陆英药效物质基础研究
|
摘要
本研究以民间常用抗肝炎中药陆英为研究对象，观察了不同溶剂制备的陆英提取物对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤的影响，确定75％乙醇为最佳提取溶剂，经系统溶剂萃取和大孔吸附树脂纯化，确立了陆英75％乙醇提取物的乙酸乙酯层和经大孔吸附树脂纯化后30％乙醇洗脱物为主要有效部位，并进行了初步药效学试验。
采用多种色谱分离技术对有效部位进行了分离纯化，得到了6个单体化合物，通过波谱分析结合理化性质，鉴定了它们的化学结构，分别为：β-谷甾醇、豆甾醇、齐墩果酸、熊果酸、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷，其中2个山奈酚葡萄糖苷为首次从该植物中分离得到的已知化合物。对得到的6个单体化合物进行体外肿瘤细胞生长抑制试验，结果表明熊果酸和齐墩果酸对所选的Bel-7402肝癌细胞生长具有一定的抑制作用。
本研究建立了同时测定陆英中活性成分熊果酸和齐墩果酸含量的反相高效液相色谱分析方法，熊果酸和齐墩果酸分别在2.3～92.0μg·mL~(-1)(r=0.9999)和2.6～104.0μg·mL~(-1)(r=0.9999)范围内线性关系良好，回收率分别为97.6％(RSD=2.1％)和102.1％(RSD=1.7％)。建立了测定陆英中活性成分绿原酸、咖啡酸和2种山奈酚葡萄糖苷的反相高效液相色谱分析方法，绿原酸、咖啡酸、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷分别在12.0～240.0(r=0.9992)，0.40～8.00(r=0.9992)，1.18～23.60(r=0.9982)和1.19～23.80μg·mL~(-1)(r=0.9993)范围内线性关系良好，回收率分别为100.9％(RSD=3.8％)、98.3％(RSD=2.8％)、99.2％(RSD=3.3％)和96.3％(RSD=3.2％)。采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对陆英中的挥发油进行分析，分离出33个组分，鉴定出25个化合物，占挥发油总量的92.8％。
采用正交试验设计，对陆英提取工艺进行优化。以熊果酸、齐墩果酸和绿原酸含量及浸膏得率为考察指标，对提取溶剂用量、提取时间和提取次数3个因素进行优化，确定陆英最佳提取工艺为加入8倍量75％乙醇，回流提取3次，每次1h。
建立了测定大鼠血浆中熊果酸含量的LC-MS分析方法，以甘草次酸为内标，血浆经醋酸酸化，正己烷-二氯甲烷-异丙醇(20：10：1，v／v／v)为提取溶剂，熊果酸在10～1000 ng·mL~(-1)(r≥0.9960)范围内线性关系良好。方法的定量下限为10 ng·mL~(-1)，日内精密度RSD≤7.8％，日间精密度RSD≤8.1％，准确度RE为±4.3％，平均回收率为83.6％。比较研究了大鼠灌胃给予陆英提取液和相当于等量的熊果酸对照品溶液后的药物动力学，测定了熊果酸的血药浓度-时间曲线，计算其相应药物动力学参数。大鼠灌胃给予熊果酸对照品后，大鼠血浆中几乎检测不到熊果酸。而给予陆英提取液后熊果酸在1 h左右达峰，达峰浓度C_(max)约为294.8 ng·mL~(-1)，消除半衰期t_(1／2)为4.3 h。
建立了测定大鼠血浆中绿原酸含量的反相高效液相色谱分析方法，以葛根素为内标，血浆经甲醇沉淀蛋白后进样分析。绿原酸在42～2100 ng·mL~(-1)(r≥0.9957)范围内线性关系良好。方法的定量下限为42 ng·mL~(-1)，日内精密度RSD≤6.7％，日间精密度RSD≤7.2％，准确度RE为±2.6％，平均回收率为84.4％。大鼠灌胃给予陆英提取液后，发现绿原酸在大鼠体内中吸收快，0.36 h左右达峰，达峰浓度C_(max)约为670.9 ng·mL~(-1)，消除半衰期t_(1／2)为4.85 h。
本研究在中医药学理论和实践的指导下，将中药学、分析化学、药理学和计算机技术相结合，初步探讨了中药陆英药效物质基础，确定其质量评价指标，优化其提取工艺，建立了陆英的质量控制方法。研究了大鼠灌胃给予陆英提取物血浆中熊果酸和绿原酸的药物动力学，探索有效成分在体内的动态过程，为中药现代化做了有意义的探索。
Sambucus chinensis L. is a native perennial herb distributed throughout China. All parts of the plant can be used in traditional Chinese medicine (TCM) as Luying. Luying is one of the important folk medicines in TCM. It has been used to treat hepatitis over a very long period of time and has produced quite a good effect.The therapeutic basis of Luying was studied in this paper. Luying extract by different extracting methods were prepared. Effects of Luying extracts of different processes on alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST) in hepatic injury mice were studied. As a result, 75% alcohol was selected as the optimal extraction reagent. The fractions of various polarities fractionated and purified with macroporous resin from 75% alcohol extract were further investigated. The ethyl acetate fraction and the fraction eluted from the macroporous resin with 30% alcohol were found to be primarily active.In order to isolate the active constituents in these two main effect parts of Luying, various Chromatographic techniques were performed. Six compounds were isolated and identified with IR, NMR and MS data and physical-chemical properties. They wereβ-sitosterol, stigmasterol, oleanolic acid, ursolic acid, kaempferol-3-O-β-D-(6-O-acetylglucopyranosid)-7-O-β-D-glucopyranoside, and kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosid-7-O-β-D-glucopyranoside. Two of the compounds, which were named as kaempferol-3-O-β-D-(6-O-acetylglucopyran-osid)-7-O-β-D-glucopyranoside and kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosid-7-O-β-D-glucopyranoside, were isolated from these plants for the first time. The in vivo antitumour effects of these compounds were investigated. It was suggested that ursolic acid and oleanolic acid possessed inhibition activity to Bel-7402 human liver cancer cell line.
RP-HPLC method was developed for the determination of ursolic acid and oleanolic acid in Luying. The linear ranges for ursolic acid and oleanolic acid were 2.3～92.0μg·mL~(-1)(r=0.9999)and 2.6～104.0μg.mL~(-1)(r=0.9999), respectively. The average recoveries were 97.6％(RSD=2.1％) and 102.1％(RSD=1.7％), respectively. RP-HPLC method for the simultaneous determination of chlorogenic acid (CGA), eaffeic acid (CFA), kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosid-7-O-β-D- glucopyranoside (KG), and (kaempferol-3-O-β-D-(6-O-acetylglucopyranosid)-7- O-β-D-glucopyranoside) (KAG)in Luying was developed and validated. The linear ranges for CGA, CFA, KG and KAG were 12.00～240.00 (r=0.9992), 0.40～8.00 (r=0.9992), 1.18～23.60 (r=0.9982), and 1.19～23.80μg·mL~(-1) (r=0.9993). The average recoveries were 100.9％(RSD=3.8％), 98.3％(RSD=2.8％), 99.2％(RSD=3.3％), and 96.3％(RSD=3.2％), respectively. The essential oil in Luying was analyzed by GC-MS. 25 compounds were got and identifed in the oil. There total content of the identified compounds was 92.8％. The content of methyl salicylate was the highest (19.48％).
The optimal alcohol extraction process of Luying extract was studied by orthogonal design with extraction yield and the contents of ursolic acid, oleanolic acid, and chlorogenic acid as quality assessment indices. Three factors were studied in this experiment, including the solvent consumption, duration of extraction and times of extraction. The result showed that the optimal extracting condition was 75％alcohol consumed ten times the amount of material, and three times for 1 hour each time.
A rapid, sensitive, and accurate liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) method for the determination of ursolic acid in rat plasma was developed and validated. Plasma samples taken from rats that had received Luying extract orally were acidified with acetic acid and then extracted with a mixture of hexane-dichloromethane-2-propanol (20:10:1, v/v/v). Atmospheric pressure chemical ionization was operated in negative-ion mode. Using selected ion-monitoring mode, the deprotonated molecules [M-H]~- at m/z 455 and 469 were used to quantify ursolic acid and glycyrrhetic acid (internal standard), respectively. The assay was shown to be linear over the range of 10～1000 ng·mL~(-1) (r≥0.9960) with a lower limit of quantification of 10 ng·mL~(-1). The method was shown to be reproducible and reliable with intraday precision below 7.8％, interday precision below 8.1％, accuracy within±4.3％, and mean extraction recovery excess of 83.6％, which were all calculated from the blank plasma sample spiked with ursolic acid at three concentrations of 20, 200, and 800 ng.mL~(-1). The LC-MS method has been successfully applied to pharmacokinetic studies of ursolic acid after oral administration of Luying ethanolic extract to rats. The main pharmacokinetic parameters were: t_(1/2), 4.3 h; C_(max), 294.8 ng·mL~(-1); and t_(max), 1.0 h, respectively.
A simple and sensitive high-performance liquid chromatographic method has been developed for the determination of chlorogenic acid in plasma and applied to its pharmacokinetic study in rats after administration of Luying decoction. After deproteinized by methanol, the plasma samples were analyzed with puerarin as internal standards. The assay was shown to be linear over the range of 42～2100 ng·mL~(-1) (r≥0.9957) with a lower limit of quantification 42 ng·mL~(-1). The method has shown to be reproducible and reliable with intra-day precision blow 6.7％, inter-day precision blow 7.2％, accuracy within±2.6％, and the mean extraction recovery excess 84.4％. The validated method was used to take a limited view of the pharmacokinetic profile of chlorogenic acid in rat plasma after taken Luying extract. The main pharmacokinetic parameters were: t_(max), 0.36 h; C_(max), 670.9 ng·mL~(-1); and t_(1/2), 4.85 h, respectively.
Under the direction of theory and clinical practice of TCM, the therapeutic material basis was elucidated, from which quality control indices were selected. The extraction process was optimized and quality assessment methods for Luying were developed. Pharmacokinetic study of ursolic acid and chlorogenic acid was carried out in rats to take a limited view of pharmacokinetic profiles of Luying extract. This research provided an exploration for the modernization of TCM.
采用多种色谱分离技术对有效部位进行了分离纯化，得到了6个单体化合物，通过波谱分析结合理化性质，鉴定了它们的化学结构，分别为：β-谷甾醇、豆甾醇、齐墩果酸、熊果酸、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷，其中2个山奈酚葡萄糖苷为首次从该植物中分离得到的已知化合物。对得到的6个单体化合物进行体外肿瘤细胞生长抑制试验，结果表明熊果酸和齐墩果酸对所选的Bel-7402肝癌细胞生长具有一定的抑制作用。
本研究建立了同时测定陆英中活性成分熊果酸和齐墩果酸含量的反相高效液相色谱分析方法，熊果酸和齐墩果酸分别在2.3～92.0μg·mL~(-1)(r=0.9999)和2.6～104.0μg·mL~(-1)(r=0.9999)范围内线性关系良好，回收率分别为97.6％(RSD=2.1％)和102.1％(RSD=1.7％)。建立了测定陆英中活性成分绿原酸、咖啡酸和2种山奈酚葡萄糖苷的反相高效液相色谱分析方法，绿原酸、咖啡酸、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷和山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷分别在12.0～240.0(r=0.9992)，0.40～8.00(r=0.9992)，1.18～23.60(r=0.9982)和1.19～23.80μg·mL~(-1)(r=0.9993)范围内线性关系良好，回收率分别为100.9％(RSD=3.8％)、98.3％(RSD=2.8％)、99.2％(RSD=3.3％)和96.3％(RSD=3.2％)。采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对陆英中的挥发油进行分析，分离出33个组分，鉴定出25个化合物，占挥发油总量的92.8％。
采用正交试验设计，对陆英提取工艺进行优化。以熊果酸、齐墩果酸和绿原酸含量及浸膏得率为考察指标，对提取溶剂用量、提取时间和提取次数3个因素进行优化，确定陆英最佳提取工艺为加入8倍量75％乙醇，回流提取3次，每次1h。
建立了测定大鼠血浆中熊果酸含量的LC-MS分析方法，以甘草次酸为内标，血浆经醋酸酸化，正己烷-二氯甲烷-异丙醇(20：10：1，v／v／v)为提取溶剂，熊果酸在10～1000 ng·mL~(-1)(r≥0.9960)范围内线性关系良好。方法的定量下限为10 ng·mL~(-1)，日内精密度RSD≤7.8％，日间精密度RSD≤8.1％，准确度RE为±4.3％，平均回收率为83.6％。比较研究了大鼠灌胃给予陆英提取液和相当于等量的熊果酸对照品溶液后的药物动力学，测定了熊果酸的血药浓度-时间曲线，计算其相应药物动力学参数。大鼠灌胃给予熊果酸对照品后，大鼠血浆中几乎检测不到熊果酸。而给予陆英提取液后熊果酸在1 h左右达峰，达峰浓度C_(max)约为294.8 ng·mL~(-1)，消除半衰期t_(1／2)为4.3 h。
建立了测定大鼠血浆中绿原酸含量的反相高效液相色谱分析方法，以葛根素为内标，血浆经甲醇沉淀蛋白后进样分析。绿原酸在42～2100 ng·mL~(-1)(r≥0.9957)范围内线性关系良好。方法的定量下限为42 ng·mL~(-1)，日内精密度RSD≤6.7％，日间精密度RSD≤7.2％，准确度RE为±2.6％，平均回收率为84.4％。大鼠灌胃给予陆英提取液后，发现绿原酸在大鼠体内中吸收快，0.36 h左右达峰，达峰浓度C_(max)约为670.9 ng·mL~(-1)，消除半衰期t_(1／2)为4.85 h。
本研究在中医药学理论和实践的指导下，将中药学、分析化学、药理学和计算机技术相结合，初步探讨了中药陆英药效物质基础，确定其质量评价指标，优化其提取工艺，建立了陆英的质量控制方法。研究了大鼠灌胃给予陆英提取物血浆中熊果酸和绿原酸的药物动力学，探索有效成分在体内的动态过程，为中药现代化做了有意义的探索。
Sambucus chinensis L. is a native perennial herb distributed throughout China. All parts of the plant can be used in traditional Chinese medicine (TCM) as Luying. Luying is one of the important folk medicines in TCM. It has been used to treat hepatitis over a very long period of time and has produced quite a good effect.The therapeutic basis of Luying was studied in this paper. Luying extract by different extracting methods were prepared. Effects of Luying extracts of different processes on alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST) in hepatic injury mice were studied. As a result, 75% alcohol was selected as the optimal extraction reagent. The fractions of various polarities fractionated and purified with macroporous resin from 75% alcohol extract were further investigated. The ethyl acetate fraction and the fraction eluted from the macroporous resin with 30% alcohol were found to be primarily active.In order to isolate the active constituents in these two main effect parts of Luying, various Chromatographic techniques were performed. Six compounds were isolated and identified with IR, NMR and MS data and physical-chemical properties. They wereβ-sitosterol, stigmasterol, oleanolic acid, ursolic acid, kaempferol-3-O-β-D-(6-O-acetylglucopyranosid)-7-O-β-D-glucopyranoside, and kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosid-7-O-β-D-glucopyranoside. Two of the compounds, which were named as kaempferol-3-O-β-D-(6-O-acetylglucopyran-osid)-7-O-β-D-glucopyranoside and kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosid-7-O-β-D-glucopyranoside, were isolated from these plants for the first time. The in vivo antitumour effects of these compounds were investigated. It was suggested that ursolic acid and oleanolic acid possessed inhibition activity to Bel-7402 human liver cancer cell line.
RP-HPLC method was developed for the determination of ursolic acid and oleanolic acid in Luying. The linear ranges for ursolic acid and oleanolic acid were 2.3～92.0μg·mL~(-1)(r=0.9999)and 2.6～104.0μg.mL~(-1)(r=0.9999), respectively. The average recoveries were 97.6％(RSD=2.1％) and 102.1％(RSD=1.7％), respectively. RP-HPLC method for the simultaneous determination of chlorogenic acid (CGA), eaffeic acid (CFA), kaempferol-3-O-β-D-glucopyranosid-7-O-β-D- glucopyranoside (KG), and (kaempferol-3-O-β-D-(6-O-acetylglucopyranosid)-7- O-β-D-glucopyranoside) (KAG)in Luying was developed and validated. The linear ranges for CGA, CFA, KG and KAG were 12.00～240.00 (r=0.9992), 0.40～8.00 (r=0.9992), 1.18～23.60 (r=0.9982), and 1.19～23.80μg·mL~(-1) (r=0.9993). The average recoveries were 100.9％(RSD=3.8％), 98.3％(RSD=2.8％), 99.2％(RSD=3.3％), and 96.3％(RSD=3.2％), respectively. The essential oil in Luying was analyzed by GC-MS. 25 compounds were got and identifed in the oil. There total content of the identified compounds was 92.8％. The content of methyl salicylate was the highest (19.48％).
The optimal alcohol extraction process of Luying extract was studied by orthogonal design with extraction yield and the contents of ursolic acid, oleanolic acid, and chlorogenic acid as quality assessment indices. Three factors were studied in this experiment, including the solvent consumption, duration of extraction and times of extraction. The result showed that the optimal extracting condition was 75％alcohol consumed ten times the amount of material, and three times for 1 hour each time.
A rapid, sensitive, and accurate liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) method for the determination of ursolic acid in rat plasma was developed and validated. Plasma samples taken from rats that had received Luying extract orally were acidified with acetic acid and then extracted with a mixture of hexane-dichloromethane-2-propanol (20:10:1, v/v/v). Atmospheric pressure chemical ionization was operated in negative-ion mode. Using selected ion-monitoring mode, the deprotonated molecules [M-H]~- at m/z 455 and 469 were used to quantify ursolic acid and glycyrrhetic acid (internal standard), respectively. The assay was shown to be linear over the range of 10～1000 ng·mL~(-1) (r≥0.9960) with a lower limit of quantification of 10 ng·mL~(-1). The method was shown to be reproducible and reliable with intraday precision below 7.8％, interday precision below 8.1％, accuracy within±4.3％, and mean extraction recovery excess of 83.6％, which were all calculated from the blank plasma sample spiked with ursolic acid at three concentrations of 20, 200, and 800 ng.mL~(-1). The LC-MS method has been successfully applied to pharmacokinetic studies of ursolic acid after oral administration of Luying ethanolic extract to rats. The main pharmacokinetic parameters were: t_(1/2), 4.3 h; C_(max), 294.8 ng·mL~(-1); and t_(max), 1.0 h, respectively.
A simple and sensitive high-performance liquid chromatographic method has been developed for the determination of chlorogenic acid in plasma and applied to its pharmacokinetic study in rats after administration of Luying decoction. After deproteinized by methanol, the plasma samples were analyzed with puerarin as internal standards. The assay was shown to be linear over the range of 42～2100 ng·mL~(-1) (r≥0.9957) with a lower limit of quantification 42 ng·mL~(-1). The method has shown to be reproducible and reliable with intra-day precision blow 6.7％, inter-day precision blow 7.2％, accuracy within±2.6％, and the mean extraction recovery excess 84.4％. The validated method was used to take a limited view of the pharmacokinetic profile of chlorogenic acid in rat plasma after taken Luying extract. The main pharmacokinetic parameters were: t_(max), 0.36 h; C_(max), 670.9 ng·mL~(-1); and t_(1/2), 4.85 h, respectively.
Under the direction of theory and clinical practice of TCM, the therapeutic material basis was elucidated, from which quality control indices were selected. The extraction process was optimized and quality assessment methods for Luying were developed. Pharmacokinetic study of ursolic acid and chlorogenic acid was carried out in rats to take a limited view of pharmacokinetic profiles of Luying extract. This research provided an exploration for the modernization of TCM.
引文
[1] 王永兵，毛福林，王强等．中草药治疗乙型肝炎的研究进展．中国野生植物资源，2000，19(5)：5-8
[2] 程书权，周霞秋．乙型肝炎的抗病毒治疗进展．国外医药抗生素分册，1999，20(4)：153-157
[3] 张骁，束梅英，张新建等．乙肝治疗药物研究进展及市场前景．中国科技成果，2002．20：9-13
[4] 刘维庆．中西医结合治疗乙型病毒性肝炎．中医药学刊，2003，21(5)：799-800
[5] 陈锡军．对慢性乙型肝炎中西医治疗的思考．湖南中医药导报，2003，9(3)：9-10
[6] 贺松其．慢性乙型肝炎辨治探析．山东中医杂志，2003，22(3)：131-132
[7] 中国中医药学会内科肝病专业委员会．病毒性肝炎中医辨证标准(试行)．中医杂志，1992，(5)：39-40
[8] 骆常义，王维，姜兴鹏．慢性肝病证治探要．四川中医，2003，21(2)：10-11
[9] 张琴，刘平，陈惠芬等．肝炎肝硬化中医证候特点的多元分析．中西医结合肝病杂志，2003，13(2)：69-73
[10] 鲁枫，高水波，彭勃．中医药貌乙型肝炎病毒研究概况．河南中医，2003，23(5)：66-68
[11] 郑民实，郑有方．1000种中草药抑制乙型肝炎病毒表面抗原的实验研究．中医杂志，1989，30(1)：47-48
[12] 应国红，郑民实．800种中草药抗乙型肝炎病毒的实验研究．江西医学院学报，2002，42(2)：20-22
[13] 郑民实，章晋根．使用ELISA技术筛选270种中草药抗HBsAg作用．中医研究，1996，9(1)：51-54
[14] 郑民实，李文．400种中草药对HBsAg的抑制作用．中国医药学报，1991，6(3)：30-31
[15] 郑民实．ELISA技术检测中草药抗HBsAg的实验研究．中国医院药学杂志，1991．16(9)：53-56
[16] 张正，许向东，杜绍财等．60种中草药抗乙肝病毒的实验研究．北京医科大学学报，1988，(3)：211-214
[17] 李文．中草药抑制HBV-DNA的实验研究．中医杂志，1997，38(1)：46-48
[18] 湛宁生．中医药治疗病毒性肝炎近况．湖南中医杂志，1992，(4)：49-51
[19] 聂淑琴，王金华，李兰芳等．乙肝舒对小鼠细胞免疫功能及白细胞介素．2生成的影响．中国实验方剂学杂志，1997，3(2)：35-38
[20] 肖小河，赵艳玲，袁海龙等．21世纪抗肝炎中药研究开发的机遇与挑战．中国中药杂志，2001，26(10)：662-666
[21] 汤臣康．五味子的化学和药理研究的新进展．西北药学杂志，1994，9(6)：278-282
[22] 胡娟．灵芝胶囊治疗慢性乙型肝炎86例分析．职业与健康，2003，19(3)：103-104
[23] 孙维会，宋明全，刘中景等．小柴胡汤联合苦参素注射液治疗肝炎肝纤维化64例．中西医结合肝病杂志，2003，13(1)：41-42
[24] 刘成，薛惠明．肝炎后肝硬化患者肝脏门静脉血流量的变化及丹参对其影响．中西医结合肝病杂志，1996，6(4)：3-6
[25] 孙铁民，李铣．水飞蓟素药理研究进展．中草药，2000，31(3)：229-231
[26] 中华人民共和国卫生部药典委员会编．中华人民共和国卫生部药品标准(中药材，第一册)，北京：化学工业出版社，1992，49
[27] 国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草．上海：上海科技出版社，1999，6573-6576
[28] 徐国钧，徐珞珊，金蓉鸾等．中国药材学．北京：中国医药科技出版社，1996，1601-1603
[29] 清·黄爽．神农本草经．北京：中医古籍出版社，1982，299
[30] 梁·陶弘景．本草经集注．北京：人民卫生出版社，1994，379
[31] 唐·苏劲．唐本草．合肥：安徽科学技术出版社，1981，277、296
[32] 中国医学科学院药物研究所．中草药有效成分的研究(第一分册)．第一版，北京：人民卫生出版社，1972，397
[33] Inoue T., Hirashima H., Studies on the constituents of Sambucus species Ⅱ. Constituents of the leaves of Sambucus sieboldiana Blume, ex Graebn. var. Miquelii (Nakai) Hara, Yakugaku Zasshi, 1973, 93(11), 1530-1533
[34] 王明时，李景荣，徐丽仙等．陆英抗肝炎活性成分的化学研究．南京药学院学报，1985，16(3)：15-17
[35] 张乐之，李新芳．齐墩果酸对大鼠实验性肝损伤作用机理的研究．中国药理与临床，1992，8(2)：24-26
[36] 韩德伍，马学惠，赵元昌等．齐墩果酸防治实验性肝硬变发生的研究．中医杂志，1981，22(3)：57-59
[37] 刘秀英，王翔朴，贺全仁等．甘草甜素和齐墩果酸对大鼠镉中毒性肝损伤的防护作用与机理．中国公共卫生，2000，16(1)：21-24
[38] 刘厚佳，胡晋红，孙莲娜等．木瓜中齐墩果酸抗乙型肝炎病毒研究．解放军药学学报，2002．18(5)：272-274
[39] Balanehru S., Nagarajan B., Protective effect of oleanolic acid and ursolic acid against lipid peroxidation. Biochem. Int., 1991, 24(5): 981-990
[40] Lanzani A, Cardillo M and Petrini MC, Preparazione di. concentrati proteici de semi di girasole per via umida. Riv. Ita. Sostanze. Grasse. 1979, 56(7): 48-51
[41] 陈少洲，吕飞杰，台建祥．葵粕中绿原酸的研究进展与应用前景．食品与发酵工业，2002，28(11)：51-54
[42] 陈武，李开泉，熊筱娟等．陆英抗肝炎活性成分的研究．南昌大学学报(理科版)，2001，25(2)：165-168
[43] 李耐三．陆英的药动学研究探讨．中草药，1986，17(2)：24
[44] 余传隆，黄泰康，丁志遵等．中药辞海(第三卷)，第一版．北京：中国医药科技出版社，1993，10-11
[45] 李仪奎．中药药理实验方法学．第一版．上海：上海科学技术出版社，1999，458-466
[46] 张均田．现代药理实验方法．第一版．北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1998，1397-1407
[47] 徐莲英，陶建生，冯怡．中药制剂发展的回顾．中成药，2002，22(1)：6-21
[48] 徐叔云．药理实验方法学．第二版．北京：人民卫生出版社，1991，506．511
[49] 张国升，凡明月，彭代银．芦根多糖对四氯化碳小鼠肝损伤的保护作用．中国药理学通报，2002，18(3)：354-355
[50] 张万国，胡晋红，蔡溱等．桑黄对四氯化碳致大鼠肝损伤的保护作用．中国药房，2003，14(5)：267-269
[51] 魏玉，张德玉，黄秉枢等．鸡矢藤对小鼠四氯化碳肝损伤的保护作用．中华肝胆外科杂志，2003，9(4)：238-239
[52] 陈象青，王钦茂，方华武等．白芍总苷与当归提取物合用对实验性肝炎的保护作用．安徽中医学院学报，2002，21(6)：44-47
[53] 覃红，程体娟，佟婉红等．沙棘籽油对肝损伤小鼠免疫功能的影响．药药理与临床，2003，19(1)：14-15
[54] 徐琳本，陈莉萍，陈立峰等．肝复乐对 D-半乳糖胺所致小鼠肝损伤的影响．中药药理与临床，2001，17(1)：28-31
[55] 赵玉珍，刘蕾，付正中等．虎茵汤对 D-半乳糖胺致小鼠急性肝损伤保护作用的观察．黑龙江医药科学，2001，24(6)：16-17
[56] 杨铁虹，卢保华，贾敏等．当归多糖对小鼠免疫功能的影响．中国药理学通报，2003．19(4)：448-451
[57] 李坤珍，万京华，姚丽芳等．牡丹皮对小白鼠免疫功能的影响．数理医药学杂志，2002，15(2)：77-78
[58] 李忠海，钟海雁，魏元青等．林檎叶提取成分对小鼠免疫功能的影响．中南林学院学报，2003，23(4)：28-31
[59] 高建平，金若敏，吴耀平等．铁皮石斛原球茎与原药材免疫调节作用的比较研究．中药材，2002，25(7)：487-489
[60] 任风芝，栗新慧，赵毅民等．紫珠叶黄酮类化合物的研究．中国中药杂志，2001，26(12)：841-845
[61] 崔书亚，胡晓黎，程东亮等．缘毛紫苑化学成分研究．天然产物研究与开发，2003，15(2)：122-124
[62] 郑尚珍，杨红澎，孟军才等．微孔草种子化学成分的研究．西北师范大学学报(自然科学版)，2003，39(2)：54-57
[63] 高黎明，魏小梅，郑尚珍等．巴天酸模中化学成分的研究．中草药，2002，33(2)：207-210
[64] 李延芳，李明慧，楼凤昌等．黄花败酱的化学成分研究．中国药科大学学报，2002，33(2)：101-103
[65] 潘炉台，何兴萍，杨立勇等．川滇腊树化学成分的研究．中国中药杂志，2002，27(10)：754-755
[66] 张艺，李文军，孟宪丽等．藏药翼首草化学成分的研究．成都中医药大学学报，2002，25(3)：41-42
[67] 陈斌，朱梅，邢旺兴等．蓝按果实化学成分的研究．中国中药杂志，2002，27(8)：596-597
[68] 周金云，宁冰梅，高永莉等．越西木香化学成分的研究．中国药学杂志，2002，37(8)：574-576
[69] 刘宏民，鲍峰玉，阎学斌．马鞭草化学成分的研究．中草药，2002，33(6)：492-494
[70] Geiger H., Lang U., Britsch E., et al. Die flavonolglykoside von equisetum telmateja. Phytochemistry, 1978, 17: 336-337
[71] Markham K. R., Ternai B.. Stanley R., et al. Carbon-13 NMR studies of flavonoids Ⅲ. Tetrahedron. 1978, 34: 1389-1397
[72] 于荣敏，李铣，张海军等．小花棘豆化学成分的研究．植物学报，1992，34(5)：369-377
[73] 徐叔云，卞如濂，陈修主编．药理实验方法学．北京：人民卫生出版社，2002，1849-1856
[74] 程宝鸾编．动物细胞培养技术．广州：华南理工大学出版社，2000，107-112
[75] 王大为．促进成骨细胞形成的中药及其活性成分的研究[D]．沈阳药科大学．2001，20-21
[76] Denizot F., Lang, R. J.. Rapid colorimetric assay for cell growth and survival: modification to the tetrazolium dye procedure giving improved sensitivity and reliability. J. Immunol. Methods, 1996, 89: 271-277
[77] Chang H. C, Huang Y. C., Wen C. H.. Antiproliferative and Chemopreventive Effects of Adley Seed on Lung Cancer in vitro and in vivo. J. Agric. Food. Chem, 2003, 51, 3656-3660
[78] Benoit G. G., Naud C. F., Simard M. A., et al. Noninterference of cytochrome P4501A2 in the cytoxicity of tacrine using genetically engineered V79 Chinese hamster cells for stable expression of the human or rat isoform and two human hepatocyte cell lines. Chemical Pharmacology, 1997, 53: 423-427
[79] 谢莹，杭太俊，程赞等．高效液相色谱法测定中药中齐墩果酸和熊果酸含量．中国中药杂志，2001，26(9)：615-617
[80] 周诚，王丽，冯小映．白花蛇舌草和水线草中齐墩果酸和熊果酸含量比较．中药材，2002，25(5)：313-314
[81] 袁珂，李根林，李俊芝等．车前草中熊果酸、齐墩果酸的HPLC测定．中草药，1999．30(12)：901-903
[82] 吕曙华，王强，夏光成等．中药女贞子中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱分析．药物分析杂志，1993，13(5)：291-294
[83] 邹盛勤，邓庭亭，杨利萍．HPLC法测定陆英中乌索酸和齐墩果酸含量．林产化工通讯，2003，37(6)：12-14
[84] 王新宏，安睿，邹云等．双黄连片的多组分质量分析．药学学报，2001，36(12)：917-920
[85] 王天志，李永梅，王志霄等．金银花中3种有机酸的反相高效液相色谱法定量分析．药物分析杂志，2000．20(5)：293-296
[86] 何心，石春伟，芦松萍等．高效液相色谱法测定双黄连粉针中绿原酸和咖啡酸的含量．药物分析杂志，1997，17(6)：410-411
[87] 王守箐，王宏，李冠忠等．HPLC—二极管阵列检测器测定银黄胶囊中绿原酸、黄芩苷含量．山东医药工业，2003，22(2)：14-15
[88] 顾利红，朱品业．日光和温度对绿原酸供试液稳定性的影响．中成药，1999，21(11)：568-569
[89] 蒋道松，裴刚，周朴华等．八棱麻挥发性成分分析．中药材，2003，26(2)：102-103
[90] 向大雄，李焕德，胥欣元．中药复方药代动力学研究近况．中国实验方剂学杂志，2002，8(1)：61-63
[91] 喜智聪，刘昌林，康重阳．中成药药动学研究近况．中成药，1998，20(11)：54-55
[92] 刘昌孝．中药的药代动力学研究在中药现代化中面临的任务．天津中医药，2003，20(6)：1-5
[93] 王娟，马张庆，宋建国等．丹参注射液在大鼠体内的药动学研究．中国临床药理学与治疗，2003，8(2)：183-185
[94] 王艳萍，孟庆彪，王伟东等．血塞通注射液药代动力学研究．中国药房，2002，13(3)：144-145
[95] 项琪，程刚，陈济民等．芍药甘草汤在大鼠体内药代动力学研究．中国药学杂志，2000，35(9)：615-618
[96] 厉将斌，张壮，李日庆等．反相高效液相色谱法测定免血清中小檗碱浓度．中国实验方剂学杂志，2003，9(6)：27-29
[97] 张壮，秦腊梅，陈可冀等．犬一次口服芍芍胶囊后芍药甙的药代动力学．中国实验方剂学杂志，2000，6(6)：21-24
[98] 孙寒静，吴伟，陈宏圭．川芎嗪的药代动力学研究状况．中药新药与临床药理，2002，13(1)：61-63
[99] 刘同征，钱之玉．西红花酸在大鼠的药代动力学研究．药学学报，2002，37(5)：367-369
[100] 胡大裕，朱景申，常明向．当归不同配伍药对当归—川芎与当归—芍药的药代动力学研究．同济医科大学学报，2001，30(4)：384-385
[101] 潘国宇，刘小东．中成药复方药动学研究的方法与展望．中草药，1998，29(9)：642-644
[102] 赵怀清，曲燕，王学娅等．胡芦巴碱的HPlC法测定及药代动力学研究．药学学报，2003，38(4)：279-282
[103] 赵维中，王宇祥，刘传功等．芸香甙的药代动力学研究．中国药理学通报，1998，14(2)：178-180
[104] 马鹏．胶束液相色谱法测定山莨菪碱的血药浓度和药代动力学参数．药学学报，1992，27(10)：763-767
[105] 杨丽莉，佟永岭．冰片和川芎嗉血药浓度的GC-MS测定法．药学学报，1994，29(9)：697-701
[106] Chan S．W．，崔颖．高效液相色谱—蒸发光散射检测测定川贝母中主要镇咳生物活性成分西贝母碱及其在鼠体内药代动力学研究．国外仪器分析，2001，(4)：47-49
[107] 钟大放．以加权最小二乘法建立生物分析标准曲线的若干问题．药物分析杂志，1996，16(5)：343-346
[108] Shah V. P., Midha K. K., Dighe S., et al. Analytical methods validation: bioavailability, bioequivalence and pharmacokinetic studies. J. Pharm. Sci, 1992, 81(3): 309-312
[109] Karnes H.T., March C. Precision, accuracy and data acceptance criteria in biopharmaceutical analysis. Pharmaceut. Res., 1993, 10 (10):1420-1426
[110] U.S. department of health and human services, food and drug administration. Guidance for industry, bioanalytical method validation, http://www.fda.gov/cder/guidance/index. htm. 2001.
[111] Azuma K., Ippoushi K., Nakayama M, et al. Absorption of chlorogenic acid and caffeic acid in rats after oral administration. J. Agric. Food Chem. 2000, 48:5496-5500
[112] Nardini M., Cirillo E., Natella F. et al. Absorption of phenolic acids in humans after coffee consumption. J. Agric. Food Chem. 2002, 50:5735-5741
[113] Cremin P., Kasim-Karakas S., Waterhouse A.L. LC/ES-MS Detection of hydroxycinnamates in human plasma and urine. J. Agric. Food Chem. 2001, 49:1747-1750
[114] Olthof M.R., Hollman P.C.H., Katan M.B. Chlorogenic acid and caffeic acid are absorbed in humans. J. Nutr. 2001, 131:66-71
[115] Yang H.J., Yuan B., Li L., et al. HPLC determination and pharmacokinetics of chlorogenic acid in rabbit plasma after an oral dose of Flos Lonicerae extract. J. Chrom. Sci. 2004, 42(4): 173-176
[2] 程书权，周霞秋．乙型肝炎的抗病毒治疗进展．国外医药抗生素分册，1999，20(4)：153-157
[3] 张骁，束梅英，张新建等．乙肝治疗药物研究进展及市场前景．中国科技成果，2002．20：9-13
[4] 刘维庆．中西医结合治疗乙型病毒性肝炎．中医药学刊，2003，21(5)：799-800
[5] 陈锡军．对慢性乙型肝炎中西医治疗的思考．湖南中医药导报，2003，9(3)：9-10
[6] 贺松其．慢性乙型肝炎辨治探析．山东中医杂志，2003，22(3)：131-132
[7] 中国中医药学会内科肝病专业委员会．病毒性肝炎中医辨证标准(试行)．中医杂志，1992，(5)：39-40
[8] 骆常义，王维，姜兴鹏．慢性肝病证治探要．四川中医，2003，21(2)：10-11
[9] 张琴，刘平，陈惠芬等．肝炎肝硬化中医证候特点的多元分析．中西医结合肝病杂志，2003，13(2)：69-73
[10] 鲁枫，高水波，彭勃．中医药貌乙型肝炎病毒研究概况．河南中医，2003，23(5)：66-68
[11] 郑民实，郑有方．1000种中草药抑制乙型肝炎病毒表面抗原的实验研究．中医杂志，1989，30(1)：47-48
[12] 应国红，郑民实．800种中草药抗乙型肝炎病毒的实验研究．江西医学院学报，2002，42(2)：20-22
[13] 郑民实，章晋根．使用ELISA技术筛选270种中草药抗HBsAg作用．中医研究，1996，9(1)：51-54
[14] 郑民实，李文．400种中草药对HBsAg的抑制作用．中国医药学报，1991，6(3)：30-31
[15] 郑民实．ELISA技术检测中草药抗HBsAg的实验研究．中国医院药学杂志，1991．16(9)：53-56
[16] 张正，许向东，杜绍财等．60种中草药抗乙肝病毒的实验研究．北京医科大学学报，1988，(3)：211-214
[17] 李文．中草药抑制HBV-DNA的实验研究．中医杂志，1997，38(1)：46-48
[18] 湛宁生．中医药治疗病毒性肝炎近况．湖南中医杂志，1992，(4)：49-51
[19] 聂淑琴，王金华，李兰芳等．乙肝舒对小鼠细胞免疫功能及白细胞介素．2生成的影响．中国实验方剂学杂志，1997，3(2)：35-38
[20] 肖小河，赵艳玲，袁海龙等．21世纪抗肝炎中药研究开发的机遇与挑战．中国中药杂志，2001，26(10)：662-666
[21] 汤臣康．五味子的化学和药理研究的新进展．西北药学杂志，1994，9(6)：278-282
[22] 胡娟．灵芝胶囊治疗慢性乙型肝炎86例分析．职业与健康，2003，19(3)：103-104
[23] 孙维会，宋明全，刘中景等．小柴胡汤联合苦参素注射液治疗肝炎肝纤维化64例．中西医结合肝病杂志，2003，13(1)：41-42
[24] 刘成，薛惠明．肝炎后肝硬化患者肝脏门静脉血流量的变化及丹参对其影响．中西医结合肝病杂志，1996，6(4)：3-6
[25] 孙铁民，李铣．水飞蓟素药理研究进展．中草药，2000，31(3)：229-231
[26] 中华人民共和国卫生部药典委员会编．中华人民共和国卫生部药品标准(中药材，第一册)，北京：化学工业出版社，1992，49
[27] 国家中医药管理局《中华本草》编委会．中华本草．上海：上海科技出版社，1999，6573-6576
[28] 徐国钧，徐珞珊，金蓉鸾等．中国药材学．北京：中国医药科技出版社，1996，1601-1603
[29] 清·黄爽．神农本草经．北京：中医古籍出版社，1982，299
[30] 梁·陶弘景．本草经集注．北京：人民卫生出版社，1994，379
[31] 唐·苏劲．唐本草．合肥：安徽科学技术出版社，1981，277、296
[32] 中国医学科学院药物研究所．中草药有效成分的研究(第一分册)．第一版，北京：人民卫生出版社，1972，397
[33] Inoue T., Hirashima H., Studies on the constituents of Sambucus species Ⅱ. Constituents of the leaves of Sambucus sieboldiana Blume, ex Graebn. var. Miquelii (Nakai) Hara, Yakugaku Zasshi, 1973, 93(11), 1530-1533
[34] 王明时，李景荣，徐丽仙等．陆英抗肝炎活性成分的化学研究．南京药学院学报，1985，16(3)：15-17
[35] 张乐之，李新芳．齐墩果酸对大鼠实验性肝损伤作用机理的研究．中国药理与临床，1992，8(2)：24-26
[36] 韩德伍，马学惠，赵元昌等．齐墩果酸防治实验性肝硬变发生的研究．中医杂志，1981，22(3)：57-59
[37] 刘秀英，王翔朴，贺全仁等．甘草甜素和齐墩果酸对大鼠镉中毒性肝损伤的防护作用与机理．中国公共卫生，2000，16(1)：21-24
[38] 刘厚佳，胡晋红，孙莲娜等．木瓜中齐墩果酸抗乙型肝炎病毒研究．解放军药学学报，2002．18(5)：272-274
[39] Balanehru S., Nagarajan B., Protective effect of oleanolic acid and ursolic acid against lipid peroxidation. Biochem. Int., 1991, 24(5): 981-990
[40] Lanzani A, Cardillo M and Petrini MC, Preparazione di. concentrati proteici de semi di girasole per via umida. Riv. Ita. Sostanze. Grasse. 1979, 56(7): 48-51
[41] 陈少洲，吕飞杰，台建祥．葵粕中绿原酸的研究进展与应用前景．食品与发酵工业，2002，28(11)：51-54
[42] 陈武，李开泉，熊筱娟等．陆英抗肝炎活性成分的研究．南昌大学学报(理科版)，2001，25(2)：165-168
[43] 李耐三．陆英的药动学研究探讨．中草药，1986，17(2)：24
[44] 余传隆，黄泰康，丁志遵等．中药辞海(第三卷)，第一版．北京：中国医药科技出版社，1993，10-11
[45] 李仪奎．中药药理实验方法学．第一版．上海：上海科学技术出版社，1999，458-466
[46] 张均田．现代药理实验方法．第一版．北京：北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1998，1397-1407
[47] 徐莲英，陶建生，冯怡．中药制剂发展的回顾．中成药，2002，22(1)：6-21
[48] 徐叔云．药理实验方法学．第二版．北京：人民卫生出版社，1991，506．511
[49] 张国升，凡明月，彭代银．芦根多糖对四氯化碳小鼠肝损伤的保护作用．中国药理学通报，2002，18(3)：354-355
[50] 张万国，胡晋红，蔡溱等．桑黄对四氯化碳致大鼠肝损伤的保护作用．中国药房，2003，14(5)：267-269
[51] 魏玉，张德玉，黄秉枢等．鸡矢藤对小鼠四氯化碳肝损伤的保护作用．中华肝胆外科杂志，2003，9(4)：238-239
[52] 陈象青，王钦茂，方华武等．白芍总苷与当归提取物合用对实验性肝炎的保护作用．安徽中医学院学报，2002，21(6)：44-47
[53] 覃红，程体娟，佟婉红等．沙棘籽油对肝损伤小鼠免疫功能的影响．药药理与临床，2003，19(1)：14-15
[54] 徐琳本，陈莉萍，陈立峰等．肝复乐对 D-半乳糖胺所致小鼠肝损伤的影响．中药药理与临床，2001，17(1)：28-31
[55] 赵玉珍，刘蕾，付正中等．虎茵汤对 D-半乳糖胺致小鼠急性肝损伤保护作用的观察．黑龙江医药科学，2001，24(6)：16-17
[56] 杨铁虹，卢保华，贾敏等．当归多糖对小鼠免疫功能的影响．中国药理学通报，2003．19(4)：448-451
[57] 李坤珍，万京华，姚丽芳等．牡丹皮对小白鼠免疫功能的影响．数理医药学杂志，2002，15(2)：77-78
[58] 李忠海，钟海雁，魏元青等．林檎叶提取成分对小鼠免疫功能的影响．中南林学院学报，2003，23(4)：28-31
[59] 高建平，金若敏，吴耀平等．铁皮石斛原球茎与原药材免疫调节作用的比较研究．中药材，2002，25(7)：487-489
[60] 任风芝，栗新慧，赵毅民等．紫珠叶黄酮类化合物的研究．中国中药杂志，2001，26(12)：841-845
[61] 崔书亚，胡晓黎，程东亮等．缘毛紫苑化学成分研究．天然产物研究与开发，2003，15(2)：122-124
[62] 郑尚珍，杨红澎，孟军才等．微孔草种子化学成分的研究．西北师范大学学报(自然科学版)，2003，39(2)：54-57
[63] 高黎明，魏小梅，郑尚珍等．巴天酸模中化学成分的研究．中草药，2002，33(2)：207-210
[64] 李延芳，李明慧，楼凤昌等．黄花败酱的化学成分研究．中国药科大学学报，2002，33(2)：101-103
[65] 潘炉台，何兴萍，杨立勇等．川滇腊树化学成分的研究．中国中药杂志，2002，27(10)：754-755
[66] 张艺，李文军，孟宪丽等．藏药翼首草化学成分的研究．成都中医药大学学报，2002，25(3)：41-42
[67] 陈斌，朱梅，邢旺兴等．蓝按果实化学成分的研究．中国中药杂志，2002，27(8)：596-597
[68] 周金云，宁冰梅，高永莉等．越西木香化学成分的研究．中国药学杂志，2002，37(8)：574-576
[69] 刘宏民，鲍峰玉，阎学斌．马鞭草化学成分的研究．中草药，2002，33(6)：492-494
[70] Geiger H., Lang U., Britsch E., et al. Die flavonolglykoside von equisetum telmateja. Phytochemistry, 1978, 17: 336-337
[71] Markham K. R., Ternai B.. Stanley R., et al. Carbon-13 NMR studies of flavonoids Ⅲ. Tetrahedron. 1978, 34: 1389-1397
[72] 于荣敏，李铣，张海军等．小花棘豆化学成分的研究．植物学报，1992，34(5)：369-377
[73] 徐叔云，卞如濂，陈修主编．药理实验方法学．北京：人民卫生出版社，2002，1849-1856
[74] 程宝鸾编．动物细胞培养技术．广州：华南理工大学出版社，2000，107-112
[75] 王大为．促进成骨细胞形成的中药及其活性成分的研究[D]．沈阳药科大学．2001，20-21
[76] Denizot F., Lang, R. J.. Rapid colorimetric assay for cell growth and survival: modification to the tetrazolium dye procedure giving improved sensitivity and reliability. J. Immunol. Methods, 1996, 89: 271-277
[77] Chang H. C, Huang Y. C., Wen C. H.. Antiproliferative and Chemopreventive Effects of Adley Seed on Lung Cancer in vitro and in vivo. J. Agric. Food. Chem, 2003, 51, 3656-3660
[78] Benoit G. G., Naud C. F., Simard M. A., et al. Noninterference of cytochrome P4501A2 in the cytoxicity of tacrine using genetically engineered V79 Chinese hamster cells for stable expression of the human or rat isoform and two human hepatocyte cell lines. Chemical Pharmacology, 1997, 53: 423-427
[79] 谢莹，杭太俊，程赞等．高效液相色谱法测定中药中齐墩果酸和熊果酸含量．中国中药杂志，2001，26(9)：615-617
[80] 周诚，王丽，冯小映．白花蛇舌草和水线草中齐墩果酸和熊果酸含量比较．中药材，2002，25(5)：313-314
[81] 袁珂，李根林，李俊芝等．车前草中熊果酸、齐墩果酸的HPLC测定．中草药，1999．30(12)：901-903
[82] 吕曙华，王强，夏光成等．中药女贞子中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱分析．药物分析杂志，1993，13(5)：291-294
[83] 邹盛勤，邓庭亭，杨利萍．HPLC法测定陆英中乌索酸和齐墩果酸含量．林产化工通讯，2003，37(6)：12-14
[84] 王新宏，安睿，邹云等．双黄连片的多组分质量分析．药学学报，2001，36(12)：917-920
[85] 王天志，李永梅，王志霄等．金银花中3种有机酸的反相高效液相色谱法定量分析．药物分析杂志，2000．20(5)：293-296
[86] 何心，石春伟，芦松萍等．高效液相色谱法测定双黄连粉针中绿原酸和咖啡酸的含量．药物分析杂志，1997，17(6)：410-411
[87] 王守箐，王宏，李冠忠等．HPLC—二极管阵列检测器测定银黄胶囊中绿原酸、黄芩苷含量．山东医药工业，2003，22(2)：14-15
[88] 顾利红，朱品业．日光和温度对绿原酸供试液稳定性的影响．中成药，1999，21(11)：568-569
[89] 蒋道松，裴刚，周朴华等．八棱麻挥发性成分分析．中药材，2003，26(2)：102-103
[90] 向大雄，李焕德，胥欣元．中药复方药代动力学研究近况．中国实验方剂学杂志，2002，8(1)：61-63
[91] 喜智聪，刘昌林，康重阳．中成药药动学研究近况．中成药，1998，20(11)：54-55
[92] 刘昌孝．中药的药代动力学研究在中药现代化中面临的任务．天津中医药，2003，20(6)：1-5
[93] 王娟，马张庆，宋建国等．丹参注射液在大鼠体内的药动学研究．中国临床药理学与治疗，2003，8(2)：183-185
[94] 王艳萍，孟庆彪，王伟东等．血塞通注射液药代动力学研究．中国药房，2002，13(3)：144-145
[95] 项琪，程刚，陈济民等．芍药甘草汤在大鼠体内药代动力学研究．中国药学杂志，2000，35(9)：615-618
[96] 厉将斌，张壮，李日庆等．反相高效液相色谱法测定免血清中小檗碱浓度．中国实验方剂学杂志，2003，9(6)：27-29
[97] 张壮，秦腊梅，陈可冀等．犬一次口服芍芍胶囊后芍药甙的药代动力学．中国实验方剂学杂志，2000，6(6)：21-24
[98] 孙寒静，吴伟，陈宏圭．川芎嗪的药代动力学研究状况．中药新药与临床药理，2002，13(1)：61-63
[99] 刘同征，钱之玉．西红花酸在大鼠的药代动力学研究．药学学报，2002，37(5)：367-369
[100] 胡大裕，朱景申，常明向．当归不同配伍药对当归—川芎与当归—芍药的药代动力学研究．同济医科大学学报，2001，30(4)：384-385
[101] 潘国宇，刘小东．中成药复方药动学研究的方法与展望．中草药，1998，29(9)：642-644
[102] 赵怀清，曲燕，王学娅等．胡芦巴碱的HPlC法测定及药代动力学研究．药学学报，2003，38(4)：279-282
[103] 赵维中，王宇祥，刘传功等．芸香甙的药代动力学研究．中国药理学通报，1998，14(2)：178-180
[104] 马鹏．胶束液相色谱法测定山莨菪碱的血药浓度和药代动力学参数．药学学报，1992，27(10)：763-767
[105] 杨丽莉，佟永岭．冰片和川芎嗉血药浓度的GC-MS测定法．药学学报，1994，29(9)：697-701
[106] Chan S．W．，崔颖．高效液相色谱—蒸发光散射检测测定川贝母中主要镇咳生物活性成分西贝母碱及其在鼠体内药代动力学研究．国外仪器分析，2001，(4)：47-49
[107] 钟大放．以加权最小二乘法建立生物分析标准曲线的若干问题．药物分析杂志，1996，16(5)：343-346
[108] Shah V. P., Midha K. K., Dighe S., et al. Analytical methods validation: bioavailability, bioequivalence and pharmacokinetic studies. J. Pharm. Sci, 1992, 81(3): 309-312
[109] Karnes H.T., March C. Precision, accuracy and data acceptance criteria in biopharmaceutical analysis. Pharmaceut. Res., 1993, 10 (10):1420-1426
[110] U.S. department of health and human services, food and drug administration. Guidance for industry, bioanalytical method validation, http://www.fda.gov/cder/guidance/index. htm. 2001.
[111] Azuma K., Ippoushi K., Nakayama M, et al. Absorption of chlorogenic acid and caffeic acid in rats after oral administration. J. Agric. Food Chem. 2000, 48:5496-5500
[112] Nardini M., Cirillo E., Natella F. et al. Absorption of phenolic acids in humans after coffee consumption. J. Agric. Food Chem. 2002, 50:5735-5741
[113] Cremin P., Kasim-Karakas S., Waterhouse A.L. LC/ES-MS Detection of hydroxycinnamates in human plasma and urine. J. Agric. Food Chem. 2001, 49:1747-1750
[114] Olthof M.R., Hollman P.C.H., Katan M.B. Chlorogenic acid and caffeic acid are absorbed in humans. J. Nutr. 2001, 131:66-71
[115] Yang H.J., Yuan B., Li L., et al. HPLC determination and pharmacokinetics of chlorogenic acid in rabbit plasma after an oral dose of Flos Lonicerae extract. J. Chrom. Sci. 2004, 42(4): 173-176