和田玉枣皂甙提取工艺及其抗氧化活性的研究
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摘要
红枣(Zizyhpus jujuba Mill)是鼠李科(Rhamnaceae)枣属植物枣树的干果,是我国特有的果品之一。富含维生素、矿物质、氨基酸等营养素,还含有环磷酸腺苷(cAMP)、多糖、黄酮、皂甙等多种生物活性物质。植物皂甙类化合物具有降血脂、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗自由基、抑制肿瘤细胞生长、免疫调节等保健作用。本文以和田玉枣(商品名称。引自山西省交城县的骏枣栽植于和田)为原料,对其皂甙的提取、分离、纯化、定性及其抗氧化活性进行了研究,为和田玉枣的皂甙提取及深加工提供工艺参数和理论依据,亦对促进新疆和田红枣产业化的发展及其巩固具有重要意义。
主要试验结果如下：
1.应用泡沫法、醋酐-硫酸反应(Liebermann-Burchard反应)、氯仿-浓硫酸反应、香草醛-高氯酸显色反应等方法,均证实了新疆和田玉枣中含有甾体皂甙。
2.香草醛-高氯酸与皂甙形成特征性的红色,该显色法的显色条件为：5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL,70℃恒温水浴中加热15min,立即以冰水冷却5min,加入冰醋酸5mL,摇匀,静置30min测定,测定波长为531nm。最后得到标准曲线方程为：A=0.00201C-0.04409(R2=0.9995)。
3.乙醇浸提和田玉枣皂甙的最佳工艺参数为：乙醇浓度80%,料液比1：6,提取温度70℃,浸提时间3h,提取量为6.267mg/g,纯度为16.3%。准确度的相对标准偏差为1.42%,加标回收率为97.0%～102.5%,回收率的相对标准偏差为2.51%。
4.LS-100型大孔吸附树脂对和田玉枣皂甙具良好的吸附和解析性能,其分离纯化和田玉枣皂甙的工艺参数为：上样量210mL,上样液浓度20mg/mL,pH值5,NaCl 2.0mg/mL,上样液流速2BV/h。洗脱剂60%乙醇水溶液,流速2 BV/h,洗脱剂用量4BV。经该工艺处理得到的和田玉枣皂甙纯度为35.7%,精制度高达219.0%。
5.和田玉枣皂甙体外抗氧化活性试验结果显示：当浓度达到1.5 mg/mL时,羟自由基(·OH)清除率可达74.40%；超氧自由基(O2-·)清除率达到40.58%；抗油脂过氧化的清除率达到73.33%；Fe2+诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧体系的清除率达到76.94%。还原能力在浓度为1.5mg/mL时,吸光度达到0.613,还原能力与吸光度成正比,可见其还原能力比较强。以上数据均显示和田玉枣皂甙具有明显的体外抗氧化活性。
Jujube (Zizyhpus jujuba Mill) is a Rhamnaceae fruit of Ziziphus jujuba Mill plant.It is a Chinese unique fruit. Apart from the rich vitamins,minerals, amino acids and other nutrients, but also contains cAMP, polysaccharides,flavonoids,saponins and other bioactive substances. Plant saponins have many health care functions.They can be used as a treatment of hypolipidemic, antibacterial, antiviral, antioxidant, anti-free radicals, inhibiting tumor cell growth and the role of immune regulation.Through the processes of Hetian jade jujube saponins extraction, separation, purification, qualitative and antioxidant activities research.The paper with Hetian jade as a raw material is aimed at providing the technological parameters and the theoretical basis for the Hetian jade jujube's processing use. It has the important theoretical value and practical significance for the the development and utilization of Xinjiang Hetian jujube.
The main results are as follows:
1. Application of the bubble method, acetic anhydride-sulfuric acid reaction (Liebermann-Burchard reaction), chloroform-concentrated sulfuric acid reaction, the color reaction of vanillin-perchloric acid and other methods to determine that Xinjiang Hetian jujude contains steroidal saponins.
2. Vanillin-perchloric acid can form the characteristic red with sapionins, which is the most extensive color characteristics of sapionins. Its color conditions are as follow:5% vanillin-glacial acetic acid 0.2mL, perchloric acid 0.8mL, heated 15min in 70℃constant temperature water bath pot, immediately cooled 5min in ice water, then add glacial acetic acid 5mL, shaken, standing for 30min, measured at the wavelength of 531nm..Finally,the standard curve equation is A= 0.00201C—0.04409(R2=0.9995)。
3. The optimum conditions of ethanol extraction from Hetian jade jujube:the ethanol concentration 80%, the solid-solvent ratio 1:6, the extracting temperature 70℃, the extracting time 3h, the extracting ratio of sapionins from Hetian jade jujube is 6.267mg/g, whose purity is 16.3%. The relative standard deviation of accuracy is 1.42%, the recovery is 97.0%-102.5%, the relative standard deviation of recovery is 2.51%.
4. LS-100 macroporous resin has good performance of adsorption and desorption ability to saponins. The optimum conditions of separation and purification for saponins from Hetian jade jujube are as followings:the loading amount 210mL, concentration of sample solution 20mg/mL, pH value of 5, concentration NaCl 2.0mg/mL,the current velocity of sample solution 2BV/h, the eluting reagent 60% ethanol, the eluting velocity 2BV/h and the eluting volume 4BV. In the above conditions, the purity of saponins from Hetian jade jujube is 35.7%, refining rate is up to 219.0%. 5. The results of the antioxidant tests of the saponins from Hetian jade jujube show that:When the experimental concentration is1.5mg/mL, the scavenging rate of the hydroxyl radical(·OH) system is 74.40%, the scavenging rate of the superoxide radical (O2·-) system is 40.58%, the scavenging rate of the Anti-lipid peroxidation is 73.33%, the scavenging rate of the Fe2+ induced lipoprotein yolk PUFA peroxide system is 76.94%. When the experimental concentration is 1.5mg/mL, the absorbance of the restore ability is 0.613, and absorbance is positively correlated with anti-reducing power,so we can see that the restore ability si strong. The above figures show that saponins from Hetian jade jujube have obvious antioxidant acitivity.
主要试验结果如下：
1.应用泡沫法、醋酐-硫酸反应(Liebermann-Burchard反应)、氯仿-浓硫酸反应、香草醛-高氯酸显色反应等方法,均证实了新疆和田玉枣中含有甾体皂甙。
2.香草醛-高氯酸与皂甙形成特征性的红色,该显色法的显色条件为：5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL,70℃恒温水浴中加热15min,立即以冰水冷却5min,加入冰醋酸5mL,摇匀,静置30min测定,测定波长为531nm。最后得到标准曲线方程为：A=0.00201C-0.04409(R2=0.9995)。
3.乙醇浸提和田玉枣皂甙的最佳工艺参数为：乙醇浓度80%,料液比1：6,提取温度70℃,浸提时间3h,提取量为6.267mg/g,纯度为16.3%。准确度的相对标准偏差为1.42%,加标回收率为97.0%～102.5%,回收率的相对标准偏差为2.51%。
4.LS-100型大孔吸附树脂对和田玉枣皂甙具良好的吸附和解析性能,其分离纯化和田玉枣皂甙的工艺参数为：上样量210mL,上样液浓度20mg/mL,pH值5,NaCl 2.0mg/mL,上样液流速2BV/h。洗脱剂60%乙醇水溶液,流速2 BV/h,洗脱剂用量4BV。经该工艺处理得到的和田玉枣皂甙纯度为35.7%,精制度高达219.0%。
5.和田玉枣皂甙体外抗氧化活性试验结果显示：当浓度达到1.5 mg/mL时,羟自由基(·OH)清除率可达74.40%；超氧自由基(O2-·)清除率达到40.58%；抗油脂过氧化的清除率达到73.33%；Fe2+诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧体系的清除率达到76.94%。还原能力在浓度为1.5mg/mL时,吸光度达到0.613,还原能力与吸光度成正比,可见其还原能力比较强。以上数据均显示和田玉枣皂甙具有明显的体外抗氧化活性。
Jujube (Zizyhpus jujuba Mill) is a Rhamnaceae fruit of Ziziphus jujuba Mill plant.It is a Chinese unique fruit. Apart from the rich vitamins,minerals, amino acids and other nutrients, but also contains cAMP, polysaccharides,flavonoids,saponins and other bioactive substances. Plant saponins have many health care functions.They can be used as a treatment of hypolipidemic, antibacterial, antiviral, antioxidant, anti-free radicals, inhibiting tumor cell growth and the role of immune regulation.Through the processes of Hetian jade jujube saponins extraction, separation, purification, qualitative and antioxidant activities research.The paper with Hetian jade as a raw material is aimed at providing the technological parameters and the theoretical basis for the Hetian jade jujube's processing use. It has the important theoretical value and practical significance for the the development and utilization of Xinjiang Hetian jujube.
The main results are as follows:
1. Application of the bubble method, acetic anhydride-sulfuric acid reaction (Liebermann-Burchard reaction), chloroform-concentrated sulfuric acid reaction, the color reaction of vanillin-perchloric acid and other methods to determine that Xinjiang Hetian jujude contains steroidal saponins.
2. Vanillin-perchloric acid can form the characteristic red with sapionins, which is the most extensive color characteristics of sapionins. Its color conditions are as follow:5% vanillin-glacial acetic acid 0.2mL, perchloric acid 0.8mL, heated 15min in 70℃constant temperature water bath pot, immediately cooled 5min in ice water, then add glacial acetic acid 5mL, shaken, standing for 30min, measured at the wavelength of 531nm..Finally,the standard curve equation is A= 0.00201C—0.04409(R2=0.9995)。
3. The optimum conditions of ethanol extraction from Hetian jade jujube:the ethanol concentration 80%, the solid-solvent ratio 1:6, the extracting temperature 70℃, the extracting time 3h, the extracting ratio of sapionins from Hetian jade jujube is 6.267mg/g, whose purity is 16.3%. The relative standard deviation of accuracy is 1.42%, the recovery is 97.0%-102.5%, the relative standard deviation of recovery is 2.51%.
4. LS-100 macroporous resin has good performance of adsorption and desorption ability to saponins. The optimum conditions of separation and purification for saponins from Hetian jade jujube are as followings:the loading amount 210mL, concentration of sample solution 20mg/mL, pH value of 5, concentration NaCl 2.0mg/mL,the current velocity of sample solution 2BV/h, the eluting reagent 60% ethanol, the eluting velocity 2BV/h and the eluting volume 4BV. In the above conditions, the purity of saponins from Hetian jade jujube is 35.7%, refining rate is up to 219.0%. 5. The results of the antioxidant tests of the saponins from Hetian jade jujube show that:When the experimental concentration is1.5mg/mL, the scavenging rate of the hydroxyl radical(·OH) system is 74.40%, the scavenging rate of the superoxide radical (O2·-) system is 40.58%, the scavenging rate of the Anti-lipid peroxidation is 73.33%, the scavenging rate of the Fe2+ induced lipoprotein yolk PUFA peroxide system is 76.94%. When the experimental concentration is 1.5mg/mL, the absorbance of the restore ability is 0.613, and absorbance is positively correlated with anti-reducing power,so we can see that the restore ability si strong. The above figures show that saponins from Hetian jade jujube have obvious antioxidant acitivity.
引文
[1]曲泽州,王永蕙.中国枣树志·枣卷[M].北京：北京林业出版社,1993：5.
[2]宋婉.中国枣优良品种DNA指纹图谱的研究[D].北京：北京林业大学,1999.
[3]陈锦屏.红枣烘干技术[M].西安：陕西科技出版社,2000：2-3.
[4]刘嘉琰.乐陵小枣甲天下[M].南海出版公司,1993：3.
[5]袁树森.陕西榆林地区枣树志[M].1983：7.
[6]陈贻金,唐云龙,陈漠林等.枣树实用新技术[M].北京：中国科学技术出版社,1993：4.
[7]刘广运.大力推进我国红枣产业化[J].中国林业,1999(11)：4-5.
[8]王军,张宝善,陈锦屏.红枣营养成分及其功能的研究.食品研究与开发[J],2003,24(2)：68-72.
[9]河北省沧州金丝小枣创四个“全国之最”[J].中国乡镇企业,2004(8)：64.
[10]刘孟军.国内外枣树生产现状、存在问题和建议[J].中国农业科学导报,2000,2(2)：76-80.
[11]刘孟军.韩国枣树的生产现状及主要科研成果[J].河北林果研究,1999,14(1)：94-100.
[12]张清安.柿霜成份研究及其功能的研究概况[J].食品研究与开发.2002年陕西师范大学硕士毕业论文.
[13]代丽,刘孟军,甑文超等.中国枣树研究论文的统计与分析[J].河北农业大学学报,2000,23(3)：40-43.
[14]王向红.枣果主要活性成分分析方法及其综合加工技术研究.2003年河北农业大学硕士毕业论文.
[15]齐小菊,王向红,迟建等.枣中糖测定研究进展[J].河北林果研究,2005,20(2)：179-182.
[16]王竣明,黄品龙.枣树栽培学[M].河南科技出版社1982：7.
[17]首届中国杨陵农科城科技成果博览会组委会编.陕西省农村新兴支柱产业选编.1994：10.
[18]刘广运.大力推进我国红枣产业化[J].中国林业,1999(11)：4-5.
[19]郑建仙功能性食品[M].技术与市场.2002,10：293.
[20]杨世平,孙润广,陈国良等.红枣中营养、药用有效成分多糖的分离与提纯及其鉴定[J].延安大学学报.2004,23(3)：38-40.
[21]郑建仙.功能食品(第二卷)[M].北京：中国轻工业出版社,1999.
[22]寇晓红,吴彩娥.中华大枣的营养食疗价值与开发利用[J].中国果菜,2000(4)：43-44.
[23]郑秀莲.中华大枣的营养食疗价值与开发利用[J].中国果树.2000,(4)：43-44.
[24]刘秀河,于同立,薛宗雄.枣汁发酵醋酸饮料的研制[J].食品与机械.1998,(2)：13-14.
[25]雷昌贵,陈锦屏,卢大新.红枣的营养成分以及保健功能[J].现代生物医学进展.2006,6(3)：56-57.
[26]刘孟军,王永慧.枣和酸枣14中园艺植物cAMP含量的研究[J].河北农业大学学报.1991,14(4)：73-79.
[27]超予.红枣保健新功能[J].家庭中医药.2000,(7)：52.
[28]肖栋.佳果良药话红枣[J].中国土特产.2000,(3)：39.
[29]毛远.原子吸收测定红枣矿质元素的预处理[J].果树科学.1992,9(4)：246-248..
[30]刘一兵,范增民.大枣和小枣中微量元素翰林的比较研究[J].微量元素与健康研究,2007,24(1)：20-21.
[31]王向红,崔同,刘孟军等.不同品种枣的营养成分分析[J].营养学报.2002,24(2)：206-208.
[32]寇晓红.中华大枣的营养食疗价值及开发利用[J].中国果菜.2000,(4)：43-44.
[33]陈贻金,陈必芬.红枣营养成分定量分析[J].林业科技通讯.1991,(3)：25-27.
[34]关俊玲,李明润,高向耘等.不同产地大枣化学成分的含量分析[J].天津药学.2002,14(3)：82-83.
[35]牛继平,张绍衡,张宏钟.大枣中微量金属元素的原子吸收光谱法测定[J].郑州轻工业学院学报(自然科学版).1993,8(1)：1-4.
[36]中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所.食品成分表[M].北京：人民卫生出版社.1991：26.
[37]王爱蓉.红枣的营养与药用价值[J].科技情报开发与经济.2005,12(23)：143-144.
[38]蔡健.大枣的营养保健作用及贮藏加工技术[J].资源与生产.2004,9：21-23.
[39]王福祥,刘春梅.鲜枣市场三个缺口亟待填[J].农业知识.2004,(35)：40.
[40]万成志.巧克力糖衣滋补夹心枣加工技术[J].杭州食品科技.1999,(1)：19-20.
[41]樊保国.枣果功能因子与保健食品的研究进展[J].食品科学.2005,26(9)：587-591.
[42]付凯卿,曹艳萍.枣皮红色素的提取及其稳定性研究[J].农牧产品开发.2001,(1)：9-11.
[43]周立国,张久恺,温惠妹.枣酊酱色素稳定性研究[J].山东轻工业学院学报.1999,13(1)：9-13.
[44]李志洲,杨海涛.枣皮红色素的提取及其稳定性研究[J].氨基酸和生物资源.2004,26(4)：4-7.
[45]李宏燕,樊君.大枣多糖的水提醇沉工艺研究[J].宁夏工程技术.2005,4(3)：265-267.
[46]杨云,田润涛,冯卫生等.大枣渣多糖制备工艺的研究[J].林产化学与工业.2004,24(3)：91-94.
[47]杨云,孟江,冯卫生等.大枣渣多糖不同提取方法的比较研究[J].中成药..2004,26(10)：860-861.
[48]毛多斌,张峻松,贾春晓等.生物技术制备天然枣香料的研究[J].精细与专用化学品.2002,(10)：20.
[49]张宝善,陈锦屏,吴丽花.红枣芦丁提取工艺的研究[J].陕西师范大学学报.2003,31(1)：89-92.
[50]石启龙,赵亚.枣在我国加工利用现状及发展趋势[J].粮油加工与食品机械.2002,(8)：30-32.
[51]周沛云,苏彩霞,谷宗奇.我国红枣产业贮藏保鲜与加工的现状与前景[J].中国新郑枣网.2002.
[52]许牡丹,施卫省等.速溶枣粉加工工艺研究[J].西北林学院学报.2002,17(1)：74-76.
[53]秦勇,杜方麓.皂甙提取分离研究进展[J].湖南中医药导报.2001,8(8)： 401-402.
[54]高学敏,顾鹏,李力等.皂甙分析方法的研究进展[J].中国食品添加剂.2000,3：54-58.
[55]李广,李浩波,刘璐等.皂甙的生理活性及其应用研究进展[J].中国农学通报.2003,12(6)：3-6.
[56]李伯庭,王湘,李小进.大孔吸附树脂在天然产物分离中的应用[J].中草药,1990,21(8)：42.
[57]芦金清,刘尚桃,刘再刚等.吸附树脂法提取绞股蓝皂甙[J].中成药,1992,14(4)：2.
[58]唐第光.大孔吸附树脂法提取山七总皂甙工艺探讨[J].中成药,1990,12(8)：5.
[59]曾宪明.无机盐对大孔吸附树脂吸附人参总皂甙的影响[J].中国医药工业杂志,1992,23(8)：339.
[60]郭孝武.超声技术在中草药成分提取中的应用[J].中草药,1993,24(10)：548.
[61]王昌利,张振光,杨景亮.超声提高薯蓣皂甙得率的实验研究[J].中成药,1994,16(4)：7.
[62]宋小妹,崔九成,张军.超声法提取绞股蓝总皂甙的工艺研究[J].中成药,1998,20(5)：4.
[63]季大洪,苏瑞强,王颖.高新工程技术在中药提前取分离中应用[J].时珍国医国药,2000,11(4)：369.
[64]葛发欢,李菁,王海波等.超临界CO2流体萃取技术在天然产物提取及药物分析中的最新研究进展和前景[J].中药材,1995,18(6)：315.
[65]葛发欢,史庆龙,林香仙等.超临界CO2从黄山药中萃取薯蓣皂素的工艺研究[J].中草药,2000,31(3)：181.
[66]葛发欢,李莹,谢健鸣等.超临界CO2从柴胡中萃取挥发油及其皂甙的研究[J].中国中药杂志,2000,25(3)：149.
[67]高云芳,梁固城.桔梗总皂甙对大鼠高脂血症的影响[J].中草药,2000,(31)：764-765.
[68]陈卫红,张在和.绞股兰皂甙对糖尿病大鼠降糖作用的观察[J].中国糖尿病杂 志,1997,5(4)：229-230.
[69]杜德极,杨薇.葛根主要成份对体外癌细胞的毒活性.癌症.1997,16(3)：165-167.
[70]徐长福,杨艳萍.绞股兰总皂甙与阿霉素、5-氟尿嘧啶联用的抑瘤效果.西安医科大学学报,1996,17(2)：170-174.
[71]郁利平.实用肿瘤学杂志.1991,5(2)：251.
[72]Kubo R etal Chem Pharm Bull,1984,32(4):1476.
[73]Wallace R J. Applied and environmental microbiology. June,1994,1762-1767.
[74]郁利平.中国免疫学杂志.1992,2(3)：191.
[75]方允辉,郑荣梁.自由基生物学的理论与应用[M].北京：科学出版社,2002.
[76]郑建仙主编.功能性食品(第一卷)[M].北京：中国轻工业出版社,1999.
[77]陈瑾等.衰老的自由基机制[J].中国老年学杂志,2004,24(6)：677-679.
[78]郑荣梁.自由基生物学[M],北京：高等教育出版社,1992.
[79]赵保路主编.氧自由基和天然抗氧化剂[M].北京：科学出版社,1999.
[80]陈暖,周玫.自由基医学[M].北京：人民军医出版社,1991.
[81]LuoZY, Tang Y, You JL et al. Protective effect of anisodamine in cultured bovine pulmonary endothelial cell injury by oxygen free radicals[J]. Arch Surg, 1992(127):1204-1208.
[82]Baumartner-Parzer SM, WagnerL, Pettermann M etal. High-glucose-triggered apoptosis incultured endothelial cells [J]. Diabetes,1995(44):1323-1327.
[83]方允辉,郑荣梁.自由基生物学的理论与应用[M].北京：科学出版社,2002.
[84]赵保路.茶多酚的抗氧化作用[J].科学通报,2002,47(16)：1206-1210.
[85]张明艳,王亚龙,史小琴.银杏叶提取物的实验研究现状[J].中国自然医学杂志,2004,6(4)：274-276.
[86]郑德勇,安鑫南.丛生竹叶提取物的成分与清除自由基的能力[J].福建林学院学报,2004,24(3)：193-196.
[87]徐向荣,王文华,李华斌.自由基测定方法进展[J].环境科学进展,1998,4(6)：24-29.
[88]NicoleCotellen, Jean-LucBernier, Jean-PierreCatteau, etal. Antioxidant propertiesofhydroxyl-flavones[J]. FreeRadicalBiology and Medicine,1996, 20(1):35-43.
[89]TingSun, Chi-TangHo. Antioxidant activities of buckwheat extracts[J]. Food Chemistry,2005,90(4):743-749.
[90]杨方美,王林,胡秋辉.鼠尾藻多糖的制备及其抗氧化活性[J].食品科学,2005,26(2)：225.
[91]Smirnoff N, Cumbes Q J. Hyroxyl radical scavenging activity of compatible solutes[J]. Phytochemistry,1989,28:1057-1060.
[92]张钟,郭元新,李凤霞.黑糯玉米芯色素清除O2-·和·OH的体外实验研究[J].食品与发酵工业,2006,32(11)：36-37.
[93]张尔贤,俞丽君,周意琳等.Fe2+诱发脂蛋白PUFA过氧化体系及对若干天然产物抗氧化作用的评价[J].生物化学与生物物理学报,1996,2(28)：218-222.
[94]张强,周正义,王松华等.大蒜、生姜、洋葱水提物抗氧化活性的比较[J].食品与发酵工业,2006,32(11)：108.
[95]Yen Gow Chin, Duh Pin Der, Tsai Hui Ling. Antioxidant and pro-oxidant properties of ascorbic acid and gallic acid[J]. Food Chemistry,2002,79(3): 307-313.
[96]Siddhuraju P, Mohan PS, Becker K. Studies on the antioxi-dant activity of Indian Laburnum(Cassia fistula L):A prelim-inary assessment of crude extracts from stem bark, leaves, flowers and fruit pulp[J]. Food Chemistry,2002,79:61.
[97]舒媛,刘安军,王丽霞.山药多糖结合蛋白质对抗氧化作用的影响[J].食品研究与开发,2003,27(11)：39-41.
[98]晏文杰,李家璞等.类黄酮抗氧化力与其结构关系[J].台湾农业化学与食品科学,2000,38(1)：80-88.
[99]梁朝晖.黄豆皂甙的提取和分离方法的初探[J].中国公共卫生,1999,15(11)：1043-1044.
[100]项昭保,唐春红,陈岗,等.木瓜中齐墩果酸测定方法的研究[J].天然产物研究与开发,2001,13(4)：23-26.
[101]杨秀利,曹艳萍.大豆皂甙提取工艺的研究[J].食品科学,2006,27(12)：492-495.
[102]秦勇.苦丁茶总皂苷提取纯化工艺研究[D].长沙：湖南中医学院,2002.
[103]任凤莲,邱昌桂,连琰.百合总皂甙的提取工艺[J].中南大学学报,20005,36(1)：69-72.
[104]姜藏珍,张述义,关彩虹,等.食品科学试验统计[M].北京：中国农业科学 出版社,1997：70-90.
[105]徐建国,桑椹红色素的提取纯化技术及其特性研究[D].西安：陕西师范大学,2002.
[106]金京玲,任东鲜,金哲洙,等.大孔吸附树脂提取蒺藜总皂甙[J].延边大学医学学报,1999,22(1)：29-31.
[107]段玉峰,李淼,王应强,等.丹参糖蛋白提取物抗氧化实验研究[J].食品工业我科技,2009,30(1)：139-141.
[108]张钟,郭元新,李凤霞.黑糯玉米芯色素清除O2·-和·OH的体外实验研究[J].食品与发酵工业.2006,32(11)：36-38.
[109]舒媛,刘安军,王丽霞.山药多糖结合蛋白质对抗氧化作用的影响[J].食品研究与开发.2006,27(11)：39-42.
[110]张尔贤,方黎,张捷,等.菊花提取物的抗氧化活性研究[J].食品科学.2000,21(7)：6-9.
[2]宋婉.中国枣优良品种DNA指纹图谱的研究[D].北京：北京林业大学,1999.
[3]陈锦屏.红枣烘干技术[M].西安：陕西科技出版社,2000：2-3.
[4]刘嘉琰.乐陵小枣甲天下[M].南海出版公司,1993：3.
[5]袁树森.陕西榆林地区枣树志[M].1983：7.
[6]陈贻金,唐云龙,陈漠林等.枣树实用新技术[M].北京：中国科学技术出版社,1993：4.
[7]刘广运.大力推进我国红枣产业化[J].中国林业,1999(11)：4-5.
[8]王军,张宝善,陈锦屏.红枣营养成分及其功能的研究.食品研究与开发[J],2003,24(2)：68-72.
[9]河北省沧州金丝小枣创四个“全国之最”[J].中国乡镇企业,2004(8)：64.
[10]刘孟军.国内外枣树生产现状、存在问题和建议[J].中国农业科学导报,2000,2(2)：76-80.
[11]刘孟军.韩国枣树的生产现状及主要科研成果[J].河北林果研究,1999,14(1)：94-100.
[12]张清安.柿霜成份研究及其功能的研究概况[J].食品研究与开发.2002年陕西师范大学硕士毕业论文.
[13]代丽,刘孟军,甑文超等.中国枣树研究论文的统计与分析[J].河北农业大学学报,2000,23(3)：40-43.
[14]王向红.枣果主要活性成分分析方法及其综合加工技术研究.2003年河北农业大学硕士毕业论文.
[15]齐小菊,王向红,迟建等.枣中糖测定研究进展[J].河北林果研究,2005,20(2)：179-182.
[16]王竣明,黄品龙.枣树栽培学[M].河南科技出版社1982：7.
[17]首届中国杨陵农科城科技成果博览会组委会编.陕西省农村新兴支柱产业选编.1994：10.
[18]刘广运.大力推进我国红枣产业化[J].中国林业,1999(11)：4-5.
[19]郑建仙功能性食品[M].技术与市场.2002,10：293.
[20]杨世平,孙润广,陈国良等.红枣中营养、药用有效成分多糖的分离与提纯及其鉴定[J].延安大学学报.2004,23(3)：38-40.
[21]郑建仙.功能食品(第二卷)[M].北京：中国轻工业出版社,1999.
[22]寇晓红,吴彩娥.中华大枣的营养食疗价值与开发利用[J].中国果菜,2000(4)：43-44.
[23]郑秀莲.中华大枣的营养食疗价值与开发利用[J].中国果树.2000,(4)：43-44.
[24]刘秀河,于同立,薛宗雄.枣汁发酵醋酸饮料的研制[J].食品与机械.1998,(2)：13-14.
[25]雷昌贵,陈锦屏,卢大新.红枣的营养成分以及保健功能[J].现代生物医学进展.2006,6(3)：56-57.
[26]刘孟军,王永慧.枣和酸枣14中园艺植物cAMP含量的研究[J].河北农业大学学报.1991,14(4)：73-79.
[27]超予.红枣保健新功能[J].家庭中医药.2000,(7)：52.
[28]肖栋.佳果良药话红枣[J].中国土特产.2000,(3)：39.
[29]毛远.原子吸收测定红枣矿质元素的预处理[J].果树科学.1992,9(4)：246-248..
[30]刘一兵,范增民.大枣和小枣中微量元素翰林的比较研究[J].微量元素与健康研究,2007,24(1)：20-21.
[31]王向红,崔同,刘孟军等.不同品种枣的营养成分分析[J].营养学报.2002,24(2)：206-208.
[32]寇晓红.中华大枣的营养食疗价值及开发利用[J].中国果菜.2000,(4)：43-44.
[33]陈贻金,陈必芬.红枣营养成分定量分析[J].林业科技通讯.1991,(3)：25-27.
[34]关俊玲,李明润,高向耘等.不同产地大枣化学成分的含量分析[J].天津药学.2002,14(3)：82-83.
[35]牛继平,张绍衡,张宏钟.大枣中微量金属元素的原子吸收光谱法测定[J].郑州轻工业学院学报(自然科学版).1993,8(1)：1-4.
[36]中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所.食品成分表[M].北京：人民卫生出版社.1991：26.
[37]王爱蓉.红枣的营养与药用价值[J].科技情报开发与经济.2005,12(23)：143-144.
[38]蔡健.大枣的营养保健作用及贮藏加工技术[J].资源与生产.2004,9：21-23.
[39]王福祥,刘春梅.鲜枣市场三个缺口亟待填[J].农业知识.2004,(35)：40.
[40]万成志.巧克力糖衣滋补夹心枣加工技术[J].杭州食品科技.1999,(1)：19-20.
[41]樊保国.枣果功能因子与保健食品的研究进展[J].食品科学.2005,26(9)：587-591.
[42]付凯卿,曹艳萍.枣皮红色素的提取及其稳定性研究[J].农牧产品开发.2001,(1)：9-11.
[43]周立国,张久恺,温惠妹.枣酊酱色素稳定性研究[J].山东轻工业学院学报.1999,13(1)：9-13.
[44]李志洲,杨海涛.枣皮红色素的提取及其稳定性研究[J].氨基酸和生物资源.2004,26(4)：4-7.
[45]李宏燕,樊君.大枣多糖的水提醇沉工艺研究[J].宁夏工程技术.2005,4(3)：265-267.
[46]杨云,田润涛,冯卫生等.大枣渣多糖制备工艺的研究[J].林产化学与工业.2004,24(3)：91-94.
[47]杨云,孟江,冯卫生等.大枣渣多糖不同提取方法的比较研究[J].中成药..2004,26(10)：860-861.
[48]毛多斌,张峻松,贾春晓等.生物技术制备天然枣香料的研究[J].精细与专用化学品.2002,(10)：20.
[49]张宝善,陈锦屏,吴丽花.红枣芦丁提取工艺的研究[J].陕西师范大学学报.2003,31(1)：89-92.
[50]石启龙,赵亚.枣在我国加工利用现状及发展趋势[J].粮油加工与食品机械.2002,(8)：30-32.
[51]周沛云,苏彩霞,谷宗奇.我国红枣产业贮藏保鲜与加工的现状与前景[J].中国新郑枣网.2002.
[52]许牡丹,施卫省等.速溶枣粉加工工艺研究[J].西北林学院学报.2002,17(1)：74-76.
[53]秦勇,杜方麓.皂甙提取分离研究进展[J].湖南中医药导报.2001,8(8)： 401-402.
[54]高学敏,顾鹏,李力等.皂甙分析方法的研究进展[J].中国食品添加剂.2000,3：54-58.
[55]李广,李浩波,刘璐等.皂甙的生理活性及其应用研究进展[J].中国农学通报.2003,12(6)：3-6.
[56]李伯庭,王湘,李小进.大孔吸附树脂在天然产物分离中的应用[J].中草药,1990,21(8)：42.
[57]芦金清,刘尚桃,刘再刚等.吸附树脂法提取绞股蓝皂甙[J].中成药,1992,14(4)：2.
[58]唐第光.大孔吸附树脂法提取山七总皂甙工艺探讨[J].中成药,1990,12(8)：5.
[59]曾宪明.无机盐对大孔吸附树脂吸附人参总皂甙的影响[J].中国医药工业杂志,1992,23(8)：339.
[60]郭孝武.超声技术在中草药成分提取中的应用[J].中草药,1993,24(10)：548.
[61]王昌利,张振光,杨景亮.超声提高薯蓣皂甙得率的实验研究[J].中成药,1994,16(4)：7.
[62]宋小妹,崔九成,张军.超声法提取绞股蓝总皂甙的工艺研究[J].中成药,1998,20(5)：4.
[63]季大洪,苏瑞强,王颖.高新工程技术在中药提前取分离中应用[J].时珍国医国药,2000,11(4)：369.
[64]葛发欢,李菁,王海波等.超临界CO2流体萃取技术在天然产物提取及药物分析中的最新研究进展和前景[J].中药材,1995,18(6)：315.
[65]葛发欢,史庆龙,林香仙等.超临界CO2从黄山药中萃取薯蓣皂素的工艺研究[J].中草药,2000,31(3)：181.
[66]葛发欢,李莹,谢健鸣等.超临界CO2从柴胡中萃取挥发油及其皂甙的研究[J].中国中药杂志,2000,25(3)：149.
[67]高云芳,梁固城.桔梗总皂甙对大鼠高脂血症的影响[J].中草药,2000,(31)：764-765.
[68]陈卫红,张在和.绞股兰皂甙对糖尿病大鼠降糖作用的观察[J].中国糖尿病杂 志,1997,5(4)：229-230.
[69]杜德极,杨薇.葛根主要成份对体外癌细胞的毒活性.癌症.1997,16(3)：165-167.
[70]徐长福,杨艳萍.绞股兰总皂甙与阿霉素、5-氟尿嘧啶联用的抑瘤效果.西安医科大学学报,1996,17(2)：170-174.
[71]郁利平.实用肿瘤学杂志.1991,5(2)：251.
[72]Kubo R etal Chem Pharm Bull,1984,32(4):1476.
[73]Wallace R J. Applied and environmental microbiology. June,1994,1762-1767.
[74]郁利平.中国免疫学杂志.1992,2(3)：191.
[75]方允辉,郑荣梁.自由基生物学的理论与应用[M].北京：科学出版社,2002.
[76]郑建仙主编.功能性食品(第一卷)[M].北京：中国轻工业出版社,1999.
[77]陈瑾等.衰老的自由基机制[J].中国老年学杂志,2004,24(6)：677-679.
[78]郑荣梁.自由基生物学[M],北京：高等教育出版社,1992.
[79]赵保路主编.氧自由基和天然抗氧化剂[M].北京：科学出版社,1999.
[80]陈暖,周玫.自由基医学[M].北京：人民军医出版社,1991.
[81]LuoZY, Tang Y, You JL et al. Protective effect of anisodamine in cultured bovine pulmonary endothelial cell injury by oxygen free radicals[J]. Arch Surg, 1992(127):1204-1208.
[82]Baumartner-Parzer SM, WagnerL, Pettermann M etal. High-glucose-triggered apoptosis incultured endothelial cells [J]. Diabetes,1995(44):1323-1327.
[83]方允辉,郑荣梁.自由基生物学的理论与应用[M].北京：科学出版社,2002.
[84]赵保路.茶多酚的抗氧化作用[J].科学通报,2002,47(16)：1206-1210.
[85]张明艳,王亚龙,史小琴.银杏叶提取物的实验研究现状[J].中国自然医学杂志,2004,6(4)：274-276.
[86]郑德勇,安鑫南.丛生竹叶提取物的成分与清除自由基的能力[J].福建林学院学报,2004,24(3)：193-196.
[87]徐向荣,王文华,李华斌.自由基测定方法进展[J].环境科学进展,1998,4(6)：24-29.
[88]NicoleCotellen, Jean-LucBernier, Jean-PierreCatteau, etal. Antioxidant propertiesofhydroxyl-flavones[J]. FreeRadicalBiology and Medicine,1996, 20(1):35-43.
[89]TingSun, Chi-TangHo. Antioxidant activities of buckwheat extracts[J]. Food Chemistry,2005,90(4):743-749.
[90]杨方美,王林,胡秋辉.鼠尾藻多糖的制备及其抗氧化活性[J].食品科学,2005,26(2)：225.
[91]Smirnoff N, Cumbes Q J. Hyroxyl radical scavenging activity of compatible solutes[J]. Phytochemistry,1989,28:1057-1060.
[92]张钟,郭元新,李凤霞.黑糯玉米芯色素清除O2-·和·OH的体外实验研究[J].食品与发酵工业,2006,32(11)：36-37.
[93]张尔贤,俞丽君,周意琳等.Fe2+诱发脂蛋白PUFA过氧化体系及对若干天然产物抗氧化作用的评价[J].生物化学与生物物理学报,1996,2(28)：218-222.
[94]张强,周正义,王松华等.大蒜、生姜、洋葱水提物抗氧化活性的比较[J].食品与发酵工业,2006,32(11)：108.
[95]Yen Gow Chin, Duh Pin Der, Tsai Hui Ling. Antioxidant and pro-oxidant properties of ascorbic acid and gallic acid[J]. Food Chemistry,2002,79(3): 307-313.
[96]Siddhuraju P, Mohan PS, Becker K. Studies on the antioxi-dant activity of Indian Laburnum(Cassia fistula L):A prelim-inary assessment of crude extracts from stem bark, leaves, flowers and fruit pulp[J]. Food Chemistry,2002,79:61.
[97]舒媛,刘安军,王丽霞.山药多糖结合蛋白质对抗氧化作用的影响[J].食品研究与开发,2003,27(11)：39-41.
[98]晏文杰,李家璞等.类黄酮抗氧化力与其结构关系[J].台湾农业化学与食品科学,2000,38(1)：80-88.
[99]梁朝晖.黄豆皂甙的提取和分离方法的初探[J].中国公共卫生,1999,15(11)：1043-1044.
[100]项昭保,唐春红,陈岗,等.木瓜中齐墩果酸测定方法的研究[J].天然产物研究与开发,2001,13(4)：23-26.
[101]杨秀利,曹艳萍.大豆皂甙提取工艺的研究[J].食品科学,2006,27(12)：492-495.
[102]秦勇.苦丁茶总皂苷提取纯化工艺研究[D].长沙：湖南中医学院,2002.
[103]任凤莲,邱昌桂,连琰.百合总皂甙的提取工艺[J].中南大学学报,20005,36(1)：69-72.
[104]姜藏珍,张述义,关彩虹,等.食品科学试验统计[M].北京：中国农业科学 出版社,1997：70-90.
[105]徐建国,桑椹红色素的提取纯化技术及其特性研究[D].西安：陕西师范大学,2002.
[106]金京玲,任东鲜,金哲洙,等.大孔吸附树脂提取蒺藜总皂甙[J].延边大学医学学报,1999,22(1)：29-31.
[107]段玉峰,李淼,王应强,等.丹参糖蛋白提取物抗氧化实验研究[J].食品工业我科技,2009,30(1)：139-141.
[108]张钟,郭元新,李凤霞.黑糯玉米芯色素清除O2·-和·OH的体外实验研究[J].食品与发酵工业.2006,32(11)：36-38.
[109]舒媛,刘安军,王丽霞.山药多糖结合蛋白质对抗氧化作用的影响[J].食品研究与开发.2006,27(11)：39-42.
[110]张尔贤,方黎,张捷,等.菊花提取物的抗氧化活性研究[J].食品科学.2000,21(7)：6-9.