柔肝抑纤饮抗肝纤维化的疗效机制研究
|
摘要
目的 观察柔肝抑纤饮抗肝纤维化的临床疗效及优势，并揭示其抗肝纤维化作
用机制。
方法 临床观察：以60例早期肝硬化患者为研究对象，治疗时限为6个月。
检测其治疗前后血清的肝功能指标、纤维化指标(HA、LN、PCⅢ、Ⅵ-C)等，并观察
肝脾的多普勒影像学改变。实验研究：用CCI4复制大鼠肝纤维化模型，分为四组，
除模型组及空白对照组外，预防组及治疗组各给药8周。治疗结束后各组检测血清肝
功能指标、纤维化指标(HA、LN、PCⅢ)及过氧化反应指标(SOD、MDA)，肝组织采
用HE染色、Masson染色及Desmin免疫组化技术，半定量观察各组肝细胞变性、胶
原增生及HSC的活化情况。
结果 经统计学处理，早期肝硬化患者症状体征、肝功能、纤维化指标及肝脾
多普勒影像学表现均有不同程度的改善，治疗前后比较差异具有显著性(P<0． 05，
P<0． 01) ；用药实验大鼠的血清学指标有不同程度的改善，肝组织细胞变性、胶原增
生及HSC活化半定量亦较模型组有统计学意义，且治疗组好于预防组。
结论 柔肝抑纤饮通过保护肝细胞、抑制胶原增生及拮抗HSC活化而有确切的
抗肝纤维化作用，能明显改善早期肝硬化患者的临床表现及实验室指标。
Object Observe the curative effect and the advantage caused by Rougany ixianYin in terms of anti-hepatic fibrosis, and reveal the mechanism of it.
Methods Clinic study: 60 patients with early hepatocirrhosis are treated with RouganyixianYin for 6 months. Before and after treatment, test the indexes of hepatic function and the contents of fibrosis including HA, LN, PC III and VI-C in serum, and observe the show of liver and spleen in Doppler. Experimental research: The rats in which hepatic fibrosis model was induced by carbon tetrachloride (CCL4) were divided into three groups. Except the model and control groups, the prevention and therapy groups all received RouganyixianYin in different period for 8 weeks by poured in. After all rats were put into death, tested the indexes of hepatic function and the contents of HA, LN, PC III in fibrosis and SOD, MDA in peroxidation in serum. The histopathology of hepatic tissue was observed by histological examination and Masson' s dye which were performed in hepatic tissue, and immunohistochemical assay which the expression of Desmin was measured by, so we can comprehend the changes of denaturation of hepatic cell
s, hyperplasia of collagen and the activation of hepatic stellate cells in terms of semi-quantity in all groups.
Results After counted with statistics, there were vary amendments in clinic symptoms, hepatic function, the indexes of fibrosis and the show of
liver and spleen in Doppler of 60 patients, and the discrepancies compared between before and after treatment were obvious (p<0.05 or P<0.01). The indexes in serum and the semi-quantities of denaturation of hepatic cell, hyperplasia of collagen and the activation of HSC in hepatic tissue of treatment groups had better amendments than those in model group, and the discrepancies compared among them are significant. The effect in therapy group was better than that in prevention group.
Conclusion RouganyixianYin has accurate curative effects, including the protection of hepatic cells, the depression of collagen' s hyperplasia and the antagonism of hepatic stellate cell' s activation. So it can ameliorate the symptoms and the indexes tested in lab of patients.
用机制。
方法 临床观察：以60例早期肝硬化患者为研究对象，治疗时限为6个月。
检测其治疗前后血清的肝功能指标、纤维化指标(HA、LN、PCⅢ、Ⅵ-C)等，并观察
肝脾的多普勒影像学改变。实验研究：用CCI4复制大鼠肝纤维化模型，分为四组，
除模型组及空白对照组外，预防组及治疗组各给药8周。治疗结束后各组检测血清肝
功能指标、纤维化指标(HA、LN、PCⅢ)及过氧化反应指标(SOD、MDA)，肝组织采
用HE染色、Masson染色及Desmin免疫组化技术，半定量观察各组肝细胞变性、胶
原增生及HSC的活化情况。
结果 经统计学处理，早期肝硬化患者症状体征、肝功能、纤维化指标及肝脾
多普勒影像学表现均有不同程度的改善，治疗前后比较差异具有显著性(P<0． 05，
P<0． 01) ；用药实验大鼠的血清学指标有不同程度的改善，肝组织细胞变性、胶原增
生及HSC活化半定量亦较模型组有统计学意义，且治疗组好于预防组。
结论 柔肝抑纤饮通过保护肝细胞、抑制胶原增生及拮抗HSC活化而有确切的
抗肝纤维化作用，能明显改善早期肝硬化患者的临床表现及实验室指标。
Object Observe the curative effect and the advantage caused by Rougany ixianYin in terms of anti-hepatic fibrosis, and reveal the mechanism of it.
Methods Clinic study: 60 patients with early hepatocirrhosis are treated with RouganyixianYin for 6 months. Before and after treatment, test the indexes of hepatic function and the contents of fibrosis including HA, LN, PC III and VI-C in serum, and observe the show of liver and spleen in Doppler. Experimental research: The rats in which hepatic fibrosis model was induced by carbon tetrachloride (CCL4) were divided into three groups. Except the model and control groups, the prevention and therapy groups all received RouganyixianYin in different period for 8 weeks by poured in. After all rats were put into death, tested the indexes of hepatic function and the contents of HA, LN, PC III in fibrosis and SOD, MDA in peroxidation in serum. The histopathology of hepatic tissue was observed by histological examination and Masson' s dye which were performed in hepatic tissue, and immunohistochemical assay which the expression of Desmin was measured by, so we can comprehend the changes of denaturation of hepatic cell
s, hyperplasia of collagen and the activation of hepatic stellate cells in terms of semi-quantity in all groups.
Results After counted with statistics, there were vary amendments in clinic symptoms, hepatic function, the indexes of fibrosis and the show of
liver and spleen in Doppler of 60 patients, and the discrepancies compared between before and after treatment were obvious (p<0.05 or P<0.01). The indexes in serum and the semi-quantities of denaturation of hepatic cell, hyperplasia of collagen and the activation of HSC in hepatic tissue of treatment groups had better amendments than those in model group, and the discrepancies compared among them are significant. The effect in therapy group was better than that in prevention group.
Conclusion RouganyixianYin has accurate curative effects, including the protection of hepatic cells, the depression of collagen' s hyperplasia and the antagonism of hepatic stellate cell' s activation. So it can ameliorate the symptoms and the indexes tested in lab of patients.
引文
[1] 中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订．病毒性肝炎防治方 案．中华传染病杂志，2001；19(1) ：56-62．
[2] 中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组．酒精性肝病诊断标准．中华 肝脏病杂志，2003：11(2) ：72．
[3] 张育轩，危北海．肝硬化临床诊断、中医辨证和疗效评定标准(试行方案)．中国中 西医结合杂志，1994；14(4) ：237-238．
[4] 翁维良．中药临床药理学，北京：人民卫生出版社，2002，第1版：433．
[5] 中华肝脏病学会肝纤维化学组．肝纤维化诊断及疗效评估共识．中华肝脏病杂 志，2002；10(5) ：327-328．
[6] 李海燕，赵武麒．慢乙肝后早期肝硬的超声评分诊断研究．中国医学影响技 术，1996：12(5) ：362-363．
[7] 许有青，王宝恩，曹海根.肝脏纤维化程度的超声二维图像诊断研究．中华肝脏病 杂志，1998：6(4) ：245．
[8] 张子玉．慢性病毒性肝炎B超与肝脏组织学变化对比分析．交通医学，2001；15 (1) ：117．
[9] 马学惠．肝纤维化动物模型的造模方法．中华肝脏病杂志，1996：4(1) ：58-60．
[10] 顾宏图，胡义扬，徐列明，等．扶正化瘀方预防实验性肝纤维化作用的组织学观 察．中西医结合肝病杂志，1997：7(4) ：224-226．
[11] Ruwart MJ. 16, 16-dimethyl prostaglandin E2 delays collagen formation in nutritional injury in rat liver. Hepatology, 1988;8:617．
[12] 谢玉梅，聂青和，周永兴，等．肝硬化患者肝组织中TIMP-1，TIMP-2的表达．第四 军医大学学报，2000：21(7) ：790-792．
[13] 姜春华．对肝硬化的认识和治疗．新医药学杂志，1975；(1) ：40．
[14] 范宗滂．中药补肾、养阴方抗肝纤维化的实验研究．江苏医药，1989：(5) ：234．
[15] 刘平，王晓玲，刘成海，等．扶正与化瘀．上海中医药大学学报，1999；13(3) ：46-50．
[16] 郭顺根，张玮，江涛，等．活血化瘀方药理血清对离体肝星形细胞影响的研究．北
京中医药大学学报，2003；26(1) ：24-26．
[17] 徐列明，刘平，刘成，等．桃仁提取物抗实验性肝纤维化的作用观察．中国中药杂 志，1994；19(8) ：491-493．
[18] 周萍，陈婕，张赤志，等．抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的实验研究．中国中西医结合 杂志，2001：10(8) ：706-708．
[19] 金树根，王灵台，任家潍，等．柔肝抗纤方对活动性和非活动性肝纤维化大鼠作 用的实验研究.中草药，1994：25(9) ：468-471．
[20] 刘伟英．养肝抗纤汤对改善肝纤维化治疗的疗效观察．中医药研究，2000； 16(6) ：25．
[21] 张友．柔肝汤治疗肝硬化(代偿期)31例临床观察．北京中医，1994；3：42-43．
[22] 胡利平，樊良卿，杨锋，等．鸡血藤对小鼠的LAK、NK细胞的影响．浙江中医学院 学报，1997：21(6) ：29-30．
[23] 黄自平，艾莉，袁顺平，等．当归对四氯化碳所致肝损伤大鼠的抗肝纤维化作用． 中国病理生理杂志，1996；12(2) ：152-153．
[24] 冯景奇，柳钟勋．当归多糖及当归内酯对小鼠细胞免疫功能的影响．中国免疫学 杂志，1998；14(4) ：279-282．
[25] 白润江，于红娟，王嘉军．当归多糖对小鼠血液、胸腺、脾脏中cAMP、cGMP含量 的影响．中医杂志，1998；39(7) ：429．
[26] 冯景奇，柳钟勋．当归内酯拮抗环孢菌素A、氢化可的松及抗肿瘤药物的免疫抑 制作用．中国免疫学杂志，2000；16(1) ：22-24．
[27] 杨利侠，夏慧茹，张菊芳．《傅青主女科》白芍平肝法浅析．山西中医，2000； 16(5) ：51．
[28] 闫秀英，许志华，韩丽莎，等．枸杞子对四氯化碳致大鼠肝脂类过氧化作用的抑 制．包头医学院学报，1998；14(1) ：7-8．
[29] 边纶，沈新生，王燕蓉，等．枸杞多糖对四氯化碳所致小鼠肝损伤修复作用的形 态学研究．宁夏医学杂志，1996；18(4) ：196-198．
[30] 车建途．治疗肝纤维化的药物．中华消化杂志，1993；11：50-51．
[31] 王英凯，王丹，唐彤宇．鳖甲为主的中药治疗肝纤维化的实验室和临床研究．临 床肝胆病杂志，2002；18(4) ：253-254．
[32] 张赤志，田德英．中西医结合肝脏病学，北京：人民军医出版社，2002，第1版： 370．
[33] 王红．脂质过氧化与肝纤维化．国外医学临床生物化学与检验学分册.1998；19 (3) ：138-139．
[34] 吕鹏，罗和生，余保平．大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及肝细胞坏死的动态分析． 胃肠病学和肝病学杂志，2002：11(3) ：213-216．
[35] 沈秀华．凋亡和肝纤维化．国外医学·生理、病理科学与临床分册，2002；22(4) ： 349-351．
[36] 展玉涛，魏红山．转化生长因子-β在肝纤维化形成中的作用及意义．国外医学 免疫学分册，2000；24(4) ：230-233．
[37] 王宝恩．肝星状细胞与肝纤维化．中华肝脏病杂志，2000；8(4) ：197-199．
[38] 张赤志，田德英．中西医结合肝脏病学，北京：人民军医出版社，2002，第1版： 378．
[39] 李东，李兵顺，刘金星．大鼠肝纤维化逆转机制研究．肝脏，2002：7(3) ：183-184．
[40] Iredale JP.Clin Invest, 1998;102:538-549．
[41] 沈秀华．凋亡和肝纤维化．国外医学·生理、病理科学与临床分册，2002：22(4) ： 349-351．
[42] 贾继东，王宝恩．细胞外基质与肝纤维化．基础医学与临床，1992；12：333-336．
[43] Iredale JP ,Tissue inhibitors of metalloproteinase in liver fibrosis. Int J Biochem Cell Biol, 1997;29(1) :43-54．
[44] Arthur MJP, Frep DM. Collagenase and liver fibrosis. J Hepatol, 1995; 22(Suppl,2) : 43-48．
[45] 彭武林．基质转换与肝纤维化．国外医学·生理、病理科学与临床分册，1999； 19(4) ：252-254．
[46] 王宇，黄宇琦．金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化．临床肝胆杂志，2000；16 (1) ：13-15．
[47] 刘景章，赵子粼，高毅，等．基质金属蛋白酶在肝纤维化组织中的表达．广东医学， 2001；22(5) ：374-375．
[48] 张赤志，田德英.中西医结合肝脏病学，北京：人民军医出版社，2002，第1
版：388-389．
[49] 杨丽莎．中药治疗肝纤维化研究概况．四川中医，1999；17(5) ：14．
[50] 王伟芹．中药抗肝纤维化作用机制研究近况．山东中医药大学学报，2003； 27(1) ：75-78．
[51] 张怀宏，翟玉峰，段钟平，等．血清HA、PCⅢ、CⅣ及LN的水平在肝纤维化与早期 肝硬化中的意义．胃肠病学和肝病学杂志，1999；8(3) ：194．
[52] 马玉玲，张培菊，李士玉．肝病患者血清LPOSOD检测结果分析．济宁医学院学 报，1998；21(2) ：43-44．
[53] 扈晓宇，陈云凤，罗丽华．肝组织SOD、LPO水平与肝纤维化血清标志物的相关关 系探讨．成都中医药大学学报，2000；23(3) ：40-41．
[54] 王红．脂质过氧化与肝纤维化．国外医学临床生物化学与检验学分册，1998； 19(3) ：138．
[55] Bedossa P, Houglum K, Trautwein Cet al. Stimulation of collagen α 1(Ⅰ) gene expression is associate with lipid peroxidcation in hepato-cellular injury: a link to tissue fibrosis; Hepatology. 1994;19(5) : 1262?271．
[56] 王先开，钱美宝，赵年丰，等．细胞外基质成分与肝纤维化的关系．肝脏，1999；4 (1) ：38-39．
[57] 程明亮，刘三都．肝纤维化的基础研究及临床，北京：人民卫生出版社，1996，第1 版：198-199．
[58] 李兵顺，王继，刘金星．血清PC、HA、LN联合检测对肝纤维化诊断价值的初步探 讨．中华肝脏病杂志，1996；4(3) ：173-174．
[59] 陆雄，刘平，刘成海，等．肝窦内皮细胞损伤在大鼠肝纤维化形成中的作用．中华 肝脏病杂志，2002：10(6) ：441-444．
[60] 王本祥．现代中药药理学，天津：天津科学技术出版社，1999，第1版．
[61] 王永炎，栗德林．今日中医内科学，北京：人民卫生出版社，2000，第1版：143-180．
[2] 中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组．酒精性肝病诊断标准．中华 肝脏病杂志，2003：11(2) ：72．
[3] 张育轩，危北海．肝硬化临床诊断、中医辨证和疗效评定标准(试行方案)．中国中 西医结合杂志，1994；14(4) ：237-238．
[4] 翁维良．中药临床药理学，北京：人民卫生出版社，2002，第1版：433．
[5] 中华肝脏病学会肝纤维化学组．肝纤维化诊断及疗效评估共识．中华肝脏病杂 志，2002；10(5) ：327-328．
[6] 李海燕，赵武麒．慢乙肝后早期肝硬的超声评分诊断研究．中国医学影响技 术，1996：12(5) ：362-363．
[7] 许有青，王宝恩，曹海根.肝脏纤维化程度的超声二维图像诊断研究．中华肝脏病 杂志，1998：6(4) ：245．
[8] 张子玉．慢性病毒性肝炎B超与肝脏组织学变化对比分析．交通医学，2001；15 (1) ：117．
[9] 马学惠．肝纤维化动物模型的造模方法．中华肝脏病杂志，1996：4(1) ：58-60．
[10] 顾宏图，胡义扬，徐列明，等．扶正化瘀方预防实验性肝纤维化作用的组织学观 察．中西医结合肝病杂志，1997：7(4) ：224-226．
[11] Ruwart MJ. 16, 16-dimethyl prostaglandin E2 delays collagen formation in nutritional injury in rat liver. Hepatology, 1988;8:617．
[12] 谢玉梅，聂青和，周永兴，等．肝硬化患者肝组织中TIMP-1，TIMP-2的表达．第四 军医大学学报，2000：21(7) ：790-792．
[13] 姜春华．对肝硬化的认识和治疗．新医药学杂志，1975；(1) ：40．
[14] 范宗滂．中药补肾、养阴方抗肝纤维化的实验研究．江苏医药，1989：(5) ：234．
[15] 刘平，王晓玲，刘成海，等．扶正与化瘀．上海中医药大学学报，1999；13(3) ：46-50．
[16] 郭顺根，张玮，江涛，等．活血化瘀方药理血清对离体肝星形细胞影响的研究．北
京中医药大学学报，2003；26(1) ：24-26．
[17] 徐列明，刘平，刘成，等．桃仁提取物抗实验性肝纤维化的作用观察．中国中药杂 志，1994；19(8) ：491-493．
[18] 周萍，陈婕，张赤志，等．抗纤软肝冲剂抗肝纤维化的实验研究．中国中西医结合 杂志，2001：10(8) ：706-708．
[19] 金树根，王灵台，任家潍，等．柔肝抗纤方对活动性和非活动性肝纤维化大鼠作 用的实验研究.中草药，1994：25(9) ：468-471．
[20] 刘伟英．养肝抗纤汤对改善肝纤维化治疗的疗效观察．中医药研究，2000； 16(6) ：25．
[21] 张友．柔肝汤治疗肝硬化(代偿期)31例临床观察．北京中医，1994；3：42-43．
[22] 胡利平，樊良卿，杨锋，等．鸡血藤对小鼠的LAK、NK细胞的影响．浙江中医学院 学报，1997：21(6) ：29-30．
[23] 黄自平，艾莉，袁顺平，等．当归对四氯化碳所致肝损伤大鼠的抗肝纤维化作用． 中国病理生理杂志，1996；12(2) ：152-153．
[24] 冯景奇，柳钟勋．当归多糖及当归内酯对小鼠细胞免疫功能的影响．中国免疫学 杂志，1998；14(4) ：279-282．
[25] 白润江，于红娟，王嘉军．当归多糖对小鼠血液、胸腺、脾脏中cAMP、cGMP含量 的影响．中医杂志，1998；39(7) ：429．
[26] 冯景奇，柳钟勋．当归内酯拮抗环孢菌素A、氢化可的松及抗肿瘤药物的免疫抑 制作用．中国免疫学杂志，2000；16(1) ：22-24．
[27] 杨利侠，夏慧茹，张菊芳．《傅青主女科》白芍平肝法浅析．山西中医，2000； 16(5) ：51．
[28] 闫秀英，许志华，韩丽莎，等．枸杞子对四氯化碳致大鼠肝脂类过氧化作用的抑 制．包头医学院学报，1998；14(1) ：7-8．
[29] 边纶，沈新生，王燕蓉，等．枸杞多糖对四氯化碳所致小鼠肝损伤修复作用的形 态学研究．宁夏医学杂志，1996；18(4) ：196-198．
[30] 车建途．治疗肝纤维化的药物．中华消化杂志，1993；11：50-51．
[31] 王英凯，王丹，唐彤宇．鳖甲为主的中药治疗肝纤维化的实验室和临床研究．临 床肝胆病杂志，2002；18(4) ：253-254．
[32] 张赤志，田德英．中西医结合肝脏病学，北京：人民军医出版社，2002，第1版： 370．
[33] 王红．脂质过氧化与肝纤维化．国外医学临床生物化学与检验学分册.1998；19 (3) ：138-139．
[34] 吕鹏，罗和生，余保平．大鼠肝纤维化模型细胞凋亡及肝细胞坏死的动态分析． 胃肠病学和肝病学杂志，2002：11(3) ：213-216．
[35] 沈秀华．凋亡和肝纤维化．国外医学·生理、病理科学与临床分册，2002；22(4) ： 349-351．
[36] 展玉涛，魏红山．转化生长因子-β在肝纤维化形成中的作用及意义．国外医学 免疫学分册，2000；24(4) ：230-233．
[37] 王宝恩．肝星状细胞与肝纤维化．中华肝脏病杂志，2000；8(4) ：197-199．
[38] 张赤志，田德英．中西医结合肝脏病学，北京：人民军医出版社，2002，第1版： 378．
[39] 李东，李兵顺，刘金星．大鼠肝纤维化逆转机制研究．肝脏，2002：7(3) ：183-184．
[40] Iredale JP.Clin Invest, 1998;102:538-549．
[41] 沈秀华．凋亡和肝纤维化．国外医学·生理、病理科学与临床分册，2002：22(4) ： 349-351．
[42] 贾继东，王宝恩．细胞外基质与肝纤维化．基础医学与临床，1992；12：333-336．
[43] Iredale JP ,Tissue inhibitors of metalloproteinase in liver fibrosis. Int J Biochem Cell Biol, 1997;29(1) :43-54．
[44] Arthur MJP, Frep DM. Collagenase and liver fibrosis. J Hepatol, 1995; 22(Suppl,2) : 43-48．
[45] 彭武林．基质转换与肝纤维化．国外医学·生理、病理科学与临床分册，1999； 19(4) ：252-254．
[46] 王宇，黄宇琦．金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化．临床肝胆杂志，2000；16 (1) ：13-15．
[47] 刘景章，赵子粼，高毅，等．基质金属蛋白酶在肝纤维化组织中的表达．广东医学， 2001；22(5) ：374-375．
[48] 张赤志，田德英.中西医结合肝脏病学，北京：人民军医出版社，2002，第1
版：388-389．
[49] 杨丽莎．中药治疗肝纤维化研究概况．四川中医，1999；17(5) ：14．
[50] 王伟芹．中药抗肝纤维化作用机制研究近况．山东中医药大学学报，2003； 27(1) ：75-78．
[51] 张怀宏，翟玉峰，段钟平，等．血清HA、PCⅢ、CⅣ及LN的水平在肝纤维化与早期 肝硬化中的意义．胃肠病学和肝病学杂志，1999；8(3) ：194．
[52] 马玉玲，张培菊，李士玉．肝病患者血清LPOSOD检测结果分析．济宁医学院学 报，1998；21(2) ：43-44．
[53] 扈晓宇，陈云凤，罗丽华．肝组织SOD、LPO水平与肝纤维化血清标志物的相关关 系探讨．成都中医药大学学报，2000；23(3) ：40-41．
[54] 王红．脂质过氧化与肝纤维化．国外医学临床生物化学与检验学分册，1998； 19(3) ：138．
[55] Bedossa P, Houglum K, Trautwein Cet al. Stimulation of collagen α 1(Ⅰ) gene expression is associate with lipid peroxidcation in hepato-cellular injury: a link to tissue fibrosis; Hepatology. 1994;19(5) : 1262?271．
[56] 王先开，钱美宝，赵年丰，等．细胞外基质成分与肝纤维化的关系．肝脏，1999；4 (1) ：38-39．
[57] 程明亮，刘三都．肝纤维化的基础研究及临床，北京：人民卫生出版社，1996，第1 版：198-199．
[58] 李兵顺，王继，刘金星．血清PC、HA、LN联合检测对肝纤维化诊断价值的初步探 讨．中华肝脏病杂志，1996；4(3) ：173-174．
[59] 陆雄，刘平，刘成海，等．肝窦内皮细胞损伤在大鼠肝纤维化形成中的作用．中华 肝脏病杂志，2002：10(6) ：441-444．
[60] 王本祥．现代中药药理学，天津：天津科学技术出版社，1999，第1版．
[61] 王永炎，栗德林．今日中医内科学，北京：人民卫生出版社，2000，第1版：143-180．