东祁连山高寒阴湿地区山生柳种群遗传多样性研究
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摘要
本文采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳(polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE)技术，对东祁连山高寒阴湿地区山生柳(Salix oritrepha)沿不同海拔梯度分布的8个亚种群，通过等位酶分析研究种群的遗传多样性。所测定的酶系统包括：酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、乙醇脱氢酶(ADH)、过氧化物酶(PER)与谷氨酸脱氢酶(GDH)6个酶系统15个等位酶位点。应用电泳酶谱分析软件ImageMaster 1D对各酶系统的谱带进行了定性与定量检测。所采用的表示种群内遗传多样性(genetic diversity of population)的指标主要有：多态位点的百分数P、平均每个位点的等位基因数A、平均每个位点的等位基因的有效数目A_e、平均每个位点的预期杂合度H_e与平均每个位点的实际杂合度H_o等。研究结果如下：
1．山生柳种群具有较高水平的遗传多样性。多态位点百分数P=60.8％，平均每个位点的等位基因数A=1.638，平均每个位点的等位基因的有效数目A_e=1.433，平均每个位点的预期杂合度H_e=0.260，平均每个位点的实际杂合度H_o=0.275。
2．山生柳各亚种群的基因型频率的实测值与预期值在其平衡位点存在不同程度的偏离。固定指数F=-0.0535＜0，种群内显示出过多的杂合体，但整个种群基本处于Hardy-Weinberg遗传平衡状态。
3．山生柳各亚种群间的遗传分化程度较低。总种群基因多样度H_T=0.281，亚种群内基因多样度H_S=0.260，亚种群间基因多样度D_(ST)=0.021，基因分化系数G_(ST)=0.075，表明92.5％的遗传变异来自于亚种群内，只有7.5％的遗传变异发生在亚种群间；基因流N_m=3.095＞1，可以防止由遗传漂变引起的亚种群之间的遗传分化。
4．山生柳各亚种群间有较近的遗传关系。平均遗传一致度I=0.9655，平均遗传距离D=0.0354。最大遗传一致度出现在P_1(3050m)与P_2(3100m)之间，最小遗传一致度出现在P_1(3050m)与P_5(3250m)之间。相关分析表明，空间距离与遗传距离之间存在显著的正相关关系(r=0.9347)。
5．山生柳种群的遗传变异与海拔梯度变化的相关性较差。在表示遗传变异水平的各项指标中，除等位基因平均数A与海拔梯度存在相关性外(r=0.9181)，其余指标，如多态位点百分率P、有效等位基因数A_e、平均期望杂合度H_e、实际观察杂合度H_o与海拔梯度变化均不相关。
This paper applied polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) method to study the genetic diversity of 8 subpopulations of Salix oritrepha distributed at different altitude gradients in the Alpine Area of Eastern Qilian Mountain. Six enzymes encoded by fifteen loci were assessed. The enzyme systems determined include: Esterase (EST), Malate dehydrogenase (MDH), Isocitrate dehydrogenase (IDH), Alcohol dehydrogenase (ADH), Peroxidase (PER),Glutamate dehydrogenase (GDH). The software (ImageMaster ID) has been used to analyze electrophoresis zymogram by qualitative and quantitative. The indices we adopted to evaluate the genetic diversity involved percentage of polymorphic loci (P), mean number of alleles per locus (A), mean effective number of alleles per locus (Ae), mean expected heterozygosity per locus (He) and mean observed heterozygosity per locus (Ho), and so on. The results showed as follows:
1. Salix oritrepha population maintained relatively high level of genetic diversity. The percentage of polymorphic loci (P), mean number of alleles per locus (A), mean effective number of alleles per locus (Ae), mean expected heterozygosity per locus (He), and mean observed heterozygosity per locus (H0) were 60.8%, 1.638,1.433,0.260 and 0.275, respectively.
2. There were deviations in the different degree between the expected and observed values of genotype frequency in each subpopulation. The negative fixation index (F=-0.0535) indicated that there was excess heterozygote in Salix oritrepha population, but the total population conformed to the Hardy-Weinberg equilibrium.
3. There was relatively low inter-subpopulation genetic differentiation. The total gene diversity (HT), intra-subpopulation gene diversity (HS), inter-subpopulation gene diversity (DST) and coefficient of gene differentiation (GsT) were 0.281, 0.260, 0.021 and 0.075, respectively. Genetic structure analysis revealed inter-subpopulation genetic variation at 7.5%, meaning 92.5% of the genetic variation in Salix oritrepha resided in intra-subpopulations. Inter-subpopulation gene flow (Nm) was 3.095, which explained the low inter-subpopulation genetic variation and could avoid the genetic differentiation arose from genetic drift.
4. Genetic relationships among subpopulations were assessed by genetic identity (I) and standard genetic distance (D). The mean genetic identity and mean standard genetic distance were 0.9655 and 0. 0354, respectively. The results suggested that 8 subpopulations had closer
relationships. The highest genetic identity appeared between PI (3050m) and P2 (3100m), and the lowest between P1 (3050m) and PS (3250m). Genetic distances were correlated with spatial distances significantly (r=0.9347).
5. The genetic variation indices in Salix oritrepha population, such as percentage of polymorphic loci (P), mean effective number of alleles per locus (Ae), mean expected heterozygosity per locus (He) and mean observed heterozygosity per locus (H0) showed insignificant correlation with the altitude gradient except mean number of alleles per locus (A) (r=0.9181).
1．山生柳种群具有较高水平的遗传多样性。多态位点百分数P=60.8％，平均每个位点的等位基因数A=1.638，平均每个位点的等位基因的有效数目A_e=1.433，平均每个位点的预期杂合度H_e=0.260，平均每个位点的实际杂合度H_o=0.275。
2．山生柳各亚种群的基因型频率的实测值与预期值在其平衡位点存在不同程度的偏离。固定指数F=-0.0535＜0，种群内显示出过多的杂合体，但整个种群基本处于Hardy-Weinberg遗传平衡状态。
3．山生柳各亚种群间的遗传分化程度较低。总种群基因多样度H_T=0.281，亚种群内基因多样度H_S=0.260，亚种群间基因多样度D_(ST)=0.021，基因分化系数G_(ST)=0.075，表明92.5％的遗传变异来自于亚种群内，只有7.5％的遗传变异发生在亚种群间；基因流N_m=3.095＞1，可以防止由遗传漂变引起的亚种群之间的遗传分化。
4．山生柳各亚种群间有较近的遗传关系。平均遗传一致度I=0.9655，平均遗传距离D=0.0354。最大遗传一致度出现在P_1(3050m)与P_2(3100m)之间，最小遗传一致度出现在P_1(3050m)与P_5(3250m)之间。相关分析表明，空间距离与遗传距离之间存在显著的正相关关系(r=0.9347)。
5．山生柳种群的遗传变异与海拔梯度变化的相关性较差。在表示遗传变异水平的各项指标中，除等位基因平均数A与海拔梯度存在相关性外(r=0.9181)，其余指标，如多态位点百分率P、有效等位基因数A_e、平均期望杂合度H_e、实际观察杂合度H_o与海拔梯度变化均不相关。
This paper applied polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) method to study the genetic diversity of 8 subpopulations of Salix oritrepha distributed at different altitude gradients in the Alpine Area of Eastern Qilian Mountain. Six enzymes encoded by fifteen loci were assessed. The enzyme systems determined include: Esterase (EST), Malate dehydrogenase (MDH), Isocitrate dehydrogenase (IDH), Alcohol dehydrogenase (ADH), Peroxidase (PER),Glutamate dehydrogenase (GDH). The software (ImageMaster ID) has been used to analyze electrophoresis zymogram by qualitative and quantitative. The indices we adopted to evaluate the genetic diversity involved percentage of polymorphic loci (P), mean number of alleles per locus (A), mean effective number of alleles per locus (Ae), mean expected heterozygosity per locus (He) and mean observed heterozygosity per locus (Ho), and so on. The results showed as follows:
1. Salix oritrepha population maintained relatively high level of genetic diversity. The percentage of polymorphic loci (P), mean number of alleles per locus (A), mean effective number of alleles per locus (Ae), mean expected heterozygosity per locus (He), and mean observed heterozygosity per locus (H0) were 60.8%, 1.638,1.433,0.260 and 0.275, respectively.
2. There were deviations in the different degree between the expected and observed values of genotype frequency in each subpopulation. The negative fixation index (F=-0.0535) indicated that there was excess heterozygote in Salix oritrepha population, but the total population conformed to the Hardy-Weinberg equilibrium.
3. There was relatively low inter-subpopulation genetic differentiation. The total gene diversity (HT), intra-subpopulation gene diversity (HS), inter-subpopulation gene diversity (DST) and coefficient of gene differentiation (GsT) were 0.281, 0.260, 0.021 and 0.075, respectively. Genetic structure analysis revealed inter-subpopulation genetic variation at 7.5%, meaning 92.5% of the genetic variation in Salix oritrepha resided in intra-subpopulations. Inter-subpopulation gene flow (Nm) was 3.095, which explained the low inter-subpopulation genetic variation and could avoid the genetic differentiation arose from genetic drift.
4. Genetic relationships among subpopulations were assessed by genetic identity (I) and standard genetic distance (D). The mean genetic identity and mean standard genetic distance were 0.9655 and 0. 0354, respectively. The results suggested that 8 subpopulations had closer
relationships. The highest genetic identity appeared between PI (3050m) and P2 (3100m), and the lowest between P1 (3050m) and PS (3250m). Genetic distances were correlated with spatial distances significantly (r=0.9347).
5. The genetic variation indices in Salix oritrepha population, such as percentage of polymorphic loci (P), mean effective number of alleles per locus (Ae), mean expected heterozygosity per locus (He) and mean observed heterozygosity per locus (H0) showed insignificant correlation with the altitude gradient except mean number of alleles per locus (A) (r=0.9181).
引文
1 李俊清．植物遗传多样性保护及其分子生物学研究方法．生态学杂志．1994，13(6)：27～33
2 李博．生态学．北京：高等教育出版社．2000
3 李毅．东祁连山高寒地区柳灌丛群落及其优势种群结构与动态的研究．博士学位论文．2002
4 冯自诚，徐梦龙．甘南树木图志．兰州：甘肃科学技术出版社．1993
5 施立明，贾旭，胡志昂．遗传多样性．见：陈灵芝主编，中国的生物多样性．北京：科学出版社，1993
6 黄百渠，曾庆华，尹东．遗传多样性研究中的分子生物学方法．东北师大学报．1996(3)：90～92
7 陈灵芝，马克平．生物多样性科学：原理与实践．上海科学技术出版社．2001
8 王中仁．植物等位酶分析．北京：科学出版社．1996
9 刘祖洞．遗传学(第二版)．北京：高等教育出版社，1991
10 Bruno Baur, Schmid B. Spatial and temporal patterns of genetic diversity within species, In: Kevin J. Gaston ed. Biodiversity: A Biology of Numbers and Difference. London: Blackwell Science Institute. 1996
11 沈同，王镜岩．生物化学．高等教育出版社．1990
12 Prakash S, Lewontin R C, Hubby J L, A molecular approach to the study of genetic heterozygosity in natural populations/Ⅳ. Patterns of genie variation in eetrol, marginal and isolated opulations of Drosophila pseudoobscura. Gentics, 1969, 61: 841～858
13 葛颂．遗传多样性．见：蒋志刚，马克平，韩兴国．保护生物学．杭州：浙江科学技术出版社．1997
14 葛颂．同工酶和植物进化生物学．见：陈家宽，杨继．植物进化生物学．武汉：汉大学出版社．1994
15 葛颂，洪德元．遗传多样性及其检测方法．见：钱迎倩，马克平．生物多样性研究的原理和方法．北京：中国科学技术出版社．1994
16 Hamrick J L. Isozymes, analysis of genetic structure of plant populations. In Soltis D, Soltis P. (eds) Isozymes in Plant Biology. Washington: Dioscorides Press, 1989, 87～105
17 Lewontin R C, Hubby J L. A molecular approach to the study of genic heterozygosity in natural populations. Ⅱ. Amount of variation and degree of heterozygosity in natural population of Drosophilla psudoobscura. Genetics. 1966, 54: 595～609
18 Hubby J L, Lewontin R C. A molecular approach to the study of genic heterozygosity in natural populations. Ⅰ. The number of alleles at different loci in Drosophilla psudoobscura. Genetics. 1966, 54: 577～594
19 Selander R K, Yang S Y. Protein polymorphism and genetic heterozygosity in a wild populations of house mouse(Mus musculus) Genetics. 1969, 63: 653～667
20 Gottlieb L. D., Evolutionary relationships in the outcrossing diploid annual species of Stephanomeria(Compositae). Evolution. 1971b, 25: 312～329
21 Soltis, D. E., C. H. Haufler and G. J. Gastony. Detecting enzyme variation in the fern genus Bommeria: an analysis of methodology. Syst. Bot. 1980, 5: 30～38
22 Cummins. H, R. Wyatt. Genetic variability in natural populations of the moss Atrichum angustatum. Bryologist. 1981(84)30～38
23 Brown A H D. Isozymes, plant population genetic structure, genetic conservation. Theor. Appl. Genet.
1978(52): 145～157
24 Brown A H D. Enzyme polymorphism in plant populations. Theoret. Pop. Biol. 1979(15): 1～42
25 Gottlieb L D. Electrophoretie evidence, plant populations. Prog. Phytochem. 1981(7): 1～46
26 Loveless M P, Hamrick J L. Ecological determinant of genetic structure in plant populations. Ann. Rev. Ecol. Syst. 1984(15): 65～69
27 Hamrick J L, Godt M J W. Allozyme diversity in plant species. In: Brown A H D, Clegg M T, Kahler A L. et al. (eds) Plant Population Genetics, Breeding and Genetic Resources Sunderland: Sinauer. 1990: 43～46
28 Ehrlich P R, Wilson E O. Biodiversity studies: science and policy. Science. 1991(253):758～762
29 Ehrlich P R. Enhancing the status of population biology. Trends Ecol. Evol. 1994(9): 157
30 Moore H D M, Holt W V, Mace G M. Biotechnology and the conservation of genetic diversity. Oxford: Oxford Science Publications. 1992
31 Milligan B G et al. Conservation genetics: beyoned the maintenance of marker diversity. Molec. Ecol. 1994(3): 423～435
32 Rajiv G. Raja, C. G. Tauer, Robert E Wittwer, and Yinghua Huang, 1997, Isoenyme variation and genetic structure in natural populations of shortleaf pine(Pinus echmata). Can. J. For. Res. 27: 740～749
33 胡守荣，夏铭，等．林木遗传多样性研究方法概况．东北林业大学学报．2001，29(3)：72～75
34 葛颂，王明庥，陈乐武．用同工酶研究马尾松群体的遗传结构．林业科学．1988，24(4)：399～409．
35 解荷锋．马尾松天然群体的遗传结构．南京林业大学学报．1990，14(4)：36～42．
36 黄启强，王莲辉，户丸信弘，等．马尾松天然群体同工酶遗传变异[J]．遗传学报．1995，22(2)：142～151．
37 李丹，彭少麟．三个不同海拔梯度马尾松种群的遗传多样性及其与生态因子的相关性．生态学报．2001，21(3)：415～421
38 查天山．青海云杉天然群体中等位酶变异的研究．硕士学位论文．1989
39 杨一平，尹瑞雪，张军丽．红皮云杉自然群体遗传多样性及遗传分化的研究．植物学报．1993，35(6)：458～465
40 张含国，高士新，等．长白落叶松天然群体遗传结构的研究．东北林业大学学报．1995，23(6)：21～30
41 钟敏，王洪新，胡志昂，等．干旱和湿润生境下辽东栎群体遗传结构及其适应意义．植物学报．1995，37(9)：661～668
42 李力．青岛耐冬山茶的多样性(Ⅱ)—居群的遗传多样性分析．生物多样性．1996，4(1)：1～6
43 葛颂．王海群，张灿明，等．八面山银杉林的遗传多样性和群体分化[J]．植物学报，1997，39(3)：266～271
44 夏兰琴，蒋尤泉，阎福林．扁蓿豆遗传多样性的研究．中国草地．1997(2)：30～35
45 朱晓琴．等．鹅掌楸居群遗传结构及其保护对策．植物资源与环境．1997，6(4)：7～14
46 李宽钰．青杨的遗传分化．植物学报．1997，39(8)：753～758
47 董玉芝，白根本．用同工酶研究胡杨天然群体遗传结构．东北林业大学学报．1998，26(6)：16～20
48 陈小勇，宋永昌．华东地区青冈种群等位酶变异的研究．植物资源与环境．1995，4(4)：10～16
49 陈小勇，王希华，宋永昌．华东地区青冈种群的遗传多样性及遗传分化．植物学报．1997，39(2)：149～
155
50 陈小勇，宋永昌．安徽黄山西部青冈种群微生环境遗传分化的研究．植物资源与环境．1998，7(1)：10～14
51 王可青，葛颂，董鸣．根茎禾草沙鞭的等位酶变异及克隆多样性．植物学报．1999，41(5)
52 郎萍，黄宏文．栗属中国特有种居群的遗传多样性及地域差异．植物学报．1999，41(6)
53 葛颂，洪德元．濒危物种裂叶沙参及其近缘广布种泡沙参的遗传多样性研究．遗传学报．1999，26(4)：410～417．
54 葛颂，王可青，董鸣．毛乌素沙地根茎灌木羊柴的遗传多样性和克隆结构．植物学报．1999，41(3)
55 周琼，周厚高．南宁地区蜈蚣蕨居群的遗传多样性分析．广西农业生物科学．1999，18(4)
56 李俊清．中国水青冈种内种间遗传多样性的初步研究．生物多样性．1996．4(2)：63～68
57 李俊清．吴刚，刘雪萍．四川南江两种水青冈种群遗传多样性初步研究．生态学报．1999(1)
58 祖元刚，张恒庆．天然红松林等位酶研究[J]．植物研究．1999，19(1)：75～79
59 冯兆华，张宗俭．野燕麦种群遗传多样性的聚类分析研究．植物保护．1999年 第2期No．2 1999
60 许东河，高忠，田清震，等．中国一年生野生大豆群体的遗传多样性研究．应用与环境生物学报．1999，5(5)
61 段飞舟，曹瑞，等．濒危植物半日花的遗传多样性和居群分化．中国学术期刊文摘．2000，6(2)：217～219
62 高连明，张长芹，王中仁．九种杜鹃属植物的遗传分化研究．广西植物．2000，20(4)：377～382
63 李建强，张敏华，等．珙桐的等位酶位点变异分析．武汉植物学研究．2000，18(3)：247～249
64 宋志平，汪小凡，潘明清．花蔺和黄花蔺居群遗传结构比较研究．武汉植物学研究．2000，18(2)：90-97
65 邱英雄，黄爱军，傅承新．明党参的遗传多样性研究．植物分类学报．2000，38(2)：111～121
66 陈少瑜．云南红豆杉(Taxus yunnanensis)居群的等位酶分析方法．西北林学院学报．2000，15(4)：10～15
67 李巧明，许再富．版纳青梅居群的遗传多样性和群体分化．云南植物研究．2001，23(2)：201～208
68 李巧明，许再富．龙脑香科植物望天树的居群遗传结构及分化．云南植物研究．2001，23(3)：313～321
69 崔继哲、曲来叶、祖元刚．微生境下羊草两种生态型种群的遗传多样性及遗传分化——等位酶分析．生态学报．2000，20(3)：434～439
70 崔继哲，祖元刚，等．松嫩草原羊草种群遗传分化的研究．植物研究．2001，21(1)：116～125
71 刘占林，李珊．等．华山新麦草自然居群的遗传结构和种内遗传多态性研究．遗传学报．2001．28(8)：769～777
72 于林清．王照兰，等．黄花苜蓿野生种群遗传多样性的初步研究．中国草地．2001，23(1)：23～25
73 王振月．匡海学．龙牙木天然种群遗传多样性及遗传分化植物研究．2001，21(3)：420～423
74 乌云塔娜，张胜利．等．沙柳等位酶分析．内蒙古农业大学学报(自然科学版)．2001，22(3)：74～79
75 惠红，刘启新，刘梦华．中国沿海中部珊瑚菜居群等位酶变异及其遗传多样性．植物资源与环境学报．2001，10(3)：1～6
76 张颖娟，杨持．西鄂尔多斯特有种四合木种群遗传多样性及遗传分化研究．生态学报．2001．21(3)：506-511
77 黎中宝，林鹏．不同纬度地区桐花树种群的遗传多样性研究．集美大学学报．2001，6(1)：39～45
78 黄英金，李桂花，陈大洲，等．东乡野生稻等位酶位点遗传多样性的初步研究．江西农业大学学报．2002，24(1)：1～5
79 苟文龙，白史且，等．假俭草遗传多样性及应用研究进展．中国草地．2002，24(2)：48～53
80 周世良，叶文国．夏腊梅的遗传多样性及其保护生物多样性．2002，10(1)：1～6
81 汪小凡，廖万金，宋志平．小毛茛居群的遗传分化及其空间隔离的相关性．生物多样性．2001，9(2)：138～144
82 汪小凡，靳宝锋．小毛茛居群分化研究(Ⅱ)——居群遗传变异的等位酶分析．广西植物．2002，22(1)：71～73
83 罗定泽，侯鑫，赵佐成．西南地区金荞麦居群遗传多样性研究．四川师范大学学报．2002，25(1)：62～65
84 胡能书，万国贤．同工酶技术及其应用．长沙：湖南科学技术出版社．1985
85 熊全沫．同工酶电泳数据的分析及其在种群遗传上的应用．遗传．1986．8(1)：1～5
86 何忠孝，张树政．电泳．北京：科学出版社．1990
87 葛学军．植物遗传多样性研究中等位基因酶分析的遗传参数及其计算方法(综述)．热带亚热带植物学报．1996，4(2)：79～84
88 郭尧君．蛋白质电泳实验技术．北京：科学出版社．1999
89 于应文，胡自治，徐长林，等．东祁连山高寒灌丛植被类型与分布特征．甘肃农业大学学报．1999，34(1)：12～16
90 梅里尔D J．黄瑞复，等译．生态遗传学．北京：科学出版社．1991，44～50
91 唐红．草坪种子品种快速鉴定技术研究．硕士学位论文．2002
92 葛颂．同工酶与林木群体变异研究．南京林业大学学报．1998，12(1)：68～76
93 杨传平，等．兴安落叶松优良种源结构的研究(Ⅱ)—遗传变异及种群分化．东北林业大学学报．1997，25(3)：1～5
94 李进，陈可咏，等．川滇高山栎群体遗传结构的初步研究．北京林业大学学报．1997，19(2)：93～97
95 孙雪新，查天山，陶毅．青海云杉群体同工酶变异的研究．甘肃林业科技．1990，2
96 赵桂仿，Francos Felber, Philippe Kuepfer．阿尔卑斯高山-亚高山黄花茅的群体遗传结构和分化研究．植物分类学报．2001，39(1)：20～30
97 施季森，叶志宏．杉木遗传多态性与多基因位点遗传结构．南京林业大学学报．1993，17(3)：9～15
98 黎中宝，林鹏．白骨壤种群不同年龄级的遗传多样性和遗传分化．厦门大学学报．2001，40(1)：103～109
99 赵桂仿．等．瑞士阿尔卑斯山欧洲落叶松居群的遗传变异和分化．植物学报．2001，43(7)：731～735
100 季维智．宿兵．遗传多样性研究的原理与方法．浙江科学技术出版社．1999．
101 胡守荣，夏铭，等．林木遗传多样性研究方法概况．东北林业大学学报．2001，29(3)：36～41
102 黄培佑．干旱区免灌植被及其恢复．科学出版社．2002
2 李博．生态学．北京：高等教育出版社．2000
3 李毅．东祁连山高寒地区柳灌丛群落及其优势种群结构与动态的研究．博士学位论文．2002
4 冯自诚，徐梦龙．甘南树木图志．兰州：甘肃科学技术出版社．1993
5 施立明，贾旭，胡志昂．遗传多样性．见：陈灵芝主编，中国的生物多样性．北京：科学出版社，1993
6 黄百渠，曾庆华，尹东．遗传多样性研究中的分子生物学方法．东北师大学报．1996(3)：90～92
7 陈灵芝，马克平．生物多样性科学：原理与实践．上海科学技术出版社．2001
8 王中仁．植物等位酶分析．北京：科学出版社．1996
9 刘祖洞．遗传学(第二版)．北京：高等教育出版社，1991
10 Bruno Baur, Schmid B. Spatial and temporal patterns of genetic diversity within species, In: Kevin J. Gaston ed. Biodiversity: A Biology of Numbers and Difference. London: Blackwell Science Institute. 1996
11 沈同，王镜岩．生物化学．高等教育出版社．1990
12 Prakash S, Lewontin R C, Hubby J L, A molecular approach to the study of genetic heterozygosity in natural populations/Ⅳ. Patterns of genie variation in eetrol, marginal and isolated opulations of Drosophila pseudoobscura. Gentics, 1969, 61: 841～858
13 葛颂．遗传多样性．见：蒋志刚，马克平，韩兴国．保护生物学．杭州：浙江科学技术出版社．1997
14 葛颂．同工酶和植物进化生物学．见：陈家宽，杨继．植物进化生物学．武汉：汉大学出版社．1994
15 葛颂，洪德元．遗传多样性及其检测方法．见：钱迎倩，马克平．生物多样性研究的原理和方法．北京：中国科学技术出版社．1994
16 Hamrick J L. Isozymes, analysis of genetic structure of plant populations. In Soltis D, Soltis P. (eds) Isozymes in Plant Biology. Washington: Dioscorides Press, 1989, 87～105
17 Lewontin R C, Hubby J L. A molecular approach to the study of genic heterozygosity in natural populations. Ⅱ. Amount of variation and degree of heterozygosity in natural population of Drosophilla psudoobscura. Genetics. 1966, 54: 595～609
18 Hubby J L, Lewontin R C. A molecular approach to the study of genic heterozygosity in natural populations. Ⅰ. The number of alleles at different loci in Drosophilla psudoobscura. Genetics. 1966, 54: 577～594
19 Selander R K, Yang S Y. Protein polymorphism and genetic heterozygosity in a wild populations of house mouse(Mus musculus) Genetics. 1969, 63: 653～667
20 Gottlieb L. D., Evolutionary relationships in the outcrossing diploid annual species of Stephanomeria(Compositae). Evolution. 1971b, 25: 312～329
21 Soltis, D. E., C. H. Haufler and G. J. Gastony. Detecting enzyme variation in the fern genus Bommeria: an analysis of methodology. Syst. Bot. 1980, 5: 30～38
22 Cummins. H, R. Wyatt. Genetic variability in natural populations of the moss Atrichum angustatum. Bryologist. 1981(84)30～38
23 Brown A H D. Isozymes, plant population genetic structure, genetic conservation. Theor. Appl. Genet.
1978(52): 145～157
24 Brown A H D. Enzyme polymorphism in plant populations. Theoret. Pop. Biol. 1979(15): 1～42
25 Gottlieb L D. Electrophoretie evidence, plant populations. Prog. Phytochem. 1981(7): 1～46
26 Loveless M P, Hamrick J L. Ecological determinant of genetic structure in plant populations. Ann. Rev. Ecol. Syst. 1984(15): 65～69
27 Hamrick J L, Godt M J W. Allozyme diversity in plant species. In: Brown A H D, Clegg M T, Kahler A L. et al. (eds) Plant Population Genetics, Breeding and Genetic Resources Sunderland: Sinauer. 1990: 43～46
28 Ehrlich P R, Wilson E O. Biodiversity studies: science and policy. Science. 1991(253):758～762
29 Ehrlich P R. Enhancing the status of population biology. Trends Ecol. Evol. 1994(9): 157
30 Moore H D M, Holt W V, Mace G M. Biotechnology and the conservation of genetic diversity. Oxford: Oxford Science Publications. 1992
31 Milligan B G et al. Conservation genetics: beyoned the maintenance of marker diversity. Molec. Ecol. 1994(3): 423～435
32 Rajiv G. Raja, C. G. Tauer, Robert E Wittwer, and Yinghua Huang, 1997, Isoenyme variation and genetic structure in natural populations of shortleaf pine(Pinus echmata). Can. J. For. Res. 27: 740～749
33 胡守荣，夏铭，等．林木遗传多样性研究方法概况．东北林业大学学报．2001，29(3)：72～75
34 葛颂，王明庥，陈乐武．用同工酶研究马尾松群体的遗传结构．林业科学．1988，24(4)：399～409．
35 解荷锋．马尾松天然群体的遗传结构．南京林业大学学报．1990，14(4)：36～42．
36 黄启强，王莲辉，户丸信弘，等．马尾松天然群体同工酶遗传变异[J]．遗传学报．1995，22(2)：142～151．
37 李丹，彭少麟．三个不同海拔梯度马尾松种群的遗传多样性及其与生态因子的相关性．生态学报．2001，21(3)：415～421
38 查天山．青海云杉天然群体中等位酶变异的研究．硕士学位论文．1989
39 杨一平，尹瑞雪，张军丽．红皮云杉自然群体遗传多样性及遗传分化的研究．植物学报．1993，35(6)：458～465
40 张含国，高士新，等．长白落叶松天然群体遗传结构的研究．东北林业大学学报．1995，23(6)：21～30
41 钟敏，王洪新，胡志昂，等．干旱和湿润生境下辽东栎群体遗传结构及其适应意义．植物学报．1995，37(9)：661～668
42 李力．青岛耐冬山茶的多样性(Ⅱ)—居群的遗传多样性分析．生物多样性．1996，4(1)：1～6
43 葛颂．王海群，张灿明，等．八面山银杉林的遗传多样性和群体分化[J]．植物学报，1997，39(3)：266～271
44 夏兰琴，蒋尤泉，阎福林．扁蓿豆遗传多样性的研究．中国草地．1997(2)：30～35
45 朱晓琴．等．鹅掌楸居群遗传结构及其保护对策．植物资源与环境．1997，6(4)：7～14
46 李宽钰．青杨的遗传分化．植物学报．1997，39(8)：753～758
47 董玉芝，白根本．用同工酶研究胡杨天然群体遗传结构．东北林业大学学报．1998，26(6)：16～20
48 陈小勇，宋永昌．华东地区青冈种群等位酶变异的研究．植物资源与环境．1995，4(4)：10～16
49 陈小勇，王希华，宋永昌．华东地区青冈种群的遗传多样性及遗传分化．植物学报．1997，39(2)：149～
155
50 陈小勇，宋永昌．安徽黄山西部青冈种群微生环境遗传分化的研究．植物资源与环境．1998，7(1)：10～14
51 王可青，葛颂，董鸣．根茎禾草沙鞭的等位酶变异及克隆多样性．植物学报．1999，41(5)
52 郎萍，黄宏文．栗属中国特有种居群的遗传多样性及地域差异．植物学报．1999，41(6)
53 葛颂，洪德元．濒危物种裂叶沙参及其近缘广布种泡沙参的遗传多样性研究．遗传学报．1999，26(4)：410～417．
54 葛颂，王可青，董鸣．毛乌素沙地根茎灌木羊柴的遗传多样性和克隆结构．植物学报．1999，41(3)
55 周琼，周厚高．南宁地区蜈蚣蕨居群的遗传多样性分析．广西农业生物科学．1999，18(4)
56 李俊清．中国水青冈种内种间遗传多样性的初步研究．生物多样性．1996．4(2)：63～68
57 李俊清．吴刚，刘雪萍．四川南江两种水青冈种群遗传多样性初步研究．生态学报．1999(1)
58 祖元刚，张恒庆．天然红松林等位酶研究[J]．植物研究．1999，19(1)：75～79
59 冯兆华，张宗俭．野燕麦种群遗传多样性的聚类分析研究．植物保护．1999年 第2期No．2 1999
60 许东河，高忠，田清震，等．中国一年生野生大豆群体的遗传多样性研究．应用与环境生物学报．1999，5(5)
61 段飞舟，曹瑞，等．濒危植物半日花的遗传多样性和居群分化．中国学术期刊文摘．2000，6(2)：217～219
62 高连明，张长芹，王中仁．九种杜鹃属植物的遗传分化研究．广西植物．2000，20(4)：377～382
63 李建强，张敏华，等．珙桐的等位酶位点变异分析．武汉植物学研究．2000，18(3)：247～249
64 宋志平，汪小凡，潘明清．花蔺和黄花蔺居群遗传结构比较研究．武汉植物学研究．2000，18(2)：90-97
65 邱英雄，黄爱军，傅承新．明党参的遗传多样性研究．植物分类学报．2000，38(2)：111～121
66 陈少瑜．云南红豆杉(Taxus yunnanensis)居群的等位酶分析方法．西北林学院学报．2000，15(4)：10～15
67 李巧明，许再富．版纳青梅居群的遗传多样性和群体分化．云南植物研究．2001，23(2)：201～208
68 李巧明，许再富．龙脑香科植物望天树的居群遗传结构及分化．云南植物研究．2001，23(3)：313～321
69 崔继哲、曲来叶、祖元刚．微生境下羊草两种生态型种群的遗传多样性及遗传分化——等位酶分析．生态学报．2000，20(3)：434～439
70 崔继哲，祖元刚，等．松嫩草原羊草种群遗传分化的研究．植物研究．2001，21(1)：116～125
71 刘占林，李珊．等．华山新麦草自然居群的遗传结构和种内遗传多态性研究．遗传学报．2001．28(8)：769～777
72 于林清．王照兰，等．黄花苜蓿野生种群遗传多样性的初步研究．中国草地．2001，23(1)：23～25
73 王振月．匡海学．龙牙木天然种群遗传多样性及遗传分化植物研究．2001，21(3)：420～423
74 乌云塔娜，张胜利．等．沙柳等位酶分析．内蒙古农业大学学报(自然科学版)．2001，22(3)：74～79
75 惠红，刘启新，刘梦华．中国沿海中部珊瑚菜居群等位酶变异及其遗传多样性．植物资源与环境学报．2001，10(3)：1～6
76 张颖娟，杨持．西鄂尔多斯特有种四合木种群遗传多样性及遗传分化研究．生态学报．2001．21(3)：506-511
77 黎中宝，林鹏．不同纬度地区桐花树种群的遗传多样性研究．集美大学学报．2001，6(1)：39～45
78 黄英金，李桂花，陈大洲，等．东乡野生稻等位酶位点遗传多样性的初步研究．江西农业大学学报．2002，24(1)：1～5
79 苟文龙，白史且，等．假俭草遗传多样性及应用研究进展．中国草地．2002，24(2)：48～53
80 周世良，叶文国．夏腊梅的遗传多样性及其保护生物多样性．2002，10(1)：1～6
81 汪小凡，廖万金，宋志平．小毛茛居群的遗传分化及其空间隔离的相关性．生物多样性．2001，9(2)：138～144
82 汪小凡，靳宝锋．小毛茛居群分化研究(Ⅱ)——居群遗传变异的等位酶分析．广西植物．2002，22(1)：71～73
83 罗定泽，侯鑫，赵佐成．西南地区金荞麦居群遗传多样性研究．四川师范大学学报．2002，25(1)：62～65
84 胡能书，万国贤．同工酶技术及其应用．长沙：湖南科学技术出版社．1985
85 熊全沫．同工酶电泳数据的分析及其在种群遗传上的应用．遗传．1986．8(1)：1～5
86 何忠孝，张树政．电泳．北京：科学出版社．1990
87 葛学军．植物遗传多样性研究中等位基因酶分析的遗传参数及其计算方法(综述)．热带亚热带植物学报．1996，4(2)：79～84
88 郭尧君．蛋白质电泳实验技术．北京：科学出版社．1999
89 于应文，胡自治，徐长林，等．东祁连山高寒灌丛植被类型与分布特征．甘肃农业大学学报．1999，34(1)：12～16
90 梅里尔D J．黄瑞复，等译．生态遗传学．北京：科学出版社．1991，44～50
91 唐红．草坪种子品种快速鉴定技术研究．硕士学位论文．2002
92 葛颂．同工酶与林木群体变异研究．南京林业大学学报．1998，12(1)：68～76
93 杨传平，等．兴安落叶松优良种源结构的研究(Ⅱ)—遗传变异及种群分化．东北林业大学学报．1997，25(3)：1～5
94 李进，陈可咏，等．川滇高山栎群体遗传结构的初步研究．北京林业大学学报．1997，19(2)：93～97
95 孙雪新，查天山，陶毅．青海云杉群体同工酶变异的研究．甘肃林业科技．1990，2
96 赵桂仿，Francos Felber, Philippe Kuepfer．阿尔卑斯高山-亚高山黄花茅的群体遗传结构和分化研究．植物分类学报．2001，39(1)：20～30
97 施季森，叶志宏．杉木遗传多态性与多基因位点遗传结构．南京林业大学学报．1993，17(3)：9～15
98 黎中宝，林鹏．白骨壤种群不同年龄级的遗传多样性和遗传分化．厦门大学学报．2001，40(1)：103～109
99 赵桂仿．等．瑞士阿尔卑斯山欧洲落叶松居群的遗传变异和分化．植物学报．2001，43(7)：731～735
100 季维智．宿兵．遗传多样性研究的原理与方法．浙江科学技术出版社．1999．
101 胡守荣，夏铭，等．林木遗传多样性研究方法概况．东北林业大学学报．2001，29(3)：36～41
102 黄培佑．干旱区免灌植被及其恢复．科学出版社．2002