小麦抗锈基因的分子标记
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摘要
采用AFLP技术和方法，对携带Lr34的小麦近等基因系、染色体代换系进行了DNA多态性分析。共筛选了78对EcoRI／MseI引物(上海生工)，筛选获得一对特异性引物(E03：5'-GACTGCGTACCAATTCAAT-3’和M01：5'-GATGAGTCCTGAGTAACAT-3’)，可在抗病亲本中扩增出两条大小分别为240bp和300bp的DNA多态性片段，在感病亲本中未能扩增出同等大小的DNA片段。通过对一条多态性片段(240bp)进行分离克隆和序列测定，表明这一与抗病基因可能有关的DNA多态性片段大小为237bp。根据此序列设计引物，可进一步对抗病亲本进行回检及开展与抗病基因的连锁分析。
根据与持久抗秆锈基因Sr31有关的DNA多态性片段序列，利用Primer 5.0软件共设计出7对特异性引物。通过利用Sr31的小麦近等基因系及其它抗/感材料进行回检筛选，获得Sr31的特异性引物(BR_(41)：5’cac ccc ctt ggt agc aca 3’和BR_(12)：5’agc cag tat cct cca cct cct3’)，可定性扩增DNA特异性区段，其片段大小为331bp，此可用作Sr31的SCAR标记。以Kavkaz和Lovrin13作为供体亲本，以完全感病品种MeNair701作为母本，分别构建了123株和120株F_2代分离群体，苗期抗性鉴定结果表明，二者对小麦秆锈菌优势小种21C_3的抗性系分别由一对显性基因和二对显性互补基因所控制。利用Sr31基因的SCAR标记对F_2代抗感单株进行分子检测，并用QTXb17软件进行连锁遗传分析。结果表明，Sr31的SCAR标记与抗病基因有较紧密的连锁遗传关系。在Kavkaz×McNair701的杂交组合中，SCAR标记与抗秆锈基因Sr31的遗传距离为25.8cM+4.2cM；在Lovrin13×McNair701的杂交组合中，其遗传距离为19.3cM+3.4cM。在小麦抗锈育种中，利用Sr31的SCAR标记进行基因鉴定和辅助选择具有较高的可靠性。
本文还就AFLP技术的可靠性、AFLP分析时应注意的问题、RAPD标记的基因类型、RAPD对易位系的鉴定以及Sr31分子标记的应用前景等问题进行了讨论。
The genes for leaf rust resistance Lr34 and for stem rust resistance Sr31 are all the most important resistance genes against rust fungi in wheat in the world. It is important for utilizing Z,r34 and Sr3l rapidly and effectively in wheat breeding program to develop the molecular markers linked to resistant genes and establish the technical system of molecular marker assistant breeding.
DNA polymorphism of the near isogenic lines and chromosome substitution lines with/without Lr34 were analyzed using AFLP method. A total of 78 random primer pairs were screened to identify the AFLP markers linked to Lr34 gene. Two polymorphic DNA fragments with the molecular weight of 237bp and 300bp respectively were amplified by a pair of specific primers ( E03 : 5'-GACTGCGTACCAATTCAAT -3' and M01: 5'- GATGAGTCCTGAGTAACAT -3' ) in the resistant parents and not in the susceptible parents. The 237bp polymorphic DNA fragment was separated, cloned and sequenced. Based on the sequence, the specific primer pairs could be designed and the linkage analysis between the polymorphic DNA fragment and the resistant gene (Ir34) would be further conducted in the near further.
Of seven specific primer pairs designed with the software of Primer 5.0 according to the previous sequence of the DNA polymorphic fragment related to Sr3l, a gene for stem rust resistance, one primer pair (BR41: 5'cac ccc ctt ggt age aca 3'and BR12: 5'age cag tat cct cca cct cct 3') can produce a 331bp specific band in the resistant parents and without in the susceptible parents of NILs and other materials. Two F2 segregating population of resistance to stem rust sourced from the crossing of Kavkaz McNair701 and Lovrinl3 McNair701 were constructed separately, the former with 123 F2 plants and the later with 120 FI plants. The seedling infection types of F2 plants were recorded based on the scale of Roelfs (1992) after inoculated with the dominant race 21C3 of Puccinia graminis f. sp. tritici. The results of genetic analysis indicated that the stem rust resistance to 21C3 in Kavkaz and Lovrin13 controlled respectively by one dominant gene and two complementary dominant genes. All plants of F2 generation was
separately detected by the specific SCAR marker of Sr31 gene. Genetic linkage between SCAR marker and Sr31 were analyzed by the software of Map Manager QTXb17. The results indicated that the SCAR marker was obviously
linked with the Sr31 gene. The genetic distances is 25.8cM±4.2cM in the combination of Kavkaz D McNair701 and 19.3cM±3.4cM in the combination of Lovrin13 a McNair701 respectively. It suggested that the SCAR marker of Sr31 could provide an useful tool for identifying resistance genes and assistant selection in wheat breeding program.
Several questions were also discussed in this paper that included the reliability and points for attention of AFLP, gene kind of RAPD marker, identification of translocation with RAPD and the prospective of SCAR marker of Sr31 in wheat breeding for resistance.
根据与持久抗秆锈基因Sr31有关的DNA多态性片段序列，利用Primer 5.0软件共设计出7对特异性引物。通过利用Sr31的小麦近等基因系及其它抗/感材料进行回检筛选，获得Sr31的特异性引物(BR_(41)：5’cac ccc ctt ggt agc aca 3’和BR_(12)：5’agc cag tat cct cca cct cct3’)，可定性扩增DNA特异性区段，其片段大小为331bp，此可用作Sr31的SCAR标记。以Kavkaz和Lovrin13作为供体亲本，以完全感病品种MeNair701作为母本，分别构建了123株和120株F_2代分离群体，苗期抗性鉴定结果表明，二者对小麦秆锈菌优势小种21C_3的抗性系分别由一对显性基因和二对显性互补基因所控制。利用Sr31基因的SCAR标记对F_2代抗感单株进行分子检测，并用QTXb17软件进行连锁遗传分析。结果表明，Sr31的SCAR标记与抗病基因有较紧密的连锁遗传关系。在Kavkaz×McNair701的杂交组合中，SCAR标记与抗秆锈基因Sr31的遗传距离为25.8cM+4.2cM；在Lovrin13×McNair701的杂交组合中，其遗传距离为19.3cM+3.4cM。在小麦抗锈育种中，利用Sr31的SCAR标记进行基因鉴定和辅助选择具有较高的可靠性。
本文还就AFLP技术的可靠性、AFLP分析时应注意的问题、RAPD标记的基因类型、RAPD对易位系的鉴定以及Sr31分子标记的应用前景等问题进行了讨论。
The genes for leaf rust resistance Lr34 and for stem rust resistance Sr31 are all the most important resistance genes against rust fungi in wheat in the world. It is important for utilizing Z,r34 and Sr3l rapidly and effectively in wheat breeding program to develop the molecular markers linked to resistant genes and establish the technical system of molecular marker assistant breeding.
DNA polymorphism of the near isogenic lines and chromosome substitution lines with/without Lr34 were analyzed using AFLP method. A total of 78 random primer pairs were screened to identify the AFLP markers linked to Lr34 gene. Two polymorphic DNA fragments with the molecular weight of 237bp and 300bp respectively were amplified by a pair of specific primers ( E03 : 5'-GACTGCGTACCAATTCAAT -3' and M01: 5'- GATGAGTCCTGAGTAACAT -3' ) in the resistant parents and not in the susceptible parents. The 237bp polymorphic DNA fragment was separated, cloned and sequenced. Based on the sequence, the specific primer pairs could be designed and the linkage analysis between the polymorphic DNA fragment and the resistant gene (Ir34) would be further conducted in the near further.
Of seven specific primer pairs designed with the software of Primer 5.0 according to the previous sequence of the DNA polymorphic fragment related to Sr3l, a gene for stem rust resistance, one primer pair (BR41: 5'cac ccc ctt ggt age aca 3'and BR12: 5'age cag tat cct cca cct cct 3') can produce a 331bp specific band in the resistant parents and without in the susceptible parents of NILs and other materials. Two F2 segregating population of resistance to stem rust sourced from the crossing of Kavkaz McNair701 and Lovrinl3 McNair701 were constructed separately, the former with 123 F2 plants and the later with 120 FI plants. The seedling infection types of F2 plants were recorded based on the scale of Roelfs (1992) after inoculated with the dominant race 21C3 of Puccinia graminis f. sp. tritici. The results of genetic analysis indicated that the stem rust resistance to 21C3 in Kavkaz and Lovrin13 controlled respectively by one dominant gene and two complementary dominant genes. All plants of F2 generation was
separately detected by the specific SCAR marker of Sr31 gene. Genetic linkage between SCAR marker and Sr31 were analyzed by the software of Map Manager QTXb17. The results indicated that the SCAR marker was obviously
linked with the Sr31 gene. The genetic distances is 25.8cM±4.2cM in the combination of Kavkaz D McNair701 and 19.3cM±3.4cM in the combination of Lovrin13 a McNair701 respectively. It suggested that the SCAR marker of Sr31 could provide an useful tool for identifying resistance genes and assistant selection in wheat breeding program.
Several questions were also discussed in this paper that included the reliability and points for attention of AFLP, gene kind of RAPD marker, identification of translocation with RAPD and the prospective of SCAR marker of Sr31 in wheat breeding for resistance.
引文
1．白建荣等．分子标记的类型、特点及在育种中的应用．山西农业科学，1999，27(4)：33-38
2．鲍海滢等．矮败小麦近等基因系的分子检测．作物学报，2001．27(4)：541-543
3．蔡健等．AFLP分子标记在作物育种中的应用．安徽农业科学，2002，30(2)：167-169
4．曹晖等．DNA分子指纹图谱与测序技术在中药品质研究中的现状及展望．中国中药杂志，1998，23(11)：643-645
5．曹卫东等．分子标记技术及其在植物营养性状基因研究中的应用．土壤肥料，2001(6)：3-8
6．曹张军等．小麦抗条锈性遗传研究进展．麦类作物学报，2001，21(3)：80-83
7．陈爱平．AFLP技术及其应用．海峡预防医学杂志，2000，6(1)：25-26
8．陈亮．APLP和RPLP标记检测水稻亲本遗传样性比较．中国农业科学，2002，35(6)：589-595
9．陈亮等．RFLP、RAPD、AFLP在水稻农垦58S和1514中多态性比较．植物学通报，2000，17(5)：424-428
10．陈万权等．我国28个小麦品种抗叶锈基因的推导．作物学报，1993，19(3)：268-275
11．陈万权等．利用AFLP遗传连锁图定位大麦苗期对叶锈病的部分抗性基因．遗传学报，1999，26(6)：690-694
12．陈万权，冯洁等．DNA分子标记在植物真菌病害研究中的应用．植物保护学报，1999，26(3)：277-282
13．刁立平等．部分太湖流域粳稻品种的AFLP分析．中国水稻科学，2001，15(1)：60-62
14．裴德翠．AFLP：DNA指纹分析的有力手段．微生物学免疫学进展，2002，20(3)：66-70
15．高欢欢等．DNA指纹技术新进展．细胞生物学杂志，2001，23(4)：196-199
16．高翔等．分子标记技术在植物遗传多样性研究中的应用．河南农业大学学报，2002，36(4)：356-359
17．苟本富等．AFLP分子标记技术及其应用研究进展．渝西学院学报，2002，15(1)：22-30
18．郭晶心等．白菜类蔬菜遗传多样性的AFLP分子标记研究．农业生物技术学报，2002，10(2)：138-143
19．郭军等．DNA分子标记技术在品种鉴定和纯度分析上的应用．种子科技，2002，(4)：217-219
20．韩双艳等．AFLP在分子生物学研究中的应用．生物技术通报，2001(2)：22-25
21．何德等．AFLP分子标记技术及其在林木遗传育种上的应用．湖南林业科技，1999，26(4)：8-17
22．何光华等．利用分子标记预测杂交水稻产量及其构成因素．遗传学报，2002，29(5)：438-444
23．胡胜武等．用RAPD标记分析中国和捷克甘蓝型油菜的遗传多样性．中国油料作物学报，2001，23(1)：1-5
24．黄祖六等．稻米胶稠度基因位点的标记和分析．中国农业科学，2000．33(6)：1-5
25．黄祖六等．稻米直链淀粉含量基因座位的分子标记定位．作物学报，2000，26(6)：777-782
26．何月秋等．稻瘟病菌变异菌株的AFLP分析．菌物系统，2002，21(3)：363-369
27．贾继增，张正斌，DEVOS K等．小麦21条染色体RFLP作图位点遗传多样性分析．中国科学：C辑，2001，31(1)：13-21
28．贾继增等．分子标记种质资源鉴定和分子标记育种．中国农业科学，1996，29(4)：1-10
29．金海国．分子遗传标记及其分析技术的研究进展．延边大学农学学报，2002，24(1)：55-59
30．梁明山等．遗传标记及其在作物品种鉴定中的应用．植物学通报，2001，18(3)：257-265
31．廖红等．低磷胁迫下菜豆根构型性状的QTL定位．农业生物技术学报，2000，8(1)：67-70
32．李本逊等．AFLP在水稻类群划分研究中的应用．种子，2001，116(4)：26-28
33．李传友等．光敏核不育水稻等位突变系的AFLP分析．生物工程学报，2000，16(1)：91-95
34．李造哲等．分子标记及其在植物育种中的应用．内蒙古农业大学学报，2000，21(3)：102-105
35．李振歧，商鸿生．小麦锈病及其防治．上海科技出版社．1989
36．李玥莹等．分子标记技术及其在作物遗传育种研究上的应用．沈阳农业大学学报，2001，32(2)：150-154
37．凌杏元．AFLP在水稻线粒体DNA研究中的应用．武汉大学学报(自然科学版)，1999，45(4)：477-479
38．凌杏元等．红莲型水稻与细胞质雄性不育相关mtDNA．片段的分离及序列测定实验生物学报，2000，33(2)：151-155
39．刘峰等．大豆基因组F连锁群较高密度图谱的构建和基因定位．自然科学进展，2000，10(11)：1012-1017
40．刘峰等．大豆遗传图谱的构建和分析．遗传学报，2000，27(11)：1018-1026
41．刘列钊等．小麦抗锈基因的RAPD标记．西南农业大学二○○○届硕士论文．
42．吕振岳等．AFLP标记及在植物中的应用．生物技术，2001，11(6)：40-43
43．卢钢等．CDNA-AFLP技术在植物表达分析上的应用．植物学通报，2002，19(1)：103-108
44．罗安定等．AFLP在橡胶树优异种质研究中的应用．植物学报，2001，43(9)：941-947
45．罗林广等．分子标记及其在作物遗传育种中的应用．江西农业学报，1997，9(1)：45-54
46．罗培高．AFLP分子标记及其在作物遗传育种中的应用与前景．四川农业大学学报，2001，19(4)：406-410
47．马翠兰等．DNA分子标记技术在果树上的应用．内蒙古农业大学学报，2001，22(2)：5-12
48．马渐新等．小麦抗条锈病基因定位及分子标记研究进展．生物技术通报，1999(1)：1-6
49．彭建营等．分子标记技术及其在果树种质资源研究上的应用．山东农业大学学报(自然科学版)，2001，32(1)：103-106
50．乔爱民等．分子标记在植物上的应用．长江蔬菜，1999，(4)：1-4
51．祁仲夏等．稻属基因组间相关性的AFLP分析．南开大学学报(自然科学)，2001，34(3)：74-80
52．乔爱民等．分子标记在植物上的应用．长江蔬菜，1999，(4)：1-4
53．任育红等．发展中的食品鉴定技术．食品研究与开发，2001，22(6)：5-7
54．沈金雄等．甘蓝型油菜遗传多样性及其与杂种表现的关系．作物学报，2002，28(5)：622-627
55．宋婉等．果树种质资源鉴定及DNA指纹图谱应用研究进展．北京林业大学学报，2000，22(1)：76-80
56．孙德岭等．白菜类蔬菜亲缘关系的AFLP分析．园艺学报，2001，28(4)：331-335
57．陶文静．AFLP技术及其在植物基因组研究中的应用．世界农业，1998．(12)：16-19
58．田雷等．AFLP标记技术在大白菜种子真实性及品种纯度鉴定中的应用．中国蔬菜，2001(4)：29-30
59．田雷等．AFLP标记技术在大白菜种子真实性及品种纯度鉴定中的应用．中国蔬菜，2001(4)：29-30
60．田雷等．AFLP标记技术在鉴定甘蓝种子真实性及品种纯度中的应用．生物技术通报，2001，(3)：30-41
61．田清震等．大豆DNA扩增片段长度多态性(AFLP)研究．大豆科学，2000，19(3)：210-217
62．涂金星等．甘蓝型油菜隐性核不育遗传标记的初步研究．作物学报，1999，25(6)：669-673
63．王发园等．分子标记技术在丛枝菌根研究中的应用现状．莱阳农学院学报，2002，19(2)：119-123，
64．王凤乐，吴立人，谢水仙．小麦抗锈基因分析方法．世界农业，1993，1：36-38
65．王峥峰等．荷木种群在不同群落中的分子生态研究．中山大学学报(自然科学版)．2000，39(5)：120-122
66．王红梅等．SSR标记技术及其在植物遗传学中的应用．西北师范大学学报(自然科学版)，2003．39(1)：113-116
67．王劲松等．分子标记及其在葡萄属植物研究上的应用．河北职业技术师范学院学报，2001，15(4)：54-57
68．王平荣等．分子标记及其在作物遗传育种研究中的应用．种子，2001(3)：38-41
69．王学德等．彩色棉雄性不育系、保持系和恢复系的选育及DNA指纹图谱的构建．浙江大学学报(农业与生命科学版)，2002，28(1)：1-6
70．王艳红等．分子标记在我国野生稻种质资源研究中的应用．干早地区农业研究，2002，20(2)：93-96
71．王颖等．分子标记技术在农业上的应用．作物研究，1998(4)：41-45
72．王峥峰等．厚壳桂种群在不同群落中的分子生态研究．应用生态学报，2000，11(3)：342-344
73．王峥峰等．厚壳桂种群在不同群落中的AFLP分析．中山大学学报(自然科学
版)，2000，39(4)：125-127
74．万平等．SSRs标记与植物遗传育种研究．安徽农业大学学报，1998，25(1)：92-95
75．翁跃进等．花生AFLP指纹图谱．中国油料作物学报．1999，21(1)：10-12
76．伍春莲等．AFLP在蔬菜遗传育种中的应用．长江蔬菜，2002，(4)：28-30
77．吴立人等．我国小麦条锈病持续控制的策略．中国农业科学，2000，33(5)：46-54
78．吴稷琦等．分子标记技术的进展及其应用．高技术通讯，2001(4)：99-103
79．吴敏生等．AFLP分子标记在玉米优良自交系优势群划分中的应用．作物学报，2000．26(1)：9-13
80．吴晓雷等．大豆属遗传多样性和进化关系．自然科学进展，2001，11(7)：689-698
81．吴少慧等．RAPD技术在微生物生物多样鉴定中的应用．微生物学杂志，2000，20(2)：44-47
82．邵映田，牛永春等．小麦抗条锈病基因Yr10的AFLP标记．科学通报．2001，4(8)：699-672
83．向碧霞等．分子标记在杨树遗传改良中的应用．南京林业大学学报，1998，22(2)：83-87
84．肖复明等．分子标记技术与物种多样性保护．江西林业科枝，2002(1)：25-28
85．辛业芸．分子标记技术在植物学研究中的应用．湖南农业科学，2002，(4)：9-12
86．熊庆等．几种分子生物学方法在真菌中的应用．贵州农业科学，2002，30(3)：69-73
87．徐胜等．分子标记技术在草坪草遗传改良中的应用．草业科学，2001，18(6)：51-54
88．徐世昌等．小麦京核891-1抗条锈病主效、微效基因的遗传分析．中国农业科学，2001，34(3)：272-276
89．杨文鹏．DNA分子标记及其在遗传育种上的应用．种子，1997，88(2)：30-33
90．杨志清等．分子标记在作物改良中的应用．云南农业科技，2002(5)：20-22
91．易干军．粉蕉、大蕉和龙牙蕉的AFLP分类研究．园艺学报，2002，29(5)：413-417
92．尹佟明等．AFLP分子标记及其在植物育种上的应用．生物工程进展，1997，17(1)：6-12
93．于永红，李云海，马荣荣．用微卫星DNA标记建立宁2A的指纹图谱．中国水稻科学，2001，15(3)：216-217．
94．翟文强等．哈密瓜杂交种纯度的AFLP指纹鉴定．园艺学报，2002，29(6)：587-588
95．张翠茹，刘大群．小麦抗叶锈病基因定位及分子标记研究进展．河北农业大学学报，2001，24(1)：108-112
96．张春庆．DNA指纹技术-AFLP的优化．山东农业大学学报(自然科学版)，2002，33(1)：89-92
97．张德强等．分子标记技术在杨树遗传变异及系统分类中的应用．北京林业大学学报，2001，23(1)：76-80
98．张海英等．分子标记技术概述(上、下)．长江蔬菜，2001，(2)：4-6，15-16
99．张军丽等．鹤山人工林大叶相思种群遗传结构的AFLP分析．应用生态学报，2001，12(4)：491-495
100．张军丽等．黑石顶南亚热带常绿阔叶林优势种群黄果厚壳桂的AFLP分析．生态学报，2001，21(3)：391-398
101．张绮纹．分子标记在林业辅助选择育种中的应用．世界林业研究，1996，(6)：24-29
102．张跃等．PCR技术新应用与水产分子生物学研究．农业生物技术学报，1999，7(2)：193-200
103．赵中秋．分子标记的发展及其在植物研究中的应用．福建热作科技，2000，25(4)：13-16
104．郑成超等．DNA分子标记技术与作物品种纯度鉴定．山东农业大学学报，1997，28(4)：
105．赵君，几种常用的分子标记技术的比较．内蒙古农业科技．1999，(3)：32-33
106．赵中秋．分子标记的发展及其在植物研究中的应用．福建热作科技，2000，25(4)：13-16
107．郑晓鹰等．大白菜耐热性分子标记的研究．中国农业科学，2002，35(3)：309-313
108．钟鸣，牛永春．DNA分子标记技术在小麦抗锈病基因研究中的应用．植物保护，2000，26(2)．32-35
109．周国辉等．番木瓜两性基因的RAPD标记．热带亚热带植物学报，2001，9(3)：190-193
110．周衮晨等．滨麦抗条锈病基因的染色体定位和分子标记．遗传学报，2001，28(9)：864-869
111．朱文进等．分子标记AFLP及其在遗传分析中应用．动物科学与动物医学，2001，19(5)：21-23
112．祝军等．果树品种(品系)鉴定技术研究进展．河南农业大学学报，2000，34(4)：371-375
113．朱桂清．小麦抗秆锈病基因推导的计算机应用程序及应用．沈阳农业大学学报，1998，129(3)：205-209
114．邹亚飞．棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)致病型AFLP分析与分子鉴定．西南农业大学二○○一届硕士学位论文
115. Ausemus E R, Harring J B, Retiz I P, et al. A summary of genetic studies in hexaploid and tetraploid wheats[J], Agron J, 1946, 38: 1082-1099.
116. Autrique E. Singh R P, Tanksley S D, et al. Molecular markers for four leaf rust resistance genes introgressed into wheat from wild relatives[J]. Genome, 1995, 38:75-83
117. AubEque J E. RFLP mapping of genes associated with different agronomic truits and disease resistance in wheat[J]. Abstract of Internation Plant Genome Ⅲ. 1995. p8. San Diego, USA
118. Ballvora A. Marker enrichment and high-resolution map of the segment of potato chromosome Vll harboring the nematode resistance gene Grol (J).Mol Gen Genet 1995,249(1):82-90
119. Chao S, Sharp P J, Worland A J, et al. RFLP-based genetic maps of wheat homoeologous group 7 chromosomes. Thero. Appl. Genet, 1989,78:495-504
120. Chen X M, Jones S S, Line R D. Phytopathology, 1995, 85: 375
121. Feuilier C, Messmer M, Schachermayr G, et al. Genetic and physical characterization of the Lrl leaf rust resistance locus in wheat(Triticum aestiuon L.)[J].Mol Gen Genet, 1995,248:553-562
122. H. Flachowsky, E. Schumann. AFLP 在检测大麻的性别所特有的标记上的应用．邱敦莲泽自Plant Breeding 2001, 120(4):305
123. Leissner C E W, Niessen M L and Vogel R. Use of the technique for the identification and discrimination of Fusarium graminerarum. Cereal Research Communications, 1997(25): 555—556.
124. Loegerring W Q. Mclntosh R A. Burton C R. Computer analysis of disease data to derive hypothetical genetypes for reaction of host varieties to pathogen. Can J Genet Cytol. 1971,13:742-748
125. Mclntosh R A et al. Wheat Rusts: An Atlas of Resistance genes. Australia: CSIRO,1995
126. Naik S., Gill K S, Prakasa Rao V S, et al. Identification of a STS marker linked to the Aegilops speltoides-derived leaf rust resistance gene Lr28 in wheat[J]. Theor Appl Genet, 1998, 97:535-540
127. Mclntosh R A et al. Catalogue of gene symbols for wheat: 2001 Supplenent. Wheat Information Service, 2001, No. 93:40-60
128. Patchara P P, Osborn T C, Williams P H et al. Genetic analysis and identification of amplified fragment length Polymorphism market linded to the alml a virulence gene of Lepeosphaeria mucnlans. Phytopatho, 1998(88): 1068-1072.
129. Robert O, Abelard C, Dedryver F, Identification of molecular markers for the detection of the yellow rust resistance gene Fr17 in wheat. Molecular Breeding, 1999,5:167-175
130. Roelfs A. P. Rust Diseases of Wheat:Concepts and Methods of Disease Managemant. Mexico, D. F:CIMMTY. 1992
131. Rogers S O, Bendich A J. Extraction of DNA from milligram amounts of fresh herbarium and mummified plant tissues. Plant Molecular Biology, 1985, 5: 69
132. Saari, E. E, andJ. M. Prescot, World distribution in relation to economic losses. In the Cereal Rust, Orlando, Florida, Academic Press 1985: 259-298
133. Schachermayr G, Feuiliet C, Kelier B. Molecular markers for the detection of the wheat leaf rust resistance gene Lr10 in diverse genetic backgrounds[J]. Molecular Breeding, 1997, 3:65-74.
134. Schachermayr G, Messmer M, Feuiliet C, et al. Identification of molecular markers linked to the Agropyron elongown-derived leaf rust resistance gene Lr24 in wheat[J]. Theor Appl Genet, 1995, 90:982-990
135. Schachermayr G, Shedler H. Gale M D, et al. Identification and localization of molecular markers linked to the Lr9 leaf rust
resistance gene of wheat[J].Theor Appl Genet, 1994,88:110-115
136. Sleldler H, Schachermayr G, Gale M D, et al. DNA marked-based analysis of near-isogenic wheat lines with Lr9 resistance gene[A].LI Z S, XIN Z Y. Proc. 8th intern. Wheat Genetics Symposium, Vol Ⅱ [C]. Beijing, China: China Agricultural Scitech Press, 1993.813-815
137. Singh R P and Gupta A K. Wheat Leaf rust resistance gene Lr34 in seedlings and adult plants. Plant Disease, 1992, 76:489-491
138. Sun G L, Fahima T, Korol A B, et al. Idetification of molecular markers linked to the Yr15 stripe rust resisitance gene of wheat originated in wild wheat, Triticura dicoccuides[J].Theor Appl Genet. 1997, 95(4): 622-628
139. Landry BS, Hubert N, Crete R, Chiang MS, Lincoln SE, Etoh T. A genetic map for Brassica oleracea based on RFLP markers detected with expressed DNA sequences and mapping of resistance genes to race 2 of Plasmodiophora brassicae (Woronin). Genome, 1992, 35, 409-420
140. Tanksley S D. Mapping polygenes. Annu Rev Genet. 1993, 27:205-233
141. Tsukasa Nunome 等．基于RAPD 和AFLP标记的茄子果形和色泽发育性状的图谱研究．向平摘译自 Breeding Science 51(1): 19-26, 2001
142. Williams J K. Kubelik A R. Libak K J. et al. DNA polymorphism amplified by arbitrary primer and useful as genetic markers. Nucleic Acids Res, 1990,18:6531-6535
143. William H M, Hoisinton D, Singh R P, et aL Detection of quantitative trait loci associated with leaf rust resistance in bread wheat[J].Genome, 1997, 40:253-260
144. Zabeau M, Vos P. Selective restriction fragment amplification: ageneral method for DNA fingerprinting. European patent office publication 1993, 0535858A1
145. Zhong Xia Qi. The molecular characterization of maize B chromosome specific AFLPs. Cell Research. 2002,12(1):63-68
2．鲍海滢等．矮败小麦近等基因系的分子检测．作物学报，2001．27(4)：541-543
3．蔡健等．AFLP分子标记在作物育种中的应用．安徽农业科学，2002，30(2)：167-169
4．曹晖等．DNA分子指纹图谱与测序技术在中药品质研究中的现状及展望．中国中药杂志，1998，23(11)：643-645
5．曹卫东等．分子标记技术及其在植物营养性状基因研究中的应用．土壤肥料，2001(6)：3-8
6．曹张军等．小麦抗条锈性遗传研究进展．麦类作物学报，2001，21(3)：80-83
7．陈爱平．AFLP技术及其应用．海峡预防医学杂志，2000，6(1)：25-26
8．陈亮．APLP和RPLP标记检测水稻亲本遗传样性比较．中国农业科学，2002，35(6)：589-595
9．陈亮等．RFLP、RAPD、AFLP在水稻农垦58S和1514中多态性比较．植物学通报，2000，17(5)：424-428
10．陈万权等．我国28个小麦品种抗叶锈基因的推导．作物学报，1993，19(3)：268-275
11．陈万权等．利用AFLP遗传连锁图定位大麦苗期对叶锈病的部分抗性基因．遗传学报，1999，26(6)：690-694
12．陈万权，冯洁等．DNA分子标记在植物真菌病害研究中的应用．植物保护学报，1999，26(3)：277-282
13．刁立平等．部分太湖流域粳稻品种的AFLP分析．中国水稻科学，2001，15(1)：60-62
14．裴德翠．AFLP：DNA指纹分析的有力手段．微生物学免疫学进展，2002，20(3)：66-70
15．高欢欢等．DNA指纹技术新进展．细胞生物学杂志，2001，23(4)：196-199
16．高翔等．分子标记技术在植物遗传多样性研究中的应用．河南农业大学学报，2002，36(4)：356-359
17．苟本富等．AFLP分子标记技术及其应用研究进展．渝西学院学报，2002，15(1)：22-30
18．郭晶心等．白菜类蔬菜遗传多样性的AFLP分子标记研究．农业生物技术学报，2002，10(2)：138-143
19．郭军等．DNA分子标记技术在品种鉴定和纯度分析上的应用．种子科技，2002，(4)：217-219
20．韩双艳等．AFLP在分子生物学研究中的应用．生物技术通报，2001(2)：22-25
21．何德等．AFLP分子标记技术及其在林木遗传育种上的应用．湖南林业科技，1999，26(4)：8-17
22．何光华等．利用分子标记预测杂交水稻产量及其构成因素．遗传学报，2002，29(5)：438-444
23．胡胜武等．用RAPD标记分析中国和捷克甘蓝型油菜的遗传多样性．中国油料作物学报，2001，23(1)：1-5
24．黄祖六等．稻米胶稠度基因位点的标记和分析．中国农业科学，2000．33(6)：1-5
25．黄祖六等．稻米直链淀粉含量基因座位的分子标记定位．作物学报，2000，26(6)：777-782
26．何月秋等．稻瘟病菌变异菌株的AFLP分析．菌物系统，2002，21(3)：363-369
27．贾继增，张正斌，DEVOS K等．小麦21条染色体RFLP作图位点遗传多样性分析．中国科学：C辑，2001，31(1)：13-21
28．贾继增等．分子标记种质资源鉴定和分子标记育种．中国农业科学，1996，29(4)：1-10
29．金海国．分子遗传标记及其分析技术的研究进展．延边大学农学学报，2002，24(1)：55-59
30．梁明山等．遗传标记及其在作物品种鉴定中的应用．植物学通报，2001，18(3)：257-265
31．廖红等．低磷胁迫下菜豆根构型性状的QTL定位．农业生物技术学报，2000，8(1)：67-70
32．李本逊等．AFLP在水稻类群划分研究中的应用．种子，2001，116(4)：26-28
33．李传友等．光敏核不育水稻等位突变系的AFLP分析．生物工程学报，2000，16(1)：91-95
34．李造哲等．分子标记及其在植物育种中的应用．内蒙古农业大学学报，2000，21(3)：102-105
35．李振歧，商鸿生．小麦锈病及其防治．上海科技出版社．1989
36．李玥莹等．分子标记技术及其在作物遗传育种研究上的应用．沈阳农业大学学报，2001，32(2)：150-154
37．凌杏元．AFLP在水稻线粒体DNA研究中的应用．武汉大学学报(自然科学版)，1999，45(4)：477-479
38．凌杏元等．红莲型水稻与细胞质雄性不育相关mtDNA．片段的分离及序列测定实验生物学报，2000，33(2)：151-155
39．刘峰等．大豆基因组F连锁群较高密度图谱的构建和基因定位．自然科学进展，2000，10(11)：1012-1017
40．刘峰等．大豆遗传图谱的构建和分析．遗传学报，2000，27(11)：1018-1026
41．刘列钊等．小麦抗锈基因的RAPD标记．西南农业大学二○○○届硕士论文．
42．吕振岳等．AFLP标记及在植物中的应用．生物技术，2001，11(6)：40-43
43．卢钢等．CDNA-AFLP技术在植物表达分析上的应用．植物学通报，2002，19(1)：103-108
44．罗安定等．AFLP在橡胶树优异种质研究中的应用．植物学报，2001，43(9)：941-947
45．罗林广等．分子标记及其在作物遗传育种中的应用．江西农业学报，1997，9(1)：45-54
46．罗培高．AFLP分子标记及其在作物遗传育种中的应用与前景．四川农业大学学报，2001，19(4)：406-410
47．马翠兰等．DNA分子标记技术在果树上的应用．内蒙古农业大学学报，2001，22(2)：5-12
48．马渐新等．小麦抗条锈病基因定位及分子标记研究进展．生物技术通报，1999(1)：1-6
49．彭建营等．分子标记技术及其在果树种质资源研究上的应用．山东农业大学学报(自然科学版)，2001，32(1)：103-106
50．乔爱民等．分子标记在植物上的应用．长江蔬菜，1999，(4)：1-4
51．祁仲夏等．稻属基因组间相关性的AFLP分析．南开大学学报(自然科学)，2001，34(3)：74-80
52．乔爱民等．分子标记在植物上的应用．长江蔬菜，1999，(4)：1-4
53．任育红等．发展中的食品鉴定技术．食品研究与开发，2001，22(6)：5-7
54．沈金雄等．甘蓝型油菜遗传多样性及其与杂种表现的关系．作物学报，2002，28(5)：622-627
55．宋婉等．果树种质资源鉴定及DNA指纹图谱应用研究进展．北京林业大学学报，2000，22(1)：76-80
56．孙德岭等．白菜类蔬菜亲缘关系的AFLP分析．园艺学报，2001，28(4)：331-335
57．陶文静．AFLP技术及其在植物基因组研究中的应用．世界农业，1998．(12)：16-19
58．田雷等．AFLP标记技术在大白菜种子真实性及品种纯度鉴定中的应用．中国蔬菜，2001(4)：29-30
59．田雷等．AFLP标记技术在大白菜种子真实性及品种纯度鉴定中的应用．中国蔬菜，2001(4)：29-30
60．田雷等．AFLP标记技术在鉴定甘蓝种子真实性及品种纯度中的应用．生物技术通报，2001，(3)：30-41
61．田清震等．大豆DNA扩增片段长度多态性(AFLP)研究．大豆科学，2000，19(3)：210-217
62．涂金星等．甘蓝型油菜隐性核不育遗传标记的初步研究．作物学报，1999，25(6)：669-673
63．王发园等．分子标记技术在丛枝菌根研究中的应用现状．莱阳农学院学报，2002，19(2)：119-123，
64．王凤乐，吴立人，谢水仙．小麦抗锈基因分析方法．世界农业，1993，1：36-38
65．王峥峰等．荷木种群在不同群落中的分子生态研究．中山大学学报(自然科学版)．2000，39(5)：120-122
66．王红梅等．SSR标记技术及其在植物遗传学中的应用．西北师范大学学报(自然科学版)，2003．39(1)：113-116
67．王劲松等．分子标记及其在葡萄属植物研究上的应用．河北职业技术师范学院学报，2001，15(4)：54-57
68．王平荣等．分子标记及其在作物遗传育种研究中的应用．种子，2001(3)：38-41
69．王学德等．彩色棉雄性不育系、保持系和恢复系的选育及DNA指纹图谱的构建．浙江大学学报(农业与生命科学版)，2002，28(1)：1-6
70．王艳红等．分子标记在我国野生稻种质资源研究中的应用．干早地区农业研究，2002，20(2)：93-96
71．王颖等．分子标记技术在农业上的应用．作物研究，1998(4)：41-45
72．王峥峰等．厚壳桂种群在不同群落中的分子生态研究．应用生态学报，2000，11(3)：342-344
73．王峥峰等．厚壳桂种群在不同群落中的AFLP分析．中山大学学报(自然科学
版)，2000，39(4)：125-127
74．万平等．SSRs标记与植物遗传育种研究．安徽农业大学学报，1998，25(1)：92-95
75．翁跃进等．花生AFLP指纹图谱．中国油料作物学报．1999，21(1)：10-12
76．伍春莲等．AFLP在蔬菜遗传育种中的应用．长江蔬菜，2002，(4)：28-30
77．吴立人等．我国小麦条锈病持续控制的策略．中国农业科学，2000，33(5)：46-54
78．吴稷琦等．分子标记技术的进展及其应用．高技术通讯，2001(4)：99-103
79．吴敏生等．AFLP分子标记在玉米优良自交系优势群划分中的应用．作物学报，2000．26(1)：9-13
80．吴晓雷等．大豆属遗传多样性和进化关系．自然科学进展，2001，11(7)：689-698
81．吴少慧等．RAPD技术在微生物生物多样鉴定中的应用．微生物学杂志，2000，20(2)：44-47
82．邵映田，牛永春等．小麦抗条锈病基因Yr10的AFLP标记．科学通报．2001，4(8)：699-672
83．向碧霞等．分子标记在杨树遗传改良中的应用．南京林业大学学报，1998，22(2)：83-87
84．肖复明等．分子标记技术与物种多样性保护．江西林业科枝，2002(1)：25-28
85．辛业芸．分子标记技术在植物学研究中的应用．湖南农业科学，2002，(4)：9-12
86．熊庆等．几种分子生物学方法在真菌中的应用．贵州农业科学，2002，30(3)：69-73
87．徐胜等．分子标记技术在草坪草遗传改良中的应用．草业科学，2001，18(6)：51-54
88．徐世昌等．小麦京核891-1抗条锈病主效、微效基因的遗传分析．中国农业科学，2001，34(3)：272-276
89．杨文鹏．DNA分子标记及其在遗传育种上的应用．种子，1997，88(2)：30-33
90．杨志清等．分子标记在作物改良中的应用．云南农业科技，2002(5)：20-22
91．易干军．粉蕉、大蕉和龙牙蕉的AFLP分类研究．园艺学报，2002，29(5)：413-417
92．尹佟明等．AFLP分子标记及其在植物育种上的应用．生物工程进展，1997，17(1)：6-12
93．于永红，李云海，马荣荣．用微卫星DNA标记建立宁2A的指纹图谱．中国水稻科学，2001，15(3)：216-217．
94．翟文强等．哈密瓜杂交种纯度的AFLP指纹鉴定．园艺学报，2002，29(6)：587-588
95．张翠茹，刘大群．小麦抗叶锈病基因定位及分子标记研究进展．河北农业大学学报，2001，24(1)：108-112
96．张春庆．DNA指纹技术-AFLP的优化．山东农业大学学报(自然科学版)，2002，33(1)：89-92
97．张德强等．分子标记技术在杨树遗传变异及系统分类中的应用．北京林业大学学报，2001，23(1)：76-80
98．张海英等．分子标记技术概述(上、下)．长江蔬菜，2001，(2)：4-6，15-16
99．张军丽等．鹤山人工林大叶相思种群遗传结构的AFLP分析．应用生态学报，2001，12(4)：491-495
100．张军丽等．黑石顶南亚热带常绿阔叶林优势种群黄果厚壳桂的AFLP分析．生态学报，2001，21(3)：391-398
101．张绮纹．分子标记在林业辅助选择育种中的应用．世界林业研究，1996，(6)：24-29
102．张跃等．PCR技术新应用与水产分子生物学研究．农业生物技术学报，1999，7(2)：193-200
103．赵中秋．分子标记的发展及其在植物研究中的应用．福建热作科技，2000，25(4)：13-16
104．郑成超等．DNA分子标记技术与作物品种纯度鉴定．山东农业大学学报，1997，28(4)：
105．赵君，几种常用的分子标记技术的比较．内蒙古农业科技．1999，(3)：32-33
106．赵中秋．分子标记的发展及其在植物研究中的应用．福建热作科技，2000，25(4)：13-16
107．郑晓鹰等．大白菜耐热性分子标记的研究．中国农业科学，2002，35(3)：309-313
108．钟鸣，牛永春．DNA分子标记技术在小麦抗锈病基因研究中的应用．植物保护，2000，26(2)．32-35
109．周国辉等．番木瓜两性基因的RAPD标记．热带亚热带植物学报，2001，9(3)：190-193
110．周衮晨等．滨麦抗条锈病基因的染色体定位和分子标记．遗传学报，2001，28(9)：864-869
111．朱文进等．分子标记AFLP及其在遗传分析中应用．动物科学与动物医学，2001，19(5)：21-23
112．祝军等．果树品种(品系)鉴定技术研究进展．河南农业大学学报，2000，34(4)：371-375
113．朱桂清．小麦抗秆锈病基因推导的计算机应用程序及应用．沈阳农业大学学报，1998，129(3)：205-209
114．邹亚飞．棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)致病型AFLP分析与分子鉴定．西南农业大学二○○一届硕士学位论文
115. Ausemus E R, Harring J B, Retiz I P, et al. A summary of genetic studies in hexaploid and tetraploid wheats[J], Agron J, 1946, 38: 1082-1099.
116. Autrique E. Singh R P, Tanksley S D, et al. Molecular markers for four leaf rust resistance genes introgressed into wheat from wild relatives[J]. Genome, 1995, 38:75-83
117. AubEque J E. RFLP mapping of genes associated with different agronomic truits and disease resistance in wheat[J]. Abstract of Internation Plant Genome Ⅲ. 1995. p8. San Diego, USA
118. Ballvora A. Marker enrichment and high-resolution map of the segment of potato chromosome Vll harboring the nematode resistance gene Grol (J).Mol Gen Genet 1995,249(1):82-90
119. Chao S, Sharp P J, Worland A J, et al. RFLP-based genetic maps of wheat homoeologous group 7 chromosomes. Thero. Appl. Genet, 1989,78:495-504
120. Chen X M, Jones S S, Line R D. Phytopathology, 1995, 85: 375
121. Feuilier C, Messmer M, Schachermayr G, et al. Genetic and physical characterization of the Lrl leaf rust resistance locus in wheat(Triticum aestiuon L.)[J].Mol Gen Genet, 1995,248:553-562
122. H. Flachowsky, E. Schumann. AFLP 在检测大麻的性别所特有的标记上的应用．邱敦莲泽自Plant Breeding 2001, 120(4):305
123. Leissner C E W, Niessen M L and Vogel R. Use of the technique for the identification and discrimination of Fusarium graminerarum. Cereal Research Communications, 1997(25): 555—556.
124. Loegerring W Q. Mclntosh R A. Burton C R. Computer analysis of disease data to derive hypothetical genetypes for reaction of host varieties to pathogen. Can J Genet Cytol. 1971,13:742-748
125. Mclntosh R A et al. Wheat Rusts: An Atlas of Resistance genes. Australia: CSIRO,1995
126. Naik S., Gill K S, Prakasa Rao V S, et al. Identification of a STS marker linked to the Aegilops speltoides-derived leaf rust resistance gene Lr28 in wheat[J]. Theor Appl Genet, 1998, 97:535-540
127. Mclntosh R A et al. Catalogue of gene symbols for wheat: 2001 Supplenent. Wheat Information Service, 2001, No. 93:40-60
128. Patchara P P, Osborn T C, Williams P H et al. Genetic analysis and identification of amplified fragment length Polymorphism market linded to the alml a virulence gene of Lepeosphaeria mucnlans. Phytopatho, 1998(88): 1068-1072.
129. Robert O, Abelard C, Dedryver F, Identification of molecular markers for the detection of the yellow rust resistance gene Fr17 in wheat. Molecular Breeding, 1999,5:167-175
130. Roelfs A. P. Rust Diseases of Wheat:Concepts and Methods of Disease Managemant. Mexico, D. F:CIMMTY. 1992
131. Rogers S O, Bendich A J. Extraction of DNA from milligram amounts of fresh herbarium and mummified plant tissues. Plant Molecular Biology, 1985, 5: 69
132. Saari, E. E, andJ. M. Prescot, World distribution in relation to economic losses. In the Cereal Rust, Orlando, Florida, Academic Press 1985: 259-298
133. Schachermayr G, Feuiliet C, Kelier B. Molecular markers for the detection of the wheat leaf rust resistance gene Lr10 in diverse genetic backgrounds[J]. Molecular Breeding, 1997, 3:65-74.
134. Schachermayr G, Messmer M, Feuiliet C, et al. Identification of molecular markers linked to the Agropyron elongown-derived leaf rust resistance gene Lr24 in wheat[J]. Theor Appl Genet, 1995, 90:982-990
135. Schachermayr G, Shedler H. Gale M D, et al. Identification and localization of molecular markers linked to the Lr9 leaf rust
resistance gene of wheat[J].Theor Appl Genet, 1994,88:110-115
136. Sleldler H, Schachermayr G, Gale M D, et al. DNA marked-based analysis of near-isogenic wheat lines with Lr9 resistance gene[A].LI Z S, XIN Z Y. Proc. 8th intern. Wheat Genetics Symposium, Vol Ⅱ [C]. Beijing, China: China Agricultural Scitech Press, 1993.813-815
137. Singh R P and Gupta A K. Wheat Leaf rust resistance gene Lr34 in seedlings and adult plants. Plant Disease, 1992, 76:489-491
138. Sun G L, Fahima T, Korol A B, et al. Idetification of molecular markers linked to the Yr15 stripe rust resisitance gene of wheat originated in wild wheat, Triticura dicoccuides[J].Theor Appl Genet. 1997, 95(4): 622-628
139. Landry BS, Hubert N, Crete R, Chiang MS, Lincoln SE, Etoh T. A genetic map for Brassica oleracea based on RFLP markers detected with expressed DNA sequences and mapping of resistance genes to race 2 of Plasmodiophora brassicae (Woronin). Genome, 1992, 35, 409-420
140. Tanksley S D. Mapping polygenes. Annu Rev Genet. 1993, 27:205-233
141. Tsukasa Nunome 等．基于RAPD 和AFLP标记的茄子果形和色泽发育性状的图谱研究．向平摘译自 Breeding Science 51(1): 19-26, 2001
142. Williams J K. Kubelik A R. Libak K J. et al. DNA polymorphism amplified by arbitrary primer and useful as genetic markers. Nucleic Acids Res, 1990,18:6531-6535
143. William H M, Hoisinton D, Singh R P, et aL Detection of quantitative trait loci associated with leaf rust resistance in bread wheat[J].Genome, 1997, 40:253-260
144. Zabeau M, Vos P. Selective restriction fragment amplification: ageneral method for DNA fingerprinting. European patent office publication 1993, 0535858A1
145. Zhong Xia Qi. The molecular characterization of maize B chromosome specific AFLPs. Cell Research. 2002,12(1):63-68