| ReferencesReferences
Objetivo
El objetivo del presente estudio es evaluar una t¨¦cnica r¨¢pida y sencilla de reacci¨®n en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real en LightCycler 2.0 revelada con SYBR-Green I, compar¨¢ndola con otra t¨¦cnica de PCR en tiempo real que utiliza sondas FRET (
fluorescence resonance energy transfer) para revelar la amplificaci¨®n.
M¨¦todos
Los dos m¨¦todos de PCR en tiempo real se compararon utilizando muestras de plasma de pacientes inmunodeprimidos con sospecha cl¨ªnica de enfermedad por citomegalovirus (CMV), de pacientes monitorizados sin sintomatolog¨ªa, y de adultos sanos. El estudio se complet¨® con otras muestras de plasma congeladas de casos positivos por antigenemia pp65, y con ADN de CMV de la cepa Towne (ATCC VR-977) obtenido de cultivo en MRC-5, con el que elaboramos una curva est¨¢ndar para su cuantificaci¨®n.
Resultados
La PCR revelada con SYBR-Green I result¨® ser claramente la m¨¢s rentable por su alta sensibilidad, rapidez y sencilla realizaci¨®n, adem¨¢s de su bajo coste.
Conclusi¨®n
La determinaci¨®n cuantitativa de ADN de CMV en plasma utilizando un m¨¦todo sensible, r¨¢pido y de bajo coste, como el que proponemos, supone una clara ventaja para el diagn¨®stico y seguimiento de estos cuadros, especialmente en hospitales como el nuestro, donde en los ¨²ltimos a?os se ha incrementado sensiblemente el n¨²mero de pacientes susceptibles de padecer esta infecci¨®n oportunista.
