金银花中绿原酸的提取分离及抗氧化作用研究
摘要
金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬的干燥花蕾,是一种具有多种生物活性的传统中医用药。其主要功能成分绿原酸具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、保肝利胆、降血压血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用,是许多中药材的有效成分之一,又是某些成药的质量指标。绿原酸可应用的范围非常广,主要为医药、日用化工和食品等行业。本文主要研究了金银花中绿原酸的检测方法、提取纯化方法和抗氧化作用,以期为提高绿原酸的提取纯度和研究开发功能作用提供参考。
本论文以河南封丘产金丰一号金银花为材料,对比研究了分光光度计法、高效液相色谱法、薄层层析色谱法三种常见的绿原酸检测方法。结论:高效液相色谱法因其高精确度、准确性和分光光度法多用于定量分析,而薄层色谱法更适于快速定性鉴别分析。
本试验对近年来金银花中绿原酸常见提取工艺:水提法、醇提法、超声波提取法、沉淀法等进行了对比研究,以高效液相色谱法为检测手段,得出改进提取方法—改良乙酸乙酯法,测定提取率为37.7%,得率为44.3%。
采用高速逆流色谱法,选择出绿原酸分离纯化的两相溶剂系统:乙酸乙酯:乙酸:水(4:1:5,V/V),优化分离参数:流速1ml/min,仪器转速800rpm,温度45℃,实现从金银花提取物中一次分离出绿原酸。该方法操作简单、分离效率高,可作为高纯度绿原酸化学对照品的制备分离方法。
本试验主要采用铁离子还原法、羟自由基和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系对金银花提取物进行抗氧化活性的研究,并以绿原酸和抗坏血酸作为对照。结论:金银花提取物清除羟自由基和DPPH·自由基的能力较强;而绿原酸的还原能力最强;从三个试验中可以得出,绿原酸是起抗氧化作用的主要物质。
Honeysuckle is Caprifoliaceae Lonicera japonica Thunb dry bud,which is a traditional Chinese medicine,with a variety of biological activities.The main functional component of chlorogenic acid has antibacterial,anti-virus, anti-tumor,nourish the liver and gallbladder,reduce blood pressure,lipids,clearing free radicals and excited the central nervous system,is one of the active ingredient in many Chinese herbal medicines,but also certain medicine qualitative index.Chlorogenic acid is a very broad range of applications,mainly in medicine,daily chemical and food industries.This paper mainly studies chlorogenic acid detection methods,extraction and purification methods,and anti-oxidation,to provide a reference for improving the extraction purity and developping its functions.
In this paper,the material based on honeysuckle of the Jinfeng 1st from Henan Fengqiu is comparatively studied by the spectrophotometer,high performance liquid chromatography,thin layer chromatography method of these three common chlorogenic acid detection methods.Conclusion:The HPLC because of its high-precision, accuracy,with spectrophotometry used for quantitative analysis,while TLC is more suitable for rapid qualitative analysis.
In this study,the recent years of chlorogenic acid in Lonicera japonica common extraction process:aqueous extraction,alcohol extraction,ultrasonic extraction,recipitation method,etc.were compared,using high performance liquid chromatography method as the detection means,obtained improving extraction method - improved ethyl acetate method,the extraction rate was 37.7%,yield of 44.3%.
Chlorogenic acid were isolated from Honeysuckle extraction at a time by high-speed countercurrent chromatography.The two-phase solvent system was chosen out:ethyl acetate:acetic acid:water(4:1:5, V/V),and optimizd the separation parameters:the flow rate is 1ml/min,instrument rotational speed is 800rpm,the temperature is 45℃.The method is simple and high separation efficiency,and can be used as a high-purity chlorogenic acid separation and preparation method.
The antioxidation effect of honeysuckle extraction and the chlorogenic acid was studied.Comparing with Vc,the antioxidation activity was studied by reducing abilities,hydroxyl radical system and DPPH system.All the results above showed that the major antioxidation of honeysuckle extraction was chlorogenic acid;Honeysuckle extraction had strong capacity to scavenge HO·and DPPH·and chlorogenic acid,But the reducing capacity of chlorogenic acid was superior than VC and honeysuckle extraction.
本论文以河南封丘产金丰一号金银花为材料,对比研究了分光光度计法、高效液相色谱法、薄层层析色谱法三种常见的绿原酸检测方法。结论:高效液相色谱法因其高精确度、准确性和分光光度法多用于定量分析,而薄层色谱法更适于快速定性鉴别分析。
本试验对近年来金银花中绿原酸常见提取工艺:水提法、醇提法、超声波提取法、沉淀法等进行了对比研究,以高效液相色谱法为检测手段,得出改进提取方法—改良乙酸乙酯法,测定提取率为37.7%,得率为44.3%。
采用高速逆流色谱法,选择出绿原酸分离纯化的两相溶剂系统:乙酸乙酯:乙酸:水(4:1:5,V/V),优化分离参数:流速1ml/min,仪器转速800rpm,温度45℃,实现从金银花提取物中一次分离出绿原酸。该方法操作简单、分离效率高,可作为高纯度绿原酸化学对照品的制备分离方法。
本试验主要采用铁离子还原法、羟自由基和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系对金银花提取物进行抗氧化活性的研究,并以绿原酸和抗坏血酸作为对照。结论:金银花提取物清除羟自由基和DPPH·自由基的能力较强;而绿原酸的还原能力最强;从三个试验中可以得出,绿原酸是起抗氧化作用的主要物质。
Honeysuckle is Caprifoliaceae Lonicera japonica Thunb dry bud,which is a traditional Chinese medicine,with a variety of biological activities.The main functional component of chlorogenic acid has antibacterial,anti-virus, anti-tumor,nourish the liver and gallbladder,reduce blood pressure,lipids,clearing free radicals and excited the central nervous system,is one of the active ingredient in many Chinese herbal medicines,but also certain medicine qualitative index.Chlorogenic acid is a very broad range of applications,mainly in medicine,daily chemical and food industries.This paper mainly studies chlorogenic acid detection methods,extraction and purification methods,and anti-oxidation,to provide a reference for improving the extraction purity and developping its functions.
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Chlorogenic acid were isolated from Honeysuckle extraction at a time by high-speed countercurrent chromatography.The two-phase solvent system was chosen out:ethyl acetate:acetic acid:water(4:1:5, V/V),and optimizd the separation parameters:the flow rate is 1ml/min,instrument rotational speed is 800rpm,the temperature is 45℃.The method is simple and high separation efficiency,and can be used as a high-purity chlorogenic acid separation and preparation method.
The antioxidation effect of honeysuckle extraction and the chlorogenic acid was studied.Comparing with Vc,the antioxidation activity was studied by reducing abilities,hydroxyl radical system and DPPH system.All the results above showed that the major antioxidation of honeysuckle extraction was chlorogenic acid;Honeysuckle extraction had strong capacity to scavenge HO·and DPPH·and chlorogenic acid,But the reducing capacity of chlorogenic acid was superior than VC and honeysuckle extraction.
引文
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