Le dépôt mésangial d’IgA1 polymérique non seulement caractérise la néphropathie à IgA (N-IgA) mais est également considéré comme une des étapes clés pathogéniques de cette maladie. Bien que jamais démontré expérimentalement, il est admis qu’un défaut de O-
glycosylation de la région charnière de l’IgA1 est responsable de son dépôt. Notre but est de vérifier ce concept.
Matériels et méthodes
Nous disposons de plusieurs IgA1 monoclonales pour lesquelles nous connaissons la capacité à déposer dans le mésangium rénal. Des hybridomes ont été produits à partir de splénocytes de souris produisant de l’IgA1 humaine chimérique. Après purification par chromatographie d’affinité, les IgA1 ont été injectées par voie veineuse à des souris puis les reins ont été collectés 2 h après injection. L’immunofluorescence sur les coupes de rein a montré que 3 IgA1 chimériques (#1, #5 et #6) sur 10 se déposent dans le mésangium rénal. Par ailleurs, 6 patients atteints de myélome à IgA et présentant des signes d’atteintes rénales ont été biopsiés, ce qui a révélé la présence de dépôts mésangiaux d’IgA chez 4 d’entre eux (patients D) contre 2 n’en présentant pas (patients N). Les IgA purifiées à partir de sérum humain et de surnageants de culture d’hybridome ont été réduites puis alkylées avant d’être digérées par la trypsine. Le O-glycopeptide [89–126] incluant la région charnière a été analysé par spectrométrie de masse.
Résultats
Après de nombreuses mises au point nécessaires à la détection fiable des O-glycopeptides, nous avons pu analyser le peptide [89–126] de 5 échantillons : de l’IgA1 polyclonale d’un sujet sain, l’IgA1 monoclonale du patient N1 et celle du patient D1, l’IgA1 chimérique #9 ne donnant pas de dépôt chez la souris et le #6. Les résultats montrent que les IgA1 monoclonales ont une O-glycosylation très hétérogène. Des formes hypogalactosylées sont retrouvées chez le patient D1.
Discussion
Ce premier résultat, nécessitant confirmation sur un plus grand nombre d’échantillons, est cohérent avec l’hypothèse d’un lien probable de cause à effet entre défaut de O-glycosylation et dépôt mésangial.
Conclusion
Le travail réalisé a permis de mettre au point les outils nécessaires pour démontrer le lien entre glycosylation et dépôt, et ainsi avancer sur la physiopathologie de la N-IgA.
