电针对脑缺血再灌注大鼠脑内PDGF-B及TGF-β1影响的研究
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摘要
目的：缺血性脑血管病，又称为脑梗死，是指由于脑部血液供应障碍，缺血、缺氧引起了脑组织坏死软化的脑血管疾病。据有关资料显示，脑梗死的发病率为100-300／10万，死亡率为50-100／10万，存活者中50％-70％留有残疾，为家庭和社会带来了沉重的经济和社会负担。随着社会老龄化进程的加快，脑血管病的病死率在增加，是目前世界范围内人类致死的主要原因之一。
脑缺血研究中发现，当供应脑组织的动脉一支或多支闭塞时，血流的剪切力发生改变，引起脑组织局部血流下降，梗塞周边组织形成高流区域，我们称它为半暗带，半暗带神经元损伤是可逆的，是治疗缺血性脑卒中的基础。研究表明，脑组织缺血后形成的梗死病灶是由中心坏死区及其周围的缺血半暗带组成，细胞凋亡主要出现在缺血半暗带内，挽救保护半暗带可逆的神经元是改善缺血性脑血管病预后的关键。最近的研究表明，脑缺血后神经元的修复不仅与营养因子、生长相关因子表达等有关，还取决于缺血区血管新生营造的微环境。脑血管闭塞以后，缺血区血管增生，有自发形成侧支循环趋向，但不足以代偿原有的血供，缺血得不到纠正。正是由于缺血部位的血流量减少不能激活足够浓度血管新生所需要的生长因子，导致了机体内源性侧支循环难以建立。
目前促进脑缺血后的血管新生的临床尝试尚不成熟，且具有较大的副作用，仍有许多问题有待解决。治疗性血管新生在治疗脑血管病中存在的不足促使我们把目光投向中医学。针刺治疗缺血性脑血管病的良好疗效，已被多年的医疗实践所肯定。络病理论认为，缺血性脑血管病的病机多为脑之脉络瘀塞，脉络末端供血供气、津血互换障碍，引起脑之脉络失养、脑神失用。这与现代医学关于缺血性脑血管病是由于缺血因素导致急骤发作的局灶／半球的脑功能障碍的认识不谋而合。在导师带领的课题组前期研究工作的基础上，进一步从血管新生的角度研究电针对急性脑缺血损伤的保护机制有着较为重要的理论价值和现实意义。
方法：将清洁级SD大鼠随机分为模型组24只(按缺血再灌注1d、2d、4d、8d分4个亚组，每个亚组6只)、电针组24只(按缺血再灌注1d、2d、4d、8d分别加电针刺激分4个亚组，每个亚组6只)、假手术组6只(颈部切开后，仅分离CCA及IPA至PPA，不插线栓)、正常对照组6只(不予处理，正常给水给食)。采用线栓大脑中动脉致局灶性脑缺血模型，电针“水沟”、“内关”、“百会”穴，接G6805-Ⅱ型电针治疗仪，疏密波，每次持续刺激30min，于缺血再灌注2h后行第1次电针刺激，每隔12h再电针刺激1次。运用行为观察法检测各组大鼠神经症状学评分；运用免疫组织化学法检测各组大鼠缺血侧大脑皮层微血管计数、血小板衍生生长因子(PDGF)及其受体(PDGF-R)蛋白表达的变化；运用原位杂交法检测各组大鼠缺血侧大脑皮层TGF-β1mRNA的变化，并进一步分析各指标时空变化的规律及电针干预的影响。
结果：
(1)电针组神经症状学评分再灌注后1d组、2d、4d组、8d组分别和模型组相比，症状明显减轻，评分有显著性差异(p＜0．01，p＜0．05)。
(2)模型组CD34微血管在再灌注1d迅速上升，持继升高至再灌注8d。缺血坏死区周围皮层表达明显增多，排列密集，且强阳性表达，侧脑室脉络膜、室管膜细胞及周围小血管的内皮细胞胞浆呈棕黄色。电针组与模型组表达规律基本一致，但更加广泛。再灌注各时间点，电针组与模型组组比较均有显著差异(P＜0．01或0．05)。
(3)缺血30min再灌注1d，PDGF-B和PDGFR-β的免疫染色增强，主要位于缺血区及其周围的小胶质细胞、星形胶质细胞以及血管内皮细胞中表达增多。梗死区周围神经元的特异性PDGF-B免疫染色于第4d显著增强，阳性细胞数也增加。而PDGFR-β的特异性免疫染色于缺血再灌注第8d显著增强。电针组PDGF-B和PDGFR-β的表达从再灌注后1d至8d均较模型组升高更加明显(P＜0．05)，表达部位与模型组大致相同，但胞浆染色更深，范围更加广泛。
(4)再灌注1d后缺血周边区组织间隙TGF-β1mRNA的表达明显增强。再灌注2d达高峰，并持续至第8d。经过电针治疗后，电针1d、2d组的TGF-β1mRNA表达细胞的数量与同时间段的模型组比较有明显增加(P＜0．05)，而电针4d、8d组缺血脑组织TGF-β1mRNA阳性表达细胞数较相应模型组有增加的趋势，但无统计学意义(P＞0．05)。
结论：
电针能较有效地改善大鼠脑缺血后的神经症状学评分，不仅是早期，晚期8d组仍有效改善预后，促进其神经功能恢复。通过CD34标记，电针刺激后缺血区周围微血管计数比模型组明显增多，表明电针改善脑缺血的神经症状的机制之一是促进了缺血再灌注后的新血管形成。
脑缺血再灌注可以诱导PDGF-B、PDGFR-β和TGF-β1mRNA的表达。其表达代偿性增加，提示它们参与了缺血／再灌注的脑细胞级联反应，在损伤脑的愈合过程中起到保护作用。而电针激活内源性血管新生机制，与上调PDGF-B、PDGFR-β和TGF-β1mRNA的表达有关。通过进一步分析各组缺血侧皮层PDGF-B、PDGFR-β和TGF-β1mRNA表达的时间规律，认为TGF-β1mRNA的活化可能是针刺促进血管新生发挥对抗缺血性脑损伤的关键。
电针相对于外源性“补充”机制，有许多优点，但是电针激活这种内源性反应本身也是有限的因此，怎样进一步激发机体的这种潜能，实现精确、适时、适量的调控，发挥最佳的血管效应，是当今研究的方向。
Objective:Ischemic cerebrovascular disease(ICVD),alsoknown as ischemicapoplexy,is cerebrovascular disease that isdue to the shortage of blood supply of the brain,thenischemiaand hypoxia cause a softening of the brain.According to thedata,the incidence rate of cerebral infarction is 100-300/10million,the mortality rate 50-100/10 million,50%-70%ofsurvival have disability,family and the community has beenbrought a heavy economic and social burdens.With the communityspeeding up the aging process,the mortality rate ofcerebrovascular disease is increasing,is one of the majorcauses of human death in the world.
Study of cerebral ischemia found that when the supply ofa branch or more of artery of brain is closed,fluid shear stresswould change,which decrease blood flow partly in brain,andthe tissue around infarct form high-flow region,we call itpenumbra which is the foundation of treatment of ischemicstroke,the damage of neurons in the penumbra zone isreversible.Studies have shown that Infarction lesions which iscaused by the shortage of the brain tissue is composed ofcentral necrosis area and ischemic penumbra around,apoptosiswas found in the ischemic penumbra,the key to improve ICVD's curative effect is to ameliorate blood accommodation inischemic region,saving nerve cell at ischemic penumbra.Studies recently show that recovery of nerve cell aftercerebral ischemia is not only related to nutrition factors andgrowth-related factor expression,but also depends onangiogenesis in ischemic area to create the micro-environment.After cerebral vascular occlusion,vascular in the ischemiczone is generated,then there is a trend of forming collateralcirculation,but that's not enough to compensate the originalblood supply,ischemia is not improved.Blood flow which is inthe ischemic can not enough to activate growth factorangiogenes,resulting in a machine-derived collateral circula-tion in vivo difficult to establish.
At present,clinical try of postischemic angiogenesis notmature,and have side effects greatly,then there are still manyissues to be resolved.Shortage of therapeutic angiogenesis inthe treatment of cerebrovascular disease prompted us to set oursights on Chinese medicine.Acupuncture treatment of ischemiccerebrovascular disease has a good effect,which has beenaffirmed by the medical practice for many years.This isconnected with the principle of modern medicine on ischemiccerebrovascular disease is due to ischemic factors leading tothe focal sharp attack/cerebral hemisphere dysfunctioncoincides awareness.Instructor-led group in the preliminaryresearch on the basis of further study of angiogenesis ofElectroacupuncture on the point of view of acute cerebralischemic injury has a more important protective mechanism ofthe theoretical value and practical significance.
Method:To SD rats were randomly divided into model group (ischemia-reperfusion by 1d,2d,4d,8d a total of fivesub-groups),electro-acupuncture group(ischemia-reperfusionby ld,2d,4d,8d respectively,electroacupuncture plus a totalof five sub-group),sham operation group(neck incision,theonly separation of CCA and the IPA to the PPA,suture unplugged),the normal control group(no treatment,the normal water supplyto the food),6 in each group.The use of middle cerebral arterysuture-induced focal cerebral ischemia model of electro-acu-puncture“Shuigou”,“Neiguan”,“Baihui”point,then G6805-Ⅱelectro-acupuncture device,density waves,stimulate con-tinuously each 30 minutes,in ischemia-reperfusion 2h laterthe 1st electro-acupuncture stimulation,and then Electro-acu-puncture in every 12h and cardiac reperfusion therapy lh fixedbefore the last.Detection of the use of behavioral observa-tions of rats in each group score of neurological symptoms;theuse of immunohistochemistry of the cortex of ischemic ratsmicrovessel count,platelet-derived growth factor(PDGF)andits receptor(PDGF-R)protein expression changes;the use ofin situ hybridization detection of the ischemic rat cerebralcortex changes in TGF-βlmRNA and further analysis of theindicators of spatial and temporal changes in the law and theeffects of electro-acupuncture intervention.
Results:
(1)Electro-acupuncture groups which is evaluated byneurological deficit score is compared with model groups byld,2d,4d,,8d group after reperfusion,which significantlyimprove the nerve missing sign of the rats and whose scores weresignificantly different from the model ones(p＜0.01,p＜0.05).
(2)Model group,the expression of CD34 microvascular increase rapidly in 1d after reperfusion,and sustainly to 8dreperfusion.The expression of CD34 around necrosis of cerebralcortex was increased significantly and intensively with strongpositive expression,the cytoplasm of endothelial cells inlateral choroidal,ependymal cells and the small vessel aroundshowed brown.The expression of CD34 was basically samebetween electro-acupuncture group and model group,but theelectro-acupuncture one was more.Electro-acupuncture groupcompared with the model group were significantly different fromreperfusion at different time points,(P＜0.01 or 0.05).
(3)In ischemia 30min reperfusion 1d,the immune stainingof PDGF-B and PDGFR-βenhanced,which mainly located inischemic and microglia,astrocytes and endothelial cellsaround.PDGF-B immunostaining specificially in neuronssurrounding the infarct area in 4th day significantly increasedand the number of positive cells also increased.And thespecific immune of PDGFR-βstaining in significantly enhancedin 8th day after ischemia-reperfusion.The expression ofPDGF-BandPDGFR-βin electro-acupuncture group after reper-fusion from ld to 8d increased more than those in model groupsignificantly(P＜0.05),whose zone of expression is the sameroughly as the model group,but the cytoplasm stained a deeper,broader
(4)Expression of TGF-βlmRNA in ischemic zone increasedsignificantly in ld after ischemia-reperfusion.That reachedthe peak in 2d after reperfusion,and continued to 8d.Aftertreatment of electro-acupuncture,compared to the same periodof the model group,the expression of TGF-βlmRNA inelectro-acupuncture ld,2d group significantly increased, while there is an increasing trend that expression of positiveceils of TGF-βlmRNA the electro-acupuncture 4d,8d group ofischemic brain tissue was more than the corresponding modelgroup,but no statistical significance(P＞0.05).
Conclusion:
Electroacupuncture can improve effectively neurologicaldeficit score after ischemic rat brain,not only early andimproving the prognosis in 8d group is still effective later,and promote its recovery of neurological function.By theCD34marker,the microvessel count of electro-acupuncture inischemic areas was more significantly increased than the model,indicating that one of mechanism how electro-acupuncture toimprove the neurological symptoms of cerebral ischemia is topromote the formation of new blood vessels after ischemia-reperfusion.
Cerebral ischemia-reperfusion can induce the expression ofPDGF-B,PDGFR-βand TGF-βlmRNA.Compensatory increase in itsexpression suggesting that they involved cascade of brain cellsin ischemia-reperfusion,and make a role of protection in thehealing process of the brain injury.Electro-acupunctureactivated mechanism of endogenous angiogenesis,which relatedto the increase of expression of PDGF-B,PDGFR-βand TGF-βlmRNA.By further analysis of expression of PDGF-B,PDGFR-βand TGF-βlmRNA in each ischemic group,we thought that themechanism of TGF-βlmRNA maybe that acupuncture promoteangiogenesis to play a key point against hypoxic-ischemic braindamage.
Electroacupuncture compared to mechanism of exogenous“supplementary”have many advantages,but the electro-acupun- cture activate endogenous reaction is also limited.Therefore,how to further stimulate the potential of body achieve controlof accurately,timely and appropriate amount,and play the bestvascular effects,which is the direction of the current study.
脑缺血研究中发现，当供应脑组织的动脉一支或多支闭塞时，血流的剪切力发生改变，引起脑组织局部血流下降，梗塞周边组织形成高流区域，我们称它为半暗带，半暗带神经元损伤是可逆的，是治疗缺血性脑卒中的基础。研究表明，脑组织缺血后形成的梗死病灶是由中心坏死区及其周围的缺血半暗带组成，细胞凋亡主要出现在缺血半暗带内，挽救保护半暗带可逆的神经元是改善缺血性脑血管病预后的关键。最近的研究表明，脑缺血后神经元的修复不仅与营养因子、生长相关因子表达等有关，还取决于缺血区血管新生营造的微环境。脑血管闭塞以后，缺血区血管增生，有自发形成侧支循环趋向，但不足以代偿原有的血供，缺血得不到纠正。正是由于缺血部位的血流量减少不能激活足够浓度血管新生所需要的生长因子，导致了机体内源性侧支循环难以建立。
目前促进脑缺血后的血管新生的临床尝试尚不成熟，且具有较大的副作用，仍有许多问题有待解决。治疗性血管新生在治疗脑血管病中存在的不足促使我们把目光投向中医学。针刺治疗缺血性脑血管病的良好疗效，已被多年的医疗实践所肯定。络病理论认为，缺血性脑血管病的病机多为脑之脉络瘀塞，脉络末端供血供气、津血互换障碍，引起脑之脉络失养、脑神失用。这与现代医学关于缺血性脑血管病是由于缺血因素导致急骤发作的局灶／半球的脑功能障碍的认识不谋而合。在导师带领的课题组前期研究工作的基础上，进一步从血管新生的角度研究电针对急性脑缺血损伤的保护机制有着较为重要的理论价值和现实意义。
方法：将清洁级SD大鼠随机分为模型组24只(按缺血再灌注1d、2d、4d、8d分4个亚组，每个亚组6只)、电针组24只(按缺血再灌注1d、2d、4d、8d分别加电针刺激分4个亚组，每个亚组6只)、假手术组6只(颈部切开后，仅分离CCA及IPA至PPA，不插线栓)、正常对照组6只(不予处理，正常给水给食)。采用线栓大脑中动脉致局灶性脑缺血模型，电针“水沟”、“内关”、“百会”穴，接G6805-Ⅱ型电针治疗仪，疏密波，每次持续刺激30min，于缺血再灌注2h后行第1次电针刺激，每隔12h再电针刺激1次。运用行为观察法检测各组大鼠神经症状学评分；运用免疫组织化学法检测各组大鼠缺血侧大脑皮层微血管计数、血小板衍生生长因子(PDGF)及其受体(PDGF-R)蛋白表达的变化；运用原位杂交法检测各组大鼠缺血侧大脑皮层TGF-β1mRNA的变化，并进一步分析各指标时空变化的规律及电针干预的影响。
结果：
(1)电针组神经症状学评分再灌注后1d组、2d、4d组、8d组分别和模型组相比，症状明显减轻，评分有显著性差异(p＜0．01，p＜0．05)。
(2)模型组CD34微血管在再灌注1d迅速上升，持继升高至再灌注8d。缺血坏死区周围皮层表达明显增多，排列密集，且强阳性表达，侧脑室脉络膜、室管膜细胞及周围小血管的内皮细胞胞浆呈棕黄色。电针组与模型组表达规律基本一致，但更加广泛。再灌注各时间点，电针组与模型组组比较均有显著差异(P＜0．01或0．05)。
(3)缺血30min再灌注1d，PDGF-B和PDGFR-β的免疫染色增强，主要位于缺血区及其周围的小胶质细胞、星形胶质细胞以及血管内皮细胞中表达增多。梗死区周围神经元的特异性PDGF-B免疫染色于第4d显著增强，阳性细胞数也增加。而PDGFR-β的特异性免疫染色于缺血再灌注第8d显著增强。电针组PDGF-B和PDGFR-β的表达从再灌注后1d至8d均较模型组升高更加明显(P＜0．05)，表达部位与模型组大致相同，但胞浆染色更深，范围更加广泛。
(4)再灌注1d后缺血周边区组织间隙TGF-β1mRNA的表达明显增强。再灌注2d达高峰，并持续至第8d。经过电针治疗后，电针1d、2d组的TGF-β1mRNA表达细胞的数量与同时间段的模型组比较有明显增加(P＜0．05)，而电针4d、8d组缺血脑组织TGF-β1mRNA阳性表达细胞数较相应模型组有增加的趋势，但无统计学意义(P＞0．05)。
结论：
电针能较有效地改善大鼠脑缺血后的神经症状学评分，不仅是早期，晚期8d组仍有效改善预后，促进其神经功能恢复。通过CD34标记，电针刺激后缺血区周围微血管计数比模型组明显增多，表明电针改善脑缺血的神经症状的机制之一是促进了缺血再灌注后的新血管形成。
脑缺血再灌注可以诱导PDGF-B、PDGFR-β和TGF-β1mRNA的表达。其表达代偿性增加，提示它们参与了缺血／再灌注的脑细胞级联反应，在损伤脑的愈合过程中起到保护作用。而电针激活内源性血管新生机制，与上调PDGF-B、PDGFR-β和TGF-β1mRNA的表达有关。通过进一步分析各组缺血侧皮层PDGF-B、PDGFR-β和TGF-β1mRNA表达的时间规律，认为TGF-β1mRNA的活化可能是针刺促进血管新生发挥对抗缺血性脑损伤的关键。
电针相对于外源性“补充”机制，有许多优点，但是电针激活这种内源性反应本身也是有限的因此，怎样进一步激发机体的这种潜能，实现精确、适时、适量的调控，发挥最佳的血管效应，是当今研究的方向。
Objective:Ischemic cerebrovascular disease(ICVD),alsoknown as ischemicapoplexy,is cerebrovascular disease that isdue to the shortage of blood supply of the brain,thenischemiaand hypoxia cause a softening of the brain.According to thedata,the incidence rate of cerebral infarction is 100-300/10million,the mortality rate 50-100/10 million,50%-70%ofsurvival have disability,family and the community has beenbrought a heavy economic and social burdens.With the communityspeeding up the aging process,the mortality rate ofcerebrovascular disease is increasing,is one of the majorcauses of human death in the world.
Study of cerebral ischemia found that when the supply ofa branch or more of artery of brain is closed,fluid shear stresswould change,which decrease blood flow partly in brain,andthe tissue around infarct form high-flow region,we call itpenumbra which is the foundation of treatment of ischemicstroke,the damage of neurons in the penumbra zone isreversible.Studies have shown that Infarction lesions which iscaused by the shortage of the brain tissue is composed ofcentral necrosis area and ischemic penumbra around,apoptosiswas found in the ischemic penumbra,the key to improve ICVD's curative effect is to ameliorate blood accommodation inischemic region,saving nerve cell at ischemic penumbra.Studies recently show that recovery of nerve cell aftercerebral ischemia is not only related to nutrition factors andgrowth-related factor expression,but also depends onangiogenesis in ischemic area to create the micro-environment.After cerebral vascular occlusion,vascular in the ischemiczone is generated,then there is a trend of forming collateralcirculation,but that's not enough to compensate the originalblood supply,ischemia is not improved.Blood flow which is inthe ischemic can not enough to activate growth factorangiogenes,resulting in a machine-derived collateral circula-tion in vivo difficult to establish.
At present,clinical try of postischemic angiogenesis notmature,and have side effects greatly,then there are still manyissues to be resolved.Shortage of therapeutic angiogenesis inthe treatment of cerebrovascular disease prompted us to set oursights on Chinese medicine.Acupuncture treatment of ischemiccerebrovascular disease has a good effect,which has beenaffirmed by the medical practice for many years.This isconnected with the principle of modern medicine on ischemiccerebrovascular disease is due to ischemic factors leading tothe focal sharp attack/cerebral hemisphere dysfunctioncoincides awareness.Instructor-led group in the preliminaryresearch on the basis of further study of angiogenesis ofElectroacupuncture on the point of view of acute cerebralischemic injury has a more important protective mechanism ofthe theoretical value and practical significance.
Method:To SD rats were randomly divided into model group (ischemia-reperfusion by 1d,2d,4d,8d a total of fivesub-groups),electro-acupuncture group(ischemia-reperfusionby ld,2d,4d,8d respectively,electroacupuncture plus a totalof five sub-group),sham operation group(neck incision,theonly separation of CCA and the IPA to the PPA,suture unplugged),the normal control group(no treatment,the normal water supplyto the food),6 in each group.The use of middle cerebral arterysuture-induced focal cerebral ischemia model of electro-acu-puncture“Shuigou”,“Neiguan”,“Baihui”point,then G6805-Ⅱelectro-acupuncture device,density waves,stimulate con-tinuously each 30 minutes,in ischemia-reperfusion 2h laterthe 1st electro-acupuncture stimulation,and then Electro-acu-puncture in every 12h and cardiac reperfusion therapy lh fixedbefore the last.Detection of the use of behavioral observa-tions of rats in each group score of neurological symptoms;theuse of immunohistochemistry of the cortex of ischemic ratsmicrovessel count,platelet-derived growth factor(PDGF)andits receptor(PDGF-R)protein expression changes;the use ofin situ hybridization detection of the ischemic rat cerebralcortex changes in TGF-βlmRNA and further analysis of theindicators of spatial and temporal changes in the law and theeffects of electro-acupuncture intervention.
Results:
(1)Electro-acupuncture groups which is evaluated byneurological deficit score is compared with model groups byld,2d,4d,,8d group after reperfusion,which significantlyimprove the nerve missing sign of the rats and whose scores weresignificantly different from the model ones(p＜0.01,p＜0.05).
(2)Model group,the expression of CD34 microvascular increase rapidly in 1d after reperfusion,and sustainly to 8dreperfusion.The expression of CD34 around necrosis of cerebralcortex was increased significantly and intensively with strongpositive expression,the cytoplasm of endothelial cells inlateral choroidal,ependymal cells and the small vessel aroundshowed brown.The expression of CD34 was basically samebetween electro-acupuncture group and model group,but theelectro-acupuncture one was more.Electro-acupuncture groupcompared with the model group were significantly different fromreperfusion at different time points,(P＜0.01 or 0.05).
(3)In ischemia 30min reperfusion 1d,the immune stainingof PDGF-B and PDGFR-βenhanced,which mainly located inischemic and microglia,astrocytes and endothelial cellsaround.PDGF-B immunostaining specificially in neuronssurrounding the infarct area in 4th day significantly increasedand the number of positive cells also increased.And thespecific immune of PDGFR-βstaining in significantly enhancedin 8th day after ischemia-reperfusion.The expression ofPDGF-BandPDGFR-βin electro-acupuncture group after reper-fusion from ld to 8d increased more than those in model groupsignificantly(P＜0.05),whose zone of expression is the sameroughly as the model group,but the cytoplasm stained a deeper,broader
(4)Expression of TGF-βlmRNA in ischemic zone increasedsignificantly in ld after ischemia-reperfusion.That reachedthe peak in 2d after reperfusion,and continued to 8d.Aftertreatment of electro-acupuncture,compared to the same periodof the model group,the expression of TGF-βlmRNA inelectro-acupuncture ld,2d group significantly increased, while there is an increasing trend that expression of positiveceils of TGF-βlmRNA the electro-acupuncture 4d,8d group ofischemic brain tissue was more than the corresponding modelgroup,but no statistical significance(P＞0.05).
Conclusion:
Electroacupuncture can improve effectively neurologicaldeficit score after ischemic rat brain,not only early andimproving the prognosis in 8d group is still effective later,and promote its recovery of neurological function.By theCD34marker,the microvessel count of electro-acupuncture inischemic areas was more significantly increased than the model,indicating that one of mechanism how electro-acupuncture toimprove the neurological symptoms of cerebral ischemia is topromote the formation of new blood vessels after ischemia-reperfusion.
Cerebral ischemia-reperfusion can induce the expression ofPDGF-B,PDGFR-βand TGF-βlmRNA.Compensatory increase in itsexpression suggesting that they involved cascade of brain cellsin ischemia-reperfusion,and make a role of protection in thehealing process of the brain injury.Electro-acupunctureactivated mechanism of endogenous angiogenesis,which relatedto the increase of expression of PDGF-B,PDGFR-βand TGF-βlmRNA.By further analysis of expression of PDGF-B,PDGFR-βand TGF-βlmRNA in each ischemic group,we thought that themechanism of TGF-βlmRNA maybe that acupuncture promoteangiogenesis to play a key point against hypoxic-ischemic braindamage.
Electroacupuncture compared to mechanism of exogenous“supplementary”have many advantages,but the electro-acupun- cture activate endogenous reaction is also limited.Therefore,how to further stimulate the potential of body achieve controlof accurately,timely and appropriate amount,and play the bestvascular effects,which is the direction of the current study.
引文
[1]王维治．神经病学[M]．北京：人民卫生出版社，2001： 130．
[2]Stollberger C，Chnupa P，Abzieber C，et al．Mortality and rate of stroke or embolism in atrial fibrillation during long-term followup in the embolism in left artial thrombi (ELAT) study[J]．Clin Cardiol，2004，27(1)：40-46．
[3]Ding YH，Li J，Zhou Y．Cerebral angiogenesis and expression of angiogenic factors in aging rats after exercise [J]．Curr Neurovasc Res，2006，3(1)：15-23．
[4]Ghajar CM，Blevins KS，Huqhes CC，et al．Mesenchymal stem cells enhance angiogenesis in mechanically viable prevascularized tissues via early matrix metalloproteinase upregulation[J]．Tissue Eng，2006，12：2875-2888．
[5]黄世杰．血管新生的生物学：最重要的分子机制[J]．国际药学研究杂志，2008，35(1)：65-67．
[6]Krupinski J，Kaluza J，Kumar，et al．Role of angiogenesis in patients with cerebral ischemic stroke [J]．Stroke， 1994，25(9)：1794-1798．
[7]Hockel．Angiotropin treatment prevents flap necrosis and enhances dermal regeneration in rabbits[J]．Arch Surg，1989，124(6)：693-698．
[8]曾俊，严洁．针灸对急性期脑缺血保护作用机制研究进展[J]．中医药导报，2008， 14(1)：72-75．
[9]赵建国．脑梗死[M]．北京：人民卫生出版社，2006： 1．
[10]陈邦国，毛庆菊，孔立红．电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血脑区细胞粘附分子表达的影响[J]．湖北中医学院学报，2006， 8 (4)： 3-5．
[11]毛庆菊，陈邦国，黎逢光，等．电针对全脑缺血再灌注大鼠的保护作用[J]．湖北中医学院学报，2004， 6 (2)： 21-22．
[12]毛庆菊，王汉兵，陈邦国，等．电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠外周血中可溶性细胞间粘附分子-1和内皮素-1的影响[J]．针刺研究，2006，31(5)：272-275．
[1]王维治．神经病学[M]．北京：人民卫生出版社，2001年，130．
[2]Stollberger C，Chnupa P，Abzieber C，et al．Mortality and rate of stroke or embolism in atrial fibrillation during long-term followup in the embolism in left artial thrombi(ELAT)study[J]．Clin Cardiol，2004，27(1)：40-46．
[3]Longa EZ，Weinstein PR，Carson S，et al．Reversible middle cerebral artery， occlusion without craniotomy in rats[J]．Stroke，1989，20：84-90．
[4]华兴邦，李辞蓉，周浩良，等．大鼠穴位图谱的研制[J]．实验动物与动物实验，1991， 1： 1-3．
[5]辛世萌，刘远洪，聂志余．栓线长度、直径大鼠体重与栓线法大鼠局灶性脑缺血模型关系的研究[J]．大连医科大学学报，2000， 22 (2 )： 105-107．
[6]刘亢丁，苏志强，李毅平，等．实验性局灶性脑缺血再灌注动物模型的改进及评价[J]．中风与神经疾病杂志，1997， 14 (2 )： 87-89．
[7]龚彪，李长清，黄剑．SD大鼠线栓法局灶性脑缺血／再灌注模型的改进[J]．重庆医学，2006， 35 (4 )： 313-315．
[8]张均田．现代药理实验方法[M]．北京：中国协和医科大学联合出版社，1998： 1240．
[9]杨渊，闻瑞友．光化学诱导老年大鼠局灶性脑梗死模型的研究[J]．中国老年医学杂志，2001， 21 (1 )： 35-37．
[10]Krueger K，Buseh E．protoeol of a thromboembolic stroke model in the rat：review of the experimental procedeure and comparison of models[J]．Invest Radiol，2002，3 7(11)：600-607．
[11]邵淑琴，林建，郑彩梅．大脑中动脉缺血模型的制作进展[J]．中风与神经疾病杂志，1995， 12 (3 )： 185-186．
[12]Koizumi J，Yoshid YNakazawa T，et al．Experimental studies of ischemia brina edema．A new experimental mode of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in ischemia area[J]．Stroke， 1986，8：1-9．
[13]曹霞，曹秉振，郭述苏．大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型的时间体积相关研究[J]．解放医学杂志，2000， 25 (2)： 123-125．
[14]张国瑾，赵增荣．国外脑血管疾病研究进展[M]．北京：中国医药科技出版社，2000： 3-7．
[15]范刚启，吴勋，陶月玉，等．脑梗死上肢电针治疗方案的优选及其对TXB_2及KetoE-PGF 1 a的影响[J]．中国针灸，2003， 23： 567-569．
[16]苏勋庄，侯建，高楠，等．早期电针疗法对急性缺血性中风患者的预后影响及其作用机制探讨[J]．中西医结合实用临床急救，2004， 4： 26-28．
[1]高培毅，粱晨阳，林燕，等．脑梗死前期脑局部微循环障碍CT灌注成像的实验研究[J]．中华放射学杂志，2003， 37： 701-706．
[2]桂雅星．脑微血管对局灶性缺血的反应[J]．国外医学神经病学神经外科学分册，2004， 31 (5 )： 448-450．
[3]Krupinskin J，Lssa R，Bujny T，et al．A putative role for platelet derived growth factor in angiogenesis and neuroprotection after ischemic stroke in man[J]．Stroke，2004，28：561-657．
[4]Zhang ZG，Zhang L，Jiang Q，et al．VEGF enhance angiogenesis and promotes blood-brain barrier leakage in the ischemic brain[J]．J Clin Invest，2000，106(7)：829-838．
[5]Beck H，Voswinckel R，Wagner S，et al．Participation of bone marrowderived cells in long-term repaie processes after experimental stroke[J]．J Cereb Blood Flow Metab，2003，23：709-717．
[6]Akihiko T，Toshihiro S，Hidekazu T，et al．Administration of CD34~+ cells after stroke enhances neurogenesis viaangiogenesis in a mouse model[J]．J Clinical investigation，2004，114(3)：330-33 8．
[7]Mokry J，Cizkova D，Filips，et al．Mestin expression by newhy formed human blood vessels[J]．Stem cells Dev，2004，13(6)：658-664．
[8]方燕南，黄海威，李玲，等．电刺激对大鼠脑梗塞康复中星形细胞和神经元的影响[J]．中国中西医结合杂志，2002， 22： 531-533．
[9]王家有，宿宝贵，潘三强，等．电针对脑梗塞大鼠缺血半影区微血管和神经细胞超微结构的影响[J]．解剖学研究，2005， (27) 4： 274-278．
[1]戚基萍，汤颖，王德生．血小板衍化生长因子与缺血性脑血管病[J]．黑龙江医学，2002， 26 (3 )： 163-164．
[2]Hu Y，Schett G，Zou Yet al．Abundance of platelel-derived growth factors(PDGFs)，PDGF receptors and activation of mito-genactivated protein kinases in brain decline with age[J]．Brain Res Mol Brain Res，1998，53(1-2)：252-259．
[3]Uutela M，Lauren J，Bergsten E，et al．Chromosomal location，exon structure，and vascular expression patterns of the human PDGFc and PDGFd genes[J]．Circulation，2001，103：2242-2247．
[4]Hellstroem M，Gerhardt H，Kalen M，et al．Lack of pericytes leads to endothe- lial hyperplasia and abnormal vascular morphogenesis[J]．J Cell Biol，2001，153 543-554．
[5]梁晓，徐锡金，张宝，等．大鼠急性脊髓损伤后血小板衍化生长因子-B的表达[J]．汕头大学学报，2007， 20 (1 )： 21-23．
[6]Ohno M，Sasahara M，Narumiya S，et al．Expression of platelet-derived growth factor B-chain and beta-receptor in hypoxic／ischemic encephalopathy of neonatal rats [J]．Neuroscience， 1999，90(2)：643 -65 1．
[7]Krupinski J，Issa R，Bujny T，et al．A putative role for platelet-derived growth factor in angiogenesis and neuroprotection after ischemia stroke in humans[J]．Stroke， 1997，28：564-573．
[8]于炳新，谭兰，任惠民，等．PDGF-B及其受体蛋白在缺血大鼠脑组织中的表达[J]．中风与神经疾病杂志，2003， 20 (3 )： 199-201．
[9]Iihara K，Sasahara M，Hashimoto N，et al．Ischemia induces the expression of the platelet-derived growth factor Bchain in neurons and brain macrophages in vivo[J]．J Cereb Blood Flow Metab，1998，14：818-824．
[10]Ohno M，Ono K，Shimada M．Neonatal hypoxic／ischemia encephalopathy： neuropathology and platicity[J]．No To Hattatau，1996，28(3)：118-124．
[11 ]Renner O，Tsimpas A，Kostin S，et al．Time and cell type-specific induction of platelet-derived growth factors receptor-beta during cerebral ischemia[J]．Brain Res Mol Brain Res，2003，113(1／2)：44-51．
[12]Kim SinghM，Huang J．Matrix metalloproteinase-9 in cerebral aneurysms[J]．J Neurosurgery， 1997，41：642-647．
[13]Iihara K，Hashimoto N，Tsukahara T，et al．Platelet-derived growth factor-BB， but not-AA，prevente delayed neuronal death after forebrain ischemia in rat[J]．J Cereb Blood FlowMetab，1997，17：1097-1106．
[14]Schiene K，Bruchl C，Zilles K，et al．Neuronal hyperexcitability and reduction of GABA-receptor expression in the surround of cerebral photothrombosis [J]．J Cereb Blood Flow Metab， 1999，19：906-914．
[15]李英，段惠军．Raf／MEK／ERK信号转导通路在糖尿病肾病发生发展中的作用[J]．国际内分泌代谢杂志，2007， 27 (7 )： 269-271．
[16]Nakata S，Fujita N，Kitagawa Yet al．Regulation of platelet-derived growth factor receptor activation by afadin through SHP-2：implications for cellular morphology[J]．J Biol Chem，2007，282(52)：37815-37825．
[17]Sandilands E，Cans C，Fincham VJ，et al．RhoB and actin polymerization coordinate Src activation with endosome-mediated delivery to the membrane [J]．Dev Cell，2004，7(6)：855-869．
[18]Yu J，Ustach C，Kim HR．Platelet-derived growth factors signaling and human cancer[J]．J BiochemMolBiol，2003，36(1)：49-59．
[19]Kojima N，Hori M，Murata T，et al．Different profiles of Ca ~(2+) responses to endothelin-1 and PDGF in liver myofibroblasts during the process of cell differentiation[J]．Br J Pharmacol，2007，151(6) ：816-827．
[20]Egan GG，Wainwright CL，Wadsworth RW，et al．PDGF-induced signaling in proliferating and differentiated vascular smooth muscle：effects of altered intracellular Ca~(2+) regulation[J]．Cardiovasc Res，2005，67(2)：308-316．
[1 ]Russette M，Lyons RM，Mosos HL．Transforming growth factors and the regulation of cell proliferation[J]．Eur J Biochem，1990，187(3)：467-473．
[2]Azhar M，Schultz Jel J，Grupp I，et al．Transforming growth factor beta in cardiovascular development and function[J]．Cytokine Growth Factor Rev， 2003，14(5)：391-407．
[3]Lebrin F，Deckers M，Bertolino Pet al．TGF-beta receptor function in the endothelium[J]．Cardiovasc Res，2005，65(3)：599-608．
[4]Yamasaki Y，Itoyama Y，Kogure K．Involvement of cytokine production in pathogenesis of transient cerebral ischemic damage[J]．Keio J Med，1996，45(3)：225-229．
[5]Van Royen N，Hoefer I，Buschmann I，et al．Exogenous application of transforming growth factor beta 1 stimulates arteriogenesis in the peripheral circulation[J]．FASEB J，2002，16：432-434．
[6]Pang L，Ye W．Reduction of inflammatory response in the mouse brain with adenoviral-mediated transforming growth factor-betal expression [J]．American Heart Association，2001：544-552．
[7]Wierner C，Gehrmann J，Lindholm D，et al．Expression of trasforing growth factor-beta Ⅰ and interlenkin-1 beta mRNA in rat brain following transient barebrain ischemia[J]．Acta Neuropatbol Berl， 1993，86(5)：439-250．
[8]Krupinski J，Kumar P，Kumar S，et al．Increased expression of TGF-betal in brain tissue after ischemic stroke in humans[J]．Stroke，1996，27(5)：852-869．
[9]李旦，韩玉昆．缺氧缺血性脑损伤后脑内转化生长因子基因转录的研究[J]．中华围产医学杂志，2000， 3 (1 )： 26-29．
[10]Vinals F，Pouyssegur J．Transforming growth factor betal(TGF-betal)promotes endothelial cell survival during in vitro angiogenesis via an autocrine mechanism implicating TGF-alpha signaling[J]．Mol Cell Biol，2001，21(21)：7218-7230．
[11 ]Li C，Issa R，Kumar Pet al．CD 105 prevents apoptosis in hypoxic endothelial cells[J]．J Cell Sci，2003，116(13)：2677-2685．
[12]Slevin M，Krupinski J．Serial measurement of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-[beta]1 in sernm of patients with acute ischemic stroke[J]．American Heart Association Inc，2000，1863-1870．
[13]Logan A，Baird A，Berry M．Decorin attenuates gliotic scar formation in the rat cerebral hemisphere[J]．Exp Neurol， 1999，159(2)：504-5 10．
[14]Roussel S，Mackenzie ET，Vivien D，et al．A transforming growth factor beta antagonist unmasks the neuroprotective role of this endogenous cytokine in excitoxic and ischemic brain injury[J]．J Cereb Blood Flow Metab， 1999，19(2)：1345-1353．
[15]McNeill H，Williams C，Guan J，et al．Neuronal rescue with transforming growth factor beta after hypoxic ischemic brain injury[J]．Neuro Report，1994，5(8)：901-901．
[16]Wachs FP，Winner B，Despress C，et al．Transforming growth factor-beta 1 is a negative modulator of adult neurogenesis[J]．J Neuropathol Exp Neurol，2006， 65：358-370．
[1]邱幸凡．络脉理论与临床[M]．陕西：科学技术出版社，1991： 30．
[2]史常永．络病论与微循环[J]．中国医药学报，1992， 7 (5 )： 11-14．
[3]屈风林，王光月．自拟活血通脉散治疗缺血性中风168例临床观察[J]中医杂志，1999， 40 (11 )： 667-669．
[4]夏韵．颜德馨治疗脑梗死的经验[J]．上海中医药杂志，1998， (6 )： 6-7．
[5]刘华．益气活血法治疗缺血性中风临床和药理研究10年回顾与展望[J]．现代中西医结合杂志，2000， 13 (9 )： 1217-1219．
[6]韩丽华，王振涛，索红亮，等．益气活血方促心梗后大鼠缺血心肌血管新生的实验研究[J]．河南中医，2005， 25 (11 )： 22-25．
[7]雷燕，王军辉，陈可冀．黄芪、当归配伍后促鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的药效比较研究[J]．中国中药杂志，2003， 28 (9 )： 876-878．
[8]陈兴华，陈树伦．中西医结合治疗缺血性脑血管病的研究[J]．实用中医药杂志，1996， 12 (6)： 26-27．
[9]穆瑞兰，周建英，田菲．化瘀通脉注射液治疗缺血性中风偏瘫临床对比观察[J]．中医药研究，1999， 15 (4 )： 12-13．
[10]Wang SS，Zheng ZG，Weng YQ，et al．Angiogenesis and antiangiogenesis activity of Chinese medicinal herbal extracts[J]．Life Sci，2004，74：2467-2478．
[11]吴以岭．络病学[M]．北京：中国中医药出版社，2006： 97-98．
[12]李晓涨．针灸“治未病”与“针灸良性预应激假说”[J]．北京中医药大学学报，2003， 26(3)：82-85．
[13]何世铭，马秀林，朱长江．针刺治疗急性缺血性中风的实验研究进展[J]．针刺研究，2000， 25(1)：75-77．
[14]周利，郑国庆，王明杰，等．针刺对缺血性脑损伤保护作用的分子机制研究进展[J]．中国针灸，2003， 23 (5 )： 303-305．
[15]庞勇，李保良．不同穴位治疗缺血性中风的临床研究[J]．中国针灸，2000， 20(2)：69-72．
[16]徐以增，毕臻．古代中风病针灸文献探讨[J]．上海针灸杂志，1998， 17(3)：42-43．
[17]许能贵，周逸平，许冠荪，等．电针大椎、百会穴对局灶性脑缺血大鼠脑血流量和自发脑电的影响[J]．中国中医药科技，2001， 8 (1 )： 3-4．
[18]赵吉平，王燕平．针灸特定穴位的理论与临床[M]．北京：科学技术文献出版社，1998： 433．
[19]马惠芳，严洁，任秀君，等．电针水沟穴对实验性全脑缺血大鼠脑组织钙调素活性的影响[J]．中国中医药信息杂志，2002， 9 (10 )： 25-26．
[20]韩肖华，黄晓琳，李春芳，等．电针对脑缺血大鼠VEGF及Flk-1表达和细胞外钙离子浓度的影响[J]．中国康复，2003， 18 (6 )： 329-331．
[21]程玲，骆明军，明建扩，等．电针对脑缺血再灌注大鼠缺血脑区IL-1β和TNF-αmRNA表达的调节[J]．针刺研究，2003， 25 (3 )： 174-178．
[22]骆明军，程玲，徐丽，等．电针刺激水沟、百会穴后对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞的活化的影响[J]．中国临床康复，2006， 10 (11 )： 180-182．
[23]牛文民，李忠仁，沈梅红，等．电针对大鼠局灶性脑缺血再灌注大脑皮层超微结构形态学损伤的保护作用[J]．上海针灸杂志，2006， 25 (2 )： 34-36．
[24]纪中．电针百会穴对大鼠缺血区脑组织神经生长因子影响的研究[J]．浙江中医学院学报，2005， 29 (3 )： 67-68．
[25]Lin Cheng，Minjun Luo，Bangguo Chen．Effects of Electroacupuncture on Serum IL-1βand TNF-α contents in Cerebral Ischemia-reperfusion Rats[J]．World Journal of Acupuncture-moxibustion，2003，13 (4)：23-28．
[26]毛庆菊，陈邦国，黎逢光，等．电针对全脑缺血再灌注大鼠的保护作用[J]．湖北中医学院学报，2004， 6 (2)： 21-22．
[27]毛庆菊，王汉兵，陈邦国，等．电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠外周血中可溶性细胞间粘附分子-1和内皮素-1的影响[J]．针刺研究，2006，31(5)：272-275．
[28]陈邦国，毛庆菊，孔立红．电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血脑区细胞粘附分子表达的影响[J]．湖北中医学院学报，2006， 8 (4)： 3-5．
[29]刘波，唐强，李静．针刺治疗缺血性脑损伤的实验研究[J]．中国康复理论与实践，2005， 11 (7)： 514-515．
[30]刘振寰，潘佩光，祁岩超，等．电针对新生鼠缺氧缺血脑组织神经细胞凋亡及神经生长因子蛋白表达的影响[J]．中国临床康复，2006， 23 (10)：114-118．
[31]周爽，黄建华．电针对脑缺血再灌注损伤大鼠炎症反应的影响[J]．江苏 中医药，2005， 26 (7 )： 49-51．
[32]吴以岭．“脉络—血管系统病”新概念及其治疗探讨[J]．疑难病杂志，2005，4(5)：285-287．
[33]邱幸凡．络脉理论与临床[M]．西安：陕西科学技术出版社，1991： 1-37．
[34]Lewis P，Rowlan D．MERRITT'S神经病学[M]．辽宁科学技术出版社，2002： 203．
[35]Iurcani P，Tureani M．Effects of propend of ylline on cerebral blood flow in a gerbil focal cerebral ischemia[J]．J Neurol Sci，2001，183(1)：57-60．
[36]Wei L，Erinjeri JP，Rovainen CM，et al．Collateral growth and ngiogenesis around cortical stroke[J]．Stroke，2001，32(9)：2179-2184．
[37]Chen HH，Chen CH，Liu HM．Correlation between angiogenesis and basic fibroblast growth factor expression in experimental brain infarct[J]．Stroke，1994，25(8)：488-493．
[38]李树清，杨丽君，张利能，等．树鼳脑缺血半暗区PAF受体介导的微环境改变及GB保护机制的探讨[J]．中国微循环，2005， 5 (10 )： 301-304．
[39]Issa R，Krupinsk J，Bujny T，et al．Vascular endothelial growth factor and its receptor，KDR，in human brain tissue after ischemic stroke[J]．Lab Invest， 1999，79(4)：417-425．
[40]Emanueli C，Madu P．Angiogenesis gene therapy to rescue ischemic-tissue： achievement's and future directions[J]．Br J Pharmacol，2001，133(7)：951-958．
[41]盛琴比，周爱儒，高炜，等．多肽生长因子与血管生成[J]．中国介入心脏病杂志，1999， 7 (2)： 90-92．
[42]Risau W．Machanisms of angiogenesis[J]．Nature，1997，38(6)：671-680．
[43]Tomanek RJ，Schatteman GC．Angiogenesis： new insights and therapeutic potential [J]．Anat Rec，2000，261：126．
[44]Bdolah Y，Sukhatme VP，Karumanchi SA．Angiogenic imbalance in the pathophysiology of preeclampsia：newer insights [J]．Semin Nephrol，2004，24：548-556．
[45]周凤鑫．组织血液灌注与微循环的病理生理——血管新生与疾病[J]．外科理论与实践，2008， 13 (3 )： 33-37．
[46]Carmeliet P．Mechanisms of angiogenesi and arteriogenesis[J]．Nature Mledicine， 2000， 6(3) ：3 89-3 95 ．
[47]Zhang ZG，Zhang L，Jiang Q，et al．VEGF enhances angiogenesis and promotes blood-brain barrier leakage in the ischemic brain[J]．J Clin Invest，2000，106(7)：829-838．
[48]Krupinski J，Kaluza J，Kumar，et al．Role of angiogenesis in patients with cerebral ischemic stroke [J]．stroke， 1994，25(9)：1794-1798．
[49]Wei L，Erinjeri JP，Rovainen CM，et al．Collateral growth and an-giogenesis around cortical stroke[J]．Stroke，2 001， 3 2 ：2179-2184．
[50]Morris DC，Yeich T，Khalighi MM，et al．Microvascular structure after embolic focal cerebral ischemia in the rat[J]．Brain Research，2003，972：31-37．
[51]Cheung WM，Chen SF，Nian GM，et al．Induction of angiogenesis relatrd gengs in the contralateral cortex with a rat three-vessel occlusion model[J]．Chin J Physiol，2000，43(3)：119-124．
[52]易成刚，郭树忠，张琳西．血管新生机制及其在整形外科中的研究应用[J]．中国实用美容整形外科杂志，2004， 15 (6 )： 315-317．
[53]Chavakis E，Dimmeler S．Regulation of Endothelial Cell Survival and Apoptosis During Angiogenesis[J]．Arterioscler Thromb Vasc Biol，2002，22(6)： 887-893．
[54]Dimmeler S，Zeiher AM．Endothelial cell apoptosis in angiogenesis and vessel regression[J]．Circ Res，2000，87(6)：434-439．
[55]Yancopoulos GD，Davis S，Gale NW，et al．Vascular-specific growth factors and vessel formation[J]．Nature，2000，407：242-248．
[56]骆明军，程玲，徐丽，等．电针对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞和TGF-βmRNA表达的影响[J]．中国神经免疫学和神经病学杂志，2005， 12 (3)：169-172．
[57]石学魁，王雅贤，严基东，等．刺五加总黄酮和针刺对脑缺血后TGF-β1的影响[J]．牡丹江医学院学报，2006， 27 (6)： 4-6．
[58]Unsicker K，Strelau J．Functions of transforming growth factor- isoforms in the nervous system．Cues based on localization and experimental in vitro and in vivo evidence[J]．Eur J Biochem，2000，267：6972-6975．
[1]Taylor TN，Davis PH，Torner JC，et al．Lifetime cost of stroke in the United States [J]．Stroke， 1996，27(9)：1459-1466．
[2]Xu Z，Xu RX，Liu BS，et al．Time window characteristics of cultured rat hippocampal rat hippocampal neurons subjected to ischemia and reperfusion [J]．Chin J Traumatol，2005， 8(3 )：179-182．
[3]Dohmen C，Kumura E，Rosner G，et al．Extracellular of glutamate toxicity in short-term cerebral ischemia and reperfusion：a direct in vivo comparison between white and gray matter[J]．Brain Res，2005，1037(1-2)：43-51．
[4]Zhang J，Benveniste H，Klitzman B，et al．Nitric oxide synthase inhibition and extracellular glutamate concentration after cerebral ischemia reperfusion[J]．Stroke， 1995，26(2)：298-304．
[5]Kiyoshi K，Hisao Y．Mild hypothermia-a revived countermea-sure against ischemic neuronal damages[J]．Neuroseience Research， 1998，32：103-117．
[6]Ding HL，Zhu HF，Dong JW，er al．Inducible nitric oxide synthase contributes to intermittent hypoxia against ischemia reperfusion injury[J]．Acta Pharmacol Sin，2005，26(3)：315-322．
[7]Dihi K，Ohtaki H，Inn R，et al．Peroxynitrite and caspase-3 expression after ischemia reperfusion in mouse cardiac arrest model[J]．Acta Neurochir Suppl， 2003，86：87-91．
[8]Toku K，Tanaka J，Yano H，et al．Microglial cells prevent nitric oxide-induced neuronal apoptosis in vitro[J]．J Neurosci Res， 1998，53(4)：415-425．
[9]Aito H，Alto KT，Raivio KO．Biphasic ATP depletion caused by transient oxidative exposure is associated with apoptotic cell death in rat embryonal cortical neurons[J].Pediatr Res,2002,52(1):40-45.
[10]Honde HM,Korge P,Weiss JN.Mitochondria and ischemia/reperfusion injury[J].Ann NY Acad Sci,2005,1047:248-258.
[11]Kontos HA.Oxygen radicals in cerebral ischemia:the 2001 Willis lecture[J].Stroke,2001,32:2712-2716.
[12]Makrs AR.Intracellular calcium-relese channelsiregula tors of cell life and death[J].Am J Physiol,1997,272:597-606.
[13]Zhang C,Shen W,Zhang GN-methyl-D-aspartate receptor and L-type voltage-gated Ca channel antagonists suppress the release of cytochromec and the expression of procaspase-3 in rat hippocampus after global brain ische-mia[J].NeurosciLett,2002,328(3):265-268.
[14]Jiang L,Tang Y.Brain cell apoptosis after cerebral hypoxia-ischemia in neonatal rat[J].Natl Med J China,1998,178(8):567-569.
[15]Leist M,Nicotera P.Apoptosis,excitotoxicity and neuropathology[J].Exp Cell Res,1998,239(2):183-201.
[16]Zhao Shif,Chai Wenqin.The expression of bcl-2 family genes and relationship with cell death during ischemia[J].Acta Anotomic Siniea,1998,29(2):119-123.
[17]Thombery NA,Lazebnik Y.Caspasesienemies within[J].Seience,1998,281:1312-1313.
[18]Cao G,Minzmi M,Pei W,et al.Intracellular Bax translocation after transient cerebral ischemia:implications for a role of the mitochondrial apoptotic signaling pathway in ischemic neuronal death[J].J Cere B Blood Flow Metab,2001,21(4):321-333.
[19]Lian SL,Chen W,Raung SL,et al.Association of immune responses and ischemic brain infarction in rat[J].Neuroreport,2001,12(9):1943-1947.
[20]Uno H,Matsuyama T,Akita H,et al.Induction of tumor necrosis factor-a in the mouse hippocampus following transient forebrain ischemia[J].J Cereb Blood Flow Metab，1997，17：491-499．
[21]Fabian RH，Perez-Polo JR，Kent TA．Electrochemical monitoring of superoxide anion production and cerebral blood flow：effect of interleukin-1 β pretreatment in a model focal ischemia and reperfusion[J]．Jneurosci Res，2000，60(6)：795-803．
[22]Jander S，Schroeter M，Stoll G．Role of N DA receptor signaling in the regulation of inflammatory gene expression after focal brain ischemia[J]．J Neuroimmunol，2000，109(2)：181-187．
[23]All C，Nicole O，Docagne F，et al．Ischemia-induced interleukin-6 as a potential endogenous neuroprotective cytokine against NMDA receptormediated exitotoxicity in the brain[J]．J Cereb Blood Plow Metab，2000，20(6)：956-966．
[24]Suzuki S，Tanake K，Nogawa S，et al．Expression of interleukin-6 is suppressed by inhibition of voltagesensitive Na+／Ca2+ channels after cerebral ischemia [J]．Neuroreport，2000，11(11)：2565-2569．
[25]Engles RE，Huber TS，Zander DS，er al．Exogenous human recombinant interleukin-10 attenuates hindlimb ischemia-reperfusionn injury[J]．J Surg Res，1997，69：425-428．
[26]Rothwell NJ，Hopkins SJ．Cytokines and the nervous system Ⅱ：Actions and mechanisms of action[J]．Trends Neurosci，1995，18：130-136．
[27]Iadecola C．Bright and dark sides of witric oxide in ischemic brain injury[J]．Trends Neurosci，1997，20：132-139．
[28]狄政莉，万琪，王洪典，等．P-选择素在大鼠全脑缺血再灌注微血管内皮细胞损伤中的作用[J]．卒中与神经疾病杂志，2002， 19： 194-196．
[29]李力仙，杨忠．粘附分子与脑缺血再灌注损伤[J]．国外医学免疫学分册，2003，26： 132-134．
[1]宿宝贵，潘三强，吕来清，等．电针刺激“曲池”和“足三里”对大鼠脑梗死影响的形态学观察[J]．解剖学报，2005， 36 (4)： 403-406．
[2]刘波，唐强，李静．针刺治疗缺血性脑损伤的实验研究[J]．中国康复理论与实践，2005， 11 (7)： 514-515．
[3]蒋红芝，黄光英，张明敏．针刺对局部脑缺血大鼠血管内皮生长因子表达和脑血流的影响[J]．微循环学杂志，2006， 16， (2 )： 9-11．
[4]周飞，李福凤，程介土，等．电针对急性脑缺血大鼠局部脑血流和脑梗死体积的影响[J]．上海针灸杂志，2003， 22 (5 )： 3-6．
[5]陆任云，徐斌．针刺对缺血再灌注脑组织形态结构和酶活性影响的实验研究[J]．针刺研究，2002， 27(1)：5-9．
[6]许能贵，易玮，马勤耘，等．电针对大鼠局灶性脑缺血后神经细胞损伤保护作用的研究[J]．中国针灸，2000， 20 (4)： 237-240．
[7]角建瓴，赖新生，张家维，等．电针对局脑缺血大鼠再灌流后四种氨基酸含量的影响[J]．针刺研究，2003， 28 (3 )： 170-173．
[8]陈虎，蔡定芳，沈思钰，等．电针对局灶性脑缺血大鼠海马兴奋性氨基酸受体的影响[J]．上海针灸杂志，2003， 22 (5 )： 13-15．
[9]郭景春，程介士．电针对脑缺血大鼠纹状体细胞外兴奋性氨基酸水平的影响[J]．上海针灸杂志，2000， 19 (2 )： 37-39．
[10]徐佳，葛林宝，陈汉平．远近部位穴位对脑缺血大鼠脑组织Ca~(2+)、 Na~+、K~+含量影响的比较[J]．上海针灸杂志，2001， 20 (5 )： 36-37．
[11]许能贵，易玮．电针对局灶性脑缺血大鼠脑细胞内Ca ~(2+)含量的影响[J]．中国中西结合杂志，2002， 22 (4)： 295-297．
[12]许能贵，易玮．电针对局灶性脑缺血大鼠NO、 NOS和ET-1的影响[J]．广州中医药大学学报，2002， 19 (1 )： 63-65．
[13]崔晓军，李伊为，陈东风，等．电针对局灶性脑缺血大鼠脑组织NO及NOS的影响[J]．上海针灸杂志，2003， 22 (3 )： 25-27．
[14]王世军，崔可密，卢岩，等．针刺对MCAO大鼠血NO、 ET的影响[J]．山东中医药大学学报，2005， 3 (29)： 159-161．
[15]吴绪平，冯异，刘又香，等．针刺对急性脑梗塞大鼠血浆cAMP与β-EP的影响[J]．中国针灸，2002， 22 (7)： 485-487．
[16]吴绪平，周爽，刘又香，等．头穴透刺对急性脑梗塞大鼠血浆中cAMP、cGMP含量的影响[J]．中国针灸，2000 (11)： 694-696．
[17]张春红，王舒，郑灏泳，等．针刺对局灶性脑缺血大鼠脑细胞凋亡的影响[J]．针刺研究，2001， 26 (2)： 102-104．
[18]董劲松，陈伯英．即早表达基因c-Fos在电针抗局灶性脑缺血损伤中作用的研究[J]．针刺研究，2001， 26 (2)： 97-100．
[19]骆仲达，骆仲逵，许能贵，等．电针对局灶性脑缺血大鼠缺血区脑组织神经细胞凋亡及神经生长因子影响的研究[J]针刺研究，2002， 27 (3)：165-167．
[20]马岩幡，王舒．醒脑开窍针刺法干预实验性脑梗塞大鼠热休克蛋白基因表达的研究[J]．中国针灸，2001， 21 (2)： 107-108．
[21]邹军，赖新生，张家维，等．电针对缺血性中风细胞凋亡及bcl-2、 P53的影响[J]．四川中医，2002， 20 (8)： 9-11．
[22]余晓慧，孙国杰．针刺对局灶性脑缺血大鼠脑细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响[J]．针刺研究，2004， 29 (1 )： 15-17．
[23]蒋红芝，黄光英，张明敏．针刺对局部脑缺血大鼠血管内皮生长因子表 达和脑血流的影响[J]．微循环学杂志，2006， 16 (2)： 9-11．
[24]韩肖华，黄晓琳，郭铁成，等．电针对脑缺血大鼠碱性成纤维细胞生长因子和血管生成素及其受体表达的影响[J]．中华物理医学与康复杂志，2006，28(9)：581-583．
[2]Stollberger C，Chnupa P，Abzieber C，et al．Mortality and rate of stroke or embolism in atrial fibrillation during long-term followup in the embolism in left artial thrombi (ELAT) study[J]．Clin Cardiol，2004，27(1)：40-46．
[3]Ding YH，Li J，Zhou Y．Cerebral angiogenesis and expression of angiogenic factors in aging rats after exercise [J]．Curr Neurovasc Res，2006，3(1)：15-23．
[4]Ghajar CM，Blevins KS，Huqhes CC，et al．Mesenchymal stem cells enhance angiogenesis in mechanically viable prevascularized tissues via early matrix metalloproteinase upregulation[J]．Tissue Eng，2006，12：2875-2888．
[5]黄世杰．血管新生的生物学：最重要的分子机制[J]．国际药学研究杂志，2008，35(1)：65-67．
[6]Krupinski J，Kaluza J，Kumar，et al．Role of angiogenesis in patients with cerebral ischemic stroke [J]．Stroke， 1994，25(9)：1794-1798．
[7]Hockel．Angiotropin treatment prevents flap necrosis and enhances dermal regeneration in rabbits[J]．Arch Surg，1989，124(6)：693-698．
[8]曾俊，严洁．针灸对急性期脑缺血保护作用机制研究进展[J]．中医药导报，2008， 14(1)：72-75．
[9]赵建国．脑梗死[M]．北京：人民卫生出版社，2006： 1．
[10]陈邦国，毛庆菊，孔立红．电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血脑区细胞粘附分子表达的影响[J]．湖北中医学院学报，2006， 8 (4)： 3-5．
[11]毛庆菊，陈邦国，黎逢光，等．电针对全脑缺血再灌注大鼠的保护作用[J]．湖北中医学院学报，2004， 6 (2)： 21-22．
[12]毛庆菊，王汉兵，陈邦国，等．电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠外周血中可溶性细胞间粘附分子-1和内皮素-1的影响[J]．针刺研究，2006，31(5)：272-275．
[1]王维治．神经病学[M]．北京：人民卫生出版社，2001年，130．
[2]Stollberger C，Chnupa P，Abzieber C，et al．Mortality and rate of stroke or embolism in atrial fibrillation during long-term followup in the embolism in left artial thrombi(ELAT)study[J]．Clin Cardiol，2004，27(1)：40-46．
[3]Longa EZ，Weinstein PR，Carson S，et al．Reversible middle cerebral artery， occlusion without craniotomy in rats[J]．Stroke，1989，20：84-90．
[4]华兴邦，李辞蓉，周浩良，等．大鼠穴位图谱的研制[J]．实验动物与动物实验，1991， 1： 1-3．
[5]辛世萌，刘远洪，聂志余．栓线长度、直径大鼠体重与栓线法大鼠局灶性脑缺血模型关系的研究[J]．大连医科大学学报，2000， 22 (2 )： 105-107．
[6]刘亢丁，苏志强，李毅平，等．实验性局灶性脑缺血再灌注动物模型的改进及评价[J]．中风与神经疾病杂志，1997， 14 (2 )： 87-89．
[7]龚彪，李长清，黄剑．SD大鼠线栓法局灶性脑缺血／再灌注模型的改进[J]．重庆医学，2006， 35 (4 )： 313-315．
[8]张均田．现代药理实验方法[M]．北京：中国协和医科大学联合出版社，1998： 1240．
[9]杨渊，闻瑞友．光化学诱导老年大鼠局灶性脑梗死模型的研究[J]．中国老年医学杂志，2001， 21 (1 )： 35-37．
[10]Krueger K，Buseh E．protoeol of a thromboembolic stroke model in the rat：review of the experimental procedeure and comparison of models[J]．Invest Radiol，2002，3 7(11)：600-607．
[11]邵淑琴，林建，郑彩梅．大脑中动脉缺血模型的制作进展[J]．中风与神经疾病杂志，1995， 12 (3 )： 185-186．
[12]Koizumi J，Yoshid YNakazawa T，et al．Experimental studies of ischemia brina edema．A new experimental mode of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in ischemia area[J]．Stroke， 1986，8：1-9．
[13]曹霞，曹秉振，郭述苏．大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型的时间体积相关研究[J]．解放医学杂志，2000， 25 (2)： 123-125．
[14]张国瑾，赵增荣．国外脑血管疾病研究进展[M]．北京：中国医药科技出版社，2000： 3-7．
[15]范刚启，吴勋，陶月玉，等．脑梗死上肢电针治疗方案的优选及其对TXB_2及KetoE-PGF 1 a的影响[J]．中国针灸，2003， 23： 567-569．
[16]苏勋庄，侯建，高楠，等．早期电针疗法对急性缺血性中风患者的预后影响及其作用机制探讨[J]．中西医结合实用临床急救，2004， 4： 26-28．
[1]高培毅，粱晨阳，林燕，等．脑梗死前期脑局部微循环障碍CT灌注成像的实验研究[J]．中华放射学杂志，2003， 37： 701-706．
[2]桂雅星．脑微血管对局灶性缺血的反应[J]．国外医学神经病学神经外科学分册，2004， 31 (5 )： 448-450．
[3]Krupinskin J，Lssa R，Bujny T，et al．A putative role for platelet derived growth factor in angiogenesis and neuroprotection after ischemic stroke in man[J]．Stroke，2004，28：561-657．
[4]Zhang ZG，Zhang L，Jiang Q，et al．VEGF enhance angiogenesis and promotes blood-brain barrier leakage in the ischemic brain[J]．J Clin Invest，2000，106(7)：829-838．
[5]Beck H，Voswinckel R，Wagner S，et al．Participation of bone marrowderived cells in long-term repaie processes after experimental stroke[J]．J Cereb Blood Flow Metab，2003，23：709-717．
[6]Akihiko T，Toshihiro S，Hidekazu T，et al．Administration of CD34~+ cells after stroke enhances neurogenesis viaangiogenesis in a mouse model[J]．J Clinical investigation，2004，114(3)：330-33 8．
[7]Mokry J，Cizkova D，Filips，et al．Mestin expression by newhy formed human blood vessels[J]．Stem cells Dev，2004，13(6)：658-664．
[8]方燕南，黄海威，李玲，等．电刺激对大鼠脑梗塞康复中星形细胞和神经元的影响[J]．中国中西医结合杂志，2002， 22： 531-533．
[9]王家有，宿宝贵，潘三强，等．电针对脑梗塞大鼠缺血半影区微血管和神经细胞超微结构的影响[J]．解剖学研究，2005， (27) 4： 274-278．
[1]戚基萍，汤颖，王德生．血小板衍化生长因子与缺血性脑血管病[J]．黑龙江医学，2002， 26 (3 )： 163-164．
[2]Hu Y，Schett G，Zou Yet al．Abundance of platelel-derived growth factors(PDGFs)，PDGF receptors and activation of mito-genactivated protein kinases in brain decline with age[J]．Brain Res Mol Brain Res，1998，53(1-2)：252-259．
[3]Uutela M，Lauren J，Bergsten E，et al．Chromosomal location，exon structure，and vascular expression patterns of the human PDGFc and PDGFd genes[J]．Circulation，2001，103：2242-2247．
[4]Hellstroem M，Gerhardt H，Kalen M，et al．Lack of pericytes leads to endothe- lial hyperplasia and abnormal vascular morphogenesis[J]．J Cell Biol，2001，153 543-554．
[5]梁晓，徐锡金，张宝，等．大鼠急性脊髓损伤后血小板衍化生长因子-B的表达[J]．汕头大学学报，2007， 20 (1 )： 21-23．
[6]Ohno M，Sasahara M，Narumiya S，et al．Expression of platelet-derived growth factor B-chain and beta-receptor in hypoxic／ischemic encephalopathy of neonatal rats [J]．Neuroscience， 1999，90(2)：643 -65 1．
[7]Krupinski J，Issa R，Bujny T，et al．A putative role for platelet-derived growth factor in angiogenesis and neuroprotection after ischemia stroke in humans[J]．Stroke， 1997，28：564-573．
[8]于炳新，谭兰，任惠民，等．PDGF-B及其受体蛋白在缺血大鼠脑组织中的表达[J]．中风与神经疾病杂志，2003， 20 (3 )： 199-201．
[9]Iihara K，Sasahara M，Hashimoto N，et al．Ischemia induces the expression of the platelet-derived growth factor Bchain in neurons and brain macrophages in vivo[J]．J Cereb Blood Flow Metab，1998，14：818-824．
[10]Ohno M，Ono K，Shimada M．Neonatal hypoxic／ischemia encephalopathy： neuropathology and platicity[J]．No To Hattatau，1996，28(3)：118-124．
[11 ]Renner O，Tsimpas A，Kostin S，et al．Time and cell type-specific induction of platelet-derived growth factors receptor-beta during cerebral ischemia[J]．Brain Res Mol Brain Res，2003，113(1／2)：44-51．
[12]Kim SinghM，Huang J．Matrix metalloproteinase-9 in cerebral aneurysms[J]．J Neurosurgery， 1997，41：642-647．
[13]Iihara K，Hashimoto N，Tsukahara T，et al．Platelet-derived growth factor-BB， but not-AA，prevente delayed neuronal death after forebrain ischemia in rat[J]．J Cereb Blood FlowMetab，1997，17：1097-1106．
[14]Schiene K，Bruchl C，Zilles K，et al．Neuronal hyperexcitability and reduction of GABA-receptor expression in the surround of cerebral photothrombosis [J]．J Cereb Blood Flow Metab， 1999，19：906-914．
[15]李英，段惠军．Raf／MEK／ERK信号转导通路在糖尿病肾病发生发展中的作用[J]．国际内分泌代谢杂志，2007， 27 (7 )： 269-271．
[16]Nakata S，Fujita N，Kitagawa Yet al．Regulation of platelet-derived growth factor receptor activation by afadin through SHP-2：implications for cellular morphology[J]．J Biol Chem，2007，282(52)：37815-37825．
[17]Sandilands E，Cans C，Fincham VJ，et al．RhoB and actin polymerization coordinate Src activation with endosome-mediated delivery to the membrane [J]．Dev Cell，2004，7(6)：855-869．
[18]Yu J，Ustach C，Kim HR．Platelet-derived growth factors signaling and human cancer[J]．J BiochemMolBiol，2003，36(1)：49-59．
[19]Kojima N，Hori M，Murata T，et al．Different profiles of Ca ~(2+) responses to endothelin-1 and PDGF in liver myofibroblasts during the process of cell differentiation[J]．Br J Pharmacol，2007，151(6) ：816-827．
[20]Egan GG，Wainwright CL，Wadsworth RW，et al．PDGF-induced signaling in proliferating and differentiated vascular smooth muscle：effects of altered intracellular Ca~(2+) regulation[J]．Cardiovasc Res，2005，67(2)：308-316．
[1 ]Russette M，Lyons RM，Mosos HL．Transforming growth factors and the regulation of cell proliferation[J]．Eur J Biochem，1990，187(3)：467-473．
[2]Azhar M，Schultz Jel J，Grupp I，et al．Transforming growth factor beta in cardiovascular development and function[J]．Cytokine Growth Factor Rev， 2003，14(5)：391-407．
[3]Lebrin F，Deckers M，Bertolino Pet al．TGF-beta receptor function in the endothelium[J]．Cardiovasc Res，2005，65(3)：599-608．
[4]Yamasaki Y，Itoyama Y，Kogure K．Involvement of cytokine production in pathogenesis of transient cerebral ischemic damage[J]．Keio J Med，1996，45(3)：225-229．
[5]Van Royen N，Hoefer I，Buschmann I，et al．Exogenous application of transforming growth factor beta 1 stimulates arteriogenesis in the peripheral circulation[J]．FASEB J，2002，16：432-434．
[6]Pang L，Ye W．Reduction of inflammatory response in the mouse brain with adenoviral-mediated transforming growth factor-betal expression [J]．American Heart Association，2001：544-552．
[7]Wierner C，Gehrmann J，Lindholm D，et al．Expression of trasforing growth factor-beta Ⅰ and interlenkin-1 beta mRNA in rat brain following transient barebrain ischemia[J]．Acta Neuropatbol Berl， 1993，86(5)：439-250．
[8]Krupinski J，Kumar P，Kumar S，et al．Increased expression of TGF-betal in brain tissue after ischemic stroke in humans[J]．Stroke，1996，27(5)：852-869．
[9]李旦，韩玉昆．缺氧缺血性脑损伤后脑内转化生长因子基因转录的研究[J]．中华围产医学杂志，2000， 3 (1 )： 26-29．
[10]Vinals F，Pouyssegur J．Transforming growth factor betal(TGF-betal)promotes endothelial cell survival during in vitro angiogenesis via an autocrine mechanism implicating TGF-alpha signaling[J]．Mol Cell Biol，2001，21(21)：7218-7230．
[11 ]Li C，Issa R，Kumar Pet al．CD 105 prevents apoptosis in hypoxic endothelial cells[J]．J Cell Sci，2003，116(13)：2677-2685．
[12]Slevin M，Krupinski J．Serial measurement of vascular endothelial growth factor and transforming growth factor-[beta]1 in sernm of patients with acute ischemic stroke[J]．American Heart Association Inc，2000，1863-1870．
[13]Logan A，Baird A，Berry M．Decorin attenuates gliotic scar formation in the rat cerebral hemisphere[J]．Exp Neurol， 1999，159(2)：504-5 10．
[14]Roussel S，Mackenzie ET，Vivien D，et al．A transforming growth factor beta antagonist unmasks the neuroprotective role of this endogenous cytokine in excitoxic and ischemic brain injury[J]．J Cereb Blood Flow Metab， 1999，19(2)：1345-1353．
[15]McNeill H，Williams C，Guan J，et al．Neuronal rescue with transforming growth factor beta after hypoxic ischemic brain injury[J]．Neuro Report，1994，5(8)：901-901．
[16]Wachs FP，Winner B，Despress C，et al．Transforming growth factor-beta 1 is a negative modulator of adult neurogenesis[J]．J Neuropathol Exp Neurol，2006， 65：358-370．
[1]邱幸凡．络脉理论与临床[M]．陕西：科学技术出版社，1991： 30．
[2]史常永．络病论与微循环[J]．中国医药学报，1992， 7 (5 )： 11-14．
[3]屈风林，王光月．自拟活血通脉散治疗缺血性中风168例临床观察[J]中医杂志，1999， 40 (11 )： 667-669．
[4]夏韵．颜德馨治疗脑梗死的经验[J]．上海中医药杂志，1998， (6 )： 6-7．
[5]刘华．益气活血法治疗缺血性中风临床和药理研究10年回顾与展望[J]．现代中西医结合杂志，2000， 13 (9 )： 1217-1219．
[6]韩丽华，王振涛，索红亮，等．益气活血方促心梗后大鼠缺血心肌血管新生的实验研究[J]．河南中医，2005， 25 (11 )： 22-25．
[7]雷燕，王军辉，陈可冀．黄芪、当归配伍后促鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的药效比较研究[J]．中国中药杂志，2003， 28 (9 )： 876-878．
[8]陈兴华，陈树伦．中西医结合治疗缺血性脑血管病的研究[J]．实用中医药杂志，1996， 12 (6)： 26-27．
[9]穆瑞兰，周建英，田菲．化瘀通脉注射液治疗缺血性中风偏瘫临床对比观察[J]．中医药研究，1999， 15 (4 )： 12-13．
[10]Wang SS，Zheng ZG，Weng YQ，et al．Angiogenesis and antiangiogenesis activity of Chinese medicinal herbal extracts[J]．Life Sci，2004，74：2467-2478．
[11]吴以岭．络病学[M]．北京：中国中医药出版社，2006： 97-98．
[12]李晓涨．针灸“治未病”与“针灸良性预应激假说”[J]．北京中医药大学学报，2003， 26(3)：82-85．
[13]何世铭，马秀林，朱长江．针刺治疗急性缺血性中风的实验研究进展[J]．针刺研究，2000， 25(1)：75-77．
[14]周利，郑国庆，王明杰，等．针刺对缺血性脑损伤保护作用的分子机制研究进展[J]．中国针灸，2003， 23 (5 )： 303-305．
[15]庞勇，李保良．不同穴位治疗缺血性中风的临床研究[J]．中国针灸，2000， 20(2)：69-72．
[16]徐以增，毕臻．古代中风病针灸文献探讨[J]．上海针灸杂志，1998， 17(3)：42-43．
[17]许能贵，周逸平，许冠荪，等．电针大椎、百会穴对局灶性脑缺血大鼠脑血流量和自发脑电的影响[J]．中国中医药科技，2001， 8 (1 )： 3-4．
[18]赵吉平，王燕平．针灸特定穴位的理论与临床[M]．北京：科学技术文献出版社，1998： 433．
[19]马惠芳，严洁，任秀君，等．电针水沟穴对实验性全脑缺血大鼠脑组织钙调素活性的影响[J]．中国中医药信息杂志，2002， 9 (10 )： 25-26．
[20]韩肖华，黄晓琳，李春芳，等．电针对脑缺血大鼠VEGF及Flk-1表达和细胞外钙离子浓度的影响[J]．中国康复，2003， 18 (6 )： 329-331．
[21]程玲，骆明军，明建扩，等．电针对脑缺血再灌注大鼠缺血脑区IL-1β和TNF-αmRNA表达的调节[J]．针刺研究，2003， 25 (3 )： 174-178．
[22]骆明军，程玲，徐丽，等．电针刺激水沟、百会穴后对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞的活化的影响[J]．中国临床康复，2006， 10 (11 )： 180-182．
[23]牛文民，李忠仁，沈梅红，等．电针对大鼠局灶性脑缺血再灌注大脑皮层超微结构形态学损伤的保护作用[J]．上海针灸杂志，2006， 25 (2 )： 34-36．
[24]纪中．电针百会穴对大鼠缺血区脑组织神经生长因子影响的研究[J]．浙江中医学院学报，2005， 29 (3 )： 67-68．
[25]Lin Cheng，Minjun Luo，Bangguo Chen．Effects of Electroacupuncture on Serum IL-1βand TNF-α contents in Cerebral Ischemia-reperfusion Rats[J]．World Journal of Acupuncture-moxibustion，2003，13 (4)：23-28．
[26]毛庆菊，陈邦国，黎逢光，等．电针对全脑缺血再灌注大鼠的保护作用[J]．湖北中医学院学报，2004， 6 (2)： 21-22．
[27]毛庆菊，王汉兵，陈邦国，等．电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠外周血中可溶性细胞间粘附分子-1和内皮素-1的影响[J]．针刺研究，2006，31(5)：272-275．
[28]陈邦国，毛庆菊，孔立红．电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血脑区细胞粘附分子表达的影响[J]．湖北中医学院学报，2006， 8 (4)： 3-5．
[29]刘波，唐强，李静．针刺治疗缺血性脑损伤的实验研究[J]．中国康复理论与实践，2005， 11 (7)： 514-515．
[30]刘振寰，潘佩光，祁岩超，等．电针对新生鼠缺氧缺血脑组织神经细胞凋亡及神经生长因子蛋白表达的影响[J]．中国临床康复，2006， 23 (10)：114-118．
[31]周爽，黄建华．电针对脑缺血再灌注损伤大鼠炎症反应的影响[J]．江苏 中医药，2005， 26 (7 )： 49-51．
[32]吴以岭．“脉络—血管系统病”新概念及其治疗探讨[J]．疑难病杂志，2005，4(5)：285-287．
[33]邱幸凡．络脉理论与临床[M]．西安：陕西科学技术出版社，1991： 1-37．
[34]Lewis P，Rowlan D．MERRITT'S神经病学[M]．辽宁科学技术出版社，2002： 203．
[35]Iurcani P，Tureani M．Effects of propend of ylline on cerebral blood flow in a gerbil focal cerebral ischemia[J]．J Neurol Sci，2001，183(1)：57-60．
[36]Wei L，Erinjeri JP，Rovainen CM，et al．Collateral growth and ngiogenesis around cortical stroke[J]．Stroke，2001，32(9)：2179-2184．
[37]Chen HH，Chen CH，Liu HM．Correlation between angiogenesis and basic fibroblast growth factor expression in experimental brain infarct[J]．Stroke，1994，25(8)：488-493．
[38]李树清，杨丽君，张利能，等．树鼳脑缺血半暗区PAF受体介导的微环境改变及GB保护机制的探讨[J]．中国微循环，2005， 5 (10 )： 301-304．
[39]Issa R，Krupinsk J，Bujny T，et al．Vascular endothelial growth factor and its receptor，KDR，in human brain tissue after ischemic stroke[J]．Lab Invest， 1999，79(4)：417-425．
[40]Emanueli C，Madu P．Angiogenesis gene therapy to rescue ischemic-tissue： achievement's and future directions[J]．Br J Pharmacol，2001，133(7)：951-958．
[41]盛琴比，周爱儒，高炜，等．多肽生长因子与血管生成[J]．中国介入心脏病杂志，1999， 7 (2)： 90-92．
[42]Risau W．Machanisms of angiogenesis[J]．Nature，1997，38(6)：671-680．
[43]Tomanek RJ，Schatteman GC．Angiogenesis： new insights and therapeutic potential [J]．Anat Rec，2000，261：126．
[44]Bdolah Y，Sukhatme VP，Karumanchi SA．Angiogenic imbalance in the pathophysiology of preeclampsia：newer insights [J]．Semin Nephrol，2004，24：548-556．
[45]周凤鑫．组织血液灌注与微循环的病理生理——血管新生与疾病[J]．外科理论与实践，2008， 13 (3 )： 33-37．
[46]Carmeliet P．Mechanisms of angiogenesi and arteriogenesis[J]．Nature Mledicine， 2000， 6(3) ：3 89-3 95 ．
[47]Zhang ZG，Zhang L，Jiang Q，et al．VEGF enhances angiogenesis and promotes blood-brain barrier leakage in the ischemic brain[J]．J Clin Invest，2000，106(7)：829-838．
[48]Krupinski J，Kaluza J，Kumar，et al．Role of angiogenesis in patients with cerebral ischemic stroke [J]．stroke， 1994，25(9)：1794-1798．
[49]Wei L，Erinjeri JP，Rovainen CM，et al．Collateral growth and an-giogenesis around cortical stroke[J]．Stroke，2 001， 3 2 ：2179-2184．
[50]Morris DC，Yeich T，Khalighi MM，et al．Microvascular structure after embolic focal cerebral ischemia in the rat[J]．Brain Research，2003，972：31-37．
[51]Cheung WM，Chen SF，Nian GM，et al．Induction of angiogenesis relatrd gengs in the contralateral cortex with a rat three-vessel occlusion model[J]．Chin J Physiol，2000，43(3)：119-124．
[52]易成刚，郭树忠，张琳西．血管新生机制及其在整形外科中的研究应用[J]．中国实用美容整形外科杂志，2004， 15 (6 )： 315-317．
[53]Chavakis E，Dimmeler S．Regulation of Endothelial Cell Survival and Apoptosis During Angiogenesis[J]．Arterioscler Thromb Vasc Biol，2002，22(6)： 887-893．
[54]Dimmeler S，Zeiher AM．Endothelial cell apoptosis in angiogenesis and vessel regression[J]．Circ Res，2000，87(6)：434-439．
[55]Yancopoulos GD，Davis S，Gale NW，et al．Vascular-specific growth factors and vessel formation[J]．Nature，2000，407：242-248．
[56]骆明军，程玲，徐丽，等．电针对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞和TGF-βmRNA表达的影响[J]．中国神经免疫学和神经病学杂志，2005， 12 (3)：169-172．
[57]石学魁，王雅贤，严基东，等．刺五加总黄酮和针刺对脑缺血后TGF-β1的影响[J]．牡丹江医学院学报，2006， 27 (6)： 4-6．
[58]Unsicker K，Strelau J．Functions of transforming growth factor- isoforms in the nervous system．Cues based on localization and experimental in vitro and in vivo evidence[J]．Eur J Biochem，2000，267：6972-6975．
[1]Taylor TN，Davis PH，Torner JC，et al．Lifetime cost of stroke in the United States [J]．Stroke， 1996，27(9)：1459-1466．
[2]Xu Z，Xu RX，Liu BS，et al．Time window characteristics of cultured rat hippocampal rat hippocampal neurons subjected to ischemia and reperfusion [J]．Chin J Traumatol，2005， 8(3 )：179-182．
[3]Dohmen C，Kumura E，Rosner G，et al．Extracellular of glutamate toxicity in short-term cerebral ischemia and reperfusion：a direct in vivo comparison between white and gray matter[J]．Brain Res，2005，1037(1-2)：43-51．
[4]Zhang J，Benveniste H，Klitzman B，et al．Nitric oxide synthase inhibition and extracellular glutamate concentration after cerebral ischemia reperfusion[J]．Stroke， 1995，26(2)：298-304．
[5]Kiyoshi K，Hisao Y．Mild hypothermia-a revived countermea-sure against ischemic neuronal damages[J]．Neuroseience Research， 1998，32：103-117．
[6]Ding HL，Zhu HF，Dong JW，er al．Inducible nitric oxide synthase contributes to intermittent hypoxia against ischemia reperfusion injury[J]．Acta Pharmacol Sin，2005，26(3)：315-322．
[7]Dihi K，Ohtaki H，Inn R，et al．Peroxynitrite and caspase-3 expression after ischemia reperfusion in mouse cardiac arrest model[J]．Acta Neurochir Suppl， 2003，86：87-91．
[8]Toku K，Tanaka J，Yano H，et al．Microglial cells prevent nitric oxide-induced neuronal apoptosis in vitro[J]．J Neurosci Res， 1998，53(4)：415-425．
[9]Aito H，Alto KT，Raivio KO．Biphasic ATP depletion caused by transient oxidative exposure is associated with apoptotic cell death in rat embryonal cortical neurons[J].Pediatr Res,2002,52(1):40-45.
[10]Honde HM,Korge P,Weiss JN.Mitochondria and ischemia/reperfusion injury[J].Ann NY Acad Sci,2005,1047:248-258.
[11]Kontos HA.Oxygen radicals in cerebral ischemia:the 2001 Willis lecture[J].Stroke,2001,32:2712-2716.
[12]Makrs AR.Intracellular calcium-relese channelsiregula tors of cell life and death[J].Am J Physiol,1997,272:597-606.
[13]Zhang C,Shen W,Zhang GN-methyl-D-aspartate receptor and L-type voltage-gated Ca channel antagonists suppress the release of cytochromec and the expression of procaspase-3 in rat hippocampus after global brain ische-mia[J].NeurosciLett,2002,328(3):265-268.
[14]Jiang L,Tang Y.Brain cell apoptosis after cerebral hypoxia-ischemia in neonatal rat[J].Natl Med J China,1998,178(8):567-569.
[15]Leist M,Nicotera P.Apoptosis,excitotoxicity and neuropathology[J].Exp Cell Res,1998,239(2):183-201.
[16]Zhao Shif,Chai Wenqin.The expression of bcl-2 family genes and relationship with cell death during ischemia[J].Acta Anotomic Siniea,1998,29(2):119-123.
[17]Thombery NA,Lazebnik Y.Caspasesienemies within[J].Seience,1998,281:1312-1313.
[18]Cao G,Minzmi M,Pei W,et al.Intracellular Bax translocation after transient cerebral ischemia:implications for a role of the mitochondrial apoptotic signaling pathway in ischemic neuronal death[J].J Cere B Blood Flow Metab,2001,21(4):321-333.
[19]Lian SL,Chen W,Raung SL,et al.Association of immune responses and ischemic brain infarction in rat[J].Neuroreport,2001,12(9):1943-1947.
[20]Uno H,Matsuyama T,Akita H,et al.Induction of tumor necrosis factor-a in the mouse hippocampus following transient forebrain ischemia[J].J Cereb Blood Flow Metab，1997，17：491-499．
[21]Fabian RH，Perez-Polo JR，Kent TA．Electrochemical monitoring of superoxide anion production and cerebral blood flow：effect of interleukin-1 β pretreatment in a model focal ischemia and reperfusion[J]．Jneurosci Res，2000，60(6)：795-803．
[22]Jander S，Schroeter M，Stoll G．Role of N DA receptor signaling in the regulation of inflammatory gene expression after focal brain ischemia[J]．J Neuroimmunol，2000，109(2)：181-187．
[23]All C，Nicole O，Docagne F，et al．Ischemia-induced interleukin-6 as a potential endogenous neuroprotective cytokine against NMDA receptormediated exitotoxicity in the brain[J]．J Cereb Blood Plow Metab，2000，20(6)：956-966．
[24]Suzuki S，Tanake K，Nogawa S，et al．Expression of interleukin-6 is suppressed by inhibition of voltagesensitive Na+／Ca2+ channels after cerebral ischemia [J]．Neuroreport，2000，11(11)：2565-2569．
[25]Engles RE，Huber TS，Zander DS，er al．Exogenous human recombinant interleukin-10 attenuates hindlimb ischemia-reperfusionn injury[J]．J Surg Res，1997，69：425-428．
[26]Rothwell NJ，Hopkins SJ．Cytokines and the nervous system Ⅱ：Actions and mechanisms of action[J]．Trends Neurosci，1995，18：130-136．
[27]Iadecola C．Bright and dark sides of witric oxide in ischemic brain injury[J]．Trends Neurosci，1997，20：132-139．
[28]狄政莉，万琪，王洪典，等．P-选择素在大鼠全脑缺血再灌注微血管内皮细胞损伤中的作用[J]．卒中与神经疾病杂志，2002， 19： 194-196．
[29]李力仙，杨忠．粘附分子与脑缺血再灌注损伤[J]．国外医学免疫学分册，2003，26： 132-134．
[1]宿宝贵，潘三强，吕来清，等．电针刺激“曲池”和“足三里”对大鼠脑梗死影响的形态学观察[J]．解剖学报，2005， 36 (4)： 403-406．
[2]刘波，唐强，李静．针刺治疗缺血性脑损伤的实验研究[J]．中国康复理论与实践，2005， 11 (7)： 514-515．
[3]蒋红芝，黄光英，张明敏．针刺对局部脑缺血大鼠血管内皮生长因子表达和脑血流的影响[J]．微循环学杂志，2006， 16， (2 )： 9-11．
[4]周飞，李福凤，程介土，等．电针对急性脑缺血大鼠局部脑血流和脑梗死体积的影响[J]．上海针灸杂志，2003， 22 (5 )： 3-6．
[5]陆任云，徐斌．针刺对缺血再灌注脑组织形态结构和酶活性影响的实验研究[J]．针刺研究，2002， 27(1)：5-9．
[6]许能贵，易玮，马勤耘，等．电针对大鼠局灶性脑缺血后神经细胞损伤保护作用的研究[J]．中国针灸，2000， 20 (4)： 237-240．
[7]角建瓴，赖新生，张家维，等．电针对局脑缺血大鼠再灌流后四种氨基酸含量的影响[J]．针刺研究，2003， 28 (3 )： 170-173．
[8]陈虎，蔡定芳，沈思钰，等．电针对局灶性脑缺血大鼠海马兴奋性氨基酸受体的影响[J]．上海针灸杂志，2003， 22 (5 )： 13-15．
[9]郭景春，程介士．电针对脑缺血大鼠纹状体细胞外兴奋性氨基酸水平的影响[J]．上海针灸杂志，2000， 19 (2 )： 37-39．
[10]徐佳，葛林宝，陈汉平．远近部位穴位对脑缺血大鼠脑组织Ca~(2+)、 Na~+、K~+含量影响的比较[J]．上海针灸杂志，2001， 20 (5 )： 36-37．
[11]许能贵，易玮．电针对局灶性脑缺血大鼠脑细胞内Ca ~(2+)含量的影响[J]．中国中西结合杂志，2002， 22 (4)： 295-297．
[12]许能贵，易玮．电针对局灶性脑缺血大鼠NO、 NOS和ET-1的影响[J]．广州中医药大学学报，2002， 19 (1 )： 63-65．
[13]崔晓军，李伊为，陈东风，等．电针对局灶性脑缺血大鼠脑组织NO及NOS的影响[J]．上海针灸杂志，2003， 22 (3 )： 25-27．
[14]王世军，崔可密，卢岩，等．针刺对MCAO大鼠血NO、 ET的影响[J]．山东中医药大学学报，2005， 3 (29)： 159-161．
[15]吴绪平，冯异，刘又香，等．针刺对急性脑梗塞大鼠血浆cAMP与β-EP的影响[J]．中国针灸，2002， 22 (7)： 485-487．
[16]吴绪平，周爽，刘又香，等．头穴透刺对急性脑梗塞大鼠血浆中cAMP、cGMP含量的影响[J]．中国针灸，2000 (11)： 694-696．
[17]张春红，王舒，郑灏泳，等．针刺对局灶性脑缺血大鼠脑细胞凋亡的影响[J]．针刺研究，2001， 26 (2)： 102-104．
[18]董劲松，陈伯英．即早表达基因c-Fos在电针抗局灶性脑缺血损伤中作用的研究[J]．针刺研究，2001， 26 (2)： 97-100．
[19]骆仲达，骆仲逵，许能贵，等．电针对局灶性脑缺血大鼠缺血区脑组织神经细胞凋亡及神经生长因子影响的研究[J]针刺研究，2002， 27 (3)：165-167．
[20]马岩幡，王舒．醒脑开窍针刺法干预实验性脑梗塞大鼠热休克蛋白基因表达的研究[J]．中国针灸，2001， 21 (2)： 107-108．
[21]邹军，赖新生，张家维，等．电针对缺血性中风细胞凋亡及bcl-2、 P53的影响[J]．四川中医，2002， 20 (8)： 9-11．
[22]余晓慧，孙国杰．针刺对局灶性脑缺血大鼠脑细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响[J]．针刺研究，2004， 29 (1 )： 15-17．
[23]蒋红芝，黄光英，张明敏．针刺对局部脑缺血大鼠血管内皮生长因子表 达和脑血流的影响[J]．微循环学杂志，2006， 16 (2)： 9-11．
[24]韩肖华，黄晓琳，郭铁成，等．电针对脑缺血大鼠碱性成纤维细胞生长因子和血管生成素及其受体表达的影响[J]．中华物理医学与康复杂志，2006，28(9)：581-583．