滇重楼茎叶总皂甙抗人白血病祖细胞作用的研究
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摘要
目的：探讨从滇重楼茎叶中提取的滇重楼茎叶总皂甙抑制人白血病祖细胞并诱导白血病祖细胞凋亡及其作用机制。方法：①：取20例髓系白血病(AML,CML)患者与20例淋巴细胞白血病(ALL,CLL)患者的新鲜骨髓标本,用淋巴细胞分离液分离出其骨髓中的白血病祖细胞；并用流式细胞仪检测白血病祖细胞的含量。②：采用四甲基偶氮哇蓝(MTT)法测定不同时间和不同浓度的滇重楼茎叶总皂甙对白血病祖细胞的生长抑制作用,计数半数抑制浓度(IC50)；③流式细胞术(FCM)检测滇重楼茎叶总皂甙(3μg／ml)作用髓系白血病祖细胞24,48小时后的凋亡及磷脂酰丝氨酸转位(PS)。结果：①分别用5个浓度的滇重楼茎叶总皂甙(5μg/mL、4μg/mL、3μg/mL、2μg/mL、1μg/mL)处理20例髓系白血病(AML,CML)患者的髓系白血病祖细胞24,48,72小时,并用相同浓度的表柔比星作对比,发现滇重楼茎叶总皂甙可以抑制髓系白血病祖细胞的增殖,其抑制作用呈时间和浓度正依赖关系,作用24、48、72小时后,IC50值分别为(3.583±0.22gg/m1、2.265±0.41μg/m1、2.182±0.54gg/ml)；②分别用3个浓度的滇重楼茎叶总皂甙(5μg/mL、3μg/mL、、2μg/mL)作用淋巴细胞白血病祖细胞24,48,72小时,并用10倍浓度的环磷酰胺作对比,发现滇重楼茎叶总皂甙可以抑制淋巴细胞白血病祖细胞的增殖,其抑制作用呈时间和浓度正依赖关系,作用24、48、72小时后,IC50值分别为(4.023±0.14ugμg/ml、2.826±0.45μg/ml、2.072±0.50μg/ml)；滇重楼茎叶总皂甙对淋巴细胞白血病祖细胞的抑制作用较环磷酰胺较强,且差异具有统计学意义(P<0.05)③用3μg／ml滇重楼茎叶总皂甙处理20例髓系白血病祖细胞24h,48h,发现15.1%,26.4%的细胞出现早期凋亡,而阳性对照组(相同浓度的表柔比星)仅9.5%,15.7%。
结论：滇重楼茎叶总皂甙对人白血病祖细胞有一定的抑制作用,滇重楼茎叶总皂甙可诱导髓系人白血病祖细胞凋亡,诱导凋亡是滇重楼茎叶总皂甙杀伤肿瘤细胞的作用机制之一。
AIM:To explore the inhibiton and apoptosis of Human Leukeamia Progenitor cell induced by Polyphylloside and its mechanisms.
METHODS:(1):20cases of myeloid leukemia (AML, CML) patients and20cases of lymphocytic leukemia (ALL CLL) patients were recruited, Separation out the bone marrow of the human Leukeamia progenitor cell by using Ficoll, And detected leukemia progenitor cells content by Flow Cytometry (FCM)(2):Cell proliferation was tested by MTT with different time and its results were expressed as IC50values.(3):Cell Apoptosis was observed by dual dyeing of AnnexinV-FITC&PI.
RESULTS:(1) Polyphylloside could inhibit the growth of Myeloid human Leukeamia Progenitor, and inhibition of proliferation was concentration-time dependence (2) Polyphylloside could inhibit the growth of Lymphocytic human Leukeamia Progenitor, and inhibition of proliferation was concentration-time dependence, Compared with Cyclophosphamide group, the inhibition level of Polyphylloside was higher than Cyclophosphamide.(3) Polyphylloside could induce apoptosis of Myeloid human Leukeamia Progenitor, and the apoptosis level of Polyphylloside was higher than Epirubicin group.
CONCLUSION:Polyphylloside can inhibit the growth of human Leukeamia Progenitor cell. Polyphylloside can induce apoptosis of human Leukeamia Progenitor cell. The inhibiton effect of Polyphylloside on human Leukeamia Progenitor cell may through the way of apoptosis induction.
结论：滇重楼茎叶总皂甙对人白血病祖细胞有一定的抑制作用,滇重楼茎叶总皂甙可诱导髓系人白血病祖细胞凋亡,诱导凋亡是滇重楼茎叶总皂甙杀伤肿瘤细胞的作用机制之一。
AIM:To explore the inhibiton and apoptosis of Human Leukeamia Progenitor cell induced by Polyphylloside and its mechanisms.
METHODS:(1):20cases of myeloid leukemia (AML, CML) patients and20cases of lymphocytic leukemia (ALL CLL) patients were recruited, Separation out the bone marrow of the human Leukeamia progenitor cell by using Ficoll, And detected leukemia progenitor cells content by Flow Cytometry (FCM)(2):Cell proliferation was tested by MTT with different time and its results were expressed as IC50values.(3):Cell Apoptosis was observed by dual dyeing of AnnexinV-FITC&PI.
RESULTS:(1) Polyphylloside could inhibit the growth of Myeloid human Leukeamia Progenitor, and inhibition of proliferation was concentration-time dependence (2) Polyphylloside could inhibit the growth of Lymphocytic human Leukeamia Progenitor, and inhibition of proliferation was concentration-time dependence, Compared with Cyclophosphamide group, the inhibition level of Polyphylloside was higher than Cyclophosphamide.(3) Polyphylloside could induce apoptosis of Myeloid human Leukeamia Progenitor, and the apoptosis level of Polyphylloside was higher than Epirubicin group.
CONCLUSION:Polyphylloside can inhibit the growth of human Leukeamia Progenitor cell. Polyphylloside can induce apoptosis of human Leukeamia Progenitor cell. The inhibiton effect of Polyphylloside on human Leukeamia Progenitor cell may through the way of apoptosis induction.
引文
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