20( 5): 271-275.
[25]王开发,张玉兰,张盛隆.花粉中核酸的研究.蜜蜂杂志,1997,( 7):11-12.
[26]李雷,高庆菊,王贻节.“寿尔康”口服液的抗衰老作用研究.蜜蜂杂志,2002,( 6): 6-8.
[27]赵立新,喻陆.松花粉抗衰老作用的实验研究.现代医学, 2004, 32(2):74-76.
[28] Semesei, Rao G., Rchardson. A expression of super-oxide dismutase and catalaes in rat brain as a function of age.Mech Aging Dev., 1991, 58: 13-19.
[29]石玉平,卢挺,王永宁.油菜蜂花粉中黄酮类物质清除羟基自由基的研究.食品科学, 2004, 25( 11): 300-302.
[30] Scarfiotti C. Free radicals,atherosclerosis,aging,and Related dysmetabolic pathologies:pathological clinical aspects. Eur J Cancer Prev.1997, 6: 31-36.
[31]王开发,王隆华,支祟远,等.玉米花粉黄酮类物质对清除自由基的作用.中国养蜂, 2001, 52(6): 4-6.
[32]曹炜,尉亚辉,郭斌,等.用荧光探针法研究茶叶花粉黄酮对氧自由基致鼠红细胞膜氧化损伤的保护作用.光子学报, 2002, 31( 4): 394-397.
[33]许子俊,余海茹,郭玉兰,等.油菜蜂花粉对小鼠免疫功能的影响.西北药学杂志, 1993, 8(1): 24-26.
[34]钱伯初,臧星星,刘雪莉,等.蜂花粉对营养不良小鼠免疫功能低下的影响.养蜂科技, 1991,( 2): 23-26.
[35]龚维桂,李军,横田正实.蜂花粉对顺铂副作用的影响.浙江省医学科学院学报, 1991,( 7): 5-7.
[36]伏纬华,陈压,横田正实.蜂花粉中抗细菌毒和免疫增强成分的分离及生物活性测定.现代应用药学, 1993, l0(l): 1-3.
[37]陆明,王开发.花粉、花粉多糖、灵芝孢子抑制肿瘤作用的对比研究.蜜蜂杂志, 2002, (11): 5-6.
[38]杨新跃,刘志勇,汪礼国,等.蜂花粉多糖液抑制肿瘤作用的实验研究.江西农业大学学报, 2006, 28(2): 293-295.
[39]万开科,宋艳玲,季爱雪,等.油菜花粉十二肽和类似物的合成及性质的研究.高等学校化学学报, 1995, 16( 4): 543-548.
[40]许家喜,金声.罂粟花粉十三肽类似物的合成及其结构与抗肿瘤活性关系研究.高等学校化学学报, 1999, 20(5): 722-726.
[41]张志友,房林华,许欣欣,等.枣花粉提取物抗肿瘤效应及其机理的探讨.中国公共卫生学报, 1997, 16( 2): 81.
[42]余颂涛,王喜群,陈伟,等.玉米花粉对高血脂症及动脉粥样硬化的影响.中草药, 1990, 21( 9): 20-23.
[43]王洪武,余颂涛,王士雯,等.玉米花粉对食饵性高血脂家兔凝血和纤溶功能的影响.中草药, 1990, 21( 10): 21-24.
[44]王开发,王隆华,支崇远等.玉米花粉黄酮类物质对SD大鼠降血脂作用的研究.放射免疫学杂志, 2002, 15(6): 368-370.
[45]王明锁,陈政,黄美英,等.蜂花粉对受照大鼠抗辐射效应的研究.辐射研究与辐射工艺学报, 1998, l6(2): 110-112.
[46]曹幼甫,蒋滢,毛棣华,等.蜂花粉对γ射线受照大鼠骨髓造血组织影响的病理学研究.中华放射医学与防护杂志, 1998, 18( 4): 269-270.
[47]王茂山,范华芬.蜂花粉对血液和造血系统的影响.中草药,1993,24( 11):588-590, 601.
[48]周玲仙,绍萍,陈彦红.荞麦花粉抗贫血作用的实验研究.昆明医学院学报, 1994, 15( 3): 11-13.
[49]耿越,王开发,张玉兰,等.40种常见花粉相对营养价值评价.天然产物研究与开发, 2000, 12(6): 40-45.
[50]胡福良,玄红专,朱威,等.花粉、蜂胶对糖尿病SD大鼠的影响.中国养蜂, 2003, 54( 4): 9-11.
[51]蒋滢,孔庆旺,舒仲,等.花粉抗糖尿病实验动物研究.中国养蜂, 1996,( 4): 8.
[52]宋心仿,杨万晶,李翠霞.花粉口服液治疗糖尿病患者.蜜蜂杂志, 1991,( 6): 6-7.
[53]钱伯初,刘雪莉,藏星星,等.花粉醇的抗前列腺增生作用.中华泌尿外科杂志, 1992, 13( 5): 365-368.
[54]王志平,陈一戎,刘国栋,等.花粉提取物对前列腺增生细胞作用的研究.中华泌尿外科杂志, 1995, 16( 12): 732-733.
[55]刘雪莉,朱丽秋,袁玉英,等.蜂花粉治疗老龄犬前列腺增生的形态学观察.中草药, 1990, 21( 4): 20-22.
[56]许立薇,侯晞.油菜花粉对小鼠体重增长和学习记忆的影响.基层中药杂志, 2000, 14( 4): 11.
[57]章华础,王开发,肖祥熊,等.花粉治疗功能性便秘的临床观察及机理探讨.放射免疫学杂志, 1995, 8( 2): 71-74.
[58]庄月明,钱伯初.蜂花粉的护肝作用.浙江医学, 1989, 11( 1): 55-56.
[59]胡福良,李英华.蜂花粉在畜牧业中的利用研究进展.甘肃畜牧兽医,2001, 31(3): 31-33.
[60]罗曼,蒋立科.蛋清破花粉壁的研究.天然产物研究与开发,1999,11(3):58-62.
[61]李道平,梁昭燕,张军平,等.超声波在花粉破壁技术中的应用.陕西师大学报, 1992, 20( 1): 87.
[62]苗前,杜红霞,王文正.玉米花粉几种机械破壁方法的研究.食品科学,1997, 18( 11): 43-45.
[63]周顺华,陶乐仁,徐斐,等.用液氮淬冷法进行花粉破壁的实验研究.上海理工大学学报, 2002, 24( 3): 233-237.
[64]吕耀奎.花粉高压气流法的破壁技术.食品科学, 1989,( 8): 17-20.
[65]袁耀东,陈黎红,吕丽萍.蜂花粉发酵破壁技术及花粉营养蜜的研制.中国养蜂, 2000, 51( 2): 8-9.
[66]徐斐,汤坚.发酵花粉饮料的初步研制.食品科技, 1999,( 6): 41-43.
[67]周忠泽,李玉成.洋槐花粉的破壁技术及口服液的研制.安徽大学学报,2000, 24( 1): 94-95.
[68]房柱.花粉.北京:农业出版社, 1985.14-23.
[69]唐维,张星海.花粉破壁方法的研究进展.食品与发酵工业,2003,29( 2):86-92.
[70]毕艳兰.油脂化学.北京:化学工业出版社, 2005.5-6.
[71]钟耀光.功能食品.北京:化学工业出版社, 2004.121-128.
[72]鲍建民.多不饱和脂肪酸的生理功能及安全性.中国食物与营养, 2006,(1): 45-46.
[73]吴时敏,裘爱泳,吴谋成.胎儿、婴幼儿的功能性多不饱和脂肪酸需要概况.中国乳品工业, 2001, 29( 3): 21-23.
[74]董杰明,吴瑞华,袁昌鲁,等.γ-亚麻酸的保健作用.卫生研究.2003,32 (3): 299-301.
[75] Kinchington D. , Randall S. , Winter M. , et al.Lithium gamma-lino -lenatc-induced cytotoxicity against cells chronically infected with HIV-1. FEBS Left, 1993, 330 (2): 219-221.
[76] Bakshi A., Mukherjeed, Bakshi M., et al. Gammalinolenic acid therapy of human gliomas. Nutr, 2003, 19(4): 305-309.
[77]邢旭光,郭国庆,孙晗笑,等.γ-亚麻酸的防病抗病作用.中国公共卫生, 2002, 18 ( 12): 1513-1515.
[78]卢艳花.中药有效成分提取分离技术.北京:化学工业出版社, 2005.2.
[79]吴时敏.功能性油脂.北京:中国轻工业出版社, 2001.16.
[80]倪培德.油脂加工技术.北京:化学工业出版社, 2002.187.
[81]陈开勋,严安,葛红光.超临界C02萃取火棘油.中国油脂,1999, 24 (4):43-44.
[82]马海乐,陈钧.超临界CO2萃取小麦胚芽油的试验研究.农业工程学报,1996, 12( 1): 182-186.
[83]孙爱东,尹卓容,蔡同一,等. CO2超临界萃取技术提取月见草油的工艺研究.中国油脂, 1998, 23( 5): 40-42.
[84]张慧敏,孙容芳,于同泉,等.超临界CO2流体萃取杏仁油的研究.粮油食品科技, 2001, 9( 1): 29-30, 41.
[85]丁怡,唐星.柱前衍生HPLC法测定薏苡仁油中的脂肪酸含量.药物分析杂志, 2004, 24( 3): 249-252.
[86]黄玉华,邓泽元.芝麻中脂肪酸成分的GC分析.现在食品科技, 2006,22( 2): 225-226.
[87]于燕波,臧鹏,付元华,等.近红外光谱法快速测定植物油中脂肪酸含量.光谱学与光谱分析, 2008, 28( 7): 1554-1558.
[88]李继平,王艳丽,张广宁,等.槐花脂肪酸成分的GC-MS分析.辽宁师范大学学报, 2008, 31( 1): 70-71.
[89]孙庆杰,丁霄霖.超临界流体萃取番茄籽油的研究.中国油脂,1998,23(3):12-14.
[90]葛发欢,史庆龙,沈永康,等.菜籽油脚中天然VE和脂肪酸的超临界CO2萃取分离及其GC-MS分析.中药材, 1997, 20( 4): 188-190.
[91]马海乐,陈钧,吴守一,等.超临界CO2萃取小麦胚芽油的实验研究.农业工程学报, 1996, 12( 1): 182-186.
[92]董海洲,万本屹,刘传富,等.葡萄籽油超临界二氧化碳萃取最佳工艺参数及其理化特性的研究.中国粮油学报, 2004, 19( 5): 55-57.
[93]潘家国,段怡,吴惠勤,等.油菜蜂花粉中脂肪酸的GC-MS分析.分析测试学报, 2003, 22( 1): 74-76.
[94]王永宁,卢挺,石玉平.油菜蜂花粉酶法破壁研究.天然产物研究与开发,2004, 16( 3): 228-230.
[95]李英华,吕秀阳,胡福良,等.花粉中化学成分的研究现状及发展趋势.中国现代应用药学杂志, 2006, 23(7): 613-615.
[96]梁惠花,刘晓河,王志宝.坝上油菜蜂花粉中脂肪油的提取及稳定性研究.中成药, 2004, 26 (9): 768-769.
[97]王开发,潘建国,支崇远.花粉多不饱和脂肪酸研究与展望.食品科技,2002, (7): 66-68.
[98]尹凯丹,张奇志.食品理化分析.北京:化学工业出版社, 2008.73-83.
[99]侯曼玲.食品分析.北京:化学工业出版社, 2008.47-50.
[100]复旦大学.物理化学实验.北京:高等教育出版社, 1999.43-48.
[101]王肇慈.粮油食品品质分析.北京:中国轻工业出版社,2000.128-131.
[102]杨培慧,郑志雯,赵秋香,等.食用植物油脂肪酸的高分辨气相色谱分析.中国油脂, 2003, 28(7): 48-50.
[103]韩国麟.油脂化学.郑州:河南科技出版社, 1995.250-251.
[104]余珠花,喻玖宏.填充柱气相色谱法测油脂脂肪酸组成条件的优化.武汉工业学院学报, 2004, 23(4): 57-59.
[105]杨培慧,郑志雯,赵秋香,等.食用植物油脂肪酸的高分辨气相色谱分析.中国油脂, 2003, 28(7): 48-50.
[106]肖昌珍,吴渝,甘东生,等.食用植物油掺伪检测.中国油料作物学报,1999, 21(1): 63-66.
[107]李飞.色谱分离工作条件的优化原则.环境科学与技术,2003,26( 4):18-19.