小檗碱对大鼠体内葛根素药动学的影响
摘要
目的:
建立大鼠血浆中葛根素(Puerarin)浓度的高效液相色谱(HPLC)测定法,观察葛根素在大鼠体内的药动学过程以及小檗碱对大鼠体内葛根素药动学的影响,并计算相应的药动学参数,探讨两药合用后葛根素在大鼠体内的药动学变化情况。
方法:
血浆样品采用6%高氯酸沉淀蛋白,15000 r·min~(-1)高速离心后进行检测。色谱柱为Hypersil ODS(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.0043mol·L~(-1)磷酸二氢钾缓冲液(pH2.7)(22:78),流速为0.8 mL·min~(-1),柱温为30℃,检测波长250 nm,进样量为20μL。大鼠灌胃给予葛根素混悬液(100 mg·kg~(-1) )及葛根素和小檗碱混合液(100 mg·kg~(-1) + 50 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 100 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 200 mg·kg~(-1)),用HPLC法测定大鼠给药后不同时间血浆葛根素的浓度,所得药物浓度-时间数据用DAS 2.1.1程序处理,进行自动房室模型判别及药动学参数计算,并对单独用药组及联合用药组进行比较。
结果:
1.葛根素的标准血药浓度的线性范围为0.10～10.00 mg·L~(-1),回归方程为A = 2.7019×104 C + 2495.8 ,r = 0.999 5,葛根素的最低检测限(LLOD)为0.05 mg·L~(-1) (S/N>3);高、中、低三种浓度的日内、日间精密度RSD分别小于2.11%和2.79% ;方法回收率为96.64%～112.55%。
2.合用小檗碱前后,葛根素混悬液组(100 mg·kg~(-1))及葛根素和小檗碱混合液组(100 mg·kg~(-1) + 50 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 100 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 200 mg·kg~(-1))四组中葛根素的主要药动学参数Cmax分别为(0.545±0.051)mg·L~(-1)、(0.587±0.030)mg·L~(-1)、(0.667±0.017)mg·L~(-1)、(0.733±0.0298)mg·L~(-1);AUC0～t分别为(2.019±0.388)mg·L~(-1)·h、(1.962±0.254)mg·L~(-1)·h、(2.008±0.619)mg·L~(-1)·h、(2.969±0.295)mg·L~(-1)·h;CL分别为(32.937±12.695)L·h~(-1)·kg~(-1)、(32.656±3.599) L·h~(-1)·kg~(-1)、(34.556±9.167)L·h~(-1)·kg~(-1)、(22.748±4.654)L·h~(-1)·kg~(-1)。结果显示葛根素与小檗碱合用后,葛根素和小檗碱混合用药组(100 mg·kg~(-1) + 50 mg·kg~(-1))药动学参数与葛根素组(100 mg·kg~(-1))无显著性差异;葛根素和小檗碱混合用药组(100 mg·kg~(-1) + 100 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 200 mg·kg~(-1)) Cmax增大,有显著性差异(P < 0.01);葛根素和小檗碱混合用药组(100 mg·kg~(-1) + 200 mg·kg~(-1)) Cmax,AUC0～t均增大,有显著性差异(P < 0.01)。
结论:
本实验建立的大鼠血浆中葛根素HPLC测定法,操作简单,费用低,方法可靠,灵敏度高,血浆中成分不干扰,能较好适应目前大多数实验室条件,适用于葛根素的血药浓度检测及药动学研究。大鼠灌胃葛根素后的药-时过程符合二室模型,与国内外文献相近,葛根素在动物体内的药动学过程的研究,有助开展中药复方中主要有效成分间的配伍研究,探讨中药复方内在配伍规律。
OBJECTIE:
To establish a sensitive and specific method for determination of puerarin in rat plasma by HPLC and study its pharmacokinetics.
METHODS:
Puerarin was extracted from plasma with perchloric acid and was centrifugated by high speed. HPLC analysis was carried out through Hypersil ODS column( 4.6 mm×150 mm, 5μm ).The mobile phase consisted of methanol-0.0043mol·L~(-1) potassium dihydrogen phosphate ( 22:78 ) at a flow rate of 0.8 mL·min~(-1). The column temperature was 30℃and the wave length was 250 nm. Plasma puerarin concentration was determined by HPLC after intragastrically given of puerarin ( 100 mg·kg~(-1) ) or puerarin combined with berberine ( 50mg·kg~(-1), 100mg·kg~(-1), 200mg·kg~(-1) ) in rats. The data obtained were processed by DAS 2.1.1 software to calculate the varities of pharmacokinetic parameters after ig single durg or mixed drugs.
RESULTS: 1. The standard curve was linear in the range of 0.10 mg·L~(-1)～10.00 mg·L~(-1)( A = 2.7019×104 C + 2495.8, r = 0.999 5 ). The lowest limit of detection was 0.05 mg·L~(-1). The relative standard derivation of inter-day and intra-day was smaller than 2.11% and 2.79%. The relative recoveries of Puerarine were 96.64%～112.55%.
2. The main pharmacokinetic parameters of puerarin before and after coadministmtion of berberine were as follow: Cmax were 0.545±0.051 mg·L~(-1), 0.587±0.030 mg·L~(-1), 0.667±0.017 mg·L~(-1), 0.733±0.0298 mg·L~(-1); AUC0～t were 2.019±0.388 mg·L~(-1)·h, 1.962±0.254 mg·L~(-1)·h, 2.008±0.619 mg·L~(-1)·h, 2.969±0.295 mg·L~(-1)·h; CL were 32.937±12.695 L·h~(-1)·kg~(-1), 32.656±3.599 L·h~(-1)·kg~(-1), 34.556±9.167 L·h~(-1)·kg~(-1), 22.748±4.654 L·h~(-1)·kg~(-1). The results showed that, there was no significant difference in other pharmacokinetic parameters of puerarin between Group 1 and Group 2. While there were no significant differences for pharmacokinetic parameters of puerarin except increasing of Cmax after oral doses ( 100mg·kg~(-1) berberine, 200mg·kg~(-1) berberine ) ( P < 0.01 ). AUC0～t of puerarin increased in Group 4 compared with Group 1.
CONCLUSIONS:
The method was specific, sensitive and simple, and suitable for determination of Puerarin in rat plasma and pharmacokinetics researches. The results were accurate, a two-compartment pharmacokinetic model was adapted to Puerarin plasma concentration-time data analysis, the main pharmacokinetic parameters were similar to those reported domestic and abroad. So it could assist to approach internal compatibility in traditional Chinese medicine complex prescription.
建立大鼠血浆中葛根素(Puerarin)浓度的高效液相色谱(HPLC)测定法,观察葛根素在大鼠体内的药动学过程以及小檗碱对大鼠体内葛根素药动学的影响,并计算相应的药动学参数,探讨两药合用后葛根素在大鼠体内的药动学变化情况。
方法:
血浆样品采用6%高氯酸沉淀蛋白,15000 r·min~(-1)高速离心后进行检测。色谱柱为Hypersil ODS(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.0043mol·L~(-1)磷酸二氢钾缓冲液(pH2.7)(22:78),流速为0.8 mL·min~(-1),柱温为30℃,检测波长250 nm,进样量为20μL。大鼠灌胃给予葛根素混悬液(100 mg·kg~(-1) )及葛根素和小檗碱混合液(100 mg·kg~(-1) + 50 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 100 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 200 mg·kg~(-1)),用HPLC法测定大鼠给药后不同时间血浆葛根素的浓度,所得药物浓度-时间数据用DAS 2.1.1程序处理,进行自动房室模型判别及药动学参数计算,并对单独用药组及联合用药组进行比较。
结果:
1.葛根素的标准血药浓度的线性范围为0.10～10.00 mg·L~(-1),回归方程为A = 2.7019×104 C + 2495.8 ,r = 0.999 5,葛根素的最低检测限(LLOD)为0.05 mg·L~(-1) (S/N>3);高、中、低三种浓度的日内、日间精密度RSD分别小于2.11%和2.79% ;方法回收率为96.64%～112.55%。
2.合用小檗碱前后,葛根素混悬液组(100 mg·kg~(-1))及葛根素和小檗碱混合液组(100 mg·kg~(-1) + 50 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 100 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 200 mg·kg~(-1))四组中葛根素的主要药动学参数Cmax分别为(0.545±0.051)mg·L~(-1)、(0.587±0.030)mg·L~(-1)、(0.667±0.017)mg·L~(-1)、(0.733±0.0298)mg·L~(-1);AUC0～t分别为(2.019±0.388)mg·L~(-1)·h、(1.962±0.254)mg·L~(-1)·h、(2.008±0.619)mg·L~(-1)·h、(2.969±0.295)mg·L~(-1)·h;CL分别为(32.937±12.695)L·h~(-1)·kg~(-1)、(32.656±3.599) L·h~(-1)·kg~(-1)、(34.556±9.167)L·h~(-1)·kg~(-1)、(22.748±4.654)L·h~(-1)·kg~(-1)。结果显示葛根素与小檗碱合用后,葛根素和小檗碱混合用药组(100 mg·kg~(-1) + 50 mg·kg~(-1))药动学参数与葛根素组(100 mg·kg~(-1))无显著性差异;葛根素和小檗碱混合用药组(100 mg·kg~(-1) + 100 mg·kg~(-1)、100 mg·kg~(-1) + 200 mg·kg~(-1)) Cmax增大,有显著性差异(P < 0.01);葛根素和小檗碱混合用药组(100 mg·kg~(-1) + 200 mg·kg~(-1)) Cmax,AUC0～t均增大,有显著性差异(P < 0.01)。
结论:
本实验建立的大鼠血浆中葛根素HPLC测定法,操作简单,费用低,方法可靠,灵敏度高,血浆中成分不干扰,能较好适应目前大多数实验室条件,适用于葛根素的血药浓度检测及药动学研究。大鼠灌胃葛根素后的药-时过程符合二室模型,与国内外文献相近,葛根素在动物体内的药动学过程的研究,有助开展中药复方中主要有效成分间的配伍研究,探讨中药复方内在配伍规律。
OBJECTIE:
To establish a sensitive and specific method for determination of puerarin in rat plasma by HPLC and study its pharmacokinetics.
METHODS:
Puerarin was extracted from plasma with perchloric acid and was centrifugated by high speed. HPLC analysis was carried out through Hypersil ODS column( 4.6 mm×150 mm, 5μm ).The mobile phase consisted of methanol-0.0043mol·L~(-1) potassium dihydrogen phosphate ( 22:78 ) at a flow rate of 0.8 mL·min~(-1). The column temperature was 30℃and the wave length was 250 nm. Plasma puerarin concentration was determined by HPLC after intragastrically given of puerarin ( 100 mg·kg~(-1) ) or puerarin combined with berberine ( 50mg·kg~(-1), 100mg·kg~(-1), 200mg·kg~(-1) ) in rats. The data obtained were processed by DAS 2.1.1 software to calculate the varities of pharmacokinetic parameters after ig single durg or mixed drugs.
RESULTS: 1. The standard curve was linear in the range of 0.10 mg·L~(-1)～10.00 mg·L~(-1)( A = 2.7019×104 C + 2495.8, r = 0.999 5 ). The lowest limit of detection was 0.05 mg·L~(-1). The relative standard derivation of inter-day and intra-day was smaller than 2.11% and 2.79%. The relative recoveries of Puerarine were 96.64%～112.55%.
2. The main pharmacokinetic parameters of puerarin before and after coadministmtion of berberine were as follow: Cmax were 0.545±0.051 mg·L~(-1), 0.587±0.030 mg·L~(-1), 0.667±0.017 mg·L~(-1), 0.733±0.0298 mg·L~(-1); AUC0～t were 2.019±0.388 mg·L~(-1)·h, 1.962±0.254 mg·L~(-1)·h, 2.008±0.619 mg·L~(-1)·h, 2.969±0.295 mg·L~(-1)·h; CL were 32.937±12.695 L·h~(-1)·kg~(-1), 32.656±3.599 L·h~(-1)·kg~(-1), 34.556±9.167 L·h~(-1)·kg~(-1), 22.748±4.654 L·h~(-1)·kg~(-1). The results showed that, there was no significant difference in other pharmacokinetic parameters of puerarin between Group 1 and Group 2. While there were no significant differences for pharmacokinetic parameters of puerarin except increasing of Cmax after oral doses ( 100mg·kg~(-1) berberine, 200mg·kg~(-1) berberine ) ( P < 0.01 ). AUC0～t of puerarin increased in Group 4 compared with Group 1.
CONCLUSIONS:
The method was specific, sensitive and simple, and suitable for determination of Puerarin in rat plasma and pharmacokinetics researches. The results were accurate, a two-compartment pharmacokinetic model was adapted to Puerarin plasma concentration-time data analysis, the main pharmacokinetic parameters were similar to those reported domestic and abroad. So it could assist to approach internal compatibility in traditional Chinese medicine complex prescription.
引文
1.高风英.葛根素药理作用的研究进展[J].中草药,2003,34(12):附7-8.
2.夏华玲.葛根素的药理作用研究进展[J].时珍国医国药,2006,17(3):434.
3.潘洪平.葛根、牛磺酸及其复方制剂降血糖作用的研究进展[J].中成药,2002,24 (3):221.
4.吴国平,黄丹丹.葛根素注射液治疗60例急性脑梗塞临床研究[J].现代中西医结合杂志,2001,10 (10):910.
5.王健,赵岚峰,王杰,等.高效毛细管电泳简介及其在中药分析中的应用[J].中成药,1996,18(10):45.
6.金昔陆,朱秀媛.血浆中葛根素的薄层-紫外光密度扫描测定法及其在家兔的药动学[J].中国药理学通报,1991,7:421.
7.王艳红,陈晓辉,毕开顺.大鼠血浆中葛根素的HPLC-荧光法测定及其药动学[J].中国医药工业杂志,2007,38(11):784.
8.金昔陆,朱秀媛,王文杰,等.血浆中葛根素的高效液相色谱测定法及其在狗体内的药代动力学[J].药学学报,1997,32(10)∶782～785.
9. Zhongze Ma, Qingli Wu, David Y.W. Lee, et al. Determination of puerarin in human plasma by high performance liquid chromatography[J]. Journal of Chromatography B,2005,823:108-114.
10.向大雄,张杰,李焕德,等.HPLC法测定犬血浆中葛根素含量[J].药物分析杂志,2004,24(6):599.
11.向大熊,李焕德,罗英杰,等.葛根总黄酮生物黏附性缓释片在家犬体内的药动学及生物利用度研究[J].中国药学杂志,2005,40(7):532-534.
12.方继辉,朱炳辉,邹玉婷,等.SPE-HPLC法测定中成药中葛根素的含量[J].中药新药与临床药理,2004,15(3):187-189.
13.张莉,黄熙,任平,等.三维HPLC法同步测定犬血浆中的葛根素及阿魏酸[J].沈阳药科大学学报,2001,18(1):45.
14.黄熙,任平,张莉. HPLC法测定犬口服养阴通脑颗粒后血浆中的葛根素[J].中国药科大学学报,2001,32(2):127-129.
15. Jeevan K. Prasain, Ning Peng, Edward Acosta, et al. Pharmacokinetic study of puerarin in rat serum by liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Biomed. Chromatogr, 2007,21: 410–414.
16. Fuzheng Ren, Qiufang Jing , Yongjia Shen, et al. Quantitative determination of puerarin in dog plasma by HPLC and study on the relative bioavailability of sustained release tablets[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis , 2006,41:549–553.
17.杜力军,於兰,常琪,等.新工艺制备的葛根黄酮的药代动力学研究[J].中药药理与临床,1997,13 (2):19-23.
18.张志荣,游学均,魏振平,等.愈风宁心胶囊在兔体内的药动学和生物利用度研究[J].中国药学杂志,1997,32(4):224-226.
19.吴燕红,苏子仁,赖小平,等.从小鼠体内的血药浓度时态曲线与组织分布特征评价葛根素的给药途径[J].中药新药与临床药理,2005,16(2):112-115.
20.李颖,潘卫三,陈士林,等.葛根素及其磷脂复合物在Beagle犬体内的药动学比较[J].中草药,2006,37(5):596-796.
21.郭东艳,杨大坚,陈士林.葛根素及其衍生物在大鼠体内的药代动力学研究[J].陕西中医学院学报,2008,31(1):52-54.
22.吴艳萍,谭晓梅,邢学峰,等.葛根芩连煎剂中小檗碱在犬体内药动学研究[J].中国药房,2006,17(11):811-813.
23.李东辉,侯胜田.连葛降糖片质量标准[J].解放军药学学报,2008,24(5):416-420.
24.陈礼明,刘圣,唐丽琴,等.正交试验优选黄连散中葛根等成分的提取工艺[J].中国药房,2006,17(6):415-417.
25.崔升淼,马龑斌.维拉帕米对葛根素药动学的影响[J].中国中药杂志,2008,33(16):3302.
26.刘朝江.黄连素的临床应用进展[J].中国医院药学杂志,2005,25 (3):272-273.
27. Tang L Q, Wei W, Chen L M, et al. Effect of berberine on diabetes induced by alloxan and a hign-fat /high-cholesterol diet in rats[J]. J Ethnopharcology, 2006, 108 (1) : 109 - 115.
28.付燕,胡本容,汤强,等.药根碱、小檗碱、黄连煎剂及模拟方对小鼠血糖的影响[J].中草药, 2005, 36 (4):548.
29.曹莉,顾振纶,茅彩萍.葛根素对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响[J].中草药, 2006,37 (6):901.
30.李克翔,钟惠菊,肖杨,等.葛根素对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用[J].中国临床康复,2006,10(31):64-66.
31.粱桂才.葛根素注射液的不良反应[J].中成药,2005,27(7):附4-6.
32.唐志书,郭东艳,宋逍.葛根素普通粉及其微粉在Beagle犬体内的生物利用度[J].辽宁中医杂志,2005,32(8):830 - 831.
33.周毅生,贾永艳,申小清,等.葛根素固体分散体的制备及其体外研究[J].中国药学杂志,2003, 38(1):42-44.
34.李颖,潘卫三,陈士林,等.葛根素磷脂复合物的制备及其固体分散体研究[J].中国药学杂志,2006, 41(15):1162-1167.
35.于爱华,翟光喜,崔晶,等.葛根素固体自微乳的研制[J].中药材,2006,29 (8):834 - 838.
36.崔升淼,赵春顺,何仲贵.大鼠肠管外翻模型对葛根素吸收机制的研究[J].时珍国医国药,2008,19(7):1715-1716.
37.崔升淼,赵春顺,何仲贵.葛根素在Caco-2细胞模型中的吸收特性[J].中草药,2007,8(6):836-839.
38.辛华雯,吴笑春,李罄,等.黄连素对P-糖蛋白底物在Caco-2和L-MDR1细胞跨膜转运的影响[J].中国药理学通报,2007,23(6):799-803.
39. Maeng H J, Yoo H J, Kim IW, et al. P-glycoprotein-mediated transport of berberineacross Caco-2 cell monolayers[J]. J PharmSci, 2002, 91:2614 - 21.
40. Pan G Y, Wang G J, Liu X D, et al. The involvement of P-glycoprotein in berberine absorption [J]. Pharmacol Toxicol, 2002,91: 193- 7.
41.邹节明,孟杰,颜正华,等.中药复方有效成分淫羊藿苷的药动学研究[J].中草药,2002,33 (1): 55-57.
42.项琪,程刚,陈济民.芍药甘草汤在大鼠体内药动学研究[J].中国药学杂志,2000,35 (9): 615-618.
43.胡大裕,朱景申,常明向.当归不同配伍药对当归川芎与当归-芍药的药动学研究[J].同济医科大学学报,2001,30 (4):384-386.
44.卢弘,邢东明,孙虹,等.金森脑泰注射剂中葛根素在正常和缺血再灌注模型大鼠体内的药动学研究[J].中国药学杂志,2002,37(1):41.
45.炎彬,孙虹,何希辉,等.葛根黄酮及其葛根素在正常和脑缺血再灌注大鼠体内药动学比较[J].中国药学杂志,2004,39(3):208.
46.汪晓虹,胡惠梅.普乐林对冠心病血液流变性的影响及其临床疗效观察[J].安徽中医学院学报,1999,18(3):9-101.
47.于健.葛根素治疗Ⅱ型糖尿病患者胰岛素抵抗的临床研究[J].山东中医杂志,2001,20(12):727-7291.
48.张慧英,许贻白,王贤军,等.葛根素对糖尿病病人血小板功能及微量清蛋白尿的影响[J].中国新药与临床杂志,1999,18(5):291-2941.
49.陈燕平,邓卫清,郭慧.葛根素注射液治疗脑梗死疗效观察[J].中国医药指南,2010,8(2):86-87.
50.董韶昱,李志刚,胡少争,等.葛根素注射液治疗突发性耳聋疗效观察[J].中国中医急症,2009,l8(8):1263.
51.李文玉,李虎将,张邵帅.HPLC测定脑栓康复胶囊中葛根素的含量[J].中成药,2006,28(12):1838.
52.郭建平,李国栋,赵彤英.HPLC对人血浆中葛根素及葛根黄酮的线性考察[J].药学实践杂志,2003,21(4):219-220.
53.吴正红,朱延勤,程光忻,等.葛根素滴眼液眼内药代动力学的研究[J].中国药科大学学报,1998,29(3):221.
54.严汉英,朱延勤,吴正红,等.葛根素滴眼液降眼压作用及其在眼房水中的药物浓度[J].眼科新进展,1999,19(2):73.
55.崔升淼,赵春顺,毛晶晶,等.乳糖酸红霉素对葛根素药物动力学的影响[J].沈阳药科大学学报,2004,21(6):412-413.
56.黄熙,陈可翼.“证治药动学”新假说的理论与实践[J].中医杂志,1997,38(12):745-747.
57.黄熙,陈可翼,任平.“复方效应成分动力学”新假说的科学依据、要素、意义及前景[J].中国中药杂志,1997,22:250-252.
1.李发美.分析化学[M].第5版,北京:人民卫生出版社,2004.417-418.
2.邵清松,胡润淮.高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用[J].中医药学报,2007,35(3):44-47.
3.张慧.中药现代分离分析技术的应用研究[J].中国初级卫生保健,2006,20(6):64.
4.徐苏丽.联用技术在中药研究中的应用[J].海峡药学,2007,19(6):105-108.
5.艾华,王广基,顾轶,等.超高效液相色谱在现代药代动力学中的应用[J].中国药科大学学报,2007,38(4):294-298.
6.赵欣,谷艳,宋欣鑫,等.HPLC法同时测定当归四逆汤中4种有效成分的含量[J].沈阳药科大学学报,2008,25(3):200-203.
7.杨红美,陈波,曾建国,等.HPLC同时测定虎杖及其提取物中4种有效成分的含量[J].中国中药杂志,2006,31(3):202-204.
8.付辉政,万凯化,刘兰祥,等.RP-HPLC法测定复方柳菊片中蒙花苷[J].中草药,2008,39(2):222-223.
9.李静,车景超,曲佳,等.HPLC法测定番泻豆荚中番泻苷A和番泻苷B[J].中草药,2007,38(12):1897-1898.
10.周家才,梁玉梅.HPLC法测定连蒲双清片中盐酸小檗碱的含量[J].安徽医药,2008,12(12):1150-1151.
11.原文鹏,刘林娜,马双成. HPLC法测定山丹酮缓释片中丹参酮类成分的含量[J].中国药房,2008,19(9):681-682.
12.冯婉姗,黄杰伟,徐志伟,等.HPLC测定滴通鼻炎水中盐酸麻黄碱的含量[J].中成药,2007,29(12):附12-13.
13.张金花,李占军,布仁,等.高效液相色谱法测定蒙药粘毛黄芩中黄芩苷的含量[J].时珍国医国药,2008,19(3):558-559.
14.冯毅凡,郭晓玲,孟青.复方姜附制剂中有效部位干姜的质量控制研究[J].时珍国医国药,2006,17(5):777-779.
15.胡亚楠,冯素香,王淑美,等.脑脉通有效部位中阿魏酸的含量测定[J].河南中医学院学报,2008,23(137):34-35.
16.李伟东,王光宁.四妙勇安汤抗炎有效部位的HPLC图谱研究[J].南京中医药大学学报,2006, 22 (5 ):312-313.
17.姜华,李军,石任兵. HPLC法测定枳实黄酮有效部位中3种二氢黄酮的含量[J].中国药房,2008 19(27):2127-2128.
18.周颖,王彦,王刃锋.半边莲药材HPLC指纹图谱的研究[J].中成药,2007,29(12): 1717-1720.
19.唐旭利,刘静,李国强,等.丹参药材水溶性成分HPLC化学指纹图谱研究[J].中成药,2008,30(3):313-317.
20.刘军,郎爱东,聂磊.柿叶黄酮类成分的HPLC指纹图谱研究[J].中国中药杂志,2008,33(6):694-695.
21.周颖,王彦,王刃锋,等.半边莲药材HPLC指纹图谱的研究[J].中成药,2007,29(12):1717-1720.
22.王倩,王建新,于治国,等.金银花药材高效液相色谱指纹图谱研究[J].中成药,2005,27(7):751-754.
23.李淑芳,吴秀君.HPLC法在中药药代动力学研究中的应用[J].实用药物与临床,2008,11(1):36-38.
24.车庆明,潘丽怡,陈颖,等.灯盏花乙素苷元的药动学研究[J].中国药学杂志,2007,42(18):1418-1421.
25.吴志敏,白敏,丁平田.石杉碱甲缓释片犬体内药动学研究[J].中国新药杂志,2008,17(1):36-39.
26.朱孝芹,臧亚如,张欢,等.家兔血浆中北豆根碱的高效液相色谱法测定及药动学研究[J].时珍国医国药,2008,19(3):596-597.
27.邹远高,梁茂植,余勤,等.HPLC-MS-MS测定人尿液中黄芪甲苷浓度及其尿液药动学研究[J].中国药学杂志,2008,43(1):55-57.
28.王艳红,陈晓辉,毕开顺.大鼠血浆中葛根素的HPLC-荧光法测定及其药动学[J].中国医药工业杂志,2007,38(11):784-786.
29.王本杰,袁桂艳,刘焕君,等. HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究[J].中国药学杂志,2007,42(18):1422-1424.
30.孙言才,孙国平,沈玉先,等.丹皮酚在小鼠体内的药动学研究[J].中国医院药学杂志,2006,26(5):543-545.
31.师少军,李忠芳,陈汇,等.静脉注射蝙蝠葛苏林碱在兔体内的药动学[J].中国药学杂志,2008,43(2):132-134.
32.黄莹,只德广,徐为人,等.樟柳碱在Beagle犬血清中的药动学研究[J].中草药,2006,37(8):1214-1217.
33.方焱,陈礼明,陈象青,等.HPLC法测定注射用双黄连中黄芩苷血浓度及其在家兔体内药物动力学[J].中国药师,2006,9(11):1022-1023.
34.王晓强,杨明炜,刘芳芳,等.黄连与生地黄不同比例配伍对小檗碱在大鼠体内药动学的影响[J].中国中药杂志,2007,32(17):1795-1797.
35.李再新,吴小红,贺福元,等.大鼠血浆中补阳还五汤及总苷元的阿魏酸药物动力学研究[J].中国药师,2007,10(10):943-945.
36.赵怀清,赵荣淑,张超,等.大鼠血浆中五昧子醇甲的药动学研究[J].药物分析杂志,2006,26(5):605-608.
37.李培凡,张韻慧,肖莉,等.中药复方苏冰口崩片中肉桂酸在大鼠体内的HPLC测定及药动学研究[J].中国中药杂志,2007,32(23):2528-2530.
38.谭晓梅,吴艳萍.葛根芩连汤配伍葛根素在兔体内药动学的研究[J].中药药理与临床,2006,22(5):1-2.
2.夏华玲.葛根素的药理作用研究进展[J].时珍国医国药,2006,17(3):434.
3.潘洪平.葛根、牛磺酸及其复方制剂降血糖作用的研究进展[J].中成药,2002,24 (3):221.
4.吴国平,黄丹丹.葛根素注射液治疗60例急性脑梗塞临床研究[J].现代中西医结合杂志,2001,10 (10):910.
5.王健,赵岚峰,王杰,等.高效毛细管电泳简介及其在中药分析中的应用[J].中成药,1996,18(10):45.
6.金昔陆,朱秀媛.血浆中葛根素的薄层-紫外光密度扫描测定法及其在家兔的药动学[J].中国药理学通报,1991,7:421.
7.王艳红,陈晓辉,毕开顺.大鼠血浆中葛根素的HPLC-荧光法测定及其药动学[J].中国医药工业杂志,2007,38(11):784.
8.金昔陆,朱秀媛,王文杰,等.血浆中葛根素的高效液相色谱测定法及其在狗体内的药代动力学[J].药学学报,1997,32(10)∶782～785.
9. Zhongze Ma, Qingli Wu, David Y.W. Lee, et al. Determination of puerarin in human plasma by high performance liquid chromatography[J]. Journal of Chromatography B,2005,823:108-114.
10.向大雄,张杰,李焕德,等.HPLC法测定犬血浆中葛根素含量[J].药物分析杂志,2004,24(6):599.
11.向大熊,李焕德,罗英杰,等.葛根总黄酮生物黏附性缓释片在家犬体内的药动学及生物利用度研究[J].中国药学杂志,2005,40(7):532-534.
12.方继辉,朱炳辉,邹玉婷,等.SPE-HPLC法测定中成药中葛根素的含量[J].中药新药与临床药理,2004,15(3):187-189.
13.张莉,黄熙,任平,等.三维HPLC法同步测定犬血浆中的葛根素及阿魏酸[J].沈阳药科大学学报,2001,18(1):45.
14.黄熙,任平,张莉. HPLC法测定犬口服养阴通脑颗粒后血浆中的葛根素[J].中国药科大学学报,2001,32(2):127-129.
15. Jeevan K. Prasain, Ning Peng, Edward Acosta, et al. Pharmacokinetic study of puerarin in rat serum by liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Biomed. Chromatogr, 2007,21: 410–414.
16. Fuzheng Ren, Qiufang Jing , Yongjia Shen, et al. Quantitative determination of puerarin in dog plasma by HPLC and study on the relative bioavailability of sustained release tablets[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis , 2006,41:549–553.
17.杜力军,於兰,常琪,等.新工艺制备的葛根黄酮的药代动力学研究[J].中药药理与临床,1997,13 (2):19-23.
18.张志荣,游学均,魏振平,等.愈风宁心胶囊在兔体内的药动学和生物利用度研究[J].中国药学杂志,1997,32(4):224-226.
19.吴燕红,苏子仁,赖小平,等.从小鼠体内的血药浓度时态曲线与组织分布特征评价葛根素的给药途径[J].中药新药与临床药理,2005,16(2):112-115.
20.李颖,潘卫三,陈士林,等.葛根素及其磷脂复合物在Beagle犬体内的药动学比较[J].中草药,2006,37(5):596-796.
21.郭东艳,杨大坚,陈士林.葛根素及其衍生物在大鼠体内的药代动力学研究[J].陕西中医学院学报,2008,31(1):52-54.
22.吴艳萍,谭晓梅,邢学峰,等.葛根芩连煎剂中小檗碱在犬体内药动学研究[J].中国药房,2006,17(11):811-813.
23.李东辉,侯胜田.连葛降糖片质量标准[J].解放军药学学报,2008,24(5):416-420.
24.陈礼明,刘圣,唐丽琴,等.正交试验优选黄连散中葛根等成分的提取工艺[J].中国药房,2006,17(6):415-417.
25.崔升淼,马龑斌.维拉帕米对葛根素药动学的影响[J].中国中药杂志,2008,33(16):3302.
26.刘朝江.黄连素的临床应用进展[J].中国医院药学杂志,2005,25 (3):272-273.
27. Tang L Q, Wei W, Chen L M, et al. Effect of berberine on diabetes induced by alloxan and a hign-fat /high-cholesterol diet in rats[J]. J Ethnopharcology, 2006, 108 (1) : 109 - 115.
28.付燕,胡本容,汤强,等.药根碱、小檗碱、黄连煎剂及模拟方对小鼠血糖的影响[J].中草药, 2005, 36 (4):548.
29.曹莉,顾振纶,茅彩萍.葛根素对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响[J].中草药, 2006,37 (6):901.
30.李克翔,钟惠菊,肖杨,等.葛根素对糖尿病肾病大鼠肾功能的保护作用[J].中国临床康复,2006,10(31):64-66.
31.粱桂才.葛根素注射液的不良反应[J].中成药,2005,27(7):附4-6.
32.唐志书,郭东艳,宋逍.葛根素普通粉及其微粉在Beagle犬体内的生物利用度[J].辽宁中医杂志,2005,32(8):830 - 831.
33.周毅生,贾永艳,申小清,等.葛根素固体分散体的制备及其体外研究[J].中国药学杂志,2003, 38(1):42-44.
34.李颖,潘卫三,陈士林,等.葛根素磷脂复合物的制备及其固体分散体研究[J].中国药学杂志,2006, 41(15):1162-1167.
35.于爱华,翟光喜,崔晶,等.葛根素固体自微乳的研制[J].中药材,2006,29 (8):834 - 838.
36.崔升淼,赵春顺,何仲贵.大鼠肠管外翻模型对葛根素吸收机制的研究[J].时珍国医国药,2008,19(7):1715-1716.
37.崔升淼,赵春顺,何仲贵.葛根素在Caco-2细胞模型中的吸收特性[J].中草药,2007,8(6):836-839.
38.辛华雯,吴笑春,李罄,等.黄连素对P-糖蛋白底物在Caco-2和L-MDR1细胞跨膜转运的影响[J].中国药理学通报,2007,23(6):799-803.
39. Maeng H J, Yoo H J, Kim IW, et al. P-glycoprotein-mediated transport of berberineacross Caco-2 cell monolayers[J]. J PharmSci, 2002, 91:2614 - 21.
40. Pan G Y, Wang G J, Liu X D, et al. The involvement of P-glycoprotein in berberine absorption [J]. Pharmacol Toxicol, 2002,91: 193- 7.
41.邹节明,孟杰,颜正华,等.中药复方有效成分淫羊藿苷的药动学研究[J].中草药,2002,33 (1): 55-57.
42.项琪,程刚,陈济民.芍药甘草汤在大鼠体内药动学研究[J].中国药学杂志,2000,35 (9): 615-618.
43.胡大裕,朱景申,常明向.当归不同配伍药对当归川芎与当归-芍药的药动学研究[J].同济医科大学学报,2001,30 (4):384-386.
44.卢弘,邢东明,孙虹,等.金森脑泰注射剂中葛根素在正常和缺血再灌注模型大鼠体内的药动学研究[J].中国药学杂志,2002,37(1):41.
45.炎彬,孙虹,何希辉,等.葛根黄酮及其葛根素在正常和脑缺血再灌注大鼠体内药动学比较[J].中国药学杂志,2004,39(3):208.
46.汪晓虹,胡惠梅.普乐林对冠心病血液流变性的影响及其临床疗效观察[J].安徽中医学院学报,1999,18(3):9-101.
47.于健.葛根素治疗Ⅱ型糖尿病患者胰岛素抵抗的临床研究[J].山东中医杂志,2001,20(12):727-7291.
48.张慧英,许贻白,王贤军,等.葛根素对糖尿病病人血小板功能及微量清蛋白尿的影响[J].中国新药与临床杂志,1999,18(5):291-2941.
49.陈燕平,邓卫清,郭慧.葛根素注射液治疗脑梗死疗效观察[J].中国医药指南,2010,8(2):86-87.
50.董韶昱,李志刚,胡少争,等.葛根素注射液治疗突发性耳聋疗效观察[J].中国中医急症,2009,l8(8):1263.
51.李文玉,李虎将,张邵帅.HPLC测定脑栓康复胶囊中葛根素的含量[J].中成药,2006,28(12):1838.
52.郭建平,李国栋,赵彤英.HPLC对人血浆中葛根素及葛根黄酮的线性考察[J].药学实践杂志,2003,21(4):219-220.
53.吴正红,朱延勤,程光忻,等.葛根素滴眼液眼内药代动力学的研究[J].中国药科大学学报,1998,29(3):221.
54.严汉英,朱延勤,吴正红,等.葛根素滴眼液降眼压作用及其在眼房水中的药物浓度[J].眼科新进展,1999,19(2):73.
55.崔升淼,赵春顺,毛晶晶,等.乳糖酸红霉素对葛根素药物动力学的影响[J].沈阳药科大学学报,2004,21(6):412-413.
56.黄熙,陈可翼.“证治药动学”新假说的理论与实践[J].中医杂志,1997,38(12):745-747.
57.黄熙,陈可翼,任平.“复方效应成分动力学”新假说的科学依据、要素、意义及前景[J].中国中药杂志,1997,22:250-252.
1.李发美.分析化学[M].第5版,北京:人民卫生出版社,2004.417-418.
2.邵清松,胡润淮.高效液相色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用[J].中医药学报,2007,35(3):44-47.
3.张慧.中药现代分离分析技术的应用研究[J].中国初级卫生保健,2006,20(6):64.
4.徐苏丽.联用技术在中药研究中的应用[J].海峡药学,2007,19(6):105-108.
5.艾华,王广基,顾轶,等.超高效液相色谱在现代药代动力学中的应用[J].中国药科大学学报,2007,38(4):294-298.
6.赵欣,谷艳,宋欣鑫,等.HPLC法同时测定当归四逆汤中4种有效成分的含量[J].沈阳药科大学学报,2008,25(3):200-203.
7.杨红美,陈波,曾建国,等.HPLC同时测定虎杖及其提取物中4种有效成分的含量[J].中国中药杂志,2006,31(3):202-204.
8.付辉政,万凯化,刘兰祥,等.RP-HPLC法测定复方柳菊片中蒙花苷[J].中草药,2008,39(2):222-223.
9.李静,车景超,曲佳,等.HPLC法测定番泻豆荚中番泻苷A和番泻苷B[J].中草药,2007,38(12):1897-1898.
10.周家才,梁玉梅.HPLC法测定连蒲双清片中盐酸小檗碱的含量[J].安徽医药,2008,12(12):1150-1151.
11.原文鹏,刘林娜,马双成. HPLC法测定山丹酮缓释片中丹参酮类成分的含量[J].中国药房,2008,19(9):681-682.
12.冯婉姗,黄杰伟,徐志伟,等.HPLC测定滴通鼻炎水中盐酸麻黄碱的含量[J].中成药,2007,29(12):附12-13.
13.张金花,李占军,布仁,等.高效液相色谱法测定蒙药粘毛黄芩中黄芩苷的含量[J].时珍国医国药,2008,19(3):558-559.
14.冯毅凡,郭晓玲,孟青.复方姜附制剂中有效部位干姜的质量控制研究[J].时珍国医国药,2006,17(5):777-779.
15.胡亚楠,冯素香,王淑美,等.脑脉通有效部位中阿魏酸的含量测定[J].河南中医学院学报,2008,23(137):34-35.
16.李伟东,王光宁.四妙勇安汤抗炎有效部位的HPLC图谱研究[J].南京中医药大学学报,2006, 22 (5 ):312-313.
17.姜华,李军,石任兵. HPLC法测定枳实黄酮有效部位中3种二氢黄酮的含量[J].中国药房,2008 19(27):2127-2128.
18.周颖,王彦,王刃锋.半边莲药材HPLC指纹图谱的研究[J].中成药,2007,29(12): 1717-1720.
19.唐旭利,刘静,李国强,等.丹参药材水溶性成分HPLC化学指纹图谱研究[J].中成药,2008,30(3):313-317.
20.刘军,郎爱东,聂磊.柿叶黄酮类成分的HPLC指纹图谱研究[J].中国中药杂志,2008,33(6):694-695.
21.周颖,王彦,王刃锋,等.半边莲药材HPLC指纹图谱的研究[J].中成药,2007,29(12):1717-1720.
22.王倩,王建新,于治国,等.金银花药材高效液相色谱指纹图谱研究[J].中成药,2005,27(7):751-754.
23.李淑芳,吴秀君.HPLC法在中药药代动力学研究中的应用[J].实用药物与临床,2008,11(1):36-38.
24.车庆明,潘丽怡,陈颖,等.灯盏花乙素苷元的药动学研究[J].中国药学杂志,2007,42(18):1418-1421.
25.吴志敏,白敏,丁平田.石杉碱甲缓释片犬体内药动学研究[J].中国新药杂志,2008,17(1):36-39.
26.朱孝芹,臧亚如,张欢,等.家兔血浆中北豆根碱的高效液相色谱法测定及药动学研究[J].时珍国医国药,2008,19(3):596-597.
27.邹远高,梁茂植,余勤,等.HPLC-MS-MS测定人尿液中黄芪甲苷浓度及其尿液药动学研究[J].中国药学杂志,2008,43(1):55-57.
28.王艳红,陈晓辉,毕开顺.大鼠血浆中葛根素的HPLC-荧光法测定及其药动学[J].中国医药工业杂志,2007,38(11):784-786.
29.王本杰,袁桂艳,刘焕君,等. HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究[J].中国药学杂志,2007,42(18):1422-1424.
30.孙言才,孙国平,沈玉先,等.丹皮酚在小鼠体内的药动学研究[J].中国医院药学杂志,2006,26(5):543-545.
31.师少军,李忠芳,陈汇,等.静脉注射蝙蝠葛苏林碱在兔体内的药动学[J].中国药学杂志,2008,43(2):132-134.
32.黄莹,只德广,徐为人,等.樟柳碱在Beagle犬血清中的药动学研究[J].中草药,2006,37(8):1214-1217.
33.方焱,陈礼明,陈象青,等.HPLC法测定注射用双黄连中黄芩苷血浓度及其在家兔体内药物动力学[J].中国药师,2006,9(11):1022-1023.
34.王晓强,杨明炜,刘芳芳,等.黄连与生地黄不同比例配伍对小檗碱在大鼠体内药动学的影响[J].中国中药杂志,2007,32(17):1795-1797.
35.李再新,吴小红,贺福元,等.大鼠血浆中补阳还五汤及总苷元的阿魏酸药物动力学研究[J].中国药师,2007,10(10):943-945.
36.赵怀清,赵荣淑,张超,等.大鼠血浆中五昧子醇甲的药动学研究[J].药物分析杂志,2006,26(5):605-608.
37.李培凡,张韻慧,肖莉,等.中药复方苏冰口崩片中肉桂酸在大鼠体内的HPLC测定及药动学研究[J].中国中药杂志,2007,32(23):2528-2530.
38.谭晓梅,吴艳萍.葛根芩连汤配伍葛根素在兔体内药动学的研究[J].中药药理与临床,2006,22(5):1-2.